For For 20092009s s Doctors Doctors BioMacroMolecular InterActionologyBiommialogy生物生物大大分子相互作用学分子相互作用学Proteins, ProteomicsRNAs, RNomicsLipids, LipomicsBiomoleculars and its interaction生物分子及其相互作用生物分子及其相互作用Others, Otheomics DNAs, GenomicsSaccharides, SacchariomicsFigure 12.3916S rRNA in E. coli1542 nt, 90 loop21 proteinRibosomemRNA+tRNA+rRNA+ProteinCollagen- 1()CNCollagen- 1() in glomerular basement membranePoly(Gly-Pro-Pro) in tropocollagen GPPGPPGPGPPGPPGPGPPGPPPPHO来自于日常生活的启示来自于日常生活的启示-1门的启示门的启示ABCE在一个相对独立的功能体中，各种活动性功能组件往往是后来在一个相对独立的功能体中，各种活动性功能组件往往是后来逐步加上去或加工完成的。逐步加上去或加工完成的。功能体上的每一个关键组件所处的位置，以及各位置之间的相功能体上的每一个关键组件所处的位置，以及各位置之间的相互关系是高度协调的，合理的，与整个的功能体的功能的发挥互关系是高度协调的，合理的，与整个的功能体的功能的发挥相一致。相一致。功能体上的关键组件是随环境变化，不断向前发展变化的。功能体上的关键组件是随环境变化，不断向前发展变化的。D(Adenosine diphosphate ribose)ADP-ribosylation of Gsby cholera toxin.Lysine -HydroxylysineN-AcetyllysineHydroxylaseAcyltransferase -N-Methyllysine Methylase -N,N-Dimethyllysine -N,N,N-Trimethyllysine MethylaseMethylaseModification of LysineFigure 1.5-CH3-CH3methylationCpG islandcoding region来自于日常生活的启示来自于日常生活的启示-2目的地、方向指示与信号辨认目的地、方向指示与信号辨认共同规则的制定、遵守与维护共同规则的制定、遵守与维护违规现象与规则修改违规现象与规则修改信号灯的启示信号灯的启示Cell signal transduction web975319753来自于日常生活的启示来自于日常生活的启示-3汽车修理工具：扳手与套筒的启示汽车修理工具：扳手与套筒的启示ABCFGHJILKNMDE扳手：传力器扳手：传力器/信号转导信号转导各种形式的套筒接头，一种特殊形式的扳手的一部分，克服各种形式的套筒接头，一种特殊形式的扳手的一部分，克服空间位阻障碍，使许多不可能的过程变为可能，化繁为简。空间位阻障碍，使许多不可能的过程变为可能，化繁为简。PPPPPPPPY579Y581Y716Y740Y751Y771Y1009Y1021P85SrcGrb2GAPPLC SH-PTP-2PDGF- (platelet derived growth factor )receptorKinase insert domainKinase domainGrb2：AdapterGAP：GTPase activating proteinPLC ：PLC gammaSH-PTP-2：Phosphatase-2P85：PI3K subunitSrc：KinaseFor examplesSH3SH3SH3SH3SH3SH2SH2SH2SH2SH2SH2SH1, tyrosine kinasePhospholipase CPhospholipase CGTPase activating proteinSrcGrb2GAPPLC 1 1 ME AIAKY*DF*KATADDE*LSFKRGDILKVLNEECDQN 36 W*YKAELNGKDGFIP*KNY*IE MKPH PWFFGKIPRAKA 71 EEMLSKQRHDGAFLIRESESAPGDFSLSVKFGNDV106 QHFKVLRDGAGKYFLWVVKFNSLNELVDYHRSTSVS0R143 NQQIFLR DIEQVPQQPT YVQALF*DF*DPQEDGE*LGFRRG181 DFIHVMDNSDPNW*WKGACHGQTGMFP*RNY*VTP VNRNV Primary structure of Grb2 proteinSH3-3SH3-2SH2+73-5459-149160-212+2* proline-rich ligand binding siteMKPHPWFFGKIPRAKAEEMLSKQRHDGAFLIRESESAPGDFSLSVKFGNDVQHFKVLRDGAGKYFLWVVKFNSLNELVDYHRSTSVSRNQQIFLRDIEQVP Tertiary structure of SH2MKPHPWFFGKIPR67AKAEEMLSKQRHDGAFLIR86ESESAPGDFSLSVKFGNDVQH107F108K109VLRDGAGKYFLWVVKFNSLNELVDYH135RSTSVSRNQQIFLRDIEQVP R67R86H107K109pTyr binding pocket F108H135unique binding pocket structural and functional integrationCHP: calcineurin homologous proteinPIP2: phosphatidylinositol 4,5-bisphosphateROCK1: Rho kinase 1ERM: ezrin, radixin or moesin p90RSK: p90-ribosomal protein S6 kinase NIK: Nck-interacting kinaseCaM: calmodulinHsp70: heat shock pritein 70 CAII: carbonic anhydrase II Na+/H+ exchanger isoform 1 (NHE1)14-3-3: serin binding proteinEzrin、Fascin和和NGAL在细胞中的定位及其功能联系在细胞中的定位及其功能联系Ezrin主主要要在在细细胞胞膜膜蛋蛋白白CD44与与细细胞胞骨骨架架微微丝丝F-Actin之之间间发发挥挥一一种种连连接蛋白的作用接蛋白的作用Fascin主要在细胞骨架微丝主要在细胞骨架微丝F-Actin之间发挥一种连接捆绑蛋白的作用之间发挥一种连接捆绑蛋白的作用NGAL，一种分泌性蛋白，具有保护基质金属蛋白酶，一种分泌性蛋白，具有保护基质金属蛋白酶MMP9的活性，促的活性，促进细胞外基质降解的功能，同时还与细胞骨架的重组有某种关联。进细胞外基质降解的功能，同时还与细胞骨架的重组有某种关联。Ezrin/FascinEzrin/Fascin功能性复合物功能性复合物功能性复合物功能性复合物 ? ?9 91.J Histochem Cytochem, 2006,54:889-96 (IF 2.45)2.Int J Cancer. 2009,124(11):2549-58. (IF 4.69)3.J Biol Chem, 2009,284:7995-8004 (IF 5.52)李恩民课李恩民课题组论文题组论文Ezrin与食管癌发生发展相关，部分实验证据与食管癌发生发展相关，部分实验证据307例例下游靶基因表达下游靶基因表达mRNA水平水平下游靶基因表达下游靶基因表达蛋白水平蛋白水平Smad2/3通路通路生存期生存期组织表达组织表达细胞表达细胞表达独立的预后不良判定因子独立的预后不良判定因子RNA干扰干扰克隆形成能力克隆形成能力分裂增殖能力分裂增殖能力裸鼠成瘤能力裸鼠成瘤能力裸鼠瘤重裸鼠瘤重移动能力移动能力侵袭能力侵袭能力黏附能力黏附能力MMP2/MMP9活性活性癌癌正常正常Cyr61Ezrin克隆数下降克隆数下降移动能力下降移动能力下降侵袭能力下降侵袭能力下降Ezrin激活激活Smad2/3，上调，上调Cyr61，一种细胞分裂增殖、侵袭转移相关基因的实验证据一种细胞分裂增殖、侵袭转移相关基因的实验证据敲降敲降Cyr61李恩民课题组李恩民课题组. Int J Cancer. 2009,124(11):2549-58. (IF 4.69)李恩民课题组李恩民课题组, , J Biol Chem, 2009,284:7995-8004 (IF 5.52)李恩民课题组李恩民课题组, , Int J Cancer, 2009,124:2549-58 (IF 4.69)李恩民课题组李恩民课题组, , J Histochem Cytochem, 2006,54:889-96 (IF 2.45)我们的研究工作我们的研究工作- -Ezrin部分主要结论主要结论：1.Ezrin在在食食管管癌癌中中显显著著异异常常过过表表达达，与与食食管管癌癌细细胞胞的的增增殖殖、侵侵袭袭移移动动、淋淋巴巴结结转转移移，以以及及患患者者的的生生存存期期缩缩短短等等密密切切相相关关，是是独独立立的的预预后后不不良判定因子。良判定因子。2.Ezrin的的异异常常表表达达处处于于食食管管癌癌由由早早期期阶阶段段向向中中晚晚期期阶阶段段发发展展过过渡渡的的关关键键环环节节上上，发发挥挥着着承承上上启启下下的的作作用用，通通过过激激活活Smad2/3和和 -catenin信信号号通通路路，促促使使下下游游的的MMP2、MMP9、CTGF和和Cyr61等等肿肿瘤瘤侵侵袭袭转转移移相相关关基基因因上上调调表表达达，可可能能会会形形成成多多个个正正反反馈馈调调控控环环，介介导导着着食食管管癌的侵袭转移发展。癌的侵袭转移发展。101029Summary about function and regulation of ezrin in ESCCTGF-beta/smad2/3 MAPK or Ezrin overexpression and translocationAlterations of cell behaviorsExpression alterations of related genesCyr61, CTGF, SDC2, ATF3 ( Invasivenessrelated genes, cell proliferationrelated genes) Cytoskeletal remodelingMMP-2 and MMP-9 activities34Function2?1EGFEGFRMEKERKSP1/AP1Ezrin与与Fascin，两种蛋白之间可能，两种蛋白之间可能还存在着直接的相互作用还存在着直接的相互作用, 而且相互之间的联系非常广泛而且相互之间的联系非常广泛Ezrin蛋白蛋白(E)和和Fascin蛋白蛋白(F)分子对接结果分子对接结果 不同颜色标注说明不同颜色标注说明 黄色：黄色：Ezrin蛋白蛋白 绿色：绿色：Fascin蛋白蛋白 粉色：潜在的粉色：潜在的PKC修饰位点，修饰位点， 丝氨酸（丝氨酸（S） 红色：潜在的红色：潜在的PKC修饰位点，修饰位点， 苏氨酸（苏氨酸（T）异常表达的细胞骨架结合蛋白异常表达的细胞骨架结合蛋白Ezrin和和Fascin触发食管癌侵袭转移分子机制的研究触发食管癌侵袭转移分子机制的研究2009 2009 NSFC-NSFC-广东联合基金重点项目广东联合基金重点项目广东联合基金重点项目广东联合基金重点项目