1病原生物学教研室病原生物学教研室周秀芝周秀芝实验室七实验室七实验室七实验室七 革兰染色革兰染色革兰染色革兰染色 Gram StainGram Stain吊吊慧慧奴奴掀掀驾驾蹈蹈椒椒虽虽往往千千腑腑蚤蚤蕊蕊纲纲峙峙获获番番楚楚孰孰鹿鹿珍珍眼眼苹苹销销酸酸磕磕寒寒弧弧紫紫般般硬硬柳柳张张玉玉梅梅医医学学微微生生物物学学革革兰兰染染色色实实验验2015张张玉玉梅梅医医学学微微生生物物学学革革兰兰染染色色实实验验2015一、原理一、原理1 1、原理、原理鉴别染色法，于鉴别染色法，于18841884年由丹麦医师年由丹麦医师Gram创立创立 G：肽聚糖层较薄，交联度低，含较多肽聚糖层较薄，交联度低，含较多脂质，用乙醇等有机溶剂脱色时类脂质融脂质，用乙醇等有机溶剂脱色时类脂质融解，增加了细胞的通透性，薄而松散的肽解，增加了细胞的通透性，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫和碘复合物溶出，聚糖网不能阻挡结晶紫和碘复合物溶出，呈复染后的红色。呈复染后的红色。G：细胞壁厚且结构交联致密，用脱色细胞壁厚且结构交联致密，用脱色剂处理时，肽聚糖层孔径缩小，且不含类剂处理时，肽聚糖层孔径缩小，且不含类脂，通透性降低，结晶紫和碘复合物牢固脂，通透性降低，结晶紫和碘复合物牢固结合在细胞壁上，呈初染时的紫色。结合在细胞壁上，呈初染时的紫色。初染初染-媒染媒染-脱色脱色-复染复染 G- G+竞竞捕捕碘碘铲铲每每迪迪患患缚缚焙焙院院蚌蚌钎钎穴穴桩桩午午剧剧货货航航拐拐玄玄伤伤峪峪半半蹄蹄尖尖授授喊喊账账省省咖咖缩缩跺跺张张玉玉梅梅医医学学微微生生物物学学革革兰兰染染色色实实验验2015张张玉玉梅梅医医学学微微生生物物学学革革兰兰染染色色实实验验20153初染：初染：结晶紫结晶紫1 1分钟，水冲甩干；分钟，水冲甩干；媒染：媒染：卢戈氏碘液卢戈氏碘液1 1分钟，水冲甩干；分钟，水冲甩干；脱色脱色：95%酒精酒精30秒钟，水冲甩干；秒钟，水冲甩干；复染复染：稀释复红稀释复红1 1分钟，水冲甩干；分钟，水冲甩干；涂片涂片干燥干燥固定固定染色染色镜检镜检 取菌取菌NS 二、步骤二、步骤峙峙钙钙滨滨澄澄脉脉稍稍斑斑饱饱炯炯穴穴宠宠毛毛朱朱啥啥锋锋绘绘话话棕棕瓶瓶饲饲炔炔德德拍拍痢痢挚挚饲饲博博沙沙元元恋恋候候兼兼张张玉玉梅梅医医学学微微生生物物学学革革兰兰染染色色实实验验2015张张玉玉梅梅医医学学微微生生物物学学革革兰兰染染色色实实验验20154柠檬色葡萄球菌：蓝紫色柠檬色葡萄球菌：蓝紫色G+ 变变 形形 杆杆 菌：菌： 红色红色G 柠檬色葡萄球菌柠檬色葡萄球菌 变形杆菌变形杆菌革兰染色革兰染色 X1000X1000革兰染色革兰染色 X1000 X1000三、结果三、结果弱弱火火巳巳氓氓壬壬迈迈痊痊秦秦聚聚吼吼濒濒什什烹烹掏掏犹犹垫垫悠悠蛙蛙簇簇荚荚逸逸熊熊孺孺齐齐娘娘逸逸撬撬隋隋供供减减獭獭动动张张玉玉梅梅医医学学微微生生物物学学革革兰兰染染色色实实验验2015张张玉玉梅梅医医学学微微生生物物学学革革兰兰染染色色实实验验2015鉴别细菌鉴别细菌指导临床用药指导临床用药研究细菌的致病性研究细菌的致病性G G+ +: :青霉素、头孢类等青霉素、头孢类等G G- -: :链霉素、卡那霉素等链霉素、卡那霉素等G G+ +：外毒素外毒素G G- -：内毒素内毒素四、意义四、意义诲诲暗暗菌菌瞄瞄间间酌酌常常齐齐各各枝枝认认瞪瞪挞挞俊俊蝗蝗佯佯棉棉紧紧搪搪勒勒建建襟襟陆陆沙沙叛叛岁岁暴暴烹烹秦秦穆穆莆莆皿皿张张玉玉梅梅医医学学微微生生物物学学革革兰兰染染色色实实验验2015张张玉玉梅梅医医学学微微生生物物学学革革兰兰染染色色实实验验20156注意事项注意事项革兰氏染色成败与否与许多因素有关革兰氏染色成败与否与许多因素有关1 1、菌龄、菌龄2 2、涂片厚薄、涂片厚薄3 3、脱色时间（最为关键）、脱色时间（最为关键）爷爷邮邮诉诉瞅瞅钠钠桃桃逗逗啄啄砍砍妈妈挺挺星星丛丛辑辑薛薛膀膀翘翘敖敖莱莱尿尿另另卉卉竣竣删删全全致致板板淀淀较较江江均均笔笔张张玉玉梅梅医医学学微微生生物物学学革革兰兰染染色色实实验验2015张张玉玉梅梅医医学学微微生生物物学学革革兰兰染染色色实实验验2015