1.1.纤维素是植物细胞中的多糖还是动物细胞中的多糖？纤维素是植物细胞中的多糖还是动物细胞中的多糖？2.2.土壤中的一些微生物能够分解纤维素并利用，为什么？土壤中的一些微生物能够分解纤维素并利用，为什么？3.3.人类为什么要从土壤中分离这些微生物，有什么意义？人类为什么要从土壤中分离这些微生物，有什么意义？一一 、基础知识、基础知识二、实验设计流程二、实验设计流程三、操作提示三、操作提示四、课题延伸四、课题延伸主要内容主要内容 是自然界中纤维素含量最高的天然产是自然界中纤维素含量最高的天然产物，纤维素的分解需要在物，纤维素的分解需要在 的催化作用的催化作用下完成，请完成下列过程：下完成，请完成下列过程：一、基础知识一、基础知识 （一）纤维素与纤维素酶（一）纤维素与纤维素酶棉花棉花纤维素酶纤维素酶纤维纤维二糖二糖葡萄糖葡萄糖C1酶酶Cx酶酶葡萄糖葡萄糖苷酶苷酶纤维素纤维素滤滤纸纸崩崩溃溃法法纤维素酶活性的测定实验：纤维素酶活性的测定实验：下列生物能分解纤维素的是（下列生物能分解纤维素的是（ ） 人人 兔兔 牛牛 蘑菇蘑菇 纤维杆菌纤维杆菌A. B.C. D.C（二）纤维素分解菌的筛选（二）纤维素分解菌的筛选1、筛选纤维素分解菌的方法是、筛选纤维素分解菌的方法是_。该方法可以通。该方法可以通过过_反应直接筛选。反应直接筛选。刚果红染色法刚果红染色法颜色颜色2、其原理是：刚果红可以与纤维、其原理是：刚果红可以与纤维素形成素形成_，当纤维素被，当纤维素被_分解后，红色复合物无分解后，红色复合物无法形成，出现以法形成，出现以_为为中心的中心的_，我们可以通过，我们可以通过_来筛选纤维素分解菌。来筛选纤维素分解菌。红色复合物红色复合物纤维素酶纤维素酶纤维素分解菌纤维素分解菌 透明圈透明圈是否产生透明圈是否产生透明圈练一练：练一练：1.1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是下列关于纤维素酶的说法，错误的是A. A. 纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B. B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C. C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D. D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖2.2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是下列说法错误的是A. A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D. D. 若培养基上产生了透明圈，则说明已筛若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌选出了纤维素分解菌土壤取样土壤取样选择培养选择培养梯度稀释梯度稀释将样品涂布到鉴别纤将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基维素分解菌的培养基上上挑选产生透挑选产生透明圈的菌落明圈的菌落二、实验设计二、实验设计 纤维素分解菌大多分布在纤维素分解菌大多分布在_的环的环境中，所以采集土样时，应选择富含纤维素境中，所以采集土样时，应选择富含纤维素的环境。的环境。（一）土壤取样（一）土壤取样富含纤维素富含纤维素旁栏思考题旁栏思考题 根据生物与环境的互相依存关系，在富含根据生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境。于普通环境。为什么要在富含纤维素的环境中找纤维素分解菌？为什么要在富含纤维素的环境中找纤维素分解菌？ 将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？埋进土壤多深？ 人工设置适宜环境，使纤维素分解人工设置适宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。将纸埋于深约菌相对聚集。将纸埋于深约10cm10cm的腐的腐殖土壤中。殖土壤中。旁栏思考题旁栏思考题1 1、纤维素分解菌选择培养基属于、纤维素分解菌选择培养基属于_（固体、液体）培养基，原因是（固体、液体）培养基，原因是_。（二）选择培养（二）选择培养阅读资料二阅读资料二 “ “选择培养基选择培养基”，回答以下，回答以下几个问题：几个问题：液体液体没有添加琼脂成分没有添加琼脂成分2 2、该培养基对微生物、该培养基对微生物_（具有，不具有）（具有，不具有）选择作用。选择作用。以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖微生物可以大量繁殖 具有具有 如果具有，其选择机制是如果具有，其选择机制是 。若设置一个对照实验说明选择培养的作若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是将用，应控制的变量是将_改为改为_。3 3、你能否设计一个对照实验，说明选、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？择培养基的作用？葡萄糖葡萄糖纤维素粉纤维素粉4 4. .实验流程中实验流程中“选择培养选择培养” 的目的是什的目的是什么？么？ 其目的是增加纤维素分解菌的浓度，其目的是增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。生物。旁栏思考题旁栏思考题为什么选择培养能够为什么选择培养能够“浓缩浓缩”所需的微生物？所需的微生物？ 在选择培养的条件下，在选择培养的条件下，可以使那些可以使那些能够适应能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到制，因此可以起到“浓缩浓缩”的作用。的作用。（三）（三） 梯度稀释梯度稀释按照课题按照课题1 1的稀释操作方法，将的稀释操作方法，将选择培养后的培养基进行等比稀释，选择培养后的培养基进行等比稀释，稀释最大倍数到稀释最大倍数到10106 6（四）样品涂布（四）样品涂布1. 制备培养基制备培养基:参照旁栏中的比例参照旁栏中的比例2. 涂布平板：涂布平板：将稀释度为将稀释度为104106的菌悬液各取的菌悬液各取0.1ml涂布在培养基上，涂布在培养基上，30倒置培养倒置培养（五）挑选产生透明圈的菌落（五）挑选产生透明圈的菌落 挑取产生明显的透明圈的菌落，挑取产生明显的透明圈的菌落，一般即为一般即为分解纤维素的菌落。分解纤维素的菌落。 接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在30300 0C C 37370 0C C培养，可获得纯培养。培养，可获得纯培养。【资料三资料三】刚果红染色法刚果红染色法方法一：方法一：先培养微生物，再加入刚果先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应红进行颜色反应方法二：方法二：在倒平板时就加入刚果红在倒平板时就加入刚果红染色法染色法优点优点缺点缺点方法一方法一 方法二方法二 颜色反应基本上是颜色反应基本上是纤维素分解菌的作纤维素分解菌的作用用 操作繁琐，操作繁琐，刚果红刚果红会会使菌落之间发生混杂使菌落之间发生混杂操作简便，不操作简便，不存在菌落混杂存在菌落混杂问题问题产生淀粉酶的微生产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明物也产生模糊透明圈，有些微生物能圈，有些微生物能降解色素，形成明降解色素，形成明显的透明圈。显的透明圈。思考：思考：这两种方法各有哪些优点与不足这两种方法各有哪些优点与不足选择培养的操作方法选择培养的操作方法 将土样加入装有将土样加入装有30ml30ml选择培养基的选择培养基的锥锥形瓶形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下定温度下震荡震荡培养培养1 12 2天，直至培养液天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养。变浑浊。也可重复选择培养。三、操作提示三、操作提示 为了确定分离得到的是纤维素分解菌，为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行还需要进行_实验，纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有发酵方法有_ _ 发酵和发酵和_ _ 发酵。纤发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的维素所产生的_ _ 含量进行定量测定。含量进行定量测定。发酵产纤维素酶发酵产纤维素酶 液体液体 固体固体 葡萄糖葡萄糖 四、课题延伸四、课题延伸分解分解纤维纤维素的素的微生微生物的物的分离分离纤维素酶纤维素酶种类、作用种类、作用刚果红染色刚果红染色筛选原理筛选原理实实验验设设计计土壤取样土壤取样选择培养选择培养涂布培养涂布培养纯化培养纯化培养前置染色法前置染色法后置染色法后置染色法富含纤维素土壤富含纤维素土壤增大分解菌含量增大分解菌含量染色鉴别染色鉴别分离出分解菌分离出分解菌D1 1、下列材料中纤维素含量最高的是、下列材料中纤维素含量最高的是 ( ( ) ) A A杨树杨树 B B小麦小麦 C C玉米玉米 D D棉花棉花C2 2、纤维素酶能够分解、纤维素酶能够分解 ( )( ) A A纤维素的微生物纤维素的微生物 B B淀粉的微生物淀粉的微生物 C C纤维素纤维素 D D淀粉淀粉B3、刚果红能与哪项物质形成红色复合物、刚果红能与哪项物质形成红色复合物 ( ) A纤维二糖纤维二糖 B纤维素纤维素 C葡萄糖葡萄糖 D麦芽糖麦芽糖B4 4、寻找纤维素分解菌应到、寻找纤维素分解菌应到( )( ) A A湿润的环境中湿润的环境中 B B富含纤维素的环境中富含纤维素的环境中 C C富含无机盐的环境中富含无机盐的环境中 D D池塘中池塘中D5 5、纤维素分解菌的选择培养基有选择作用，、纤维素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于其含有原因在于其含有 ( )( ) A ANaNO3 BNaNO3 BKClKCl C C酵母膏酵母膏 D D纤维素粉纤维素粉A6 6、下列哪种生物能产生纤维素酶、下列哪种生物能产生纤维素酶 ( )( ) A A纤维素分解菌纤维素分解菌 B B牛牛 C C羊羊 D D兔兔D7 7、选择培养时应将锥形瓶固定在、选择培养时应将锥形瓶固定在 ( ) ( ) A A桌子上桌子上 B B温箱里温箱里 C C窗台上窗台上 D D摇床上摇床上B8 8、选择培养的结果：培养液变、选择培养的结果：培养液变 ( )( ) A A清澈清澈 B B浑浊浑浊 C C红色红色 D D产生透明圈产生透明圈C9 9、刚果红染色时，加入刚果红可在、刚果红染色时，加入刚果红可在 ( ( ) ) 制备培养基时制备培养基时 梯度稀释时梯度稀释时 倒平板时倒平板时 涂布时涂布时 培养基上长出菌落时培养基上长出菌落时 A A B B C C D DA1010、两种刚果红染色法的结果是、两种刚果红染色法的结果是 ( )( ) A A均会出现透明圈均会出现透明圈 B B均不会出现透明圈均不会出现透明圈 C C方法一出现，方法二不出现方法一出现，方法二不出现 D D方法一不出现，方法二出现方法一不出现，方法二出现