武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系第二章第二章 食品分析一般程序食品分析一般程序武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系食品分析的一般程序食品分析的一般程序样品的采集、制备和保存样品的采集、制备和保存 样品预处理样品预处理 成分分析成分分析 分析数据处理分析数据处理 分析报告分析报告武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系1. 1. 样品的采取制备和保存样品的采取制备和保存1.1.样品的采集样品的采集2.2.样品的制备样品的制备3.3.样品的保存样品的保存武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系1.1样品的采集样品的采集1.1.1 1.1.1 正确采样的重要性（两个原则）正确采样的重要性（两个原则）n第一，第一，代表性代表性：采集的样品要均匀：采集的样品要均匀; ;能反映所属能反映所属指标。指标。 n第二，第二，适时性适时性：采样过程中要设法保持原有：采样过程中要设法保持原有 的理化指标，防止成分逸散或带入杂质。的理化指标，防止成分逸散或带入杂质。从大量的分析对象中抽取从大量的分析对象中抽取 有代表性有代表性的一部分的一部分样品作为分析材料（分析样品），称为样品样品作为分析材料（分析样品），称为样品的采集。的采集。武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系 检样检样(需检验的批量需检验的批量食品食品)原始样品原始样品平均样品平均样品试验样品试验样品复验样品复验样品保留样品保留样品（0.5kg）（0.5kg）（0.5kg）混合、处理混合、处理缩分缩分采采样样1.1.2采样步骤采样步骤武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系两种方法1.1.2采样的一般方法采样的一般方法n代表性法代表性法: : 随时间、空间和位置等变化采集代表相随时间、空间和位置等变化采集代表相应的样品。如分层、定期和根据生产环节取样等。应的样品。如分层、定期和根据生产环节取样等。n随机抽样法随机抽样法: :每个样品每个部分都有被抽检的可能每个样品每个部分都有被抽检的可能性性. .武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系1.1.2.1采样的一般方法采样的一般方法具体的取样方法，因分析对象的性质具体的取样方法，因分析对象的性质而异而异（1 1）均匀固体物料）均匀固体物料( (如粮食、粉状食如粮食、粉状食品）：品）：按不同批号分别采样，同一批号的产按不同批号分别采样，同一批号的产品采样点数由下式确定：品采样点数由下式确定： S= (N/2)S= (N/2)1/21/2 N N：检测对象数目；：检测对象数目； S S：采样点数；：采样点数；按采样点数用取样器具在袋的上中下按采样点数用取样器具在袋的上中下部位采样，并混合为原始样品。部位采样，并混合为原始样品。原始样品采用四分法对角取样至样品原始样品采用四分法对角取样至样品量不少于所有检测项目所需样品量量不少于所有检测项目所需样品量的的2 2倍，即得平均样品。倍，即得平均样品。武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系（2 2）较稠的半固体物料（如稀奶油、动物油脂、果酱）较稠的半固体物料（如稀奶油、动物油脂、果酱等）：分别在上中下三层的中心和四角采样，然后置等）：分别在上中下三层的中心和四角采样，然后置同一容器内混匀。同一容器内混匀。（3 3）液体物料（如植物油、鲜乳等）：按取样点数公）液体物料（如植物油、鲜乳等）：按取样点数公式抽取一定的量，再用虹吸法在上中下部位取样，混式抽取一定的量，再用虹吸法在上中下部位取样，混匀后分取至所需量。匀后分取至所需量。（4 4）小包装食品（罐头、袋或听装奶粉、瓶装饮料等）小包装食品（罐头、袋或听装奶粉、瓶装饮料等）：根据批号，分批连同包装一起取样。如小包装外还：根据批号，分批连同包装一起取样。如小包装外还有大包装，可按取样点数公式抽取一定的大包装，再有大包装，可按取样点数公式抽取一定的大包装，再从中抽取小包装，混匀后分取至所需量。从中抽取小包装，混匀后分取至所需量。武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系（5 5）组成不均匀的固体食品（如肉、鱼、果品、蔬菜等）组成不均匀的固体食品（如肉、鱼、果品、蔬菜等）肉：肉：从不同部位取样，混合后代表一只动物；从多只动物的从不同部位取样，混合后代表一只动物；从多只动物的同一部位采样，混合后代表该部位的质量。同一部位采样，混合后代表该部位的质量。水产品：水产品：小鱼等可随机多个取样，切碎、混匀后，分取缩减小鱼等可随机多个取样，切碎、混匀后，分取缩减至所需量；大鱼等可从若干个体上切割少量可食部分，切至所需量；大鱼等可从若干个体上切割少量可食部分，切碎后混匀，分取缩减。碎后混匀，分取缩减。果蔬：果蔬：先去皮、核，体积小的随机多个取样（豆，枣、葡萄先去皮、核，体积小的随机多个取样（豆，枣、葡萄等），切碎、混匀后，分取缩减至所需量；体积大的（如等），切碎、混匀后，分取缩减至所需量；体积大的（如冬瓜、茄子等），按成熟度及个体的大小比例，选取若干冬瓜、茄子等），按成熟度及个体的大小比例，选取若干个个体，对每个个体单独取样，以消除样品间的差异，取个个体，对每个个体单独取样，以消除样品间的差异，取样方法：从每个个体生长轴纵向剖成样方法：从每个个体生长轴纵向剖成4 4份或份或8 8份，取对角线份，取对角线2 2份，再混合缩减；体积膨胀型蔬菜（如生菜、菠菜等），份，再混合缩减；体积膨胀型蔬菜（如生菜、菠菜等），应由对个包装分别抽取一定数量，混合后做成平均样品。应由对个包装分别抽取一定数量，混合后做成平均样品。武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系1.2.11.2.1液体、浆体或悬浮液体：搅拌均匀。工具：玻棒、电动搅液体、浆体或悬浮液体：搅拌均匀。工具：玻棒、电动搅拌器、液体采样器等。拌器、液体采样器等。1.2样品制备样品制备武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系1.2.21.2.2互不相溶的液体互不相溶的液体：如油和水等应分离后分别采取。：如油和水等应分离后分别采取。1.2.31.2.3固体样品：一般先用破碎或切分、捣碎、研磨等方固体样品：一般先用破碎或切分、捣碎、研磨等方法粉碎后过法粉碎后过20-4020-40目筛目筛；肉类用绞碎或磨碎法；蔬菜和水；肉类用绞碎或磨碎法；蔬菜和水果等采用匀浆法；果等采用匀浆法；绞肉机超微粉碎机匀浆机1.2样品制备样品制备武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系1.2.4 1.2.4 罐头：水果类清除果核后捣碎；肉类应剔除骨罐头：水果类清除果核后捣碎；肉类应剔除骨头后捣碎；鱼类应剔除调味料后再捣碎；常用工具头后捣碎；鱼类应剔除调味料后再捣碎；常用工具为高速组织捣碎机。为高速组织捣碎机。高速组织捣碎机武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系采集的样品应保持原有的性状，避免在外观、化学和细菌方采集的样品应保持原有的性状，避免在外观、化学和细菌方面的影响。为此应注意：面的影响。为此应注意：1 1、采样工具、容器必须清洁，无污染。、采样工具、容器必须清洁，无污染。2 2、包装应严密，防止水分、挥发性成分损失。、包装应严密，防止水分、挥发性成分损失。3 3、样品、样品采样量采样量要足够，一般样品应分为检验、复检和备查要足够，一般样品应分为检验、复检和备查用三份，每份不少于用三份，每份不少于0.5Kg0.5Kg。4 4、样品采集后应立即送检。、样品采集后应立即送检。5 5、样品、样品标签标签应注明：名称、批号、地点、日期、检验项目、应注明：名称、批号、地点、日期、检验项目、采样人、样品编号等。采样人、样品编号等。6 6、性质不同的样品不可混在一起，应发分别包装，并注明、性质不同的样品不可混在一起，应发分别包装，并注明性质。性质。1.3采样注意事项及样品保存采样注意事项及样品保存武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系样品的保存：样品的保存：1 1、原则原则：干燥、低温、避光、密封。：干燥、低温、避光、密封。2 2、注意事项：环境清洁干燥、存放样品按日期、批、注意事项：环境清洁干燥、存放样品按日期、批次、编号摆放。次、编号摆放。 武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系2. 2. 样品预处理样品预处理总的原则是：总的原则是： 消除消除干扰干扰因素；因素； 完整完整保留保留被测组份；被测组份； 使被测组份使被测组份浓缩浓缩，以获得可靠的分析结果。，以获得可靠的分析结果。常用的样品预处理方法有常用的样品预处理方法有6 6种种，应用时应根据食品的种类、，应用时应根据食品的种类、分析对象、被测组份的理化性质及所选用的分析方法决定分析对象、被测组份的理化性质及所选用的分析方法决定选用哪种预处理方法选用哪种预处理方法。干法灰化湿法消化浸提法溶剂萃取法常压蒸馏法减压蒸馏水蒸汽蒸馏吸附色谱分离分配色谱分离离子交换色谱分离磺化法和皂化法沉淀分离法掩蔽法常压浓缩法减压浓缩法有机物破坏法有机物破坏法溶剂提取法溶剂提取法蒸蒸 馏馏 法法色层分离法色层分离法化学分离法化学分离法浓浓 缩缩武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系（一）有机物破坏法（一）有机物破坏法测定食品中无机成分的含量，需要在测定前破坏有机结测定食品中无机成分的含量，需要在测定前破坏有机结合体，如蛋白质等。操作方法分为干法和湿法两大类。合体，如蛋白质等。操作方法分为干法和湿法两大类。1.1.干法灰化干法灰化原理：将样品至于电炉上加热，使其中的有机物脱水、原理：将样品至于电炉上加热，使其中的有机物脱水、炭化、分解、氧化，在置高温炉中灼烧灰化，直至残灰炭化、分解、氧化，在置高温炉中灼烧灰化，直至残灰为白色或灰色为止，所得残渣即为无机成分。为白色或灰色为止，所得残渣即为无机成分。武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系n1.干法灰化干法灰化n原理：采用高温（原理：采用高温（500-550）使有机物完全分）使有机物完全分解氧化，将待测成分转化为无机状态。解氧化，将待测成分转化为无机状态。n仪器：坩埚、电炉、马福炉等。仪器：坩埚、电炉、马福炉等。n步骤：称样步骤：称样-坩埚坩埚-小火炭化（电炉）小火炭化（电炉）-灰化灰化（马福炉）（马福炉）n结果判定：结果判定：白色或灰白色白色或灰白色n注意：该法应用于注意：该法应用于非挥发性非挥发性元素的测定。时间较长。元素的测定。时间较长。马福炉（一）有机物破坏法（一）有机物破坏法武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系干法灰化方法特点干法灰化方法特点优点：优点：此法基本不加或加入很少的试剂，故空白值低。此法基本不加或加入很少的试剂，故空白值低。因灰分体积很小，因而可处理较多的样品，可富集被因灰分体积很小，因而可处理较多的样品，可富集被测组分。测组分。有机物分解彻底，操作简单。有机物分解彻底，操作简单。缺点缺点：所需时间长。所需时间长。因温度高易造成易挥发元素的损失。因温度高易造成易挥发元素的损失。坩埚对被测组分有吸留作用，使测定结果和回收率降坩埚对被测组分有吸留作用，使测定结果和回收率降低。低。武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系原理：加强氧化剂（硝酸原理：加强氧化剂（硝酸-高氯酸高氯酸-硫酸；硝酸硫酸；硝酸-硫酸）消煮硫酸）消煮使有机物完全分解氧化，将待测成分转化为无机状态。使有机物完全分解氧化，将待测成分转化为无机状态。仪器：消化装置仪器：消化装置注意问题：适当温度；防注意问题：适当温度；防暴沸暴沸；防；防毒气毒气；加氧化剂时应冷；加氧化剂时应冷却沿壁加入；操作时人不能离开。却沿壁加入；操作时人不能离开。2湿法消化武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系2.湿法消化湿法消化原理：样品中加入强氧化剂，并加热消煮，使样原理：样品中加入强氧化剂，并加热消煮，使样品中的有机物质完全分解、氧化，呈气态逸出，品中的有机物质完全分解、氧化，呈气态逸出，待测组分转化为无机物状态存在于消化液中。待测组分转化为无机物状态存在于消化液中。常用的强氧化剂有浓硝酸、浓硫酸、高氯酸、高常用的强氧化剂有浓硝酸、浓硫酸、高氯酸、高锰酸钾、过氧化氢等。锰酸钾、过氧化氢等。武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系湿法消化的湿法消化的优缺点缺点优点：优点：（1 1）有机物分解速度快，所需时间短。）有机物分解速度快，所需时间短。（2 2）由于加热温度低，可减少金属挥发逸散的）由于加热温度低，可减少金属挥发逸散的损失。损失。缺点：缺点： （1 1）产生有害气体。）产生有害气体。 （2 2）初期易产生大量泡沫外溢。）初期易产生大量泡沫外溢。 （3 3）试剂用量大，空白值偏高。）试剂用量大，空白值偏高。武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系（二）溶剂提取法：（二）溶剂提取法：1.1.原理：利用样品中各组分在某一溶剂中溶解度的差原理：利用样品中各组分在某一溶剂中溶解度的差异，将各组分完全或部分分离。常用于异，将各组分完全或部分分离。常用于维生素、重金属、维生素、重金属、农药、毒素和功能食品成分等测定农药、毒素和功能食品成分等测定。液固武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系2 2浸提法：液固浸提法：液固提取剂选择：提取剂选择：A A、相似相溶原则（极性：水、相似相溶原则（极性：水 乙腈乙腈 甲醇甲醇 乙醇乙醇 丙酮丙酮 正丁醇正丁醇 乙酸乙酯乙酸乙酯 乙醚乙醚 二氯甲烷二氯甲烷 氯氯仿仿 苯苯 四氯化碳四氯化碳 环己烷环己烷 己烷己烷 ）；）；B B、沸点：、沸点：45-8045-80；C C、溶剂要稳定，不能与样品发生反应。、溶剂要稳定，不能与样品发生反应。提取方法：振荡法、捣碎法、索氏提取法提取方法：振荡法、捣碎法、索氏提取法武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系3 3萃取法：液液萃取法：液液萃取剂：不相溶溶剂，易分层。萃取剂：不相溶溶剂，易分层。萃取方法：分液漏斗萃取方法：分液漏斗武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系（三）蒸馏法：（三）蒸馏法：1 1原理原理: :利用液体混合物利用液体混合物中各组分的中各组分的挥发度挥发度不同而进不同而进行分离行分离. .2 2 常压蒸馏法常压蒸馏法武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系4 4水蒸汽蒸馏法水蒸汽蒸馏法3 3减压蒸馏法减压蒸馏法武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系（四）盐析法（四）盐析法武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系1 1、磺化法和皂化法、磺化法和皂化法 加入加入浓硫酸浓硫酸或或氢氧化氢氧化钠钠溶液，使脂肪转变为水溶液，使脂肪转变为水溶性物质，而采用有机溶溶性物质，而采用有机溶剂提取脂溶性成分。剂提取脂溶性成分。2 2、沉淀分离法：、沉淀分离法： 加入适当沉淀剂，加入适当沉淀剂，使被测组分或干扰组分使被测组分或干扰组分沉淀而消除干扰。沉淀而消除干扰。（五）化学分离法（五）化学分离法武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系3 3、掩蔽法：、掩蔽法： 加入适当掩蔽剂，加入适当掩蔽剂，与干扰组分反应转变为与干扰组分反应转变为不干扰状态。不干扰状态。武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系（六）色谱分离法（六）色谱分离法纸纸色色谱谱 武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系柱色谱柱色谱 武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系（七）浓缩法（七）浓缩法浓缩仪浓缩仪 旋转蒸发浓缩仪旋转蒸发浓缩仪 武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系3.分析方法的选择分析方法的选择3.1 正确选择分析方法的重要性正确选择分析方法的重要性3.2 选择分析方法应考虑的因素选择分析方法应考虑的因素3.3 分析方法的评价分析方法的评价3.4 不同分析方法测定结果差异性的检验不同分析方法测定结果差异性的检验武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系3.2 3.2 选择分析方法应考虑的因素选择分析方法应考虑的因素1 .1 .分析要求的准确度和精密度分析要求的准确度和精密度2 .2 .分析方法的繁简和速度分析方法的繁简和速度3 .3 .样品的特性样品的特性4 .4 .现有条件现有条件武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系3.3分析方法的评价分析方法的评价3.3.1 3.3.1 精密度精密度：是指多次平行测定结果相互接近的：是指多次平行测定结果相互接近的程度。程度。 精密度的高低可用精密度的高低可用偏差偏差来衡量。来衡量。平均偏差平均偏差标准偏差标准偏差武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系3.3.2 3.3.2 准确度准确度 ：是指测定值与：是指测定值与真实值真实值的接近程度。的接近程度。准确度高低可用误差来表示。准确度高低可用误差来表示。某一分析方法的准确度，可通过测定标准试样的误某一分析方法的准确度，可通过测定标准试样的误差，或作回收试验计算回收率，以误差或差，或作回收试验计算回收率，以误差或回收率P来来判断。判断。绝对误差绝对误差=XXTX-XT相对误差相对误差=XT武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系3.3.3 3.3.3 3.3.3 3.3.3 灵敏度灵敏度灵敏度灵敏度 ：是指分析方法所能检测到的：是指分析方法所能检测到的：是指分析方法所能检测到的：是指分析方法所能检测到的最低限量最低限量最低限量最低限量。仪器分析仪器分析化学分析化学分析灵敏度灵敏度高高低低选用选用待测成分待测成分含量低含量低待测成分待测成分含量高含量高武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系4. 4. 国内外食品检测标准简介国内外食品检测标准简介国内食品分析标准：国内食品分析标准：国际食品分析标准：国际食品分析标准： 食品卫生法（试行）食品卫生法（试行）； 中华人民共和国食品卫生检验方法中华人民共和国食品卫生检验方法（理化部分）（理化部分）ISOISO制定的食品分析标准；制定的食品分析标准；食品法规委员会食品法规委员会CACCAC；美国分析化学家协会（美国分析化学家协会（AOACAOAC）五、食品检验记录五、食品检验记录一、记录单内容样品名称样品名称检验目的检验目的样品型号规格样品型号规格收检日期收检日期生产日期生产日期检验日期检验日期样品来源样品来源报告日期报告日期检验环境检验环境20 50%20 50%样品包装样品包装检验依据检验依据GB/TGB/T检验设备检验设备检验编号检验编号仪器状态仪器状态送样者送样者仪器主要工作仪器主要工作参数参数检验项目检验项目结果记录结果记录检验结论检验结论该样品经检验，所检项目均符合该样品经检验，所检项目均符合XXXX标准要求。标准要求。 备注备注 批准：批准： 审核：审核： 主检：主检：检验报告单2007（）检字第145号武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系二、检验记录的填写二、检验记录的填写 操作记录：记录操作要点，操作条件，试剂名操作记录：记录操作要点，操作条件，试剂名称、纯度、浓度、用量，意外问题及处理称、纯度、浓度、用量，意外问题及处理 数据记录：根据仪器准确度要求记录。数据记录：根据仪器准确度要求记录。 数据处理记录：数据列表、结果计算、误差计数据处理记录：数据列表、结果计算、误差计算算武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系 检验记录注意事项：检验记录注意事项：1.1.填写内容要完全、要正确。填写内容要完全、要正确。2.2.要求字迹清楚整齐，用钢笔填写，不允许随意要求字迹清楚整齐，用钢笔填写，不允许随意涂改涂改，只能修改（更正），但一般不超过只能修改（更正），但一般不超过3 3处，更正方法处，更正方法是：在需更正部分划两条平行线后，在其上方写上是：在需更正部分划两条平行线后，在其上方写上正确的数字和文字（实际岗位要求正确的数字和文字（实际岗位要求加盖更改人印章加盖更改人印章）。武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系三、检验结果的表示方法三、检验结果的表示方法1.1.百分数：一般保留到小数点后第二位或两位有效百分数：一般保留到小数点后第二位或两位有效数字。数字。2.2.误差：一般保留一位，最多保留误差：一般保留一位，最多保留2 2位。位。3.3.其它按有效数字运算规则保留。其它按有效数字运算规则保留。4.4.单位：单位：mg/100g, mg/100mL, g/100g, mg/100L, mg/100g, mg/100mL, g/100g, mg/100L, g/kg, g/L. g/kg, g/L. 武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系四、有效数字及数据记录、运算：四、有效数字及数据记录、运算：有效数字：从检测仪器获得的数据。含准确数字和可有效数字：从检测仪器获得的数据。含准确数字和可疑数字两部分。反映了仪器的准确度。疑数字两部分。反映了仪器的准确度。武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系1.1.精密度：各次检验结果的吻合的程度。精密度：各次检验结果的吻合的程度。 每次检验的每次检验的结果越接近结果越接近，即吻合的程度越好，说明，即吻合的程度越好，说明所有的检验结果所有的检验结果精密度高精密度高，由此才能判断结果可靠。，由此才能判断结果可靠。 每次检验的每次检验的结果越分散结果越分散，即吻合的程度越差，说明，即吻合的程度越差，说明所有的检验结果所有的检验结果精密度差精密度差，则可判断结果不可靠。，则可判断结果不可靠。同一样品一般进行同一样品一般进行4-54-5次测定，可进行这样的分析，次测定，可进行这样的分析，当相对偏差或相对标准偏差不超过规定值就可以确定当相对偏差或相对标准偏差不超过规定值就可以确定或报告检验结果。或报告检验结果。五、检验结果可靠性的判断及结果报告五、检验结果可靠性的判断及结果报告武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系2.2.报告检验结果报告检验结果 精密度符合要求的检验结果平均值。精密度符合要求的检验结果平均值。武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系六、标准曲线的制作六、标准曲线的制作 标准曲线的制作有两种：标准曲线的制作有两种：绘图法：绘图法：a a、根据操作数据列表、根据操作数据列表 b b、绘图、绘图回归法：回归法：a a、根据操作数据列表、根据操作数据列表 b b、计算回归直线方程、计算回归直线方程 Y = ax + bY = ax + b回归直线的相关性检验回归直线的相关性检验 r1 rr1 r值越接近值越接近1 1，说明所有点越靠近该直，说明所有点越靠近该直线，线性越好，否则越差。线，线性越好，否则越差。武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系案例：用薄层色谱法测定糖精含量时，吸取案例：用薄层色谱法测定糖精含量时，吸取0.0，2.0，4.0，6.0，10.0ml浓度为浓度为1.0mg/ml的糖精钠标准溶液，分别置于的糖精钠标准溶液，分别置于100ml容容量瓶中，各加量瓶中，各加2%碳酸钠溶液至刻度，混匀，以碳酸钠溶液至刻度，混匀，以0管为参比，于波长管为参比，于波长270nm测定吸光度，分别为测定吸光度，分别为0.075，0.169，0.235，0.387，请，请你制作标准曲线。你制作标准曲线。方法一：1、列表： 编编 号号 0 01 12 23 34 4标准使用液的体积，标准使用液的体积，mlml0.02.0 4.06.010.0 标准使用液的浓度，标准使用液的浓度，mg/mlmg/ml 1.01.01.01.01.01.01.01.01.01.0糖精钠总含量糖精钠总含量mgmg0.02.0 4.06.010.0 糖精钠浓度糖精钠浓度mg/ml mg/ml 0.00.020 0.0400.0600.10 吸光度值吸光度值A A 0.0 0.0750.1690.2350.387 武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系2、绘图、绘图横坐标糖精钠浓度，纵坐标吸光度值，描点，画线，画线横坐标糖精钠浓度，纵坐标吸光度值，描点，画线，画线时应使画出的直线距离各点最近为原则。时应使画出的直线距离各点最近为原则。武夷学院武夷学院 茶学与生物系茶学与生物系方法二：回归法方法二：回归法列表（略）列表（略）计算计算a a、b b值，列出回归直线方程值，列出回归直线方程 nAnAAA a= a= n n2 2 ()()2 2 2 2A A AA b= b= n n2 2 ()()2 2 AA = 0.0200.075 + 0.0400.169 + 0.0600.235 + 0.100.387 = 0.0200.075 + 0.0400.169 + 0.0600.235 + 0.100.387 =0.06106 =0.06106 = 0.020 + 0.040 + 0.060 + 0.100 = 0.020 + 0.040 + 0.060 + 0.100 =0.220 =0.220 A = 0.866 A = 0.866 2 2 = = （0.0200.020）2+2+（0.0400.040）2+2+（0.0600.060）2+2+（0.1000.100）2 2 =0.0156 =0.0156 （）2 2 =0.0484 =0.0484 a=3.836 , b=0.005714 a=3.836 , b=0.005714即标准曲线为即标准曲线为 A = 3.836+ 0.005714A = 3.836+ 0.005714相关性检验相关性检验 r=0.9985r=0.9985若需作图，则根据上述方程计算任意两个点的值后描点画出直线。若需作图，则根据上述方程计算任意两个点的值后描点画出直线。 1 =0.020 mg/ml A1 = 0.0821 =0.020 mg/ml A1 = 0.082 2 =0.100 mg/ml A2 = 0.389 2 =0.100 mg/ml A2 = 0.389