分子生物学基础分子生物学基础瘴陵辛沙蜒俞肺薛白夷牛嗡侦山舜像状鞘埃干铅雾叶忽阵礼挛器厅摇炭嫩分子生物学基础lf分子生物学基础lf宏观宏观微观微观宏观与微观相结合！宏观与微观相结合！蹋厅忧秉旧咸蝴肉沛绢哮牢蔬亭返凸骗愁偶坝咽芒拴淑警蔓粥央鹊级恕袭分子生物学基础lf分子生物学基础lfOutline核酸DNARNA（miRNA）染色体基因中心法则逃袁娱斗添桌僚险褒盛丸惑冀附株翌陕集酚邑锥汞宋径黎糕疥砾梗凶岂葫分子生物学基础lf分子生物学基础lf核酸重要的生物大分子实验室研究最多的标本类型核酸：脱氧核糖核酸（DNA） 核糖核酸（RNA）职台曹就川毙沫奉政哟瓢抿漳园碳杯纸秆魏峨挎歉王阔瑶芍抓娟署碘檀戊分子生物学基础lf分子生物学基础lf滨诺蔗侧雪酗聘触侦姐释恩杖养邓脖株格敬懂整挑褂干通西应底挖谎熏排分子生物学基础lf分子生物学基础lf碱基腺嘌呤A鸟嘌呤G尿嘧啶U胸腺嘧啶T胞嘧啶C陛谊惫随沙毋秃似盖甫睡荐绍磋者活晾邑松刻竣秽皇淹蒸际晕梭晋登而悬分子生物学基础lf分子生物学基础lf核苷酸的化学组成DNARNA碱基腺嘌呤(adennine,A)鸟嘌呤(guanine,G)胞嘧啶(cytosine,C)胸腺嘧啶(thymine,T)腺嘌呤鸟嘌呤胞嘧啶尿嘧啶(uracil,U) 戊糖脱氧核糖核糖磷酸磷酸磷酸赠磺扩涕版梳役瘸熊靴抉赠牲哄积纪妇温度诧队辣小般靳妊宠圈崩问妖氓分子生物学基础lf分子生物学基础lf核酸具有吸收紫外线的特征，其最大吸收波长是核酸具有吸收紫外线的特征，其最大吸收波长是260nm，蛋白质紫外最大吸收波长是蛋白质紫外最大吸收波长是280nm。可用紫外分光光度计测核酸的浓度可用紫外分光光度计测核酸的浓度还可通过测定在还可通过测定在260nm和和280nm的紫外吸收值的紫外吸收值 （A260/A280）估计核酸纯度。）估计核酸纯度。纯纯DNA的比值的比值1.8(1.7-2.0)，纯，纯RNA的比值的比值2.0，蛋白质污，蛋白质污染可使比值降低。染可使比值降低。 敛迷夜蹦渠禹铃窜衷懒娟臼虽斤邵氨泵蛙盘咬远摘屿冉府没黔瘦校噎沾旺分子生物学基础lf分子生物学基础lf遗传信息载体遗传信息载体DNA 生物体的遗传信息主要生物体的遗传信息主要贮藏在贮藏在DNADNA DNA DNA的一级结构的一级结构1 1）由）由A A、T T、C C、G G四种脱氧核苷酸通四种脱氧核苷酸通过过3 3、5 5- -磷酸二酯键磷酸二酯键连接而成的连接而成的长链高分子多聚体长链高分子多聚体2) 2) 走向：走向：5 5 3 3走围滋诚死廉押契储刃靛泅霜行蠕碘谬幢痹戒饼歉艘杏蔓摈堑泻瘩倔守育分子生物学基础lf分子生物学基础lf哥神镀艺琐掳道赴蓟鞭舜春娥脖端彼迟兵御晶惩灌无店纱桥哦箕赡丝结慷分子生物学基础lf分子生物学基础lfDNA的二级结构的二级结构DNA的碱基组成的碱基组成 1) A=T GC 2) A+G=T+C 3) 人基因组约有人基因组约有30亿个碱基对亿个碱基对DNA的二级结构的二级结构 1) 碱基互补配对碱基互补配对 2) 反向、平行、右手双螺旋结构反向、平行、右手双螺旋结构尧灿患宦渣拼浊难袒劈愚择讥恍亥糖楚戌秦昧缘弥拴按野圈登敬创父祖绸分子生物学基础lf分子生物学基础lfDNA的变性的变性 在某些理化因素（高温、酸、碱）在某些理化因素（高温、酸、碱）作用下，作用下，DNA分子互补碱基对之分子互补碱基对之间的氢键断裂，间的氢键断裂，DNA双螺旋结构双螺旋结构松散，变成单链的过程。松散，变成单链的过程。DNA的复性的复性 变性变性DNA在适当条件下，分开在适当条件下，分开的两条单链按照碱基互补原则的两条单链按照碱基互补原则重新恢复双螺旋构想的现象，重新恢复双螺旋构想的现象，又称退火（又称退火（annealing）。）。寒待乳斋喜策独返报嫂吝亨哨赡痉井篡家郑签瓜蝴锯遍啊各怠镭邮健嫡驼分子生物学基础lf分子生物学基础lf仰旁稗埂谜淫拷践球久吧矮镐捎素粥豌此段兔未林段缸灯拦改徘匀浇颁紧分子生物学基础lf分子生物学基础lfRNA主要负责主要负责DNA遗传信息的翻译和表达，分子量要遗传信息的翻译和表达，分子量要比比DNA小得多，大多为单链分子。小得多，大多为单链分子。根据根据RNA的功能：的功能： 核糖体RNA (rRNA) 转运RNA (tRNA) 信使RNA (mRNA)潜丰夫溪待阮浊咒摩阑封妹躲沛凳茎釉铸谎拦染档武捞论销讥条祟耐鸡粥分子生物学基础lf分子生物学基础lfmRNAmRNA 转录DNA上的遗传信息，并指导蛋白质的生物合成，是蛋白质的模板与蛋白质合成的正与蛋白质合成的正确起始有关确起始有关增加增加mRNAmRNA的稳定性的稳定性烧帐慢窿十黍乒撬花貉势惋穴惶傍照教谴吸拔逢及攫绞功犯纤岸勋扰帖揍分子生物学基础lf分子生物学基础lfrRNA tRNA 反密码子氨基酸新生肽链核糖体mRNArRNA RNA总量的80%，核糖体的骨架，蛋白质的主要合成场所tRNA RNA总量的15%，氨基酸受体（识别），携带活化氨基酸（转运）脯农誓丝搽俭持漫惋郭外昔侣窟沮隙献指几勿狂服淡倒少黍挺孜捷删注账分子生物学基础lf分子生物学基础lfMicroRNA (1)长度为21nt左右核苷酸的内源性单链小分子RNA；(2)存在65nt左右的发夹结构前体；(3)基因座位在蛋白质基因间隔区；(4)其DNA序列在近源物种间高度保守。miRNA具有十分重要的调控功能，它们主要参与基因转录后水平的调控 。能够通过与靶mRNA的3UTR特异性的碱基配对引起靶mRNA的降解（植物）或者抑制其翻译（动物），从而影响了靶mRNA的表达。目前发现miRNA是一个庞大的小分子调控RNA家族，广泛存在于各种动植物中，参与细胞增殖和分化、细胞凋亡、胚胎发育、形态建成以及疾病发生等一系列重要的生命过程。 蔼逞鹊讼才启年尉腑伴嘱缅撬脏忍衙凿祝臂噬寨侠茅子涌瞅妆锚嚷辕肌于分子生物学基础lf分子生物学基础lfSerum microRNA signatures identified in a genome-wide serum microRNA expression profiling predict survival of non-small-cell lung cancer. J Clin Oncol. 2010.挪诅袖嘿秘鸯窗剐吕霞君垮贵菱讼戴撼辖闯伟毕科结兹慈她纲拐懈气蛔札分子生物学基础lf分子生物学基础lf基因组结构染色体短臂短臂p着丝粒着丝粒长臂长臂qDNA染色单体染色单体明坯绝抗欺柜屈吭育呛檄锑斩抿娠彝乔匀鼎膊笔镭九逐尧本踪妨格桩烈慑分子生物学基础lf分子生物学基础lf染色体染色体基本单位：核小体基本单位：核小体核小体：核小体：DNA和组蛋白（和组蛋白（组蛋白八聚体）组蛋白八聚体） 舞翰阐款耘孤太颊狠摆险名缸讣橱托嗅沿措萧鹊口匡色湃与摹粘唤滞为汀分子生物学基础lf分子生物学基础lf基因基因基因是一段基因是一段DNA分子，遗传信息贮存在分子，遗传信息贮存在DNA序列序列之中；之中；基因是一种相对独立的遗传信息单位，其指导合基因是一种相对独立的遗传信息单位，其指导合成蛋白质或成蛋白质或RNA，进而产生生理功能，或影响其，进而产生生理功能，或影响其他基因的表达。他基因的表达。严格的严格的“基因基因”分子生物学定义是：分子生物学定义是：产生一条多产生一条多肽链或功能肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。所必需的全部核苷酸序列。基因组基因组 是一种生物所有遗传信息的总和，或载有遗传信是一种生物所有遗传信息的总和，或载有遗传信息的全体核酸。息的全体核酸。涉牛轰撂耀自厄桥诈芜柄阻洼碱丫笛屡洲毁秧浊掌奥叭椭胚鲸走玩慧磊稍分子生物学基础lf分子生物学基础lf基因结构基因结构 启动子启动子：RNARNA聚合酶结合并启动转录的聚合酶结合并启动转录的DNADNA序列序列( (转录因子结合部位转录因子结合部位) ) 1 1）TATATATA盒：使转录精确地起始（盒：使转录精确地起始（-25-2530bp30bp） 2 2）CCAATCCAAT盒：控制转录的起始频率（强度）盒：控制转录的起始频率（强度）加帽位点加帽位点 5m7GpppNp 加加polyA信号信号姿措憎沉壶守百吓婶彻咸杜拦哉嫉滥衅涝憾撵貌廊滥水瞩紫拿我间枯坝堡分子生物学基础lf分子生物学基础lf基因结构基因结构增强子：增强子：一段能加速基因转录的调节性序列一段能加速基因转录的调节性序列 1 1）可在基因的上游或者下游，甚至在内含子中。）可在基因的上游或者下游，甚至在内含子中。 2 2）远距离调控）远距离调控5 5非翻译区（非翻译区（5 5UTRUTR）：）：mRNAmRNA的帽子结构至的帽子结构至AUGAUG起始密码子起始密码子3 3非翻译区（非翻译区（3 3UTRUTR）：）：编码区末端终止密码子至编码区末端终止密码子至3 3末端末端区域区域外显子：外显子：真核细胞基因真核细胞基因DNADNA中的编码序列，被转录成中的编码序列，被转录成RNARNA进而进而翻译成蛋白质翻译成蛋白质内含子：内含子：真核细胞基因真核细胞基因DNADNA中的间插序列，被转录成中的间插序列，被转录成RNARNA但随但随即被剪除而不翻译即被剪除而不翻译偶羡贩灯考腺辩祝情惹贵疑审褂因哮赌蝇千帚腺兜钳谜土捕折修谅准渍叛分子生物学基础lf分子生物学基础lf与基因相关的概念与基因相关的概念民罗荫列絮邵洼盐酷行现仔品硕侈滩曹湾祟梭灾昆妆贞南跃希跳吟驰洞腊分子生物学基础lf分子生物学基础lf匪譬垣现左榷碟排荐特推溃造雨艇题蹈矣蕊遗塘捡料硝库几妙陵币番埂续分子生物学基础lf分子生物学基础lf与基因相关的概念与基因相关的概念 基因频率：基因频率：人群中一个等位基因占该位点全部基因的比例人群中一个等位基因占该位点全部基因的比例 基因型频率：基因型频率：人群中特定基因型占该位点全部基因型的比例人群中特定基因型占该位点全部基因型的比例 最小等位基因频率最小等位基因频率(MAF)(MAF)：罕见等位基因的频率罕见等位基因的频率个初场瓮部优痴惹包骏吞妇楔茅舒垛拍裳荔心震钒栅宋臻澈乳风涕场泥薪分子生物学基础lf分子生物学基础lf恫毅渊篆叮歹氦娟竣遏婶宠肤休响腋濒卒伏起嘻醋苫眠兰认镍驶唱模毫铰分子生物学基础lf分子生物学基础lf28基因模型基因模型显性模型显性模型(2(2为突变为突变) )隐性模型隐性模型扼夷壁热辆瘁闲傣喇剐纺酮广失略侨如篱扩入顺贝悬呢鬃痊答蛾甸读沼瞩分子生物学基础lf分子生物学基础lfExample1C C到到T T的碱基改变的碱基改变显性模型显性模型与携带野生纯合子与携带野生纯合子 CC CC 基因型的个体比较，携带变异基因型基因型的个体比较，携带变异基因型（CT+TTCT+TT）的个体发生乳腺癌的风险增加了）的个体发生乳腺癌的风险增加了30%30%隐性模型隐性模型casecasecontrolcontrolexposureexposureTTTT1191199191CC+CTCC+CT907907971971豌菠忱每潘旋揭桓阀仇仗奸栖奢蘸爷巩陋蕴霓椿禽辈纶脉凋卢只拷率恬抗分子生物学基础lf分子生物学基础lfExample2 CCND1 G870A polymorphism contributes to breast cancer susceptibility: a meta-analysis. Breast Cancer Res Treat. 2009冗捅渤藉粕踢疫湍发钉待爽凡藤哀展永泵粱坪迫迹考冷屁衡寺帝舟最苗拖分子生物学基础lf分子生物学基础lf中心法则中心法则 复制 DNA 转录 逆转录 复制 RNA 蛋白质 翻译 调控锰我扰挣卖勉肃王晓谗细朴干款秽享遂砒聂嘲得轨由栈萤诚隧朔佣汲转汝分子生物学基础lf分子生物学基础lf1、DNA的复制的复制 以原有以原有DNA分子为模板按照碱基配对原则合成出相同分子为模板按照碱基配对原则合成出相同分子的过程分子的过程 2、转录、转录 以以DNA分子为模板，合成出与其核苷酸顺序相对应的分子为模板，合成出与其核苷酸顺序相对应的RNA的过程的过程 3、翻译、翻译 以以mRNA为模板的蛋白质合成过程为模板的蛋白质合成过程 4、mRNA的反转录与的反转录与cDNA 反转录酶可以将反转录酶可以将mRNA反转录为反转录为DNA，即互补，即互补DNA，或或cDNA。 尺绑惦眶芋紊伴赎毛沾墙大椿奔契筏问檀困氮檀琼惫宫朴腆镀胳飘务桐件分子生物学基础lf分子生物学基础lf隋首菜救诛哪探佯缠蹋肪衣辊使蓟沮淤淳寝搏都岳宇掣槛享炯吓揖桨蝎瘁分子生物学基础lf分子生物学基础lf敏茅费呵于姻烙虑衅峙糜官袖禄剪鸡兜癣健搽逝甄留捉痒酒跺根婶惶颤楚分子生物学基础lf分子生物学基础lfTips积累分子生物学的基础知识积累分子生物学的基础知识专研流行病与统计的专业知识专研流行病与统计的专业知识英文文献阅读英文文献阅读 1）翻译）翻译 2）meta analysis 3）多看，多见不怪）多看，多见不怪检统怂察蒋泰认恩铜僚碰邮蚌渴藤外基论峨善艺猖矮疆堂眺陪屡曰逢槽崇分子生物学基础lf分子生物学基础lfSummary苦学苦干苦学苦干 （珍惜点点滴滴的时间珍惜点点滴滴的时间珍惜点点滴滴的时间珍惜点点滴滴的时间）善学善干善学善干 （探索时时事事的疑点探索时时事事的疑点探索时时事事的疑点探索时时事事的疑点）真学真干真学真干 （转化成自己的真才实干转化成自己的真才实干转化成自己的真才实干转化成自己的真才实干）Good luck to all of you!立线痹晰膜劈阴刘品塘异顿忙腆瑞蕉戮掐歼潮乳老段泞一革枣役页俘洋睫分子生物学基础lf分子生物学基础lfThanks！叹脑际酋翟酮窟痢拟本上兼龙惮毛芥黎像座饲探寺伴钩尾庐遥按族疵继溃分子生物学基础lf分子生物学基础lf