第第40讲浅尝现代生物技术讲浅尝现代生物技术高高频频考考点点深深度度剖剖析析考点一考点一植物组织培养的原理及影植物组织培养的原理及影响因素响因素考点突破考点突破考点突破考点突破1原理：植物细胞的全能性。原理：植物细胞的全能性。2影响植物组织培养的条件影响植物组织培养的条件(1)材料：植物的种类、材料的年龄和保材料：植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。存时间的长短等都会影响实验结果。菊花组织培养一般选择已无菌培养过的菊花组织培养一般选择已无菌培养过的菊花幼苗作材料。菊花幼苗作材料。一般来说，容易进行无性繁殖的植物容一般来说，容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。易进行组织培养。选取生长旺盛的嫩枝进行组织培养的原选取生长旺盛的嫩枝进行组织培养的原因是嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和因是嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。再分化。(2)营养营养(3)激素：在培养基中需要添加生长素和细激素：在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素，其浓度、使用的先胞分裂素等植物激素，其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。后顺序、用量的比例等都影响结果。植物激素的使用顺序及结果植物激素的使用顺序及结果使用顺序使用顺序实验结果实验结果先生长素，后细胞先生长素，后细胞分裂素分裂素有利于分裂但不有利于分裂但不分化分化先细胞分裂素，后先细胞分裂素，后生长素生长素细胞既分裂也分细胞既分裂也分化化同时使用同时使用分化频率提高分化频率提高生长素与细胞分裂素比值与结果生长素与细胞分裂素比值与结果(4)环境条件：环境条件：pH、温度、光等环境条、温度、光等环境条件。件。比值高时比值高时促根分化，抑芽形成促根分化，抑芽形成比值低时比值低时促芽分化，抑根形成促芽分化，抑根形成比值适中比值适中促进愈伤组织生长促进愈伤组织生长考点二考点二植物组织培养过程及注意事项植物组织培养过程及注意事项(3)若若a是花药，则是花药，则d是单倍体幼苗，继续对是单倍体幼苗，继续对其使用秋水仙素处理可获得染色体加倍的其使用秋水仙素处理可获得染色体加倍的可育植株。可育植株。2操作流程操作流程3.进行植物组织培养时应注意的问题进行植物组织培养时应注意的问题(1)所有实验用具严格灭菌。所有实验用具严格灭菌。(2)接种过程要求严格的无菌操作。接种过程要求严格的无菌操作。(3)愈伤组织培养：最初避光培养，后期见愈伤组织培养：最初避光培养，后期见光培养。光培养。(4)试管苗培养：要先进行生芽培养，再进试管苗培养：要先进行生芽培养，再进行生根培养，试管苗培养要在光照条件下行生根培养，试管苗培养要在光照条件下进行。进行。植物组织培养过程植物组织培养过程 (2010高考安徽卷高考安徽卷)草莓生产上草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染病毒传播给传统的繁殖方式易将所感染病毒传播给后后代，导致产量降低、品质变差。运用微代，导致产量降低、品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下：莓微型繁殖的基本过程如下：考题链接考题链接考题链接考题链接例例例例(2)在过程在过程中，常用的中，常用的MS培养基主要成培养基主要成分包括大量元素、微量元素和分包括大量元素、微量元素和_，在配制好的培养基中，常常需要添加在配制好的培养基中，常常需要添加_，有利于外植体启动细胞，有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织，接种后分裂形成愈伤组织，接种后25 d，若发，若发现外植体边缘局部污染，原因可能是现外植体边缘局部污染，原因可能是_。(3)在过程在过程中，愈伤组织在诱导生根的中，愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是原因可能是_。【解析解析】(1)因茎尖因茎尖(或根尖或根尖)病毒极少，病毒极少，甚至无病毒，所以常用其作为外植体培甚至无病毒，所以常用其作为外植体培育无病毒植株。育无病毒植株。(2)在植物组织培养的培养基中，除了在植物组织培养的培养基中，除了添加植物必需的矿质元素外，还要添加添加植物必需的矿质元素外，还要添加有机物，添加植物激素有利于启动细胞有机物，添加植物激素有利于启动细胞分裂实现脱分化形成愈伤组织并且可诱分裂实现脱分化形成愈伤组织并且可诱导愈伤组织细胞再分化过程。若对外植导愈伤组织细胞再分化过程。若对外植体消毒不彻底，会造成外植体边缘局部体消毒不彻底，会造成外植体边缘局部污染。污染。(3)在培养基中生长素与细胞分裂素的用在培养基中生长素与细胞分裂素的用量比值不同，诱导生根发芽结果不同，量比值不同，诱导生根发芽结果不同，当比值低时，有利于发芽，比值高时，当比值低时，有利于发芽，比值高时，有利于生根。有利于生根。【答案答案】(1)茎尖茎尖(或根尖或根尖)茎尖茎尖(或根尖或根尖)病毒极少，甚至无病毒病毒极少，甚至无病毒(2)有机物植物激素外植体消毒不彻底有机物植物激素外植体消毒不彻底(3)培养基中生长素类物质用量与细胞分裂培养基中生长素类物质用量与细胞分裂素类物质用量的比值偏低素类物质用量的比值偏低