微生物学实验微生物学实验酵母菌子囊孢子的观察酵母菌子囊孢子的观察水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验目的要求目的要求v学习并掌握酵母菌子囊孢子的观察方法学习并掌握酵母菌子囊孢子的观察方法水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验基本原理基本原理v子囊孢子是子囊菌类真菌有性生殖产生的有性子囊孢子是子囊菌类真菌有性生殖产生的有性孢子。孢子。v在酵母菌中在酵母菌中, ,能否形成子囊孢子及其形态是酵母能否形成子囊孢子及其形态是酵母菌分类鉴定的重要依据之一。菌分类鉴定的重要依据之一。v酵母菌形成子囊孢子需要一定条件，所以对不酵母菌形成子囊孢子需要一定条件，所以对不同属的酵母要选择适合形成子囊孢子的培养基。同属的酵母要选择适合形成子囊孢子的培养基。v麦氏培养基有利于酿酒酵母子囊孢子的形成。麦氏培养基有利于酿酒酵母子囊孢子的形成。水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验子囊孢子形成过程子囊孢子形成过程细胞（）细胞（）细胞（）细胞（）管状突起管状突起管状突起管状突起接触、融合接触、融合质配质配核配核配减数分裂减数分裂4或或8个子核个子核原生质结合原生质结合形成孢子壁形成孢子壁子囊孢子子囊孢子水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验图图1、S.cerevisiae（酿酒酵母）的生活史酿酒酵母）的生活史 引自周德庆微生物学教程引自周德庆微生物学教程水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验图图2、Schizosaccaromyces octsporus（八孢裂殖酵母）的生活史八孢裂殖酵母）的生活史 引自周德庆微生物学教程引自周德庆微生物学教程水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验图图3、Saccharomycodes ludwiggi（路德类酵母）的生活史路德类酵母）的生活史 引自周德庆微生物学教程引自周德庆微生物学教程水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验实验材料实验材料v菌种：菌种：酿酒酵母酿酒酵母v培养基：培养基：豆芽汁琼脂斜面豆芽汁琼脂斜面麦氏琼脂斜面麦氏琼脂斜面v溶液或试剂：溶液或试剂：5%5%的孔雀绿水溶液的孔雀绿水溶液0.5%0.5%的番红水溶液的番红水溶液95%95%的乙醇液。的乙醇液。v仪器或其他用具：仪器或其他用具：载玻片载玻片显微镜等。显微镜等。水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验实验方法实验方法v菌种活化菌种活化v产孢培养产孢培养v制片制片v染色染色v脱色脱色v复染复染v镜检镜检水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验实验结果实验结果v子囊孢子呈子囊孢子呈绿色绿色v菌体呈菌体呈粉红色粉红色v子囊呈子囊呈粉红色粉红色水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验菌种活化菌种活化酿酒酵母菌种酿酒酵母菌种用接种环无菌用接种环无菌挑取少许菌种挑取少许菌种2528 C培培养养24hr无菌操作接种在无菌操作接种在新鲜麦芽汁斜面新鲜麦芽汁斜面新鲜麦芽汁斜面新鲜麦芽汁斜面连续转接种连续转接种3 3次次水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验产孢培养产孢培养活化酵母菌种活化酵母菌种用接种环无菌用接种环无菌挑取少许菌种挑取少许菌种2528 C培培养养1周周无菌接种在新鲜无菌接种在新鲜麦氏琼脂斜面上麦氏琼脂斜面上麦氏琼脂斜面麦氏琼脂斜面水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验常规制片常规制片生理盐水生理盐水 1、滴生理盐水、滴生理盐水 滴半滴生理滴半滴生理盐水在载玻盐水在载玻片中央片中央 挑取少量菌苔挑取少量菌苔与生理盐水混匀与生理盐水混匀均匀涂布均匀涂布2、涂片、涂片或电吹风吹干或电吹风吹干3、干燥、干燥室温自然晾干室温自然晾干水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验染色、脱色染色、脱色5%孔雀绿染液孔雀绿染液1、染色、染色滴加数滴孔滴加数滴孔雀绿染液在雀绿染液在菌膜上菌膜上 95%酒精脱色酒精脱色30s95%酒精酒精2、脱色、脱色水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验复复 染染0.5%番红水溶液番红水溶液1、滴番红水溶液、滴番红水溶液滴加数滴番红滴加数滴番红染液在菌膜上染液在菌膜上 复染复染30s2、水洗、水洗不要直接冲菌膜不要直接冲菌膜可从可从玻片反面冲洗玻片反面冲洗水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物学实验微生物学实验镜镜 检检或吸水纸吸干或吸水纸吸干1、干燥、干燥室温自然晾干室温自然晾干或电吹风吹干或电吹风吹干2、镜检、镜检显微镜操作程序显微镜操作程序油镜使用注意事项油镜使用注意事项水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH