三三 、细菌染色法、细菌染色法:负染色 涂片涂片干燥干燥固定固定染色染色1min水洗、吸干镜检镜检简单染色制备涂片标本制备涂片标本染色染色步骤：结果: 阳性菌阳性菌紫色紫色 阴性菌阴性菌红色红色结晶紫初染碘液媒染乙醇脱色番红复染涂片固定由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年创立。革兰氏染色法（革兰氏染色法（Gram Stain）Figure 1 - A Gram stain of Gram + Staphylococcus cells. Figure 2 - Gram stain of Gram - E. coli cellsFigure染料染料碱性染料（碱性染料（basic dye）带正电染料。其阳离子部带正电染料。其阳离子部分为发色基团，可与细胞中带负电的组分结合。如分为发色基团，可与细胞中带负电的组分结合。如Crystal violet, Safranin, Methylene blue等。等。酸性染料（酸性染料（Acid dye）带负电染料。其阴离子部带负电染料。其阴离子部分为发色基团，可与细胞中带正电的组分结合。如分为发色基团，可与细胞中带正电的组分结合。如Eosin, Congo red , Acid fuchsin 等。等。脂溶性染料脂溶性染料如如Sudan black。 多数染料都是中性有机盐。据着色基的不同可分为以下类型：四、细菌的繁殖一般为无性繁殖，一般为无性繁殖，二分裂法。二分裂法。同同形形裂裂殖殖：裂裂殖殖后后形形成成的的子子细细胞大小相等。胞大小相等。异异形形裂裂殖殖：分分裂裂产产生生两两个个大大小小不等的子细胞。不等的子细胞。细菌分裂过程：细菌分裂过程：菌体伸长，核质体分裂菌体伸长，核质体分裂形成横隔壁形成横隔壁子细胞分离子细胞分离无性繁殖无性繁殖有性繁殖有性繁殖少数有菌毛的菌可少数有菌毛的菌可少数有菌毛的菌可少数有菌毛的菌可进进行有性繁殖行有性繁殖行有性繁殖行有性繁殖方式方式五、细菌的群体形态固体培养时的群体形态：固体培养时的群体形态： 菌落（菌落（colony) 单菌落单菌落（clone) 菌苔菌苔(lawn)culture plate液体培养时的群体形态液体培养时的群体形态： （一）种类（一）种类： 不同的微生物种类，其菌落特征不同。同一种菌在不同的微生物种类，其菌落特征不同。同一种菌在不同培养条件下菌落特征也不尽相同。不同培养条件下菌落特征也不尽相同。菌落菌落的特征的特征包括：包括：（二）（二）菌落菌落形态形态1 1、大小、大小2 2、颜色、颜色3 3、透明度、透明度4 4、表面状态、表面状态5 5、质地、质地6 6、边缘形态、边缘形态7 7、隆起形状、隆起形状（正面观）（正面观）Samples were taken from the numbered colonies and examined microscopically（三）影响菌落形态的因素（三）影响菌落形态的因素各种微生物在一定条件下形成的菌落，其形态特征有一定的稳定性和专一性，因而可以作为识别、鉴定菌种的一个依据，但也受某些因素的影响，观察时应加以注意。1、邻近菌落、邻近菌落2、培养时间、培养时间3、培养基成分、培养基成分4、培养温度、培养温度细菌菌落的特征细菌菌落的特征一般都较小，菌落与培养基结合不紧一般都较小，菌落与培养基结合不紧密，用接种针容易挑起，多数表面较密，用接种针容易挑起，多数表面较光滑、湿润、较粘稠，易挑取，质地光滑、湿润、较粘稠，易挑取，质地均匀，色泽多样。均匀，色泽多样。