完成实验完成实验完成实验完成实验酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？提出问题提出问题提出问题提出问题作出假设作出假设作出假设作出假设设计实验设计实验设计实验设计实验分析结果，得出结论分析结果，得出结论分析结果，得出结论分析结果，得出结论变量如何控制？变量如何控制？变量如何控制？变量如何控制？探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 该该该该探究活动中探究活动中探究活动中探究活动中涉及涉及涉及涉及4 4 4 4个科学个科学个科学个科学方法：方法：方法：方法：（1 1 1 1）数学模型法；）数学模型法；）数学模型法；）数学模型法；（2 2 2 2）抽样检测法；）抽样检测法；）抽样检测法；）抽样检测法；（3 3 3 3）显微观察法；）显微观察法；）显微观察法；）显微观察法；（4 4 4 4）微生物培养法。）微生物培养法。）微生物培养法。）微生物培养法。探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 关注本实验中的几个关键点：关注本实验中的几个关键点：关注本实验中的几个关键点：关注本实验中的几个关键点： 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微生物计数法，也叫做显微镜直接计数法。常用的微生物计数法，也叫做显微镜直接计数法。常用的微生物计数法，也叫做显微镜直接计数法。常用的微生物计数法，也叫做显微镜直接计数法。优点：直观、快速。优点：直观、快速。优点：直观、快速。优点：直观、快速。适用于稀释的菌悬液（或孢子悬液），即液体适用于稀释的菌悬液（或孢子悬液），即液体适用于稀释的菌悬液（或孢子悬液），即液体适用于稀释的菌悬液（或孢子悬液），即液体培养基中菌体的计数。培养基中菌体的计数。培养基中菌体的计数。培养基中菌体的计数。此法计得的是活菌体和死菌体的总和，又称为此法计得的是活菌体和死菌体的总和，又称为此法计得的是活菌体和死菌体的总和，又称为此法计得的是活菌体和死菌体的总和，又称为总菌计数法。总菌计数法。总菌计数法。总菌计数法。 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数（1 1 1 1）计数工具）计数工具）计数工具）计数工具血球计数板血球计数板血球计数板血球计数板实物图实物图实物图实物图正面图正面图正面图正面图侧面图侧面图侧面图侧面图计数室计数室计数室计数室滴液处滴液处滴液处滴液处血球计数血球计数板是一种板是一种专门用于专门用于计算较大计算较大单细胞微单细胞微生物的一生物的一种仪器。种仪器。计数时，计数时，常采用常采用样样方法方法。 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数（1 1 1 1）计数工具）计数工具）计数工具）计数工具血球计数板血球计数板血球计数板血球计数板探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 放大后的计数池放大后的计数池放大后的计数池放大后的计数池 每块计数板由每块计数板由每块计数板由每块计数板由H H H H形凹槽分为形凹槽分为形凹槽分为形凹槽分为2 2 2 2个个个个同样的计数池。同样的计数池。同样的计数池。同样的计数池。 每个计数池分为每个计数池分为每个计数池分为每个计数池分为9 9 9 9个大方格。个大方格。个大方格。个大方格。25252525个中格个中格个中格个中格16161616个小格个小格个小格个小格16161616个中格个中格个中格个中格25252525个小格个小格个小格个小格25X16 = 40025X16 = 40025X16 = 40025X16 = 400小格小格小格小格16X25 = 40016X25 = 40016X25 = 40016X25 = 400小格小格小格小格每个计数室（大方格）共有每个计数室（大方格）共有每个计数室（大方格）共有每个计数室（大方格）共有400400400400小格，总容积为小格，总容积为小格，总容积为小格，总容积为0.1mm0.1mm0.1mm0.1mm3 3 3 3*抽样检测：抽样检测：抽样检测：抽样检测：5 5 5 516=8016=8016=8016=80个小格个小格个小格个小格抽样检测：抽样检测：抽样检测：抽样检测：4 4 4 425=10025=10025=10025=100个小格个小格个小格个小格 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数（2 2 2 2）计算：）计算：）计算：）计算： 每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 酵母细胞个数酵母细胞个数酵母细胞个数酵母细胞个数/ / / /mLmLmLmL= = = =所数小方格中细胞总数所数小方格中细胞总数所数小方格中细胞总数所数小方格中细胞总数x400x10x400x10x400x10x400x104 4 4 4x x x x稀释倍数稀释倍数稀释倍数稀释倍数所数的小方格数所数的小方格数所数的小方格数所数的小方格数例例2:酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球计数板每个大方格容积为0.1mm3，由400个小方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先 后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。例例1:在用血球计数板（2mm2mm方格）对某一稀释50倍样品进行计数时，发现在一个计数室内（盖玻片下的培养液厚度为0.1mm）酵母菌平均数为16，据此估算10mL培养液中有酵母菌个。2x1072108稀释稀释例例3检测员将1mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由2516400个小格组成，容纳液体的总体积为01mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻 个mL。 5n105 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数（3 3 3 3）计数的操作）计数的操作）计数的操作）计数的操作 稀释：将酵母菌培养液进行适当的稀释；若菌液不浓，稀释：将酵母菌培养液进行适当的稀释；若菌液不浓，稀释：将酵母菌培养液进行适当的稀释；若菌液不浓，稀释：将酵母菌培养液进行适当的稀释；若菌液不浓， 可不必稀释。可不必稀释。可不必稀释。可不必稀释。 镜检计数室：在加样前，先对计数板的计数室进行镜检镜检计数室：在加样前，先对计数板的计数室进行镜检镜检计数室：在加样前，先对计数板的计数室进行镜检镜检计数室：在加样前，先对计数板的计数室进行镜检 。若有污物，则需清洗后才能进。若有污物，则需清洗后才能进。若有污物，则需清洗后才能进。若有污物，则需清洗后才能进行计数。行计数。行计数。行计数。 加样品：在清洁干燥的血球计数板加样品：在清洁干燥的血球计数板加样品：在清洁干燥的血球计数板加样品：在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片盖上盖玻片盖上盖玻片盖上盖玻片，再用，再用，再用，再用无无无无 菌细口滴管菌细口滴管菌细口滴管菌细口滴管将稀释的酵母菌液由将稀释的酵母菌液由将稀释的酵母菌液由将稀释的酵母菌液由盖玻片边盖玻片边盖玻片边盖玻片边缘缘缘缘滴滴滴滴 入一小滴（将计数室充满即可），让菌液入一小滴（将计数室充满即可），让菌液入一小滴（将计数室充满即可），让菌液入一小滴（将计数室充满即可），让菌液沿缝沿缝沿缝沿缝 隙隙隙隙自行渗入自行渗入自行渗入自行渗入计数室。计数室。计数室。计数室。注意不可有气泡产生注意不可有气泡产生注意不可有气泡产生注意不可有气泡产生。探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数（3 3 3 3）计数的操作）计数的操作）计数的操作）计数的操作 显微计数：静止显微计数：静止显微计数：静止显微计数：静止5 5 5 5分钟后，先用低倍镜（分钟后，先用低倍镜（分钟后，先用低倍镜（分钟后，先用低倍镜（1616161610101010）找）找）找）找 到计数室所在的位置。然后根据血到计数室所在的位置。然后根据血到计数室所在的位置。然后根据血到计数室所在的位置。然后根据血球计数球计数球计数球计数 板规格，每个计数室选取板规格，每个计数室选取板规格，每个计数室选取板规格，每个计数室选取5 5 5 5个（或个（或个（或个（或4 4 4 4个）中个）中个）中个）中 方格中的菌体进行计数。每个小方方格中的菌体进行计数。每个小方方格中的菌体进行计数。每个小方方格中的菌体进行计数。每个小方格内约格内约格内约格内约 有有有有5-105-105-105-10个菌体为宜。个菌体为宜。个菌体为宜。个菌体为宜。对于压在小方对于压在小方对于压在小方对于压在小方格界线格界线格界线格界线 上的酵母菌应取上的酵母菌应取上的酵母菌应取上的酵母菌应取相邻两边及顶角相邻两边及顶角相邻两边及顶角相邻两边及顶角计计计计数。数。数。数。如如如如 遇酵母出芽遇酵母出芽遇酵母出芽遇酵母出芽，芽体大小达到母细胞，芽体大小达到母细胞，芽体大小达到母细胞，芽体大小达到母细胞的一半的一半的一半的一半 时，即作为时，即作为时，即作为时，即作为两个两个两个两个菌体计数。计数一菌体计数。计数一菌体计数。计数一菌体计数。计数一个样品个样品个样品个样品 要从两个计数室中计得的值来计算要从两个计数室中计得的值来计算要从两个计数室中计得的值来计算要从两个计数室中计得的值来计算样品的样品的样品的样品的 含菌量。含菌量。含菌量。含菌量。探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数（4 4 4 4）血球计数板的清洗：）血球计数板的清洗：）血球计数板的清洗：）血球计数板的清洗： 使用完毕后，将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗，使用完毕后，将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗，使用完毕后，将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗，使用完毕后，将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗，切勿用硬刷洗刷切勿用硬刷洗刷切勿用硬刷洗刷切勿用硬刷洗刷，洗完后自行晾干或用吹风机吹干。，洗完后自行晾干或用吹风机吹干。，洗完后自行晾干或用吹风机吹干。，洗完后自行晾干或用吹风机吹干。镜检，观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。镜检，观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。镜检，观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。镜检，观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复洗涤至干净为止。若不干净，则必须重复洗涤至干净为止。若不干净，则必须重复洗涤至干净为止。若不干净，则必须重复洗涤至干净为止。探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数（5 5 5 5）注意事项：）注意事项：）注意事项：）注意事项： 进行计数前，应先将试管进行计数前，应先将试管进行计数前，应先将试管进行计数前，应先将试管摇匀摇匀摇匀摇匀，目的是使，目的是使，目的是使，目的是使酵母菌在培酵母菌在培酵母菌在培酵母菌在培养液中混合均匀养液中混合均匀养液中混合均匀养液中混合均匀，以减少计数误差。，以减少计数误差。，以减少计数误差。，以减少计数误差。 显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应取取取取相邻两边及顶角相邻两边及顶角相邻两边及顶角相邻两边及顶角计数。计数。计数。计数。 若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可将培养液将培养液将培养液将培养液稀释稀释稀释稀释一定倍数后再计数。一定倍数后再计数。一定倍数后再计数。一定倍数后再计数。 本实验本实验本实验本实验无无无无对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成前前前前后对照后对照后对照后对照。 血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和浸泡和浸泡和浸泡和冲洗冲洗冲洗冲洗的方法清洗的方法清洗的方法清洗的方法清洗探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数酵母菌的计数（6 6 6 6）讨论：）讨论：）讨论：）讨论：计数前还应有哪些步骤？需注意些什么？计数前还应有哪些步骤？需注意些什么？探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 酵母菌培养：酵母菌培养：酵母菌培养：酵母菌培养： 培养液配制培养液配制培养液配制培养液配制 灭菌灭菌灭菌灭菌 接种接种接种接种 培养培养培养培养配制质量分数为配制质量分数为配制质量分数为配制质量分数为5 5 5 5的葡萄糖溶液（葡的葡萄糖溶液（葡的葡萄糖溶液（葡的葡萄糖溶液（葡萄糖萄糖萄糖萄糖20g20g20g20g，1000 1000 1000 1000 mLmLmLmL水），分装到水），分装到水），分装到水），分装到5 5 5 5个烧个烧个烧个烧杯中（杯中（杯中（杯中（200mL/200mL/200mL/200mL/烧杯）烧杯）烧杯）烧杯）用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。接种时要在酒精灯附近，用灭菌干净的接种时要在酒精灯附近，用灭菌干净的接种时要在酒精灯附近，用灭菌干净的接种时要在酒精灯附近，用灭菌干净的1mL1mL1mL1mL刻度吸管每次吸取刻度吸管每次吸取刻度吸管每次吸取刻度吸管每次吸取0.1mL0.1mL0.1mL0.1mL酵母菌母液，酵母菌母液，酵母菌母液，酵母菌母液，往每个烧杯中加入。（注意往每个烧杯中加入。（注意往每个烧杯中加入。（注意往每个烧杯中加入。（注意：滴加量不滴加量不滴加量不滴加量不要太多，避免初始菌数过多。）要太多，避免初始菌数过多。）要太多，避免初始菌数过多。）要太多，避免初始菌数过多。）将烧杯置于将烧杯置于将烧杯置于将烧杯置于28282828的恒温箱中培养的恒温箱中培养的恒温箱中培养的恒温箱中培养无菌无菌无菌无菌操作操作操作操作 结果分析结果分析结果分析结果分析（1 1 1 1）数据记录）数据记录）数据记录）数据记录 以汤麦式血球计数板的数据记录为例。下表为某一次以汤麦式血球计数板的数据记录为例。下表为某一次以汤麦式血球计数板的数据记录为例。下表为某一次以汤麦式血球计数板的数据记录为例。下表为某一次的数据记录表，其中，的数据记录表，其中，的数据记录表，其中，的数据记录表，其中，A A A A表示五个中方格的总菌数；表示五个中方格的总菌数；表示五个中方格的总菌数；表示五个中方格的总菌数；B B B B表示表示表示表示菌液稀释倍数：菌液稀释倍数：菌液稀释倍数：菌液稀释倍数：探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 各中格的总菌数各中格的总菌数各中格的总菌数各中格的总菌数A A A AB B B B二室平二室平二室平二室平均数均数均数均数菌数菌数菌数菌数/ml/ml/ml/ml12 2 2 23 3 3 34 4 4 45 5 5 5第一室第一室第二室第二室 结果分析结果分析结果分析结果分析（1 1 1 1）数据记录）数据记录）数据记录）数据记录 下表为一周的数据记录表：下表为一周的数据记录表：下表为一周的数据记录表：下表为一周的数据记录表： 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 时间时间时间时间次数次数次数次数1 1 1 12 2 2 23 3 3 34 4 4 45 5 5 56 6 6 67 7 7 71 1 1 12 2 2 23 3 3 3平均平均平均平均第第 1 1 天天第第 3 3 天天第第 6 6 天天第第 7 7 天天死亡死亡死亡死亡 结果分析结果分析结果分析结果分析（2 2 2 2）构建数学模型：）构建数学模型：）构建数学模型：）构建数学模型：探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 实验再探究实验再探究实验再探究实验再探究 温度、营养物质影响酵母菌的生长吗？某同学按下温度、营养物质影响酵母菌的生长吗？某同学按下温度、营养物质影响酵母菌的生长吗？某同学按下温度、营养物质影响酵母菌的生长吗？某同学按下表完成了有关实验。表完成了有关实验。表完成了有关实验。表完成了有关实验。试管试管试管试管编号编号编号编号培养液培养液培养液培养液/ /mLmL无菌水无菌水无菌水无菌水/ /mLmL酵母菌母液酵母菌母液酵母菌母液酵母菌母液/ /mLmL温度（温度（温度（温度（）A100.128B100.15C100.128温度、营养物质对酵母菌生长的影响温度、营养物质对酵母菌生长的影响温度、营养物质对酵母菌生长的影响温度、营养物质对酵母菌生长的影响 试管试管试管试管编号编号编号编号培养液培养液培养液培养液/mL/mL无菌水无菌水无菌水无菌水/mL/mL酵母菌母液酵母菌母液酵母菌母液酵母菌母液/mL/mL 温度（温度（温度（温度（）A100.128B100.15C100.128探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 实验再探究实验再探究实验再探究实验再探究 培养空间、氧气会影响酵母菌的生长吗？培养空间、氧气会影响酵母菌的生长吗？培养空间、氧气会影响酵母菌的生长吗？培养空间、氧气会影响酵母菌的生长吗？ 例：（例：（20082008年江苏卷年江苏卷3131题题）为研究酵母菌种群密度的动态）为研究酵母菌种群密度的动态变化，某同学按下表所列条件进行了变化，某同学按下表所列条件进行了A A、B B、C C和和D D 共共4 4组实验，组实验，用用1000mL1000mL锥形瓶作为培养器皿，棉塞封口，在锥形瓶作为培养器皿，棉塞封口，在2525下静置培下静置培养，其他实验条件均相同，定时用血球计数板计数。根据实养，其他实验条件均相同，定时用血球计数板计数。根据实验结果绘出的酵母菌种群密度变化曲线图如下。验结果绘出的酵母菌种群密度变化曲线图如下。