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第二节 细菌的生理一、细菌生长繁殖条件1. 营养物质 水、碳源、氮源、生长因子等 2. pH 多数在7.27.63. 温度 最适温度374. 气体:CO2,O2 根据细菌对氧的要求不同将细菌分为四类: (1)专性需氧菌:结核杆菌 (2)微 需 氧 菌:幽门螺杆菌 (3)兼性厌氧菌:大多数病原菌 (4)专性厌氧菌:破伤风杆菌二、细菌生长繁殖的方式、速度及规律 1. 细菌个体的生长繁殖 二分裂方式繁殖 2. 细菌群体的生长繁殖 生长曲线: 培养时间为横坐标,细菌数目的对数为纵坐标 (1) 迟缓期:适应阶段,几乎不繁殖,代谢活跃,体积增大,积极合成各种酶类及代谢产物,为繁殖做准备。 (2) 对数期:研究细菌的生物学性状在此期 生物血特性典型,对外界因素的作用敏感 (3) 稳定期:细菌代谢产物多在此期产生 繁殖数与死亡数基本平衡 (4) 衰亡期:三、细菌的人工培养培养基由人工方法配制,专供微生物生长繁殖使用的营养物制品类型:按照用途:基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基按照物理形态:液体培养基、固体培养基、半固体培养基细菌在培养基中的生长现象 1.液体培养基: 菌膜生长 枯草芽胞菌混浊生长 大多数细菌沉淀生长 链球菌菌膜生长混浊生长沉淀生长2. 固体培养基:菌 落 菌 苔菌菌 落落菌菌 苔苔3.半固体培养基:无鞭毛有鞭毛培养基的用途v液体培养基:增菌v固体培养基:纯化,增菌v半固体培养基:动力检测,保种细菌人工培养的意义 1.在医学中的应用:诊断和治疗;细菌鉴定和研究;生物制品。 2.在工农业生产中的应用 :发酵等 3.在基因工程中的应用 :外源DNA的重组细菌代谢产物v(一)与致病性有关的代谢产物v(二)与治疗有关的代谢产物v(三)与鉴别细菌有关的代谢产物三、细菌的代谢产物及意义 (一)与致病性有关的代谢产物 1热原质(pyrogen) 菌体中细胞壁的脂多糖,大多是革兰氏阴性菌产生的。注入人或动物体内能引起发热反应,故名热原质特点:耐高温;去除方法:250干烤、蒸馏等 2毒素 内毒素 外毒素 3侵袭性酶 侵袭性酶 病原菌在代谢过程中合成的具有侵袭病原菌在代谢过程中合成的具有侵袭性的酶类,这些物质性的酶类,这些物质一般一般不损伤机体组织不损伤机体组织细胞,但能协助病原菌在机体内的定植、细胞,但能协助病原菌在机体内的定植、繁殖及扩散。繁殖及扩散。常见的侵袭性酶主要有透明常见的侵袭性酶主要有透明质酸酶、硫酸软骨素酶、链激酶、胶原酶质酸酶、硫酸软骨素酶、链激酶、胶原酶等。等。它们的共性是使机体组织结构疏松它们的共性是使机体组织结构疏松,通透性增强,从而有助于病原菌及其毒素通透性增强,从而有助于病原菌及其毒素迅速扩散。迅速扩散。(二)与治疗有关的代谢产物 1.抗生素 能抑制或杀死某些微生物或肿瘤细胞的物质。 2.维生素(三)与鉴别细菌有关的代谢产物 1.色素 水溶性和脂溶性 2.细菌素 具有抑菌作用的蛋白质,只对与细菌素的产生菌有近缘关系的细菌才有杀菌作用,抑菌范围窄,种和型特异性,用于细菌分型。 3.糖分解产物 糖发酵实验糖发酵实验 4.蛋白质分解产物 VP实验 H2S实验第三节 细菌的分布与消毒灭菌 一、细菌的分布(一)在自然界的分布水、空气、土壤(二)正常人体的分布 正常菌群:指存在于机体一定部位,具有一定的种类和数量,在正常条件下对机体有利无害的微生物群或细菌群。 作用:生物拮抗作用 生物屏障,阻止外来细菌入侵 营养作用;参与营养物质代谢,促进营养的消化与吸收, 免疫促进作用;刺激机体免疫系统发育成熟,增强防御能力 抗衰老作用;抑瘤作用。致癌物质转换为非致癌物质 条件致病菌:指正常菌群在某些非正常条件下(如机体免疫机能下降、使用抗菌药物、改变寄居部位等)也能导致机体致病。 菌群失调:指一定范围的正常菌群的种类和数量的比例发生失调。 菌群失调症:指因菌群失调所导致的临床症状,又称二重感染。 二、消毒灭菌 1.消毒: 杀死物体上病原微生物,针对繁殖体,不一定杀死芽胞 2.灭菌: 杀灭物体上所有微生物(病原微生物,非病原微生物,细菌芽孢) 3.防腐: 抑制或防止微生物繁殖 4.无菌:没有活的微生物存在。 5.无菌操作: 防止微生物进入机体或物体的方法 6.清洁: 减少微生物达到安全状态消毒灭菌的方法 1、物理灭菌法物理灭菌法温 度日光、紫外线滤过除菌电辐射超声波低温高温(热力)(1)热力灭菌 高温加热干热灭菌法干热灭菌法热空气为导热介质热空气为导热介质焚烧焚烧 烧灼烧灼干烤(干烤(160170/2h160170/2h)红外线红外线巴氏消毒法巴氏消毒法 低温、营养成分不被破坏低温、营养成分不被破坏煮沸法煮沸法 流动蒸气消毒法流动蒸气消毒法 间歇蒸气灭菌法间歇蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法 湿热灭菌法湿热灭菌法湿热灭菌法湿热灭菌法高温的水或水高温的水或水高温的水或水高温的水或水蒸气为导热介质蒸气为导热介质蒸气为导热介质蒸气为导热介质同一温度下,湿热比干热效果好 穿透力、受热均匀、水分多蛋白易变性,潜热v高压蒸汽灭菌法 在高压蒸汽灭菌器里进行,在蒸汽不外溢的情况下,随着灭菌器压力的增高,温度液逐渐上升。适用于耐高温、不怕潮湿的物品灭菌,如基础培养基手术器械。121121.3.3, , 15-3015-30分钟分钟 最常用、最有效最常用、最有效间接灭菌法间接灭菌法100100加热加热3030分钟(杀死繁殖体,为杀死芽孢)后分钟(杀死繁殖体,为杀死芽孢)后3737温箱过夜(芽孢繁殖),再于温箱过夜(芽孢繁殖),再于100100加热加热3030分钟,重分钟,重复复3 3次,可达灭菌效果。次,可达灭菌效果。适用于不耐高温的物品,适用于不耐高温的物品,如如含含有糖,鸡蛋,血清的培养基。有糖,鸡蛋,血清的培养基。(2)辐射杀菌法紫外线 杀菌作用与波长有关,200-300nm有杀菌作用 265266nm杀菌最强原理:细菌DNA吸收紫外线后,DNA构型发生改变,从而干扰DNA复制 ,导致细菌死亡局限性:穿透力弱,室内空气的消毒或物品表面的消毒 如手术室,微生物室 电离辐射 X、射线 原理:水分被解离为H+和OH-,为强烈的氧化剂和还原剂,可破坏细菌核酸,酶,蛋白质,是细菌死亡v(3)滤过除菌法 采取机械性阻流的方法,利用滤菌器除去液体或空气中细菌。滤菌器含有微细小孔,小于孔径物质可以通过,故可除菌。但衣原体、立克次体、病毒可以通过滤菌器。适用于不耐热、不能用化学方法消毒的液体。如血清等(4)超声波杀菌法 裂解细菌(5)干燥与低温抑菌法 使细菌脱水,蛋白变性,盐类浓缩,从而妨碍其代谢生长,繁殖。低温抑制细菌生长繁殖。 冷冻真空干燥保存菌种2、化学消毒灭菌法(外用)常用消毒剂的杀菌机制: 使菌体蛋白变性或凝固; 干扰微生物酶系统和影响其代谢; 损伤细胞膜或改变其通透性。类别类别作用机制作用机制常用种类常用种类酚类蛋白变性,细胞膜损伤石炭酸醇类蛋白变性乙醇氧化剂氧化、蛋白沉淀高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒重金属盐氧化、蛋白酶变性红汞、硫柳汞表面活性剂蛋白变性,细胞膜损伤新洁而灭染料干扰氧化、抑制繁殖龙胆紫酸碱类破坏膜、壁,蛋白凝固醋酸、生石灰烷化剂蛋白质、核酸烷基化环氧乙烷影响消毒灭菌效果的因素影响消毒灭菌效果的因素消毒剂的性质、浓度与作用时间消毒剂的性质、浓度与作用时间微生物的种类与数量微生物的种类与数量温度温度酸碱度酸碱度有机物有机物噬菌体v噬菌体是感染细菌,真菌等微生物的病毒。因部分噬菌体能引起宿主细胞裂解,故称噬菌体。其个体微小,结构简单,只含一种核酸,严格胞内寄生,复制方式繁殖。v感染过程:吸附、穿入、生物合成、装配、成熟、释放噬菌体在宿主菌体内的增殖过程 谢 谢!
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