化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究案例n湖南省武警总队n协和医院老干部体检-现有酶免技术普遍存在较高的假阳性及假 阴性缺陷化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究艾滋病实验室诊断技术分类n病毒培养n免疫学检测n核酸检测nCD4检测化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究诊断试剂的临床评价指标n灵敏度（sensitivity)n特异度（specificity)n阴性预期值（NPV）n阳性预期值（PPV）n重复性（reproducibility)n准确性（accuracy)n精确性（precision)化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究常见诊断方法缺点分析n细胞培养 不会出现假阳性 敏感性差，需P3实验室nP24抗原检测 易出现假阳性化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究常见诊断方法缺点分析n酶免抗体检测 易出假阳性，相对化学发光和时间分辨荧光免疫分析技术等更先进的分析方法，它的灵敏度比较低。 n抗原抗体联检 敏感度低，且易出假阳性nPCR检测 HIV基因的多样性，引物覆盖的局限性化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究HIV诊断试剂发展方向n提高检测的敏感性、特异性，缩短窗口期，简便、快速和降低成本已成为HIV检测技术发展的方向。 化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究影响免疫诊断试剂敏感度和特异性的关建要素n抗原抗体的活性、纯度及构像n酶标记物的效能n信号放大的效率n试剂盒反应体系的优劣n生产工艺的先进性化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究化学发光HIV诊断试剂提高灵敏度的技术策略n抗原改进化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究化学发光HIV诊断试剂提高灵敏度的技术策略n抗原改进 1、构像抗原代替线性抗原以增加流行病学敏 感度。 2、重组抗原结合肽抗原，以增加分析敏感度化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究化学发光HIV诊断试剂提高灵敏度的技术策略n标记物改进 长臂柔性，空间位阻n光子技术代替吸光度 极高的信号敏感n反应体系正交优化 pH、离子强度、温度、粘稠度n全自动恒低温包被技术化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究化学发光HIV诊断试剂提高特异性的技术策略npeptide代替BSA封闭n基于超敏的信号放大，降低P-P效应n基于高信噪比，适当提高阈值n包被板冷干燥工艺化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究CLIA和ELISA对HIV高危样本的检测结果对比-检出率方法学方法学敏感度敏感度特异度特异度总符合率总符合率CLIA100.00%(102/102）100%（170/170）100%（102+170/102+170）ELISA199.02%（101/102）97.06%(165/170)97.79%(266/272)ELISA298.04%（100/102）98.82%(168/170)98.53%(268/272)ELISA3100.00%(102/102)95.88%(163/170)97.43%(265/272)ELISA4100.00%(102/102)94.12%(160/170)96.32%(262/272)ELISA596.08%(98/102)100.00%(170/170)98.53%(268/272)化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究高危样品中阳性样品S/CO值得分析方法学方法学2.16.16.510.210.612.813.525.230.1100100.2CLIA0613203825ELISA1815295000ELISA2918274800ELISA31315423200化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究阳转血清盘的检测对比PanelBGDay1121723311716233549CLNRNRRRRNRNRNRRRREIANRNRNRRRNRNRNRNRNRRWBNEGNEGINDPOSPOSNEGNEGNEGINDPOSPOS化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究干扰性物质检测结果方法学方法学HCV抗体抗体RF高脂高脂溶血溶血CLIA0/100/150/121/20ELISA10/101/150/120/20ELISA22/100/150/120/20ELISA31/100/151/121/20化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究国内外HIV试剂可信度对比分析n“灰区”的困惑n可信度分析 国外可信度规定化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究国内外HIV试剂可信度对比分析n材料方法 1、样品：假阳性；假阴性；220份。 2、试剂：进口发光试剂OT、自制发光试剂 CL、EIA1、EIA2、EIA3。 3、方法：按说明书检测，不一致标本双孔复 试，不一致标本WB。 化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究国内外HIV试剂可信度对比分析n结果 1、220份样本中，真阳性50例，真阴性170例 试剂OTCLEIA1EIA2EIA3合计+ -+ -+ -+ -+ -真阳性50 050 049 150 047 350真阴性7 1634 166 8 1629 1617 163170合计57 16354 16657 16359 16154 166220化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究国内外HIV试剂可信度对比分析2、假阳性和假阴性S/CO分布 进口发光试剂OT 7份假阳性，其S/CO值均小于4.1;自制发光试剂CL 4份假阳性，其S/CO值均 小 于 3.6;EIA18份 假 阳 性 ， 其 S/CO值 在1.210.2; EIA2 9份 假 阳 性 其 S/CO值 在1.720.3 ；EIA3 7份假阳性，其S/CO值在1.816。 化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究国内外HIV试剂可信度对比分析试剂试剂假阳性假阳性S/CO值分布情况值分布情况进口发光进口发光OT4.1; 3.6; 2.7; 1.9; 1.6; 3.1; 2.1自制发光自制发光CL3.6; 2.8; 1.9; 3.2EIA11.2; 1.7; 2.5; 7.9; 3.5; 10.1; 9.5; 5.3EIA220.3; 5.6; 3.1; 1.8; 1.7; 1.7; 14.1;2.3; 6.5EIA31.8; 2.7; 2.1; 16.0; 3.5; 9.1; 2.5化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究国内外HIV试剂可信度对比分析假阴性样本S/CO分布EIA1：0.86EIA3：0.71; 0.82; 0.14化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究国内外HIV试剂可信度对比分析3、结论 （1）不同试剂盒设置不同的灰区标准。 （2）国产三代酶免试剂假阳性S/CO值的分散 性，使得灰区很难界定。 （3）进口和自制发光试剂假阳性S/CO值分别 小于4.1和3.6，便于划定可信度标准， 符合国际规范。化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究请到美丽威海来化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究请到美丽威海来化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究以下为附加内容不需要的朋友下载后可以编辑删除，谢谢以下为附加内容化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究让更多的农民成为新型职业农民中央农业广播电视学校中央农业广播电视学校 刘天金刘天金20130507 陕西化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究 农业部部长韩长赋： 这是一项基础性工程、创新性工作，要大抓特抓、坚持不懈。 让更多的农民成为新型职业农民（目标） 生产更多更好更安全的农产品供给社会（方向）化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究一、为什么要大力培育新型职业农民二、什么是新型职业农民三、如何加快培育新型职业农民化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究一、为什么要大力培育新型职业农民（一）深刻背景农村劳动力持续转移农村劳动力持续转移,“,“人走村空人走村空”问题愈演愈问题愈演愈烈烈 2012年我国农民工数量达到2.62.6亿亿，每年新增900-1000900-1000万万。四川抽样调查：26%26% 举家外出农户20%20% 留守农户转移比例平均60%60%，高的70-80%70-80% 化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究一、为什么要大力培育新型职业农民（一）深刻背景农农村村青青壮壮年年劳劳动动力力大大量量外外出出，“老老人人农农业业”“”“妇女农业妇女农业”“”“小学农业小学农业”问题日益凸显问题日益凸显陕西抽样调查：72%72% “80后”“90后”青壮年劳动力（农民工）5555岁岁 务农农民平均年龄63%63% 妇女83%83% 初中及以下文化程度化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究 四川抽样调查： 务农农民50岁以上54%，60岁以上30%，70岁以上13%； 妇女60%； 初中及以下90%。化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究一、为什么要大力培育新型职业农民（一）深刻背景农村新生劳动力离农意愿强烈，农业后农村新生劳动力离农意愿强烈，农业后继乏人问题步步紧逼继乏人问题步步紧逼新生代农民工76% 76% 不愿再回乡务农85% 85% 从未种过地（国家统计局2010年10省调查：90%的新生代农民工没有从事过一天的农业生产活动）化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究一、为什么要大力培育新型职业农民（二）紧迫课题“谁来种地谁来种地”“”“地如何种地如何种”？化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究党党的的十十八八大大：坚持和完善农村基本经营制度，构建集约化、专业化、组织化、社会化相结合的新型农业经营体系。国国务务院院常常务务会会议议：要采取有效措施，使一部分年轻人愿意在农村留下来搞农业，培养和稳定现代农业生产队伍。中中央央经经济济工工作作会会议议、中中央央农农村村工工作作会会议议：要稳定完善强农惠农富农政策，充分保护和调动农民生产经营积极性，使务农种粮有效益、不吃亏、得实惠。20132013年年中中央央一一号号文文件件：农村劳动力大量流动，农户兼业化、村庄空心化、人口老龄化趋势明显，农民利益诉求多元，加强和创新农村社会管理势在必行。十十二二届届全全国国人人大大一一次次会会议议（政政府府工工作作报报告告）：要采取有效措施，稳定农业生产经营队伍，积极培育新型农民。 聚焦聚焦“谁来种地谁来种地”“”“地如何种地如何种”化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究一、为什么要大力培育新型职业农民（二）紧迫课题“谁来种地”“地如何种”是一个问题的两个方面 农村劳动力结构性不足：“不是不是没人种地，而是这地由什么人来种没人种地，而是这地由什么人来种” 创新农业生产经营方式：“不是不是种不过来，而是怎么种得更好种不过来，而是怎么种得更好”化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究一、为什么要大力培育新型职业农民（三）历史使命回回答答好好“谁谁来来种种地地”“”“地地如如何何种种”的的问问题题，历历史史性性地地落落在在了了培培育育新新型型职职业业农农民民上。上。 2012年中央一号文件聚焦农业科技，着力解决农业生产力发展问题，明确提出大力培育新型职业农民；2013年中央一号文件突出农业经营体制机制创新，着力完善与现代农业发展相适应的农业生产关系，进一步强调加强农业职业教育和职业培训。化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究创新农业生产经营方式创新农业生产经营方式（现代）家庭经营+合作组织+社会化服务 =新型农业经营体系新型职业农民 新型生产经营主体 新型农业经营体系 现代农业化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究 新型职业农民新型职业农民是伴随农村生产力发展和生产关系完善产生的新型生产经营主体，是构建新型农业经营体系的基本基本细胞细胞，是发展现代农业的基本支撑基本支撑，是推动城乡发展一体化的基本力量基本力量。化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究一、为什么要大力培育新型职业农民（四）重大意义不失时机地大力培育新型职业农民： 一一是是有有利利于于促促进进农农民民从从身身份份向向职职业业的的转转变变，在推动城乡发展一体化中加快剥离“农民”的身份属性，使培育起来的新型职业农民逐步走上具有相应社会保障和社会地位的职业化路子，解决有人愿意在农村留下来搞农业的问题；化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究一、为什么要大力培育新型职业农民（四）重大意义不失时机地大力培育新型职业农民： 二二是是有有利利于于促促进进农农民民从从传传统统农农业业生生产产向向现现代代农农业业生生产产经经营营的的转转变变，在加大强农惠农富农政策力度中加快发展现代农业，使培育起来的新型职业农民逐步走上专业化、规模化、集约化、标准化生产经营的现代化路子，解决务农种粮有效益、不吃亏、得实惠的问题；化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究一、为什么要大力培育新型职业农民（四）重大意义不失时机地大力培育新型职业农民： 三三是是有有利利于于促促进进农农民民从从传传统统小小农农生生产产向向社社会会化化大大生生产产的的转转变变，在坚持和完善农村基本经营制度中加快培育新型生产经营主体，使培育起来的新型职业农民逐步走上“家庭经营+合作组织+社会化服务”新型农业经营体系的组织化路子，解决保供增收长效机制的问题。 化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究 培育新型职业农民的过程，就是激活农民自身活力和增强农业农村发展活力的过程，就是培养高素质现代农业和新农村建设者的过程，就是培育“三农”事业发展未来的过程。化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究农业部部长韩长赋农业部部长韩长赋 应对农业后继乏人问题的挑战，必须在稳定提高农业比较效益的基础上，大力培育种养大户、家庭农场、专业合作社等各类新型农业经营主体，让更多的农民成为新型职业农民。化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究世界性课题世界性课题比如在英国，农场主平均年龄达到59岁。 欧盟一直关注农民老龄化和培养青年农民问题，在CAP新一轮改革议案中提出，将2%的直接支付专门用于支持40岁以下的青年农民从事农业。化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究世界性课题世界性课题法国经验 统筹农村劳动力转留 加强农业后继者培养 重视农业劳动力教育培训化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究 切实把培育新型职业农民放在三农工作突出位置予以推动落实。农村劳动力向城镇和二三产业转移，是伴随现代化进程的必然趋势。目前我国农业劳动力供求结构已进入总量过剩与结构性、区域性短缺并存新阶段，关键农时缺人手、现代农业缺人才、新农村建设缺人力问题日显普遍，“谁来种地”“地如何种”事关13亿人的饭碗。化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究 各级农业部门要把培育新型职业农民作为一项重要职责和基本任务，积极争取当地政府和有关部门的重视支持，将其放在三农工作的突出位置，坚持“政府主导、农民主体、需求导向、综合配套”的原则，采取更加有力的措施加以推动落实，培养和稳定现代农业生产经营者队伍，壮大新型生产经营主体。化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究二、什么是新型职业农民（一）基本表述 传统农业向现代农业转型，必然要求传统农民向新型职业农民转变。从我国农村基本经营制度和农业生产经营现状及发展趋势看，新新型职业农民是指以农业为职业、具有一型职业农民是指以农业为职业、具有一定的专业技能、收入主要来自农业的现定的专业技能、收入主要来自农业的现代农业从业者。代农业从业者。化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究二、什么是新型职业农民（二）主要类型生产经营型：生产经营型：专业大户、家庭农场主专业技能型：专业技能型：农业工人、农业雇员等社社会会服服务务型型：农村信息员、农产品经纪人、跨区作业农机手、统防统治植保员、村级动物防疫员等农业社会化服务人员化学发光技术在艾滋病诊断中的应用研究