实验五实验五其他细菌、真菌、病毒学试验其他细菌、真菌、病毒学试验主要内容：主要内容：厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法螺旋体形态观察螺旋体形态观察真菌的形态与培养真菌的形态与培养病毒学试验病毒学试验分枝杆菌与抗酸染色分枝杆菌与抗酸染色一、厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法一、厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法 1 1、形态观察、形态观察 破伤风梭菌破伤风梭菌 产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌 破伤风梭菌（芽胞）破伤风梭菌（芽胞） 破伤风梭菌（鞭毛）破伤风梭菌（鞭毛）产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌2 2、厌氧培养法、厌氧培养法 用于专性厌氧菌的培养用于专性厌氧菌的培养方法：方法：1)1)将普通培养基置于无氧环境中培养将普通培养基置于无氧环境中培养 如如: :焦性没食子酸法焦性没食子酸法2)2)厌氧培养基厌氧培养基: :在培养基中加氧化还原剂在培养基中加氧化还原剂 如如: :庖肉培养基庖肉培养基 a. a. 原理：焦性没食子酸原理：焦性没食子酸在在碱性溶液碱性溶液中能迅速吸收氧气，中能迅速吸收氧气，生成深棕色生成深棕色焦性没食子橙焦性没食子橙，利用，利用此法可除去试管或平皿等容器中此法可除去试管或平皿等容器中的氧气。的氧气。（1 1）焦性没食子酸法）焦性没食子酸法焦性没食子酸培养基焦性没食子酸培养基焦性没食子酸培养基示意图焦性没食子酸培养基示意图血平板血平板纱布纱布石蜡b.培养结果观察培养结果观察产气荚膜梭菌血平板厌氧培养产气荚膜梭菌血平板厌氧培养（2 2）疱肉培养基）疱肉培养基 不饱和脂不饱和脂肪酸肪酸a.a.原理原理 动物组织耗氧法动物组织耗氧法 还原型氨基酸还原型氨基酸 谷胱甘肽谷胱甘肽 凡士林凡士林破破伤伤风风梭梭菌菌产产气气荚荚膜膜梭梭菌菌正正常常对对照照1 1、形态特点：、形态特点：二、螺旋体二、螺旋体 2 2、分类：、分类： 根根据据抗抗原原性性、螺螺旋旋的的数目、大数目、大 小小、规规则则程程度度、螺螺旋旋间间距距分分类。类。 原核细胞型微生物原核细胞型微生物 菌菌体体细细长长柔柔软软，弯弯曲曲呈呈螺旋状，螺旋状， 运动活泼运动活泼与疾病有关的：与疾病有关的：n疏螺旋体属疏螺旋体属 如如 伯氏疏伯氏疏螺旋体螺旋体n密螺旋体属密螺旋体属 如如 梅毒螺梅毒螺旋体旋体n钩端螺旋体属钩端螺旋体属 如如 钩端螺钩端螺旋体旋体回归热疏螺旋体回归热疏螺旋体梅毒螺旋体梅毒螺旋体 钩端螺旋体钩端螺旋体 钩端螺旋体（镀银染钩端螺旋体（镀银染色）色） 1 1、形态形态: : 单细胞单细胞酵母菌酵母菌 如白色念如白色念 珠菌珠菌 新型隐球菌新型隐球菌 多细胞多细胞丝状菌丝状菌三、真菌的形态与培养三、真菌的形态与培养白色念珠菌白色念珠菌白色念珠菌白色念珠菌新型隐球菌（墨汁染色）新型隐球菌（墨汁染色）2 2、培养特性、培养特性: : 沙保培养基沙保培养基成份：成份： 蛋白胨蛋白胨 1g 琼脂琼脂 2g 葡萄糖葡萄糖 4g 蒸馏水蒸馏水 100ml pH 45左右左右菌落特征菌落特征: : 酵母型菌落酵母型菌落 酵母样菌落酵母样菌落 丝状菌落丝状菌落单细胞单细胞多细胞多细胞白色念珠菌白色念珠菌新型隐球菌新型隐球菌酵酵母母样样菌菌落落酵酵母母型型菌菌落落 酵酵母母型型菌菌落落酵酵母母样样菌菌落落四、病毒学试验四、病毒学试验n1 1、病毒包涵体形态、病毒包涵体形态 n2 2、病毒感染的细胞病变（录像）、病毒感染的细胞病变（录像） 病病毒毒感感染染细细胞胞后后，在在胞胞浆浆或或胞胞核核内内出出现现嗜嗜酸酸或或嗜嗜碱碱性性的的圆圆形形、椭圆形、不规则形斑块结构。椭圆形、不规则形斑块结构。 什么是包涵体？什么是包涵体？狂犬病病毒包涵体（内基小体）狂犬病病毒包涵体（内基小体）巨细胞病毒包涵体巨细胞病毒包涵体五、分枝杆菌与抗酸染色五、分枝杆菌与抗酸染色n1 1、 形态形态n2 2、结构特点、结构特点n3 3、抗酸染色、抗酸染色 结核杆菌（抗酸染色）结核杆菌（抗酸染色）结核杆菌（抗酸染色）结核杆菌（抗酸染色）2 2、结构特点：、结构特点： 细胞壁含有大量细胞壁含有大量脂质脂质，主要是，主要是分分枝菌酸枝菌酸 ，一般不易着色，如果经加温，一般不易着色，如果经加温或延长染色时间而着色后能抵抗强脱或延长染色时间而着色后能抵抗强脱色剂色剂盐酸酒精盐酸酒精的脱色，所以又称的脱色，所以又称抗酸抗酸杆菌杆菌。3 3、抗酸染色、抗酸染色 （1 1）温温染染：石石炭炭酸酸复复红红溶溶液液 5 5 minmin （2 2）脱脱色色：3%3%盐盐酸酸酒酒精精溶溶液液 0.5-1 0.5-1 minmin （ 3 3）复复 染染： 碱碱 性性 美美 兰兰 溶溶 液液 0.5 min0.5 min 破伤风梭菌破伤风梭菌