第八讲第八讲淋巴细胞（淋巴细胞（Lymphocyte）第九章第九章 T T淋巴细胞淋巴细胞第十章第十章 B B淋巴细胞淋巴细胞Outline of the lecture1.Tlymphocytes1.Tlymphocytes2.Blymphocytes2.Blymphocytes基 本 概 念n n免疫细胞（免疫细胞（immunocyteimmunocyte）：）：所有参所有参与免疫应答或与免疫应答有关的细与免疫应答或与免疫应答有关的细胞及其前体，包括造血干细胞、胞及其前体，包括造血干细胞、APCAPC、淋巴细胞、粒细胞、肥大细胞和红淋巴细胞、粒细胞、肥大细胞和红细胞等。细胞等。淋巴细胞淋巴细胞（lymphocyte）:是一群异质性的构是一群异质性的构成免疫系统的主要成免疫系统的主要细胞，包括细胞，包括T细胞、细胞、B细胞和细胞和NK细胞。细胞。淋淋巴巴细细胞胞第一节第一节 T淋巴细胞淋巴细胞一、一、 MaturationMaturation二、二、 Surface markersSurface markers三、三、 SubsetsSubsets 来源于骨髓来源于骨髓在胸腺（在胸腺（thymusthymus）内发育成熟（由胸腺内发育成熟（由胸腺皮质区向髓质区迁移）皮质区向髓质区迁移）移行至外周淋巴组织移行至外周淋巴组织执行细胞执行细胞免疫应答，参与对免疫应答，参与对TDTD抗原的体液免疫应答。抗原的体液免疫应答。 重要事件重要事件重要事件重要事件 * * * * 功能性功能性功能性功能性TCRTCRTCRTCR形成（基因重排）；（胸腺皮质区）形成（基因重排）；（胸腺皮质区）形成（基因重排）；（胸腺皮质区）形成（基因重排）；（胸腺皮质区）* * * * 阳性选择（胸腺皮髓交界区）阳性选择（胸腺皮髓交界区）阳性选择（胸腺皮髓交界区）阳性选择（胸腺皮髓交界区）* * * * 阴性选择。（胸腺髓质区）阴性选择。（胸腺髓质区）阴性选择。（胸腺髓质区）阴性选择。（胸腺髓质区）意义意义意义意义 * * * * 获得功能性与多样性的获得功能性与多样性的获得功能性与多样性的获得功能性与多样性的TCRTCRTCRTCR； * * * * 获得获得获得获得MHCMHCMHCMHC的限制性；的限制性；的限制性；的限制性； * * * * 获得对自身抗原的耐受性。获得对自身抗原的耐受性。获得对自身抗原的耐受性。获得对自身抗原的耐受性。一、一、Maturation of T cellMousethymus5 x 107 per dayTcellsmatureinthethymusbutmostdiethere.98% of cells die in the thymus without inducing any inflammation or any change in the size of the thymus.Thymic macrophages phagocytose apoptotic thymocytes.2 x 106 per dayConstant1-2 x 108cells (一一)早期阶段早期阶段（皮质区）（皮质区）双阴细胞双阴细胞(doublenegtivecell)双阳细胞双阳细胞(doublepositivecell) (二二)阳性选择阳性选择（皮髓交界区）（皮髓交界区） (三三)阴性选择阴性选择（髓质区）（髓质区）三三 个个 阶阶 段段 TCRd d+、CD3-、CD4-、CD8-的祖的祖T细胞细胞双阴性双阴性T细胞（细胞（doublenegtive,DN）( (一一) ) 早早 期期 阶阶 段段TCRd d+、CD3+、CD4-、CD8-的的dTdT细胞细胞TCRb b+、CD3+、CD4+、CD8+的前的前T细胞细胞双阳性双阳性T细胞（细胞（doublepositive，DP）输出到外周输出到外周参与固有免疫参与固有免疫进入阳性选择阶段进入阳性选择阶段 ( (二二) ) 阳性选择阶段阳性选择阶段n n获得有功能性的获得有功能性的TCRTCRn nT T细胞由双阳性成熟为单阳性细胞由双阳性成熟为单阳性清除无用的清除无用的清除无用的清除无用的T T T T细胞细胞细胞细胞T细胞不能识别胸腺皮质上皮细胞提呈的肽细胞不能识别胸腺皮质上皮细胞提呈的肽/MHC复合物，即发生凋亡复合物，即发生凋亡。获得功能性获得功能性TCRTCR T细胞由双阳性分化为单阳性 DP细胞的细胞的CD4结合皮质胸腺上皮细胞的结合皮质胸腺上皮细胞的MHCII类分子，类分子，CD8丢失，成为丢失，成为CD4T细胞；而细胞；而CD8结合结合MHCI类分子，则类分子，则CD4丢失，成为丢失，成为CD8T细胞。从而细胞。从而发育为发育为单阳性细胞（单阳性细胞（single positive，SP）通过阳性选择，获得了自身通过阳性选择，获得了自身MHC限制性。限制性。 CD8+T细胞受细胞受MHC类分子类分子的限制；的限制；CD4+T细胞受细胞受MHC类分子的限制。类分子的限制。( (三三) ) 阴性选择阶段阴性选择阶段n n去除自身反应性去除自身反应性T T细胞，形成由功能细胞，形成由功能性和多样性性和多样性TCRTCR组成的单阳性成熟组成的单阳性成熟T T细细胞库。胞库。阴性选择阶段阴性选择阶段 阴性选择是去除自身反应性阴性选择是去除自身反应性T T细胞，实现自身免疫耐受细胞，实现自身免疫耐受的关键步骤之一（的关键步骤之一（T T细胞的中枢耐受）细胞的中枢耐受）详见免疫耐受详见免疫耐受经阳性选择的经阳性选择的T T细胞与髓质细胞与髓质DCDC和巨噬细胞提呈的自身和巨噬细胞提呈的自身肽肽/MHC/MHC复合物高亲和力结合，则发生凋亡。复合物高亲和力结合，则发生凋亡。TCRabab,gdgdCD3andTCR-CD3complexCD4/CD8Costimulatorymoleculereceptors(CMR)CTLA-4CD40L Mitogenreceptorothermolecules 二、二、SurfacemakerofTcell(一）一）T-cellreceptors(TCR)There are two kinds of TCR, the great majority of T cells express the TCR/heterodimer; the minority of T cells express the TCR/heterodimers.twopolypeptidechains-,.Eachofthemismadeupofconstantandvariableregions(V,C;V,C).The variableregion (V+V)composeaT-cellantigen-bindingsite.Thestructureof/TCRhasaverysimilarstructure.1StructureofTCRabab-Recognizeandbindtoantigen,exactlyshortpolypeptides(epitopes)ofantigen.2 Functions of TCRTT细胞识别抗原：双识别细胞识别抗原：双识别第一识别：第一识别：第一识别：第一识别：TCRTCRTCRTCR的的的的CDR3CDR3CDR3CDR3识别抗原决定基识别抗原决定基识别抗原决定基识别抗原决定基第二识别：第二识别：第二识别：第二识别：TCRTCRTCRTCR的的的的CDR1,CDR2CDR1,CDR2CDR1,CDR2CDR1,CDR2识别识别识别识别MHCMHCMHCMHC分子分子分子分子存在于外周成熟和部分未成熟的存在于外周成熟和部分未成熟的存在于外周成熟和部分未成熟的存在于外周成熟和部分未成熟的T T细胞表面细胞表面细胞表面细胞表面 1. Structure1. Structuren n-由由由由 、 、 、 和和和和 五五五五种种种种不不不不同同同同的的的的多多多多肽肽肽肽链链链链组组组组成成成成的的的的6 6条条条条跨跨跨跨膜膜膜膜多多多多肽链组成的复合体肽链组成的复合体肽链组成的复合体肽链组成的复合体 n n-通过非共价键与通过非共价键与通过非共价键与通过非共价键与TCRTCR形成形成形成形成TCR-CD3TCR-CD3分子复合物。分子复合物。分子复合物。分子复合物。n n-胞胞胞胞浆浆浆浆区区区区长长长长，含含含含有有有有与与与与免免免免疫疫疫疫细细细细胞胞胞胞活活活活化化化化信信信信号号号号转转转转导导导导有有有有关关关关的的的的免免免免疫疫疫疫受受受受体体体体酪酪酪酪氨氨氨氨酸酸酸酸活活活活化化化化基基基基序序序序（immune immune receptor receptor tyrosine-based tyrosine-based activation motif, ITAMactivation motif, ITAM），故能执行信号转导功能。），故能执行信号转导功能。），故能执行信号转导功能。），故能执行信号转导功能。 2. Function: 2. Function: 支持支持支持支持TCRTCR结构；结构；结构；结构； 信号转导信号转导信号转导信号转导（二）（二）CD3与与TCR-CD3复合物复合物Structure of TCR-CD3 complexStructure of TCR-CD3 complex（三）（三）CD4andCD8molecules共受体共受体CD4与与CD8的作用的作用（四）（四）共刺激分子受体共刺激分子受体/协同刺激分子受体协同刺激分子受体T T细胞的活化需要双信号；细胞的活化需要双信号；共刺激分子受体与共刺激分共刺激分子受体与共刺激分子结合为子结合为T T细胞的活化提供第细胞的活化提供第二信号；二信号；CD28CD28是是T T细胞上重要的协同细胞上重要的协同刺激分子受体，其相应的配刺激分子受体，其相应的配体为体为B7B7。Costimulatorymoleculereceptors(CMR)Important costimulatory moleculesCMR on T cells CMR on T cells CMR on T cells CMR on T cells CM on APCs CM on APCs CM on APCs CM on APCs FunctionsFunctionsFunctionsFunctionsCD28CD28CD28CD28B7B7.1(CD80), B7B7.1(CD80), B7B7.1(CD80), B7B7.1(CD80), B7.2(CD86)B7.2(CD86)B7.2(CD86)B7.2(CD86)参与参与参与参与T T T T细胞活化最重细胞活化最重细胞活化最重细胞活化最重要的协同刺激信号要的协同刺激信号要的协同刺激信号要的协同刺激信号 CD2 CD2 CD2 CD2 绵羊红细胞受体绵羊红细胞受体绵羊红细胞受体绵羊红细胞受体（E E E E受体）、受体）、受体）、受体）、LFA-2 LFA-2 LFA-2 LFA-2 LFA-3(CD58) LFA-3(CD58) LFA-3(CD58) LFA-3(CD58) 参与参与参与参与T T T T细胞活化细胞活化细胞活化细胞活化 CD40L (CD40L (CD40L (CD40L (活化的活化的活化的活化的T T T T细胞细胞细胞细胞 ) ) ) ) CD40 CD40 CD40 CD40 辅助辅助辅助辅助B B B B细胞活化细胞活化细胞活化细胞活化辅助巨噬细胞活化辅助巨噬细胞活化辅助巨噬细胞活化辅助巨噬细胞活化 CD11CD11CD11CD11（LFA-1 LFA-1 LFA-1 LFA-1 ）细胞间粘附分子细胞间粘附分子细胞间粘附分子细胞间粘附分子(ICAM-1(ICAM-1(ICAM-1(ICAM-1、2 2 2 2、3 )3 )3 )3 )参与参与参与参与T T T T细胞的活化细胞的活化细胞的活化细胞的活化（五）（五）CTLA-4n nCytotoxic T lymphocyte antigen-4（细胞毒（细胞毒性淋巴细胞抗原性淋巴细胞抗原-4）：结构与）：结构与CD28类似，类似，配体也是配体也是B7-1（CD80）和）和B7-2（CD86），），但亲和力更高。但亲和力更高。n nCTLA-4只表达于活化的只表达于活化的T细胞。细胞。n nCTLA-4的胞内段含免疫受体酪氨酸抑制基的胞内段含免疫受体酪氨酸抑制基序（序（immune receptor tyrosine-based inhibitory motif，ITIM）。与配体）。与配体B7结合结合后传递抑制信号。后传递抑制信号。CD28与与CTLA-4的拮抗作用的拮抗作用（六）（六）CD40L（CD40 ligand） n n表达：表达于活化的表达：表达于活化的CD4CD4+ +T T细胞上，静止细胞上，静止T T细细胞上没有表达。相应的配体为胞上没有表达。相应的配体为CD40CD40（主要表（主要表达在达在B B细胞和巨噬细胞表面）。细胞和巨噬细胞表面）。n n功能：功能：n n辅助辅助辅助辅助B B B B细胞激活细胞激活细胞激活细胞激活：与：与：与：与B B B B细胞上的细胞上的细胞上的细胞上的CD40CD40CD40CD40分子结合，产分子结合，产分子结合，产分子结合，产生生生生B B B B细胞活化的第二信号。细胞活化的第二信号。细胞活化的第二信号。细胞活化的第二信号。n n辅助巨噬细胞激活辅助巨噬细胞激活辅助巨噬细胞激活辅助巨噬细胞激活：与巨噬细胞上的：与巨噬细胞上的：与巨噬细胞上的：与巨噬细胞上的CD40CD40CD40CD40分子结分子结分子结分子结合，活化巨噬细胞，促进其高表达合，活化巨噬细胞，促进其高表达合，活化巨噬细胞，促进其高表达合，活化巨噬细胞，促进其高表达MHCMHCMHCMHC和和和和B7B7B7B7分子分子分子分子；提升其吞噬杀伤活性和分泌细胞因子等。；提升其吞噬杀伤活性和分泌细胞因子等。；提升其吞噬杀伤活性和分泌细胞因子等。；提升其吞噬杀伤活性和分泌细胞因子等。CD40CD40与与CD40LCD40L结合为结合为B B细胞的活化提供细胞的活化提供第二信号第二信号第二活化信号第二活化信号CD40与与CD40L结结合激活巨噬细胞合激活巨噬细胞 （七）（七）Mitogen receptors 有丝分裂原能非特异性刺激有丝分裂原能非特异性刺激T、B细胞发生有丝细胞发生有丝分裂。分裂。人类人类与小鼠与小鼠T细胞表面均有细胞表面均有PHA-R、ConA-R、PWM-R，能接受，能接受PHA、ConA和和PWM的刺激，的刺激，发生有丝分裂，转化为淋巴母细胞。发生有丝分裂，转化为淋巴母细胞。淋巴细胞转化率可作为检测淋巴细胞转化率可作为检测T细胞功能的指标。细胞功能的指标。 （八）（八）other molecules MHC分子：所有分子：所有T细胞均表达细胞均表达MHC类分子，类分子，活化的活化的T细胞还表达细胞还表达MHC类分子，其可是被视类分子，其可是被视为为T细胞活化的标志分子之一。细胞活化的标志分子之一。CKR：T细胞表达多种细胞表达多种CKR，例如，例如IL-1R，IL-2R，IL-4R，IL-6R，IL-7R等，参与等，参与T细胞的活细胞的活化、增殖和分化。活化后的化、增殖和分化。活化后的T细胞，其细胞，其CKR的种的种类，密度及亲和力均发生改变。例如静止类，密度及亲和力均发生改变。例如静止T细胞细胞仅表达低亲和力的仅表达低亲和力的IL-2Rb b链链，活化后的活化后的T细胞则细胞则表达高亲和力的表达高亲和力的IL-2Rb b链。链。 初始初始T细胞与活化细胞与活化T细胞细胞IL-2R表达的不同表达的不同(链链/CD25)-naveTcell-effectorTcel-memoryTcell三、三、SubsetsandfunctionsofTcells-TcRabab+Tcells-TcRgdgd +Tcells-CD4+Tcells-CD8+TcellsNKTcell-Th-CTL-Treg（一）初始（一）初始T细胞、活化细胞、活化T细胞和记忆性细胞和记忆性T细胞细胞根据根据T细胞是否受抗原刺激及刺激后的分化不同分类细胞是否受抗原刺激及刺激后的分化不同分类初始初始T细胞（细胞（NaiveTcells：未受抗原刺激的成熟：未受抗原刺激的成熟T细胞细胞 表达表达CD45RA效应效应T细胞（细胞（ effectorTcel）：初始）：初始T细胞在受抗原刺激后，细胞在受抗原刺激后，活化、增殖分化成为活化、增殖分化成为表达表达CD45RO 记忆记忆T细胞（细胞（ memoryTcell）：初始）：初始T细胞在受抗原刺激后，细胞在受抗原刺激后，活化、增殖分化成为活化、增殖分化成为 表达表达CD45RO （二）（二）TCRT细胞和细胞和TCRT细胞细胞根据根据T细胞表达的细胞表达的TCR表型的不同分类表型的不同分类TCRT细胞（细胞（T细胞）：细胞）：数量很少；主要参与固有免疫数量很少；主要参与固有免疫TCRT细胞（细胞（T细胞）细胞）：外周血中的外周血中的T细胞绝大部分为细胞绝大部分为T细胞，可按照细胞，可按照CD4、CD8分子的表达不同分为分子的表达不同分为CD4+T细胞和细胞和CD8+T细胞细胞，主要参与适应性免疫应答。，主要参与适应性免疫应答。TCRgdT细胞（gdT细胞）（固有免疫）n n分布：黏膜、上皮、外周血分布：黏膜、上皮、外周血n n抗原识别受体多样性较少，应答较局限。抗原识别受体多样性较少，应答较局限。n n以非以非MHCMHC的限制性方式识别完整的多肽抗原，的限制性方式识别完整的多肽抗原，还可识别还可识别CD1CD1递呈的脂类抗原。递呈的脂类抗原。n n参与体表皮肤黏膜的免疫防御功能，为抗胞参与体表皮肤黏膜的免疫防御功能，为抗胞内菌和病毒感染的第一道防线。内菌和病毒感染的第一道防线。TCRabab+T细胞（细胞（ababT细胞）细胞）CD4+T细胞细胞（表型为（表型为CD3+CD4+CD8-）CD8+T细胞细胞（表型为（表型为CD3+CD4-CD8+）受自身受自身MHC类分子的限制类分子的限制受自身受自身MHC类分子的限制类分子的限制ababT细胞细胞细胞毒性细胞毒性T细胞细胞（CTL）辅助性辅助性T细胞细胞（Th）调节性调节性T细胞细胞（Treg） CD4CD4+ +T T与与CD8CD8+ +T T细胞的比较细胞的比较 CD4 CD4+ +T T细胞细胞 CD8 CD8+ +T T细胞细胞表型表型 CD3 CD3+ +CD4CD4+ +CD8CD8- - CD3 CD3+ +CD8CD8+ +CD4CD4- -识别抗原肽识别抗原肽 13 13 18AA 818AA 8 12AA12AAMHCMHC限制性限制性 MHC MHC类分子类分子 MHC MHC类分子类分子Th + -Th + -CTL - +CTL - +（三）根据功能分类（三）根据功能分类n nThThThTh细胞：细胞：细胞：细胞：CD4CD4CD4CD4+ + + +T T T T细胞可分化为细胞可分化为细胞可分化为细胞可分化为Th1Th1Th1Th1、Th2Th2Th2Th2、Th17Th17Th17Th17三类效应三类效应三类效应三类效应ThThThTh细胞，分泌不细胞，分泌不细胞，分泌不细胞，分泌不同的细胞因子，发挥不同的免疫效应。其中同的细胞因子，发挥不同的免疫效应。其中同的细胞因子，发挥不同的免疫效应。其中同的细胞因子，发挥不同的免疫效应。其中Th1Th1Th1Th1主要参与细胞免疫应答；主要参与细胞免疫应答；主要参与细胞免疫应答；主要参与细胞免疫应答；Th2Th2Th2Th2主要参与体液免疫应答；主要参与体液免疫应答；主要参与体液免疫应答；主要参与体液免疫应答；Th17Th17Th17Th17通过分泌通过分泌通过分泌通过分泌IL-17IL-17IL-17IL-17参与固有免疫和某些参与固有免疫和某些参与固有免疫和某些参与固有免疫和某些炎症炎症炎症炎症(2005(2005(2005(2005年年年年) ) ) )；CD4CD4CD4CD4+ + + +T T T T细胞还可分化为细胞还可分化为细胞还可分化为细胞还可分化为Th3Th3Th3Th3、型调节性型调节性型调节性型调节性T T T T细胞（细胞（细胞（细胞（Tr1Tr1Tr1Tr1）。）。）。）。n nCTLCTLCTLCTL（cytotoxic T cell, CTLcytotoxic T cell, CTLcytotoxic T cell, CTLcytotoxic T cell, CTL）: : : :根据分泌细胞因子的不同，分为根据分泌细胞因子的不同，分为根据分泌细胞因子的不同，分为根据分泌细胞因子的不同，分为Tc1Tc1Tc1Tc1和和和和Tc2Tc2Tc2Tc2。Tc1Tc1Tc1Tc1与与与与Th1Th1Th1Th1分泌的细胞因子类似；分泌的细胞因子类似；分泌的细胞因子类似；分泌的细胞因子类似；Tc2Tc2Tc2Tc2与与与与Th2Th2Th2Th2分泌的细胞因子类似。分泌的细胞因子类似。分泌的细胞因子类似。分泌的细胞因子类似。n nTregTregTregTreg：某些高表达：某些高表达：某些高表达：某些高表达IL-2IL-2IL-2IL-2受体的受体的受体的受体的链（链（链（链（CD25CD25CD25CD25），胞质中表达），胞质中表达），胞质中表达），胞质中表达Foxp3Foxp3Foxp3Foxp3转录因转录因转录因转录因子的子的子的子的CD4+TCD4+TCD4+TCD4+T细胞，被称为调节性细胞，被称为调节性细胞，被称为调节性细胞，被称为调节性T T T T细胞（细胞（细胞（细胞（regulatary T cell, Tregregulatary T cell, Tregregulatary T cell, Tregregulatary T cell, Treg） 。TregTregTregTreg可由胸腺内发育成熟后直接迁移到外周（自然调节性可由胸腺内发育成熟后直接迁移到外周（自然调节性可由胸腺内发育成熟后直接迁移到外周（自然调节性可由胸腺内发育成熟后直接迁移到外周（自然调节性T T T T细胞），细胞），细胞），细胞），也可由外周初始也可由外周初始也可由外周初始也可由外周初始T T T T细胞（细胞（细胞（细胞（Th0Th0Th0Th0）经）经）经）经TGF-TGF-TGF-TGF-等细胞因子诱导分化而来（诱等细胞因子诱导分化而来（诱等细胞因子诱导分化而来（诱等细胞因子诱导分化而来（诱导性调节性导性调节性导性调节性导性调节性T T T T细胞）例如细胞）例如细胞）例如细胞）例如Th3Th3Th3Th3和和和和Tr1Tr1Tr1Tr1。TregTregTregTreg在免疫应答的负调节及自身耐在免疫应答的负调节及自身耐在免疫应答的负调节及自身耐在免疫应答的负调节及自身耐受的建立和维持中发挥重要作用。受的建立和维持中发挥重要作用。受的建立和维持中发挥重要作用。受的建立和维持中发挥重要作用。效应效应Th的分化的分化Th1/Th2细胞的细胞的免疫调节作用免疫调节作用* Th1* Th1和和Th2Th2互为抑制细胞，互为抑制细胞，从而调节机体的细胞免疫从而调节机体的细胞免疫和体液免疫应答和体液免疫应答n n表面能表达表面能表达表面能表达表面能表达NKNK细胞特有标志的少量细胞特有标志的少量细胞特有标志的少量细胞特有标志的少量T T细胞，其表面细胞，其表面细胞，其表面细胞，其表面标志为标志为标志为标志为NK1.1NK1.1，TCR/CD3TCR/CD3。主要为。主要为。主要为。主要为CD4CD4- -CD8CD8- -T T细胞，细胞，细胞，细胞，少数为少数为少数为少数为CD4CD4+ +单阳性单阳性单阳性单阳性T T细胞。细胞。细胞。细胞。n n主要分布在细胞分化增殖旺盛、组织更新再生迅速主要分布在细胞分化增殖旺盛、组织更新再生迅速主要分布在细胞分化增殖旺盛、组织更新再生迅速主要分布在细胞分化增殖旺盛、组织更新再生迅速的组织中（肝脏、骨髓）。的组织中（肝脏、骨髓）。的组织中（肝脏、骨髓）。的组织中（肝脏、骨髓）。n n抗原识别谱较窄，主要针对抗原识别谱较窄，主要针对抗原识别谱较窄，主要针对抗原识别谱较窄，主要针对CDCD1 1 1 1分子所递呈的脂类分子所递呈的脂类分子所递呈的脂类分子所递呈的脂类和糖脂类抗原和糖脂类抗原和糖脂类抗原和糖脂类抗原n n主要功能为细胞毒作用（主要功能为细胞毒作用（主要功能为细胞毒作用（主要功能为细胞毒作用（NKTCNKTC活化后具有活化后具有活化后具有活化后具有NKNK细胞细胞细胞细胞样细胞毒活性样细胞毒活性样细胞毒活性样细胞毒活性）和免疫调节作用（可分泌）和免疫调节作用（可分泌）和免疫调节作用（可分泌）和免疫调节作用（可分泌IL-4IL-4IL-4IL-4和和和和IFN-IFN-IFN-IFN-等细胞因子和多种趋化因子）。等细胞因子和多种趋化因子）。等细胞因子和多种趋化因子）。等细胞因子和多种趋化因子）。（四）NK细胞（NKTC）（固有免疫）第二节第二节 B B淋巴细胞淋巴细胞一、一、Maturation二、二、Membranemolecules三、三、Subsets一、 Maturation of B cells B细胞在细胞在胎肝和骨髓胎肝和骨髓发育成熟发育成熟进入外周淋巴组织进入外周淋巴组织 遇到抗原遇到抗原在在生发中心生发中心增殖、突变、选择增殖、突变、选择 抗体亲抗体亲和力成熟，和力成熟，Ig类别转换，产生记忆类别转换，产生记忆B和浆细胞和浆细胞 产生抗产生抗体，介导体液免疫体，介导体液免疫主要事件主要事件* 功能性功能性BCR形成（基因重排，骨髓）形成（基因重排，骨髓）* 阴性选择（骨髓）阴性选择（骨髓）* 阳性选择阳性选择（外周淋巴组织生发中心）外周淋巴组织生发中心）意义意义* 产生功能性和多样性的产生功能性和多样性的BCR* * 获得自身耐受获得自身耐受* * BCR与与抗体亲和力成熟、抗体亲和力成熟、Ig类别转换、记类别转换、记 忆忆B细胞和浆细胞的产生细胞和浆细胞的产生 存在于骨髓和胎肝等造血组织存在于骨髓和胎肝等造血组织;胞浆中可检测到胞浆中可检测到IgM的重链的重链链，无轻链，链，无轻链，也无膜表面也无膜表面Ig的表达，的表达，因此缺乏对抗原的反应能力因此缺乏对抗原的反应能力;（一）（一）前前B细胞细胞（pre-B cell） 表达表达:CD10、CD19，TdT以及以及重组活化基因产物重组活化基因产物RAG-1和和RAG-2MHC类分子和类分子和CD20。（二）不成熟（二）不成熟B细胞细胞 （immature B cell） 开始表达开始表达SmIgMSmIgM如与抗原结合，产生负应答，不能继续分化成熟如与抗原结合，产生负应答，不能继续分化成熟（阴性选择）（阴性选择）；CD19CD19、CD20CD20和和MHCMHC类抗原表达量增加，类抗原表达量增加，开始表达开始表达CD21CD21抗原。抗原。在骨髓中停留在骨髓中停留1 13 3天，逐渐发育为成熟天，逐渐发育为成熟B B细胞，迁细胞，迁移到外周淋巴组织中。移到外周淋巴组织中。（三）成熟（三）成熟B细胞细胞（mature B cell） 最主要标志是膜表面出现最主要标志是膜表面出现IgDIgD同时表达同时表达SmIgMSmIgM和和SmIgDSmIgD；若遭遇抗原，抗原特异性；若遭遇抗原，抗原特异性B B细胞选择性被活化，形成生发中心，分化成熟，发细胞选择性被活化，形成生发中心，分化成熟，发挥免疫效应挥免疫效应（阳性选择）。（阳性选择）。（详见体液免疫应答）（详见体液免疫应答）成熟成熟B B细胞表达与细胞表达与B B细胞功能相关的众多分子：细胞功能相关的众多分子：补体受体（补体受体（CR1CR1和和CR2CR2）、）、CD73CD73、CD23CD23、LFA-1LFA-1、ICAM-1ICAM-1、CD22CD22、丝裂原受体、多种细胞因子受体，归巢受体、丝裂原受体、多种细胞因子受体，归巢受体、MHCMHC类分子、类分子、CD40CD40分子。分子。 B细胞的分化发育过程 l l抗原非依赖期（骨髓）抗原非依赖期（骨髓）抗原非依赖期（骨髓）抗原非依赖期（骨髓）祖祖祖祖BBBB前前前前B(B(B(B(胞浆胞浆胞浆胞浆 m) m) m) m) 未成熟未成熟未成熟未成熟 B(mIgM)B(mIgM)B(mIgM)B(mIgM) 成熟成熟成熟成熟B(mIgMandB(mIgMandB(mIgMandB(mIgMandmIgD)mIgD)mIgD)mIgD)l l 阴性选择（骨髓）阴性选择（骨髓）阴性选择（骨髓）阴性选择（骨髓）未成熟未成熟未成熟未成熟 B(IgM)+B(IgM)+B(IgM)+B(IgM)+抗原抗原抗原抗原 克隆清除或无能克隆清除或无能克隆清除或无能克隆清除或无能 自身耐受自身耐受自身耐受自身耐受l l 抗原依赖期（外周淋巴器官）：阳性选择抗原依赖期（外周淋巴器官）：阳性选择抗原依赖期（外周淋巴器官）：阳性选择抗原依赖期（外周淋巴器官）：阳性选择成熟成熟成熟成熟B+B+B+B+抗原抗原抗原抗原活化增殖活化增殖活化增殖活化增殖在生发中心发育在生发中心发育在生发中心发育在生发中心发育浆细胞和记忆浆细胞和记忆浆细胞和记忆浆细胞和记忆B B B Bl l生发中心生发中心生发中心生发中心活化活化活化活化B B B B增殖增殖增殖增殖 BCRBCRBCRBCR可变区体细胞高频突变可变区体细胞高频突变可变区体细胞高频突变可变区体细胞高频突变 突变突变突变突变 BBBB与与与与 FDCFDCFDCFDC表面抗原高亲和力结合表面抗原高亲和力结合表面抗原高亲和力结合表面抗原高亲和力结合 选择存活选择存活选择存活选择存活 导致导致导致导致 BCRBCRBCRBCR及抗体及抗体及抗体及抗体亲和力成熟，抗体类别转换，产生浆细胞和记忆亲和力成熟，抗体类别转换，产生浆细胞和记忆亲和力成熟，抗体类别转换，产生浆细胞和记忆亲和力成熟，抗体类别转换，产生浆细胞和记忆B B B B细胞。细胞。细胞。细胞。二、二、MembranemoleculesofBcells（一）（一）BCRcomplex（二）（二）coreceptor（三）（三）Costimulatorymolecule，CM（四）其他膜分子：（四）其他膜分子：FcreceptorsComplementreceptors（CR）MitogenreceptorsCKR1主要结构主要结构-BCR即即B细胞膜上的免疫细胞膜上的免疫球蛋白球蛋白-成熟成熟B细胞表达两种细胞表达两种BCRIg:IgMandIgD.两种两种-BCR的胞内区非常短，仅的胞内区非常短，仅有三个氨基酸残基有三个氨基酸残基（一）（一）Bcellreceptors(BCR)2Function通过可变区通过可变区(VH+VL)中六个互补决定区中六个互补决定区CDRs(HVR)特异性识别抗原表位。特异性识别抗原表位。B细胞不同于细胞不同于T细胞的抗原识别特点细胞的抗原识别特点n nB B细细细细胞胞胞胞直直直直接接接接识识识识别别别别天天天天然然然然抗抗抗抗原原原原表表表表面面面面的的的的B B细细细细胞胞胞胞表表表表位位位位，因因因因此此此此 B B细胞识别抗原是非细胞识别抗原是非细胞识别抗原是非细胞识别抗原是非MHCMHC限制性的。限制性的。限制性的。限制性的。n nTCRTCR不不不不能能能能识识识识别别别别完完完完整整整整抗抗抗抗原原原原而而而而只只只只能能能能识识识识别别别别抗抗抗抗原原原原决决决决定定定定基基基基（T T细细细细胞胞胞胞表表表表位位位位）与与与与MHCMHC分分分分子子子子结结结结合合合合形形形形成成成成的的的的抗抗抗抗原原原原肽肽肽肽- -MHCMHC分分分分子子子子复复复复合合合合物物物物（双双双双识识识识别别别别）。因因因因此此此此，T T细细细细胞胞胞胞识识识识别抗原具有别抗原具有别抗原具有别抗原具有MHCMHC限制性。限制性。限制性。限制性。 结构结构结构结构 - -由由由由两两两两条条条条低低低低分分分分子子子子量量量量的的的的肽肽肽肽链链链链构构构构成成成成，含含含含很很很很长长长长的的的的胞胞胞胞浆浆浆浆区区区区，含含含含有有有有ITAMITAM基基基基序序序序(immune (immune receptor receptor tyrosine-based tyrosine-based activation activation motifmotif，ITAM),ITAM),负负负负责责责责传传传传递活化信号递活化信号递活化信号递活化信号功能功能功能功能- -参与参与参与参与BCRBCR的组装，稳定的组装，稳定的组装，稳定的组装，稳定BCRBCR结构结构结构结构- -传传传传递递递递BCRBCR识识识识别别别别抗抗抗抗原原原原的的的的抗抗抗抗原原原原识识识识别别别别信信信信号（第一信号）到号（第一信号）到号（第一信号）到号（第一信号）到B B细胞中细胞中细胞中细胞中-BCR-Ig-BCR-Ig/IgIg 复复复复合合合合体体体体：与与与与第第第第一一一一信信信信号的产生与传递有关。号的产生与传递有关。号的产生与传递有关。号的产生与传递有关。4.Ig/Ig(CD79/)BCR- Ig/IgcomplexBCR- Ig/Igcomplex（二）共受体（二）共受体/ /辅助受体（辅助受体（coreceptorcoreceptor）nCD19CD19、CD21CD21（CR2CR2）、）、CD81CD81组成的复合物是组成的复合物是B B细胞活化的辅细胞活化的辅助受体。助受体。n能降低能降低B B细胞活化的所需抗原的阈值，辅助细胞活化的所需抗原的阈值，辅助B B细胞的激活。细胞的激活。（三）协同刺激分子（三）协同刺激分子（三）协同刺激分子（三）协同刺激分子(Costimulatorymolecule(Costimulatorymolecule(Costimulatorymolecule(Costimulatorymolecule，CM)CM)CM)CM) 主要有主要有主要有主要有CD40CD40CD40CD40，B7B7B7B7等等等等B7B7B7B7的作用：与的作用：与的作用：与的作用：与T T T T细胞活化的第二信号的产生有关。细胞活化的第二信号的产生有关。细胞活化的第二信号的产生有关。细胞活化的第二信号的产生有关。T T T T细胞活化的第二信号：细胞活化的第二信号：细胞活化的第二信号：细胞活化的第二信号：产生：产生：产生：产生：B B B B细胞表面的细胞表面的细胞表面的细胞表面的协同刺激分子协同刺激分子协同刺激分子协同刺激分子-B7-B7-B7-B7与与与与T T T T细胞表面上的细胞表面上的细胞表面上的细胞表面上的协同刺激协同刺激协同刺激协同刺激分子受体分子受体分子受体分子受体-CD28-CD28-CD28-CD28结合结合结合结合, , , ,产生协同刺激信号。产生协同刺激信号。产生协同刺激信号。产生协同刺激信号。传递：传递：传递：传递：CD28CD28CD28CD28传递第二信号到传递第二信号到传递第二信号到传递第二信号到T T T T细胞中。细胞中。细胞中。细胞中。CD40CD40CD40CD40的作用：与的作用：与的作用：与的作用：与B B B B细胞活化的第二信号的产生有关。细胞活化的第二信号的产生有关。细胞活化的第二信号的产生有关。细胞活化的第二信号的产生有关。B B B B细胞活化的第二信号：细胞活化的第二信号：细胞活化的第二信号：细胞活化的第二信号：产生：产生：产生：产生：B B B B细胞表面的细胞表面的细胞表面的细胞表面的协同刺激分子协同刺激分子协同刺激分子协同刺激分子-CD40-CD40-CD40-CD40与与与与活化活化活化活化T T T T细胞表面的细胞表面的细胞表面的细胞表面的CD40LCD40LCD40LCD40L结合，产生协同刺激信号。结合，产生协同刺激信号。结合，产生协同刺激信号。结合，产生协同刺激信号。传递：传递：传递：传递：CD40CD40CD40CD40传递第二信号到传递第二信号到传递第二信号到传递第二信号到B B B B细胞中。细胞中。细胞中。细胞中。B B细胞活化的双信号细胞活化的双信号细胞活化的双信号细胞活化的双信号第一信号第一信号第一信号第一信号: BCR : BCR 识别完整抗原或识别完整抗原或识别完整抗原或识别完整抗原或B B细胞表位细胞表位细胞表位细胞表位 第二信号第二信号第二信号第二信号: CD40: CD40识别识别识别识别 CD40LCD40L第二活化信号第二活化信号Interaction of B and T cell（四）（四）其他膜分子其他膜分子1. Fc receptors表达于多种免疫细胞表面，介导抗体的调理作用。表达于多种免疫细胞表面，介导抗体的调理作用。2. Complement receptors（CR） 主要是主要是CR1和和CR2（即（即CD35和和CD21）CR1：可与补体：可与补体C3b和和C4b结合，促进结合，促进B细胞的活化。细胞的活化。CR2：配体是：配体是C3d，C3d与与CR2结合亦可调节结合亦可调节B细胞的生长和分化；细胞的生长和分化；3. Mitogen receptors人类人类B细胞上有细胞上有PWM-R、LPS-R、SPA-R;因此因此PWM、LPS和和SPA对对B细细胞均有致有丝分裂的作用。胞均有致有丝分裂的作用。小鼠小鼠B细胞上仅有细胞上仅有LPS-R，因此在小鼠，可用，因此在小鼠，可用LPS致致B细胞有丝分裂。细胞有丝分裂。B淋巴细胞转化试验：用淋巴细胞转化试验：用PWM，或，或LPS或或SPA与外周血淋巴组织共同培养与外周血淋巴组织共同培养时，时，B细胞相应受体可与之结合而被激活，并增殖分化为淋巴母细胞，可细胞相应受体可与之结合而被激活，并增殖分化为淋巴母细胞，可用于检测用于检测B细胞的功能。细胞的功能。 4. CKR三、三、subsetsofBcells根据根据B细胞表型的不同，可将其分为二个亚群：细胞表型的不同，可将其分为二个亚群：B1细胞（细胞（CD5+）：负责识别）：负责识别TI抗原抗原B2细胞（细胞（CD5- -）：负责识别）：负责识别TD抗原抗原TD和和TI抗原分别活化两类抗原分别活化两类B细胞细胞B2细胞细胞B1细胞细胞B2细胞细胞B1细胞细胞(CD5+)（固有免疫）（固有免疫）n分布：腹腔、胸腔、肠壁固有层分布：腹腔、胸腔、肠壁固有层n抗原识别受体多样性较少，针对抗原识别受体多样性较少，针对TITI抗原，主要是抗原，主要是TI-2TI-2抗原抗原, ,产生产生IgM.IgM.n主要承担腹腔、胸腔等体腔部位的主要承担腹腔、胸腔等体腔部位的非特异性免疫防御功能非特异性免疫防御功能. .B1和和B2细胞的比较细胞的比较特性特性特性特性B1B1 B2 B2发生、分化来源发生、分化来源发生、分化来源发生、分化来源胎肝胎肝胎肝胎肝骨髓骨髓骨髓骨髓分布部位分布部位分布部位分布部位腹腔、胸腔、肠腹腔、胸腔、肠腹腔、胸腔、肠腹腔、胸腔、肠壁的固有层壁的固有层壁的固有层壁的固有层外周免疫器官外周免疫器官外周免疫器官外周免疫器官表面标志表面标志表面标志表面标志CD5+CD5+、SmIgM+ SmIgM+ CD23-CD23-CD5-CD5-、SmIgM+SmIgM+SmIgD+SmIgD+、 CD23CD23应答抗原应答抗原应答抗原应答抗原TI-AgTI-AgTD-AgTD-Ag是否需要是否需要是否需要是否需要ThTh辅助辅助辅助辅助否否否否是是是是抗体类型抗体类型抗体类型抗体类型IgMIgM各类抗体各类抗体各类抗体各类抗体主要功能主要功能主要功能主要功能固有免疫固有免疫固有免疫固有免疫体液免疫体液免疫体液免疫体液免疫B1细胞的主要生物学功能细胞的主要生物学功能（固有免疫）（固有免疫）-主要识别主要识别TI抗原的多糖类物质，如荚膜多糖，聚抗原的多糖类物质，如荚膜多糖，聚合鞭毛素等；合鞭毛素等；-参与对多种细菌（尤其体腔中）的抗感染免疫，参与对多种细菌（尤其体腔中）的抗感染免疫，在固有免疫中发挥功能；在固有免疫中发挥功能；-产生低亲和力产生低亲和力IgM类的生理性自身抗体，参与对类的生理性自身抗体，参与对衰老、蜕变自身细胞的清除；衰老、蜕变自身细胞的清除；-通过产生通过产生IgM类自身抗体参与某些自身免疫病的类自身抗体参与某些自身免疫病的发生。发生。B2细胞的主要生物学功能细胞的主要生物学功能-参与体液免疫应答：参与体液免疫应答：BC+Ag在在Th辅助下辅助下 活化增殖活化增殖 分化浆细胞分化浆细胞 产生高亲和力抗体产生高亲和力抗体-抗原提呈：抗原提呈：BC用用BCR摄取摄取Ag 处理肽处理肽+MHCII 提呈抗原给提呈抗原给CD4T细胞，提供协同信号细胞，提供协同信号-免疫调节：免疫调节：活化活化BC产生多种细胞因子，参与免疫调节产生多种细胞因子，参与免疫调节ImmunocyteImmunocyteImmunocyteImmunocyteLymphocyteLymphocyteLymphocyteLymphocytedoublenegativecellsdoublenegativecellsdoublenegativecellsdoublenegativecells，DNDNDNDNdoublepositivecellsdoublepositivecells，DPDPSinglepositivecells,SPSinglepositivecells,SPTcellreceptorsTcellreceptorsTcellreceptorsTcellreceptors，TCRTCRTCRTCRCostimulatorymoleculereceptorsCostimulatorymoleculereceptorsCostimulatorymoleculereceptorsCostimulatorymoleculereceptors，CMRCMRCMRCMRCostimulatorymoleculeCostimulatorymoleculeCostimulatorymoleculeCostimulatorymolecule，CMCMCMCMBcellreceptors,BCRBcellreceptors,BCRBcellreceptors,BCRBcellreceptors,BCRMitogenreceptorMitogenreceptorMitogenreceptorMitogenreceptorComplementreceptorComplementreceptorComplementreceptorComplementreceptor下一讲：下一讲：T T细胞介导的细胞免疫应答细胞介导的细胞免疫应答预习内容：预习内容：n n细胞免疫的三个阶段细胞免疫的三个阶段n n三个阶段中的重要事件三个阶段中的重要事件n n效应效应T T细胞发挥效应的机制细胞发挥效应的机制