2024/9/21检验标本的采集与处理2014年3月2概要 检验标本的定义及种类检验标本的定义及种类 1影响检验标本质量的因素影响检验标本质量的因素 2静脉抽血的注意事项静脉抽血的注意事项 3各种标本的采集要求各种标本的采集要求 45检验标本的采集与运送检验标本的采集与运送 危急值的处理危急值的处理 63一、检验标本的定义及种类一、检验标本的定义及种类标本的定义：是指采取患者少许的标本的定义：是指采取患者少许的血液血液、排排泄物泄物（粪、尿）、（粪、尿）、分泌物分泌物（痰、鼻分泌物）、（痰、鼻分泌物）、呕吐物、体液（胸腔积液、腹腔积液）和呕吐物、体液（胸腔积液、腹腔积液）和脱脱落细胞落细胞（食道、阴道）等样品，（食道、阴道）等样品， 经过物理、化学和生物学的实验室技术经过物理、化学和生物学的实验室技术和方法对其进行检验，作为判断患者有无异和方法对其进行检验，作为判断患者有无异常存在的依据。常存在的依据。4检验标本的种类血液检验标本血常规其他生化检查血沉凝血免疫检查5检验标本的种类体液检验标本大便尿液痰液其他6检验标本的种类其它特殊标本细胞穿剌毛发皮屑其它7临床标本检验的过程临床标本检验的过程检验申请患者准备患者识别、采集标本样品检测结果分析与解释样品运送、保存与处理结果确认特殊患者回访8二.影响检验标本质量的因素患者的状态药物的影响患者的饮食9影响检验标本质量的因素原则上患者应在平静、休息状态下采集标本，特别是血液标本。因为运动能影响许多项目的测定结果。研究指出，患者处于激动、兴奋、恐惧状态时，可使血红蛋白、白细胞增高。患者的状态患者的状态10影响检验标本质量的因素多数检查要求在采血前禁食12h，并注意检查前一天晚餐禁食高脂食品。 研究表明：一顿标准餐后，可使血中甘油三酯增高50%、血糖增高15%。进食高脂肪食物，可引起血脂的大幅度增高。餐后采集的血液标本，其血清常出现乳糜状，影响到许多检验测定的正确性。患者的饮食患者的饮食11影响检验标本质量的因素研究表明:多种常用镇静剂,多种常用抗生素,对多种检测结果均有影响。输血、输液对电解质，血糖等检验结果均有影响,一般不宜在输血输液侧采集血液标本。通常在输液对侧采集血液标本，或输液结束后12h后采血。药物的影响药物的影响12影响检验标本质量的因素运动运动的影响的影响 与运动时间、强度有关。适度运动，与运动时间、强度有关。适度运动，血糖、尿酸、乳酸增加，血糖、尿酸、乳酸增加，ATPATP减少，血清减少，血清ASTAST、LDHLDH、CKCK、ALPALP增加，运动员，血清增加，运动员，血清ChCh、TGTG减少，减少，HDL-CHDL-C增加。增加。 年龄年龄的影响的影响 性别性别的影响的影响 体形体形的影响的影响 13三.静脉抽血的注意事项采血时，应统一采血姿势(卧位、坐位、立位)；应尽量在使用止血带1min内采血，看到回血马上解开止血带；当需要重复使用止血带时，应使用另一上臂；采集过程是标本质量的关键环节采集过程是标本质量的关键环节14三.静脉抽血的注意事项胶塞穿刺针上的乳胶套能防止滴血，采血时不能取下;采血针软管的容积为0.4ml，采血时可酌情提前拔出采血针;采血针刺入静脉后，如穿破静脉，回血撤回，可将采血针顺原路缓慢退回，见回血即可;采血完毕后，先拔出采血针，待滴血停止后再拔出试管端穿刺针.15三.静脉抽血的注意事项血液标本常见溶血原因（1）注射器、针头或容器不干燥；（2）压脉带捆扎时间太久，淤血过久；（3）穿剌不畅，损伤组织过多；（4）抽血速度太慢或太快；（5）血液注入容器时未取下针头；16三.静脉抽血的注意事项（6）抗凝血混合时，振荡力量过大；（7）血液存放时间过长；（8）静脉采血时，为增加血流而挤压采血部位；（9）血液标本在送检或运输过程中，挤压或振动过大等。17多管采血的顺序： 三.静脉抽血的注意事项血液培养无添加剂管凝血实验血常规其它防止凝血因子活化，或者血小板聚集而影响检验结果。18四.各种标本的采集要求血液标本的采集血液标本的采集血液标本的采集血液标本的采集01体液标本的采集体液标本的采集体液标本的采集体液标本的采集0202003微生物标本的采集与送检微生物标本的采集与送检19一）、血液标本的采集1、血常规标记：浅紫色瓶塞真空采血管（EDTA抗凝）采集要求：采集2ml静脉血后，立即颠倒混匀，至少5次，但不能剧烈震荡，如果血液有凝块，一定要重新抽血。20一）、血液标本的采集2、生化分析标记：绿色瓶塞真空采血管采集要求：采集3-5ml空腹血，避免溶血，避免强光照射。糖化血红蛋白：浅紫色瓶塞真空采血管（EDTA抗凝）21标本的正确采集与保存是生化检验结果是否可靠的前提，而这种差异往往不易被检测者发现，因此，必须给予重视。 一）、血液标本的采集22一）、血液标本的采集3：红细胞沉降率（血沉）标记：黑色瓶塞真空采血管（抗凝）采集要求：采集1.6ml空腹血（至2ml瓶签刻度处），立即颠倒混匀，至少8次。23一）、血液标本的采集4：免疫血清分析（如：肝炎系列、甲功、激素等）标记：红色瓶塞真空采血管（不抗凝）采集要求：采集35ml空腹血，避免溶血，避免强光照射。24一）、血液标本的采集5：凝血四项标记：浅蓝色瓶塞真空采血管（枸橼酸钠抗凝）检验凝血四项是为了证明有无出血性疾病。采集1.8ml空腹血（至2ml瓶签刻度处），立即颠倒混匀，至少5次。避免溶血，避免凝固。256 6、采集方法、采集方法静脉采血法静脉采血法：采采血血部部位位：最最常常用用的的是是肘肘静静脉脉，此此外外，也也可可采采用用手手背背静静脉脉、外外踝踝静静脉脉、颈颈外外静静脉。脉。取血容器：最好采用一次性注射器和试取血容器：最好采用一次性注射器和试管管。 26注意事项：注意事项：如如遇遇到到病病人人采采血血发发生生眩眩晕晕，平平卧卧休休息息，必必要时嗅吸芳香氨酊，掐人中。要时嗅吸芳香氨酊，掐人中。防防止止溶溶血血：造造成成溶溶血血原原因因，穿穿刺刺不不顺顺利利，局局部部组组织织损损伤伤过过多多，取取血血容容器器有有水水，血血液液注注入试管时不取下针头，抗凝血的剧烈震荡。入试管时不取下针头，抗凝血的剧烈震荡。27避避免免充充血血和和血血液液浓浓缩缩：止止血血带带压压迫迫时时间间不能过长，最好不超过半分钟。不能过长，最好不超过半分钟。抽抽血血时时，只只能能向向外外抽抽，不不能能向向内内推推。以以免注人空气。免注人空气。肢体进行静脉输液时不宜在同侧静脉采肢体进行静脉输液时不宜在同侧静脉采血血。 28动脉采血法动脉采血法：一一般般多多采采用用股股动动脉脉，其其他他部部位位如如桡桡动动脉脉，肱肱动动脉脉也也可可采采用用，在在博博动动明明显显处处，常常规规消消毒毒，刺刺入入动动脉脉后后，血血液液自自行行涌涌入入注注射射器器，达达所所需需血量，用干棉球压迫止血。血量，用干棉球压迫止血。29抗凝剂抗凝剂阻阻止止血血液液凝凝固固的的化化学学试试剂剂，称称为为抗抗凝凝剂剂，常用的有：常用的有：草草酸酸钾钾与与血血液液中中钙钙离离子子结结合合生生成成草草酸酸钙钙沉沉淀淀。通通常常配配成成100g/L水水溶溶液液，每每支支试试管管中中加加0.1ml,80以下烘干备用。以下烘干备用。优优点点：溶溶解解度度大大，抗抗凝凝作作用用强强（抗抗凝凝用用量量2mg/ml血），价格低血），价格低缺缺点点：改改变变血血液液pH，不不能能用用于于酸酸碱碱平平衡衡观观察察，不不能能用用于于K+、Ca2+测测定定，抑抑制制一一些些酶酶活活性性，LDH、ACP、ALT。 7 7、标本的处理标本的处理30氟氟化化钠钠抗抗凝凝作作用用弱弱，常常与与草草酸酸钾钾混混合合使使用用，NaF4g,草草酸酸钾钾6g,溶溶解解至至100ml，每每管管加加0.1ml,80以下烘干备用，可抗凝以下烘干备用，可抗凝23ml血。血。优点：防止糖酵解，用于血糖测定。优点：防止糖酵解，用于血糖测定。肝肝素素是是一一种种含含硫硫酸酸基基团团的的粘粘多多糖糖，具具有有多多方面抗凝作用。方面抗凝作用。优优点点：抗抗凝凝作作用用强强（抗抗凝凝用用量量0.1mg/ml血血）不不影影响响血血细细胞胞体体积积，不不易易溶溶血血，配配成成1g/L水水溶溶液液，每每管管0.5ml,60烘烘干干备备用用，久久置置而而失失效效，价格贵。价格贵。31二）、体液标本的采集1：尿常规晨尿标本：一般留取清晨第一次尿最佳。尿标本的送检及保存：（1）一般需留取10ml左右（2）尿标本收集后应及时送检,以免有型成分破坏和有机物质分解32二）、体液标本的采集2：大便标本（1）患者的准备:患者应于治疗之前留取标本,留作隐血试验的标本应于日前禁食肉类及动物性食物,并禁服铁剂及维生素等药物。（2）自然排便后，挑取有脓血、粘液部分粪便2-3g，若稀水样便则应取约2ml，于粪便标本容器中送检。33二）、体液标本的采集（3）标本务必新鲜且不可混入尿液、消毒液及污水等，以免有型成分破坏。（4）标本采集后应于1-2小时内检查完毕，否则可因pH及消化酶等影响导致有型成分破坏分解。34二）、体液标本的采集3：痰液标本（1）痰液要求新鲜，一般检查以清晨第一口痰作标本最适宜。（2）咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽，从肺深部咳新鲜痰液于无菌容器送检。（3）对咳嗽乏力或昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔或口腔抵达气管腔内吸取痰液。35二）、体液标本的采集4：其它分泌物排泄物标本及特殊标本的采集 主要由专科医生或检验人员进行：胃液标本 精液标本脑脊液标本 前列腺液标本 胸腹水标本 阴道分泌物标本羊水标本 骨髓标本等细胞穿剌标本36体液标本的处理体液标本的处理 收收集集2424小小时时尿尿液液时时，为为防防止止细细菌菌生生长长而而影响检验结果，应使用防腐剂，常用的有：影响检验结果，应使用防腐剂，常用的有： 1 1、甲甲苯苯（或或二二甲甲苯苯） 在在尿尿液液表表面面形形成成一一薄薄膜膜，防防止止细细菌菌繁繁殖殖，防防腐腐能能力力较较弱弱。用用量量1010mlml左左右右，适适合合作作尿尿糖糖，尿尿蛋蛋白白、尿尿素素、肌酸、肌酐、尿酸，钾、钠、氯测定。肌酸、肌酐、尿酸，钾、钠、氯测定。372 2、浓浓盐盐酸酸 使使尿尿液液保保持持强强酸酸性性，阻阻止止细细菌菌繁繁殖殖，防防止止尿尿液液中中某某些些成成分分因因尿尿酸酸碱碱化化而而分分解解，用用量量1010mlml左左右右，适适合合作作尿尿17-17-羟羟、17-17-酮、儿茶酚胺、钙测定。酮、儿茶酚胺、钙测定。 3 3、麝麝香香草草酚酚 可可抑抑制制尿尿中中细细菌菌生生长长，用用量量1 1g g左左右右，也也可可用用麝麝香香草草酚酚异异丙丙醇醇溶溶液液（10%10%），5 5 mlml左左右右，适适合合作作尿尿钾钾，钠钠、钙钙、AAAA、糖糖、尿尿胆胆原原、胆胆红红素素测测定定，不不适适合合作作尿尿蛋白测定。蛋白测定。38标本的分离和储存标本的分离和储存 血血液液标标本本采采集集后后，如如需需要要血血浆浆或或血血清清者者，应应及及时时分分离离，以以免免红红细细胞胞与与血血清清或或血血浆浆之之间间物物质的转移和红细胞对血清中某些物质的利用。质的转移和红细胞对血清中某些物质的利用。 血血浆浆的的分分离离：取取血血后后与与抗抗凝凝剂剂充充分分混混匀匀后后，可立即离心分离，可立即离心分离，2500300025003000转转/ /minmin，5min5min。 血血清清的的分分离离：取取血血后后将将试试管管放放3737水水浴浴放放置置3030minmin左右，离心分离。左右，离心分离。 分分离离的的血血浆浆或或血血清清不不能能及及时时检检测测时时，可可放放4646冰冰箱箱保保存存，保保存存期期限限依依待待测测成成分分稳稳定定性性而定，一般而定，一般3535天。天。39三）、微生物检验的标本采集及送检在医学高度发展，新的抗菌药物不断涌现的今天，感染性疾病的发病率和病死率仍然居高不下。主要原因之一是当代的感染性疾病，在病原上发生了较大的变化，形成了现代感染性疾病在病原学上的新特点。40现代感染性疾病的新特点以条件致病菌为主：很多低致病、弱毒的细菌，在外环境、人体体表以及与外界相通的腔道中广泛存在的细菌，引起感染甚至造成严重后果的现象日益增多。病原菌的种类更为广泛：包括需氧菌、厌氧菌、苛氧菌、分枝杆菌和真菌等。41细菌的耐药性不断增强：同一种细菌对抗生素的耐药性可以完全不同，甚至出现同时耐多种抗生素的“多重耐药”细菌，往往使临床医师的“经验性”治疗或所谓的常规治疗根本无效。现代感染性疾病的新特点42出现一些新的感染性病原：有人统计，20世纪后期，全世界一共出现种31种新的传染病，其中病毒14种，细菌11种，寄生物6种，由于人们的认识不足，缺乏有效的预防、治疗办法，人群又无免疫力，这些新出现的病菌在不同的地区和范围内流行，来势猛，传播快，造成巨大的损失和社会恐慌。例如：疯牛病、埃博拉出血热、新型肝炎病毒、大肠杆菌O157、出血性肠炎、O139霍乱、艾滋病、莱姆病等。现代感染性疾病的新特点43我们应该追求：“准确的病原学诊断”“针对性病原学治疗”正确的微生物标本采集和运送，是准确的病原学诊断的前提！微生物让人类步步为营，44检验误差发生率哪个阶段最高4560%以上实验误差发生在分析前1997年，一位意大利著名检验专家就对急诊检验误差发生的种类和发生率进行了统计。结果显示，约有68.2%的检验误差发生在检验前期，而来自于检验中期和检验后期的误差率分别为13.3%和18.5%。2007年，这位检验专家又进行了类似统计，结果显示，检验前期的误差发生率仍高达61.9%。摘自：摘自：46分析前质量控制分析前质量控制获得准确结果的重要环节获得准确结果的重要环节47基本原则1.1.及时采集微生物标本作病原学检查及时采集微生物标本作病原学检查2.2.在抗菌药物使用前采集标本在抗菌药物使用前采集标本3.3.采样时严格执行无菌操作采样时严格执行无菌操作4.4.采样后立即送检采样后立即送检5.5.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂6.6.送检标本应注明来源和检验目的送检标本应注明来源和检验目的48如何提高细菌阳性检出率？标本采集时机标本采集时机标本采集方法标本采集方法标本的质与量标本的质与量标本的运送与保存标本的运送与保存镜检筛选合格标本（退检制度）镜检筛选合格标本（退检制度）高质量、多种分离培养基高质量、多种分离培养基培养环境培养环境49常见不合格标本主要有以下问题：q标本采集时间错误标本采集时间错误q容器错误容器错误q标本量不足标本量不足q 标本采集延误标本采集延误q 标本未及时正确运送标本未及时正确运送q 以及暂存条件错误以及暂存条件错误。q 。50最有价值的细菌学检测项目q 血液培养血液培养q 脑脊液培养脑脊液培养q 胆汁培养胆汁培养q 胸腹水培养胸腹水培养q 关节液关节液q 其他无菌体液或分泌液其他无菌体液或分泌液51血培养标本采集与运送5253血培养概念:采集患者的血液或无菌体液标本采集患者的血液或无菌体液标本,送至微生物实验送至微生物实验室培养检测室培养检测.检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存在检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存在.如有细菌如有细菌,则极有可能为致病的细菌则极有可能为致病的细菌.进一步进行鉴定进一步进行鉴定/药敏试验药敏试验.54完整的血培养过程医师开出医嘱医师开出医嘱护理人员收集送检样本护理人员收集送检样本实验室检测、分离并鉴定导致血流感实验室检测、分离并鉴定导致血流感染的微生物染的微生物三级报告：为临床医生提供抗菌药物三级报告：为临床医生提供抗菌药物敏感性试验结果敏感性试验结果55目前血培养的问题：采血时机不合适采血时机不合适采血套数不够采血套数不够采血量不足采血量不足只做需氧培养，不同时做厌氧培养只做需氧培养，不同时做厌氧培养采血前或采血时正在使用抗生素治疗采血前或采血时正在使用抗生素治疗56血流感染与血培养血流感染与血培养的规范实践的规范实践57“只有在只有在发热时，才需要，才需要进行血培养。行血培养。”关于血培养指征关于血培养指征想想采采就就采采58答案：血培养的指征当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养怀疑患者有血流感染的症状有：怀疑患者有血流感染的症状有：怀疑患者有血流感染的症状有：怀疑患者有血流感染的症状有：不明原因的发烧不明原因的发烧不明原因的发烧不明原因的发烧( (3838) )或体温过低或体温过低或体温过低或体温过低( (3636) )白细胞增多（白细胞增多（白细胞增多（白细胞增多（ 10,000/ul10,000/ul），粒细胞减少（），粒细胞减少（），粒细胞减少（），粒细胞减少（ 1,000ul1,000ul）休克，寒颤，僵直休克，寒颤，僵直休克，寒颤，僵直休克，寒颤，僵直严重的局部感染严重的局部感染严重的局部感染严重的局部感染( (脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感染，肾炎，腹部术后感染，肾炎，腹部术后感染，肾炎，腹部术后感染，)心率异常加快心率异常加快心率异常加快心率异常加快低血压或高血压低血压或高血压低血压或高血压低血压或高血压呼吸频率加快呼吸频率加快呼吸频率加快呼吸频率加快59“何何时采血采血进行血培养，无特殊行血培养，无特殊时间要求。要求。”关于采血时机关于采血时机6003060时间 (分钟)体温体温血培养采血时机血培养采血时机细菌浓度细菌浓度61答案：采集血培养样本的最佳时间尽可能在患者寒战或开始发热时采血尽可能在患者寒战或开始发热时采血在患者接受抗生素治疗前采血在患者接受抗生素治疗前采血如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养下一次用药之前采血培养 62 “为减减轻患者痛苦，只从一个穿刺部患者痛苦，只从一个穿刺部位采一份血液位采一份血液标本即可。本即可。”关于采血套数及部位关于采血套数及部位63基本概念成人成人“一套一套” 血培养应该包括需氧瓶和厌血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个，也叫氧瓶各一个，也叫“一份一份”注意：一次穿刺采血，算注意：一次穿刺采血，算“一套一套”，采集，采集第二套应从另一个穿刺点获得。第二套应从另一个穿刺点获得。儿童一般只做需氧培养，但仍需从多个部儿童一般只做需氧培养，但仍需从多个部位采集多次。特殊患者才考虑厌氧培养。位采集多次。特殊患者才考虑厌氧培养。 64采血套数Weinsteinetal.DetectionofBloodstreamInfectionsinAdults:HowManyWeinsteinetal.DetectionofBloodstreamInfectionsinAdults:HowManyBloodCulturesAreNeededJClinMicrobiol.2007;45:3546-3548BloodCulturesAreNeededJClinMicrobiol.2007;45:3546-3548表皮葡萄球菌的临床意义2 23 3套血培养，有助于污染的判断。套血培养，有助于污染的判断。Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333采集采集1套无法判套无法判断是病原菌还断是病原菌还是污染菌。是污染菌。66答案：关于血培养套数与采血部位每位患者每次采血最少每位患者每次采血最少2套，套，初发患者，绝不能只采初发患者，绝不能只采1套标本套标本 多个穿刺部位采血。因多部位同时发多个穿刺部位采血。因多部位同时发 生污染的几率较小，便于对结果进判断生污染的几率较小，便于对结果进判断 67“两套血培养采集两套血培养采集间隔无特殊要求。隔无特殊要求。” 关于采血间隔关于采血间隔68答案：关于标本采集间隔时间对对对对于于于于非非非非持持持持续续续续性性性性菌菌菌菌血血血血症症症症，同同同同时时时时或或或或短短短短时时时时间间间间内内内内采采采采集集集集2 2 2 23 3 3 3套套套套血血血血培培培培养养养养，因因因因为为为为体体体体内内内内巨巨巨巨噬噬噬噬细细细细胞胞胞胞吞吞吞吞噬噬噬噬系系系系统统统统会会会会在在在在1515151530min30min30min30min内清除掉进入人体内的细菌。内清除掉进入人体内的细菌。内清除掉进入人体内的细菌。内清除掉进入人体内的细菌。可可可可疑疑疑疑急急急急性性性性心心心心内内内内膜膜膜膜炎炎炎炎患患患患者者者者要要要要立立立立即即即即取取取取血血血血作作作作血血血血培培培培养养养养，30303030分分分分钟钟钟钟内内内内完完完完成成成成3 3 3 3套套套套血血血血培培培培养养养养的的的的采采采采集集集集，采采采采集集集集后后后后立立立立即即即即进进进进行行行行抗抗抗抗菌菌菌菌药药药药的的的的经经经经验验验验治治治治疗疗疗疗。如如如如果果果果24242424小小小小时时时时内内内内报报报报告告告告阴阴阴阴性性性性，则则则则继续采集继续采集继续采集继续采集2 2 2 2套血培养。套血培养。套血培养。套血培养。可可可可疑疑疑疑的的的的亚亚亚亚急急急急性性性性心心心心内内内内膜膜膜膜炎炎炎炎患患患患者者者者每每每每间间间间隔隔隔隔30303030分分分分钟钟钟钟至至至至1h1h1h1h采采采采集集集集1 1 1 1套套套套，连连连连续续续续采采采采集集集集3 3 3 3套套套套标标标标本本本本。如如如如果果果果24242424小小小小时时时时内内内内报报报报告告告告阴阴阴阴性，则继续采集性，则继续采集性，则继续采集性，则继续采集2 2 2 2套血培养。套血培养。套血培养。套血培养。 69“每瓶采集多少血液无特殊要求。每瓶采集多少血液无特殊要求。” 关于采血量关于采血量70采血量(ml)与检出率的关系 Overall血培养物每增加一毫升，真性菌血症血培养物每增加一毫升，真性菌血症成年人微生物的检出率增加成年人微生物的检出率增加3 但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质（补体、抗体、抗生素）。所以血液与肉汤的最佳比例（补体、抗体、抗生素）。所以血液与肉汤的最佳比例为为1：41：1071答案：关于采集血液量采血量是影响灵敏度最关键因素采血量是影响灵敏度最关键因素成成人人一一般般应应采采2个个培培养养瓶瓶（需需氧氧厌厌氧氧），每每瓶瓶510ml，共共20ml。儿儿童童一一般般只只需需采采集集需需氧氧瓶瓶，在在保保证证采采集集血血量量1总总血血量量下，一般为下，一般为13ml采采血血量量不不足足时时应应优优先先保保证证需需氧氧瓶瓶，因因临临床床90以以上上的的感感染染为为需需氧氧菌菌或或兼兼性性需需氧氧菌菌感感染染 72先采生化、凝血先采生化、凝血标本，再采血培养本，再采血培养标本。本。”关于关于各种血液标本的各种血液标本的采集顺序采集顺序73血培养对无菌操作的要求比注射、采集血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它标本要高。生化、凝血等其它标本要高。所以要最先采集血培养标本。所以要最先采集血培养标本。污染率的指标是污染率的指标是 3% 3% （100100份标本里只能有不到份标本里只能有不到3 3个标本出现个标本出现污染。）污染。）答案：采各种血液标本的先后顺序74“消毒的重点是足消毒的重点是足够量的消毒量的消毒剂。”关于皮肤及培养瓶消毒75皮肤消毒程序：皮肤消毒程序： 推荐使用碘町、洗必泰或碘推荐使用碘町、洗必泰或碘伏作为皮肤消毒剂。伏作为皮肤消毒剂。 碘町作用碘町作用1min 碘伏作用碘伏作用1.5-2min 洗必泰作用时间与碘町一样洗必泰作用时间与碘町一样（但不能用于少于（但不能用于少于2个月婴儿个月婴儿皮肤消毒）皮肤消毒）76培养瓶的消毒程序：培养瓶的消毒程序：1.1.去掉培养瓶口的塑料瓶盖。去掉培养瓶口的塑料瓶盖。去掉培养瓶口的塑料瓶盖。去掉培养瓶口的塑料瓶盖。2.2.75%75%75%75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子酒精消毒血培养瓶橡皮塞子酒精消毒血培养瓶橡皮塞子酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60606060秒。秒。秒。秒。3.3.自然待干。自然待干。自然待干。自然待干。4.4.将标本注入培养瓶内。将标本注入培养瓶内。将标本注入培养瓶内。将标本注入培养瓶内。5. 5. 5. 5. 颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝集。集。集。集。77“培养瓶未使用时，需要冷藏或冷冻。培养瓶未使用时，需要冷藏或冷冻。”关于培养瓶的储存温度78 不需冷藏，更不能冷冻。保存在1525的室温即可，温度过低会导致对温度敏感的耐瑟氏菌等死亡。答案：关于未用培养瓶的储存温度79 “加入标本后的培养瓶夜班未能及时送到加入标本后的培养瓶夜班未能及时送到检验科，可以冷藏或放入检验科，可以冷藏或放入35的温箱。的温箱。”关于关于夜班血培养的夜班血培养的送检送检80 培养瓶夜班未能及时送到检验科，培养瓶夜班未能及时送到检验科，存在室温即可，不能冷藏也不能放入存在室温即可，不能冷藏也不能放入35 的温箱的温箱 。过夜不会对检测造成影响，过夜不会对检测造成影响，但仍需尽快送检。冷藏可能导致对温度但仍需尽快送检。冷藏可能导致对温度敏感的耐瑟氏菌等死亡。温箱会导致细敏感的耐瑟氏菌等死亡。温箱会导致细菌进入生长对数期，从而错过检测的最菌进入生长对数期，从而错过检测的最佳时期。佳时期。答案：关于夜班血培养的送检答案：关于夜班血培养的送检81“患者静脉中插有导管，可直接从导患者静脉中插有导管，可直接从导管采血。管采血。”关于采血部位82 不可以不可以，常规血培养不宜从常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置中采集，静脉导管或静脉留置装置中采集，检出污染或定植菌的可能性较大。检出污染或定植菌的可能性较大。除非怀疑导管相关性血流感染，除非怀疑导管相关性血流感染，请参照导管相关性血流感染的采请参照导管相关性血流感染的采血方法。血方法。答案：关于从静脉留置装置直接采血答案：关于从静脉留置装置直接采血83血培养标本的拒收瓶子上帖的标签错误或未帖标签。瓶子上帖的标签错误或未帖标签。血培养瓶打破的、损坏的或渗漏。血培养瓶打破的、损坏的或渗漏。血液凝固。血液凝固。84培养基的选择推荐使用商品化的培养基推荐使用商品化的培养基使用添加抗菌药物吸附剂的血培养使用添加抗菌药物吸附剂的血培养瓶有助于提高已接受抗菌药物治疗瓶有助于提高已接受抗菌药物治疗患者血培养的检出率，增加细菌的患者血培养的检出率，增加细菌的分离率和分离速度，但同时也会增分离率和分离速度，但同时也会增加污染菌的检出率。加污染菌的检出率。85上呼吸道标本86上呼吸道感染：绝大部分呼吸道感染局限于口咽、鼻咽和鼻腔部位；导致咽痛、鼻涕、常常会发热。感染喉部、中耳、鼻窦炎、结膜炎或角膜炎。可能与严重疾病百日咳、流行性感冒、麻疹和传染性单核细胞增多症并存。8788不同的采样拭子对标本的检测结果有影响吗?89棉+木棍抑菌区域的产生由于棉中所含的脂肪酸以及从木棒中渗出的树脂和甲醛。90咽拭子运送培养基q 可以运送需氧、厌氧、苛养菌可以运送需氧、厌氧、苛养菌q 4或或RTq 24或或48小时小时建议用于病原菌培养而不是涂片的标本送检。建议用于病原菌培养而不是涂片的标本送检。91痰培养标本采集与运送92病原体种类繁多而复杂病原体种类繁多而复杂使下呼吸道感染病原诊断成为难题使下呼吸道感染病原诊断成为难题细菌（包括放线菌与奴卡菌，厌氧菌与细菌（包括放线菌与奴卡菌，厌氧菌与分枝杆菌）分枝杆菌）真菌（包括肺孢子菌）真菌（包括肺孢子菌）病毒病毒支原体、衣原体与立克次体支原体、衣原体与立克次体原虫原虫寄生虫寄生虫93咳痰途经口咽部咳痰途经口咽部唾液中口咽部定植菌的浓度可达唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml。研究显示，国内常规痰标本中约半数研究显示，国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象。存在唾液严重污染现象。不可避免地受到污染不可避免地受到污染94我国痰细菌培养现状标本送检率低标本送检率低苛养菌检出率极低苛养菌检出率极低结果重复性差结果重复性差报告速度慢报告速度慢感染菌与污染菌不易区分感染菌与污染菌不易区分药敏结果与治疗反应存在差距药敏结果与治疗反应存在差距95下呼吸道感染病原学诊断注意事项痰标本的正确采集（包括导痰）痰标本的正确采集（包括导痰）痰标本及时运送和处理的重要性痰标本及时运送和处理的重要性痰标本的洗涤与匀化痰标本的洗涤与匀化痰涂片：质量评估和细菌、真菌初步痰涂片：质量评估和细菌、真菌初步报告报告接种平板：质量与质控，血、巧克力、接种平板：质量与质控，血、巧克力、麦康凯、沙保弱麦康凯、沙保弱96培养环境：培养环境：CO2CO2培养时间：培养时间：24h24h，48h48h菌落观察要点菌落观察要点结果报告：所有菌种（群），包括结果报告：所有菌种（群），包括半定量半定量临床意义判定临床意义判定其他病原体的检测：结核、真菌、其他病原体的检测：结核、真菌、厌氧菌、非典型病原体厌氧菌、非典型病原体下呼吸道感染病原学诊断注意事项97咳痰标本的采集标本采集方法标本采集方法医师或护士直视下采集标本医师或护士直视下采集标本病人先漱口，去除表面的菌群病人先漱口，去除表面的菌群教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液液临床上约半数咳痰标本不合格！临床上约半数咳痰标本不合格！98关于咳痰标本在抗生素应用前采集痰标本在抗生素应用前采集痰标本;标本采集后标本采集后12h内必须立即进行实验室处理内必须立即进行实验室处理咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本本 取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导无痰可用无痰可用35NaCl 5ml雾吸约雾吸约5min导痰导痰也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰痰995种筛选标准判断14001份痰标本合格率比较合格合格不合格不合格不能归类不能归类标本数标本数率率标本数标本数率率标本数标本数率率标准标准1474033.9925366.1*80.1标准标准2358325.611097.9*930966.5标准标准3483234.5916965.5标准标准4911565.1488634.9标准标准5637845.6762354.4注：标准2：卫生部医政局全国临床检验操作规程100咳痰标本不合格，退检吗？如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于2525个，个，白细胞小于白细胞小于1010个，应不做或仅在特殊要个，应不做或仅在特殊要求时做培养。求时做培养。如做培养，报告中注明如做培养，报告中注明“镜检结果表明镜检结果表明标本口咽分泌物污染明显标本口咽分泌物污染明显”。101几种下呼吸道直接采集的标本经气管穿刺吸引（经气管穿刺吸引（transtracheal aspiration,TTA）经胸壁针刺吸引（经胸壁针刺吸引（transthoracic needle aspiration, TNA）经支气管镜采样经支气管镜采样 支气管肺泡灌洗（支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage, BAL）经支气管镜直接吸引经支气管镜直接吸引防污染样本毛刷（防污染样本毛刷（protective specimen brush, PSB）开胸肺活检（开胸肺活检（open-lung biopsy，OLB）经人工气道吸引分泌物（经人工气道吸引分泌物（endotracheal aspirates，ETA）102痰培养的送检次数对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，次，连续连续23天。不建议天。不建议24h内多次采集，除非内多次采集，除非痰液外观性状出现改变；痰液外观性状出现改变；怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨天清晨痰液送检；痰液送检；怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的送检次数尚无定论。送检次数尚无定论。103痰培养的运送和保存尽快（尽快（2h）送至实验室。）送至实验室。如不能及时送达，应将标本暂存于如不能及时送达，应将标本暂存于4，但，但放置时间不可超过放置时间不可超过24h。厌氧培养标本的最佳运送时间取决于标本量。厌氧培养标本的最佳运送时间取决于标本量。被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌氧菌培养。厌氧菌培养。104痰培养的拒收光学显微镜细胞学检查发现口咽分泌物光学显微镜细胞学检查发现口咽分泌物污染明显。污染明显。没有标签或贴错标签。没有标签或贴错标签。运送容器选择不当或有渗漏。运送容器选择不当或有渗漏。标本采集不符合要求。标本采集不符合要求。同一天同一试验重复送检同一天同一试验重复送检2次。次。延时送至实验室的标本。延时送至实验室的标本。105尿培养标本采集与运送106你知道吗？尿液通常是无菌的或一过性有少量微生物，但是尿道内或尿液通常是无菌的或一过性有少量微生物，但是尿道内或尿道周围皮肤的菌群会污染尿液标本，从而可能导致错误尿道周围皮肤的菌群会污染尿液标本，从而可能导致错误的培养结果。的培养结果。诊断症状明显的病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标本诊断症状明显的病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标本就已足够，治疗就已足够，治疗48-7248-72小时后再采集第二份标本。对于症小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人，需采集状不明显的病人，需采集2-32-3份标本。怀疑肾结核时，应份标本。怀疑肾结核时，应连续连续3 3天采集晨尿。天采集晨尿。多次收集或多次收集或2424小时尿不能用作培养。小时尿不能用作培养。申请单上必须注明病人症状是否明显，这对于定量培养分申请单上必须注明病人症状是否明显，这对于定量培养分析非常重要，尤其只有少量尿液标本。析非常重要，尤其只有少量尿液标本。室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖，因此若室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖，因此若30min30min内不能及时培养尿液则必须冷藏，但也不能超过内不能及时培养尿液则必须冷藏，但也不能超过2424小时。小时。107尿培养标本清洁中段尿清洁中段尿导尿导管尿导尿导管尿经耻骨上皮肤穿刺采集膀胱内尿液经耻骨上皮肤穿刺采集膀胱内尿液送检标本以晨起第一次尿液为佳送检标本以晨起第一次尿液为佳不能立即送检者，可暂存不能立即送检者，可暂存4冰箱，但保冰箱，但保存不超过存不超过8h108清洁中段尿液尽量取早晨第一次尿液尽量取早晨第一次尿液弃去开始流出的尿液，以冲刷尿道口的细菌，弃去开始流出的尿液，以冲刷尿道口的细菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿取能代表膀胱部位病原菌的中段尿详细告知病人以下操作步骤详细告知病人以下操作步骤女性病人女性病人收集标本前用清洗液冲洗干净，从前向后仔收集标本前用清洗液冲洗干净，从前向后仔细擦洗细擦洗尿道区域尿道区域分开阴唇，开始排尿分开阴唇，开始排尿排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿男性病人男性病人回缩包皮并清洗龟头回缩包皮并清洗龟头排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿109导尿管尿液集尿袋内的尿液不能用作培养；集尿袋内的尿液不能用作培养；导尿管末端的尿液也不能用于培养，因为很难导尿管末端的尿液也不能用于培养，因为很难避免没有尿道菌群污染。避免没有尿道菌群污染。留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集，留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集，不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。采样端口用酒精消毒；必要时，可先夹住导尿采样端口用酒精消毒；必要时，可先夹住导尿管但不能超过管但不能超过3030分钟；将注射器针头插入采样分钟；将注射器针头插入采样端口，抽吸出尿液；注入无菌杯或试管中端口，抽吸出尿液；注入无菌杯或试管中110耻骨上穿刺吸取尿液常用于患儿、泌尿道厌氧菌感染或脊柱损伤病常用于患儿、泌尿道厌氧菌感染或脊柱损伤病人等。人等。可避免尿道或会阴细菌的污染，但对膀胱内少可避免尿道或会阴细菌的污染，但对膀胱内少量尿液的小儿难以实施。量尿液的小儿难以实施。方法：消毒自脐以下至尿道之间区域的皮肤，方法：消毒自脐以下至尿道之间区域的皮肤，局麻穿刺点部位；在耻骨联合与脐连线上，高局麻穿刺点部位；在耻骨联合与脐连线上，高于耻骨联合于耻骨联合2cm2cm处进针刺入膀胱；取处进针刺入膀胱；取20ml20ml尿液；尿液；置于无菌容器中并送往实验室。置于无菌容器中并送往实验室。可用于厌氧菌检测可用于厌氧菌检测111五、检验标本采集与运送（1）临床医生正确规范书写检验申请单。（2）住院病人由各病区护士采集标本，并写好病区，床号，姓名等信息。（3）急诊检查应注明“急”字，常规检验30分钟内出报告，生化1小时内出报告，检测完毕立即将检查结果上网并电话报告病房医生或护士。（4）常规检查报告于当日17:00点前送达各病房。112六、危急值的处理（1）立即检查标本是否搞错，操作是否正确，仪器等环境因素是否处于正常状态；（2）询问医生该结果是否和病情相符；（3）必要时重新采集标本检验；（4）向医生报告检验结果并做好记录。113小结保证检验结果质量的前提是保证检验标本的质量，而保证检验标本质量需要有患者、医生、护士和检验人员的共同配合，其中护士是最重要的环节。希望通过上面的介绍，能使我们对检验标本的采集方法及注意事项有进一步的熟悉，共同把检验标本的质量提高到一个新水平。114