第五节第五节 定性和定量分析定性和定量分析一、定性分析一、定性分析一、定性分析一、定性分析二、定量分析二、定量分析二、定量分析二、定量分析 定性鉴别定性鉴别纯度检查和杂质限量测定纯度检查和杂质限量测定 单组分的定量方法单组分的定量方法多组分的定量方法多组分的定量方法一、定性分析一、定性分析（一）定性鉴别 定性鉴别的依据定性鉴别的依据吸收光谱的特征吸收光谱的特征吸收光谱的形状吸收光谱的形状吸收峰的数目吸收峰的数目吸收峰的位置（波长）吸收峰的位置（波长）吸收峰的强度吸收峰的强度相应的吸光系数相应的吸光系数续前1对比吸收光谱的一致性对比吸收光谱的一致性同一测定条件下，同一测定条件下，与标准对照物谱图或标准谱图与标准对照物谱图或标准谱图进行对照比较进行对照比较续前2对比吸收光谱的特征值对比吸收光谱的特征值续前3 3对比吸光度或吸光系数的比值：对比吸光度或吸光系数的比值：例：例：续前（二）纯度检查和杂质限量测定1 1纯度检查（杂质检查）纯度检查（杂质检查）1 1）峰位不重叠：）峰位不重叠： 找找使主成分无吸收，杂质有吸收使主成分无吸收，杂质有吸收直接考察杂质含量直接考察杂质含量2 2）峰位重叠：）峰位重叠： 主成分强吸收，杂质无吸收主成分强吸收，杂质无吸收 / / 弱吸收弱吸收与纯品比较，与纯品比较，EE 杂质强吸收杂质强吸收 主成分吸收主成分吸收与纯品比较，与纯品比较，EE，光谱变形光谱变形续前2 2杂质限量的测定：杂质限量的测定：例：肾上腺素中微量杂质例：肾上腺素中微量杂质肾上腺酮含量计算肾上腺酮含量计算 2mg/mL -0.05mol/L2mg/mL -0.05mol/L的的HCLHCL溶液，溶液， 310nm 310nm下测定下测定 规定规定 A A3103100.05 0.05 即符合要求的杂质限量即符合要求的杂质限量0.06%0.06%二、定量分析二、定量分析（一）单组分的定量方法（一）单组分的定量方法1 1吸光系数法吸光系数法 2 2标准曲线法标准曲线法 3 3对照法：外标一点法对照法：外标一点法续前1 1吸光系数法（绝对法）吸光系数法（绝对法）吸光系数法（绝对法）吸光系数法（绝对法）练习例例：维维生生素素B B1212 的的水水溶溶液液在在361nm361nm处处的的百百分分吸吸光光系系数数为为207207，用用1cm1cm比比色色池池测测得得某某维维生生素素B B1212溶溶液液的的吸吸光度是光度是0.4140.414，求该溶液的浓度，求该溶液的浓度（见书（见书P201P201例例1 1）解：解：练习例例：精精密密称称取取B B1212样样品品25.0mg25.0mg，用用水水溶溶液液配配成成100ml100ml。精精密密吸吸取取10.00ml10.00ml，又又置置100ml100ml容容量量瓶瓶中中，加加水水至至刻刻度度。取取此此溶溶液液在在1cm1cm的的吸吸收收池池中中，于于361nm361nm处处测测定定吸吸光光度度为为0.5070.507，求求B B1212的的百百分分含含量量？（见见书书P61P61例例2 2）解：解：练习例：例：解：解：续前续前2 2标准曲线法标准曲线法标准曲线法标准曲线法示例 芦丁含量测定芦丁含量测定0.7100.710mg/25mLmg/25mL续前3 3对照法：外标一点法对照法：外标一点法对照法：外标一点法对照法：外标一点法注：当样品溶液与标准品溶液的注：当样品溶液与标准品溶液的注：当样品溶液与标准品溶液的注：当样品溶液与标准品溶液的 稀释倍数相同时稀释倍数相同时稀释倍数相同时稀释倍数相同时练习例：例： 维生素维生素B B1212的含量测定的含量测定 精精密密吸吸取取B B1212注注射射液液2.50mL2.50mL，加加水水稀稀释释至至10.00mL10.00mL；另另配配制制对对照照液液，精精密密称称定定对对照照品品25.00mg25.00mg，加加水水稀稀释释至至1000mL1000mL。在在361nm361nm处处，用用1cm1cm吸吸收收池池，分分别别测测定定吸吸光光度度为为0.5080.508和和0.5180.518，求求B B1212注注射射液液注注射射液液的的浓浓度度以以及及标标示示量量的的百百分分含含量量（该该B B1212注注射射液液的的标标示示量为量为100g / 100g / mLmL）见书见书P203P203例题例题解：解：1 1）对照法）对照法 练习2 2）吸光系数法）吸光系数法 续前（二）多组分的定量方法（二）多组分的定量方法（二）多组分的定量方法（二）多组分的定量方法三种情况：三种情况：1 1两组分吸收光谱不重叠两组分吸收光谱不重叠两组分吸收光谱不重叠两组分吸收光谱不重叠（互不干扰）（互不干扰） 两组分在各自两组分在各自max下不重叠下不重叠分别按单组分定量分别按单组分定量续前2 2两组分吸收光谱部分重叠两组分吸收光谱部分重叠两组分吸收光谱部分重叠两组分吸收光谱部分重叠 1测测A1b组分不干扰组分不干扰可按单组分定量测可按单组分定量测Ca 2测测A2a组分干扰组分干扰不能按单组分定量测不能按单组分定量测Ca 续前3 3 3 3两组分吸收光谱完全重叠两组分吸收光谱完全重叠两组分吸收光谱完全重叠两组分吸收光谱完全重叠混合样品测定混合样品测定混合样品测定混合样品测定（1）解线性方程组法）解线性方程组法（2）等吸收双波长消去法）等吸收双波长消去法（3）系数倍率法）系数倍率法1解线性方程组法解线性方程组法n n步骤：步骤：步骤：步骤：2等吸收双波长法等吸收双波长法n n步骤：步骤：步骤：步骤： 消除消除消除消除a a的影响测的影响测的影响测的影响测b b续前消去消去消去消去b b的影响测的影响测的影响测的影响测a a 注：须满足两个基本条件注：须满足两个基本条件注：须满足两个基本条件注：须满足两个基本条件 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大3系数倍率法系数倍率法前提：干扰组分前提：干扰组分b不成峰形不成峰形 无等吸收点无等吸收点续前步骤：步骤：b b曲线上任找一点曲线上任找一点1 1 另一点另一点2 2优点：同时将待测组分和干扰组分放大信号优点：同时将待测组分和干扰组分放大信号优点：同时将待测组分和干扰组分放大信号优点：同时将待测组分和干扰组分放大信号K K K K倍，倍，倍，倍， 提高了待测组分测定灵敏度提高了待测组分测定灵敏度提高了待测组分测定灵敏度提高了待测组分测定灵敏度a ab b 1 1 2 2练习解：解：1 1取咖啡酸，在取咖啡酸，在165165干燥至恒重，精密称取干燥至恒重，精密称取10.0010.00mgmg，加少量加少量 乙醇溶解，转移至乙醇溶解，转移至200200mLmL容量瓶中，加水至刻度线，取此溶容量瓶中，加水至刻度线，取此溶 液液5.005.00mLmL，置于置于5050mLmL容量瓶中，加容量瓶中，加6 6mol/Lmol/L的的HCL 4mLHCL 4mL，加加 水至刻度线。取此溶液于水至刻度线。取此溶液于1 1cmcm比色池中，在比色池中，在323323nmnm处测定吸处测定吸 光度为光度为0.4630.463，已知该波长处的，已知该波长处的 ，求咖啡酸百分，求咖啡酸百分 含量含量（见书后（见书后P215 P215 题题1616）练习解：解：2 2精密称取精密称取0.05000.0500g g样品，置于样品，置于250250m Lm L容量瓶中，加入容量瓶中，加入 0.020.02mol/L HCLmol/L HCL溶解，稀释至刻度。准确吸取溶解，稀释至刻度。准确吸取2 2mLmL，稀释至稀释至 100100mLmL。以以0.020.02mol/L HCLmol/L HCL为空白为空白, ,在在263263nmnm处用处用1 1cmcm吸收池吸收池 测定透光率为测定透光率为41.7%41.7%，其摩尔吸光系数为，其摩尔吸光系数为1200012000，被测物分，被测物分 子 量 为子 量 为100.0100.0， 试 计 算， 试 计 算263263n mn m处处 和样品的百分含量。和样品的百分含量。 （见书后（见书后P215P215题题1717）