鸡白痢全血平板凝集试验鸡白痢全血平板凝集试验张桂枝1一、实验目的要求一、实验目的要求掌握鸡白痢全血平板凝集试验的操作掌握鸡白痢全血平板凝集试验的操作方法及结果判断。方法及结果判断。 2二、实验原理二、实验原理 l颗粒性抗原与相应抗体结合后，在有电颗粒性抗原与相应抗体结合后，在有电解质存在时，互相凝聚成肉眼可见的凝解质存在时，互相凝聚成肉眼可见的凝集小块。参与反应的抗原称为凝集原，集小块。参与反应的抗原称为凝集原，抗体称为凝集素。抗体称为凝集素。3三、在生产中的应用三、在生产中的应用l1、用于鉴定细菌。、用于鉴定细菌。l2、用于种鸡场鸡白痢的检疫、用于种鸡场鸡白痢的检疫。4四、实验器材四、实验器材l鸡白痢全血凝集反应抗原、鸡白痢阳性鸡白痢全血凝集反应抗原、鸡白痢阳性血清、生理盐水、洁净玻璃板、蜡笔、血清、生理盐水、洁净玻璃板、蜡笔、7#或或9#注射针头、注射针头、75%酒精棉球、移液酒精棉球、移液器、手电筒。器、手电筒。5五、实验方法步骤五、实验方法步骤l1、用蜡笔将玻璃板分成、用蜡笔将玻璃板分成3格。格。l2、将抗原瓶充分摇匀，在、将抗原瓶充分摇匀，在3格内分别滴加一滴格内分别滴加一滴鸡白痢全血凝集反应抗原。鸡白痢全血凝集反应抗原。l3、用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠尖，用移、用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠尖，用移液器吸取全血一滴加入第液器吸取全血一滴加入第1格内。格内。 6五、实验方法步骤五、实验方法步骤l4、用移液器吸取鸡白痢阳性血清一滴加入第、用移液器吸取鸡白痢阳性血清一滴加入第2格内作阳性对照，吸取生理盐水一滴加入第格内作阳性对照，吸取生理盐水一滴加入第3格内作阴性对照。格内作阴性对照。l5、以上、以上3格用牙签随即搅拌均匀，并使散开至格用牙签随即搅拌均匀，并使散开至直径约直径约2cm为度；为度；l6、用手电筒反照玻璃板，仔细观察并判定。、用手电筒反照玻璃板，仔细观察并判定。7六、结果分析六、结果分析l1、抗原与血清混合后在、抗原与血清混合后在2min内发生明显颗粒内发生明显颗粒状或块状凝集者为阳性。状或块状凝集者为阳性。l2、2分钟以内不出现凝集，或出现均匀一致的分钟以内不出现凝集，或出现均匀一致的极微小颗粒，或在边缘处由于临干前出现絮状极微小颗粒，或在边缘处由于临干前出现絮状者判为阴性反应。者判为阴性反应。l3、在上述情况之外而不易判断为阳性或阴性、在上述情况之外而不易判断为阳性或阴性者，判为可疑反应。者，判为可疑反应。 8910？思考题？思考题l全血平板凝集反应和血清平板凝集反应有何区全血平板凝集反应和血清平板凝集反应有何区别？哪一个更准确？别？哪一个更准确？11七、注意事项七、注意事项l1、抗原应在、抗原应在215冷暗处保存，从杀菌之日冷暗处保存，从杀菌之日算起有效期算起有效期6个月。个月。l2、本抗原适用于产卵母鸡及、本抗原适用于产卵母鸡及1年以上公鸡，幼年以上公鸡，幼龄鸡敏感度较差。龄鸡敏感度较差。l3、本实验应在、本实验应在20以上室温中进行。冬季检以上室温中进行。冬季检疫室内温度达不到疫室内温度达不到20时时, 应先将载玻片在酒应先将载玻片在酒精灯加热达精灯加热达30左右。左右。 12七、注意事项七、注意事项l4、手电筒反照可以不分阴晴天或白昼。、手电筒反照可以不分阴晴天或白昼。l5、吸血的滴管每次先用水反复吹吸、吸血的滴管每次先用水反复吹吸45 次次,再用生理盐水冲洗再用生理盐水冲洗1 2 次次, 最后以吸水纸将最后以吸水纸将水吸干。水吸干。l6、实验完后应迅速止血、实验完后应迅速止血,以减少失血。再给鸡以减少失血。再给鸡饮电解多维饮电解多维,以减少应激。以减少应激。 13八、实验作业八、实验作业l1、写出鸡白痢全血平板凝集试验的操作方法、写出鸡白痢全血平板凝集试验的操作方法及结果判断及结果判断l2、采用全血平板凝集试验检疫鸡白痢时，应、采用全血平板凝集试验检疫鸡白痢时，应注意哪些问题？注意哪些问题？ l3、查阅资料，写出种鸡场如何做好鸡白痢的、查阅资料，写出种鸡场如何做好鸡白痢的检疫、净化？检疫、净化？14