显微镜的使用显微镜的使用(shyng)与细胞观察与细胞观察普通普通(ptng)生物学实验生物学实验第一页，共三十九页。1显微镜的使用与细胞观察目录目录(ml) 1生物学实验课的基本要求生物学实验课的基本要求 2实验目的实验目的 3实验用品实验用品 4实验内容实验内容n光学显微镜的使用练习光学显微镜的使用练习n制作并观察制作并观察(gunch)人口腔上皮细胞临时装片人口腔上皮细胞临时装片n制作并观察洋葱细胞临时装片制作并观察洋葱细胞临时装片 5生物绘图生物绘图第二页，共三十九页。2生物学实验课的基本生物学实验课的基本(jbn)要要求求n课前预习实验指导，主动参阅相关资料课前预习实验指导，主动参阅相关资料(zlio)。n准确理解老师对实验的要求。准确理解老师对实验的要求。n利用实验指导或相关资料完成实验。利用实验指导或相关资料完成实验。n实验操作一定要规范。实验操作一定要规范。n在实验过程中要认真观察，积极思考，并可在实验过程中要认真观察，积极思考，并可以与其他同学讨论。不做与实验无关的事。以与其他同学讨论。不做与实验无关的事。n训练自己独立实验的能力。训练自己独立实验的能力。n认真、规范、准时完成实验报告。认真、规范、准时完成实验报告。第三页，共三十九页。3实验实验(shyn)(shyn)目目的的n了解双目显微镜的基本构造了解双目显微镜的基本构造及其维护及其维护，掌握显，掌握显微镜的使用方法。微镜的使用方法。n学习临时装片制作的技术。学习临时装片制作的技术。n观察动、植物细胞临时装片，了解动、植物细观察动、植物细胞临时装片，了解动、植物细胞的基本结构胞的基本结构(jigu)(jigu)特点。特点。n学习生物绘图的基本方法。学习生物绘图的基本方法。第四页，共三十九页。4实验实验(shyn)(shyn)用用品品n材料材料： 人口腔上皮细胞；洋葱（人口腔上皮细胞；洋葱（Allium cepa）鳞茎。）鳞茎。n器材和仪器器材和仪器(yq)： BK1000显微镜、投影仪、解剖器材、培养皿、烧杯、滴显微镜、投影仪、解剖器材、培养皿、烧杯、滴管、载玻片、盖玻片、擦镜纸、吸水纸、纱布、蒸馏水。管、载玻片、盖玻片、擦镜纸、吸水纸、纱布、蒸馏水。n试剂：试剂： 生理盐水、生理盐水、0.1%的亚甲基蓝溶液、的亚甲基蓝溶液、 I2KI溶液。溶液。第五页，共三十九页。5实验实验(shyn)(shyn)内内容容n显微镜的构造显微镜的构造(guzo)和使用和使用n临时装片的制作与观察临时装片的制作与观察1 1 制作并观察人口腔上皮细胞临时装片制作并观察人口腔上皮细胞临时装片2 2 制作并观察制作并观察洋葱洋葱细胞临时装片细胞临时装片第六页，共三十九页。6College of Life Sciences显微镜的构造显微镜的构造(guzo)和使和使用用第七页，共三十九页。7单目显微镜的结构单目显微镜的结构(jigu)第八页，共三十九页。81312 双目复式显微镜的构造双目复式显微镜的构造1.1.目镜目镜 2.2.止紧螺钉止紧螺钉 3.3.物物镜转换器镜转换器 4.4.物镜物镜 5.5.载物载物台台 6.6.聚光器（光栏调节聚光器（光栏调节(tioji)(tioji)杆）杆）7.7.聚光器调节螺聚光器调节螺旋旋 8.8.粗、细准焦螺旋粗、细准焦螺旋 9.9.镜座镜座 10.10.亮度调节开关亮度调节开关 11.11.标本片夹手柄标本片夹手柄 12.12.镜臂镜臂 13.13.纵横向移动手纵横向移动手轮轮11显微镜的构造显微镜的构造(guzo)图图显微镜的构造显微镜的构造(guzo)第九页，共三十九页。9机械机械(jxi)部部分分n显微镜的构造可分为保证成象的光学系统和用以安装显微镜的构造可分为保证成象的光学系统和用以安装光学系统的机械光学系统的机械(jxi)(jxi)部分。部分。n机械部分：机械部分：n镜座和镜柱：镜座和镜柱：n镜臂：镜臂：n镜筒：镜筒：n物镜转换器：物镜转换器：n载物台：载物台：n调节轮：大的为粗调节轮，小的为细调节轮，旋转一周镜调节轮：大的为粗调节轮，小的为细调节轮，旋转一周镜筒升降筒升降0.10.1毫米。毫米。第十页，共三十九页。10光学光学(gungxu)部部分分n光学部分包括物镜、目镜、聚光器、反光镜等。物镜和目镜直接参与显微镜的光学部分包括物镜、目镜、聚光器、反光镜等。物镜和目镜直接参与显微镜的成像，聚光器和反光镜起调节光强度和改变入射光的作用。成像，聚光器和反光镜起调节光强度和改变入射光的作用。n 物镜物镜：也叫接物镜（或镜头），它由：也叫接物镜（或镜头），它由15组透镜组成，其功能是聚集来自标本的光线，组透镜组成，其功能是聚集来自标本的光线，使标本第一次放大成一个倒立的实像。使标本第一次放大成一个倒立的实像。na放大倍数放大倍数：从：从3到到100，常用的低倍镜为，常用的低倍镜为10，高倍镜为，高倍镜为40，油镜头为，油镜头为100，放，放大倍数的计算方法：大倍数的计算方法：n物镜的放大倍数物镜的放大倍数=相当的光学筒长相当的光学筒长/物镜的焦距物镜的焦距n（光学筒长（光学筒长=物镜上焦点平面到目镜下焦点平面的距离）物镜上焦点平面到目镜下焦点平面的距离）nb工作距离工作距离：是指物镜最下面透镜的表面到盖玻片上表面之间的距离。物镜的放：是指物镜最下面透镜的表面到盖玻片上表面之间的距离。物镜的放大倍数越大，它的工作距离越小。低倍镜的工作距离为大倍数越大，它的工作距离越小。低倍镜的工作距离为6.5毫米，高倍镜为毫米，高倍镜为0.6毫米，毫米，而油镜头仅为而油镜头仅为0.2毫米，使用时要倍加注意。毫米，使用时要倍加注意。nC焦点深度焦点深度：指视野中垂直范围内所能清晰观察到的界限。在用不同倍数的物镜观：指视野中垂直范围内所能清晰观察到的界限。在用不同倍数的物镜观察物体时，所能看到垂直的清晰范围是不同的。物镜的倍数越大，焦点深度越浅。察物体时，所能看到垂直的清晰范围是不同的。物镜的倍数越大，焦点深度越浅。nD分辨力分辨力：是分辩被检物体细微结构的能力，也就是判别：是分辩被检物体细微结构的能力，也就是判别(pnbi)两个物体点之间最短距离两个物体点之间最短距离的本领。是衡量显微镜质量优劣的主要根据。分辨力与镜口率（又称数值孔径）关系很大，的本领。是衡量显微镜质量优劣的主要根据。分辨力与镜口率（又称数值孔径）关系很大，镜口率越大，分辩率越高，物镜的价值也越高。镜口率越大，分辩率越高，物镜的价值也越高。第十一页，共三十九页。11n 目镜目镜：也叫接目镜，其作用是将由物镜放大的倒立实像放大成一个正立的虚像。目镜仅：也叫接目镜，其作用是将由物镜放大的倒立实像放大成一个正立的虚像。目镜仅起放大物像的作用，并不增加显微镜的分辨力。一般目镜有数个，它的放大倍数分别是起放大物像的作用，并不增加显微镜的分辨力。一般目镜有数个，它的放大倍数分别是5，7，10，15等。等。n 聚光器聚光器：安装在载物台下，一般由：安装在载物台下，一般由23个凸透镜组成，上面的透镜是平面的。个凸透镜组成，上面的透镜是平面的。它的功用是收集从光源射来的平行光线，并汇集成光束，集中在一点，以增它的功用是收集从光源射来的平行光线，并汇集成光束，集中在一点，以增强照明度，再经过被检物体照射到物镜中去。利用齿轮和齿条升降，能调节强照明度，再经过被检物体照射到物镜中去。利用齿轮和齿条升降，能调节光线的强弱，使物像明晰。光线的强弱，使物像明晰。n 虹彩光圈虹彩光圈：装在聚光器之下，由一片压一片的铁片组成。调拔操纵杆可以改变光圈：装在聚光器之下，由一片压一片的铁片组成。调拔操纵杆可以改变光圈的大小，调节光线的强弱。有的显微镜在载物台下安装有盘光阑，它是一片有数个口的大小，调节光线的强弱。有的显微镜在载物台下安装有盘光阑，它是一片有数个口径大小不同并可转动的金属圆盘径大小不同并可转动的金属圆盘(yun pn)。它旋转时，可以调节下方反射来的光线强。它旋转时，可以调节下方反射来的光线强弱，以适于被检标本的要求。弱，以适于被检标本的要求。n 反光镜反光镜：安装在聚光器及虹彩光圈的下方。它可向各方向转动，它的作用是把光源：安装在聚光器及虹彩光圈的下方。它可向各方向转动，它的作用是把光源射出的光线反射至聚光器或通光孔。它分平、凹两面，凹面镜有聚光作用，在光源微射出的光线反射至聚光器或通光孔。它分平、凹两面，凹面镜有聚光作用，在光源微弱时使用，如光源充足则用平面镜。弱时使用，如光源充足则用平面镜。第十二页，共三十九页。12显微镜的成像原理显微镜的成像原理(yunl)第十三页，共三十九页。13显微镜的成像原理显微镜的成像原理(yunl)n其实普通的光学显微镜是根据凸透镜的成像原理，要经过凸透镜其实普通的光学显微镜是根据凸透镜的成像原理，要经过凸透镜的两次成像。第一次先经过物镜（凸透镜的两次成像。第一次先经过物镜（凸透镜1 1）成像，这时候的物）成像，这时候的物体应该在物镜体应该在物镜( (凸透镜凸透镜1 1）的一倍焦距和两倍焦距之间，根据物理）的一倍焦距和两倍焦距之间，根据物理学的原理，成的应该是放大的倒立的实像。而后以第一次成的物学的原理，成的应该是放大的倒立的实像。而后以第一次成的物像作为像作为“物体物体”，经过目镜的第二次成像。由于我们观察的时候，经过目镜的第二次成像。由于我们观察的时候(sh hou)(sh hou)是在目镜的另外一侧，根据光学原理，第二次成的像应该是在目镜的另外一侧，根据光学原理，第二次成的像应该是一个虚像，这样像和物才在同一侧。因此第一次成的像应该在是一个虚像，这样像和物才在同一侧。因此第一次成的像应该在目镜（凸透镜目镜（凸透镜2 2）的一倍焦距以内，这样经过第二次成像，第二次）的一倍焦距以内，这样经过第二次成像，第二次成的像是一个放大的正立的虚像。如果相对实物说的话，应该是成的像是一个放大的正立的虚像。如果相对实物说的话，应该是倒立的放大的虚像。倒立的放大的虚像。 第十四页，共三十九页。14阅读阅读 ：显微镜的机械：显微镜的机械(jxi)(jxi)结结构构n本显微镜的机械结构紧凑，精度较高。粗、微调机构集中在仪器的下方，重心较低，安放稳定。载本显微镜的机械结构紧凑，精度较高。粗、微调机构集中在仪器的下方，重心较低，安放稳定。载物台位于弧形镜臂上面，试样为复置安放，能胜任体积宽广的被观察物体。目镜管呈物台位于弧形镜臂上面，试样为复置安放，能胜任体积宽广的被观察物体。目镜管呈45倾斜，工作倾斜，工作者观察舒适。照明附设在圆形底盘内，便于移放。各部分构造分述如下，见图者观察舒适。照明附设在圆形底盘内，便于移放。各部分构造分述如下，见图19。n底座起支撑整个镜体的作用。为了防止震动，有的在底座上装有四只防震橡皮脚。底座起支撑整个镜体的作用。为了防止震动，有的在底座上装有四只防震橡皮脚。n照明照明7 照明设备装于底盘内，在底座内装有一低压（照明设备装于底盘内，在底座内装有一低压（68V，15W）灯泡作为光源，由变压器降压）灯泡作为光源，由变压器降压供电，靠调节次级电压（供电，靠调节次级电压（68V）来改变灯光的亮度，灯座具有偏心环，为调整光源后固定灯座于底）来改变灯光的亮度，灯座具有偏心环，为调整光源后固定灯座于底盘用。光源前有聚光镜组（一），反光镜及孔径光栏，安装在圆形底盘上，聚光镜组（二）及视场盘用。光源前有聚光镜组（一），反光镜及孔径光栏，安装在圆形底盘上，聚光镜组（二）及视场光栏安装在物镜支架上，它们组成显微镜的照明系统，使试样表面获得充分、均匀的照明。光栏安装在物镜支架上，它们组成显微镜的照明系统，使试样表面获得充分、均匀的照明。n粗动调焦装置粗动调焦装置6 粗动手轮安装在镜体齿轮箱的两侧，位置适合观察者手臂支撑于工作桌上操作。粗动手轮安装在镜体齿轮箱的两侧，位置适合观察者手臂支撑于工作桌上操作。手轮传动内部的齿轮，使支承载物台的弯臂作上下升降。在粗动手轮之一侧，附设有制动环，手轮传动内部的齿轮，使支承载物台的弯臂作上下升降。在粗动手轮之一侧，附设有制动环，用以紧固调焦正确用以紧固调焦正确(zhngqu)后的载物台位置，使不易受到偶然震动而变异，尤以用于显微照后的载物台位置，使不易受到偶然震动而变异，尤以用于显微照相时的必要有效装置。如需紧固载物台不动，可将制动环按右螺旋方向旋紧，如需再调节粗动相时的必要有效装置。如需紧固载物台不动，可将制动环按右螺旋方向旋紧，如需再调节粗动手轮，则必须先将此环以反方向旋松，否则易损坏机件。手轮，则必须先将此环以反方向旋松，否则易损坏机件。n图图19 XJB1 型金相显微镜外形结构图型金相显微镜外形结构图n微动调焦装置微动调焦装置5 微动手轮与粗动手轮同轴，用于使显微镜本体沿着滑轨缓慢移动。左侧的手微动手轮与粗动手轮同轴，用于使显微镜本体沿着滑轨缓慢移动。左侧的手轮上刻有分度，每分格表示微动升降轮上刻有分度，每分格表示微动升降0.002mm，机体齿轮箱刻有二条白线，贴连支架上有一条白线，机体齿轮箱刻有二条白线，贴连支架上有一条白线，是用以表示微动升降的极限范围，当微动手轮旋到极限位置时，微动手轮就自动被限制住，此时，应该倒是用以表示微动升降的极限范围，当微动手轮旋到极限位置时，微动手轮就自动被限制住，此时，应该倒转旋动使用，否则将会损坏机件。转旋动使用，否则将会损坏机件。第十五页，共三十九页。15第十六页，共三十九页。16显微镜的机械显微镜的机械(jxi)(jxi)结构结构n载物台载物台1 放置试样用的机械载物台是显微镜的重要部件。常见的载物台为圆形，位于镜架上方，放置试样用的机械载物台是显微镜的重要部件。常见的载物台为圆形，位于镜架上方，利于放置各种几何形状试样进行观察，移动结构采用粘性油膜与托架联结，托架与台面之间有利于放置各种几何形状试样进行观察，移动结构采用粘性油膜与托架联结，托架与台面之间有方形导架，引导载物台在水平面上一定范围内作十字方形导架，引导载物台在水平面上一定范围内作十字(sh z)定向移动，当移到极限位置时有限定向移动，当移到极限位置时有限止作用，避免载物台滑出托架之外。载物台必须牢固，不易发生震动；其工作台位置必须与显止作用，避免载物台滑出托架之外。载物台必须牢固，不易发生震动；其工作台位置必须与显微镜光轴垂直；载物台移动时试样的像应基本清晰。载物台有圆形和方形两种。一般备有能在微镜光轴垂直；载物台移动时试样的像应基本清晰。载物台有圆形和方形两种。一般备有能在水平面内作前后、左右和水平面内作前后、左右和360 度旋转的螺丝和刻度。载物台上还备有弹簧压片和场光圈。明场度旋转的螺丝和刻度。载物台上还备有弹簧压片和场光圈。明场用的玻璃场光圈有用的玻璃场光圈有13mm、21mm 和和27mm 三种；暗场用的金属场光圈有三种；暗场用的金属场光圈有10mm、15mm 和和20mm 三种。三种。n孔径光栏孔径光栏15 和视场光栏和视场光栏14 孔径光栏装在照明反光镜座上面，刻有孔径光栏装在照明反光镜座上面，刻有05 分划线，它为孔径分划线，它为孔径大小之毫米值。调整孔径光栏能够控制入射光束的粗细，以保证物像达到清晰的程大小之毫米值。调整孔径光栏能够控制入射光束的粗细，以保证物像达到清晰的程度。视场光栏装在物镜支架下面，其作用是控制视场范围，使目镜中视场明亮而无度。视场光栏装在物镜支架下面，其作用是控制视场范围，使目镜中视场明亮而无阴影。可以旋转滚花套圈来调节视场大小。在套圈上方有两颗滚花螺钉，用来调整阴影。可以旋转滚花套圈来调节视场大小。在套圈上方有两颗滚花螺钉，用来调整光栏中心与光轴重合。光栏中心与光轴重合。第十七页，共三十九页。17显微镜的机械显微镜的机械(jxi)(jxi)结构结构n物镜转换器物镜转换器3 这是快速更换物镜的装置。转换器呈球面形，上有三个螺孔符合互换性，可这是快速更换物镜的装置。转换器呈球面形，上有三个螺孔符合互换性，可安装不同放大倍数的物镜，旋动转换器可使各物镜镜头进入安装不同放大倍数的物镜，旋动转换器可使各物镜镜头进入(jnr)光路，与不同的目镜光路，与不同的目镜搭配使用，可获得各种放大倍数。当转换各物镜到光轴上时，有显著感觉的定位器定位。搭配使用，可获得各种放大倍数。当转换各物镜到光轴上时，有显著感觉的定位器定位。有不同类型的转换器。按安装物镜的孔数可分为两类，一类是用于低、中级金相显微镜有不同类型的转换器。按安装物镜的孔数可分为两类，一类是用于低、中级金相显微镜的转换器，有的转换器，有3 孔和孔和4 孔；另一类是用于高级金相显微镜的转换器，有孔；另一类是用于高级金相显微镜的转换器，有5 孔或孔或5 孔以上。按定位孔以上。按定位方式也可分为两类，一类是外定位转换器，定位搭子在上面，加工方便，但不够美方式也可分为两类，一类是外定位转换器，定位搭子在上面，加工方便，但不够美观；另一类是内定位转换器，定位搭子在里面，加工精度高，外形美观。物镜转换观；另一类是内定位转换器，定位搭子在里面，加工精度高，外形美观。物镜转换器有一固定座和一个转动搭子，中间排有钢珠以保证回转轻便。物镜转换器需保证器有一固定座和一个转动搭子，中间排有钢珠以保证回转轻便。物镜转换器需保证两方面的精度：一是定位精度，即各个物镜座孔的中心偏移量要尽量小；二是齐焦两方面的精度：一是定位精度，即各个物镜座孔的中心偏移量要尽量小；二是齐焦精度，即当一个物镜调焦在工作位置后，转换其他物镜时，应不需重新调焦或只许精度，即当一个物镜调焦在工作位置后，转换其他物镜时，应不需重新调焦或只许稍微调焦就能得到清晰的像。稍微调焦就能得到清晰的像。n目镜管目镜管11 呈倾斜呈倾斜45单管形式，接在装有棱镜的半球形镜座上，可随时拆卸或将目镜平单管形式，接在装有棱镜的半球形镜座上，可随时拆卸或将目镜平向转向转90（以便接合照相设备作金相照相之用）。（以便接合照相设备作金相照相之用）。n物镜物镜2 本显微镜的物镜为本型号显微镜专用的，除螺纹是按国家标准外，一般不适用本显微镜的物镜为本型号显微镜专用的，除螺纹是按国家标准外，一般不适用于其他显微镜，于其他显微镜，45及及100物镜筒设有防压弹簧，使前透镜万一触及试样时，不会因碰压而损坏物镜筒设有防压弹簧，使前透镜万一触及试样时，不会因碰压而损坏透镜，不同倍率物镜的镜筒上涂以不同颜色的环线，以示区别（例透镜，不同倍率物镜的镜筒上涂以不同颜色的环线，以示区别（例10紫色，紫色，45黄色，黄色，100白色）白色）。第十八页，共三十九页。18显微镜的成像原理显微镜的成像原理(yunl)n众所周知，放大镜是最简单的一种光学仪器，众所周知，放大镜是最简单的一种光学仪器， 它实际上是一块会聚透镜（凸透它实际上是一块会聚透镜（凸透镜），利用它可以将物体放大。其成像光学原理如图镜），利用它可以将物体放大。其成像光学原理如图1-1所示。所示。n当物体当物体AB 置于透镜焦距置于透镜焦距f 以外时，得到倒立的放大实像以外时，得到倒立的放大实像AB（如图（如图1-1（a），它的），它的位置在位置在2倍焦距以外。若将物体倍焦距以外。若将物体AB 放在透镜焦距内，就可看到一个放大正立的虚象放在透镜焦距内，就可看到一个放大正立的虚象AB（如图（如图1-1（b）。映象的长度与物体长度之比（）。映象的长度与物体长度之比（AB/AB）就是放大镜的放大）就是放大镜的放大倍数（放大率）。若放大镜到物体之间的距离倍数（放大率）。若放大镜到物体之间的距离a 近似等于透镜的焦距近似等于透镜的焦距(af)，而放，而放大镜到像间的距离大镜到像间的距离b 近似相当于人眼明视距离（近似相当于人眼明视距离（250mm），则放大镜的放大倍数为：），则放大镜的放大倍数为：N=b/a=250/fn由上式知，透镜的焦距越短，放大镜的放大倍数越大。一般采用由上式知，透镜的焦距越短，放大镜的放大倍数越大。一般采用(ciyng)的放大的放大镜焦距在镜焦距在10100mm 范围内，因而放大倍数在范围内，因而放大倍数在2.525倍之间。进一步提高放大倍倍之间。进一步提高放大倍数，将会由于透镜焦距缩短和表面曲率过分增大而使形成的映象变得模糊不清。为数，将会由于透镜焦距缩短和表面曲率过分增大而使形成的映象变得模糊不清。为了得到更高的放大倍数，就要采用显微镜，显微镜可以使放大倍数达到了得到更高的放大倍数，就要采用显微镜，显微镜可以使放大倍数达到15002000倍。倍。第十九页，共三十九页。19（a a）实实像像( (s sh h x xi i n ng g) )放放大大（b b）虚像）虚像(x xin)(x xin)放大放大第二十页，共三十九页。20显微镜的成像原理显微镜的成像原理(yunl)n显微镜不象放大镜那样由单个透镜组成，而是由两级特定透镜所组成。显微镜不象放大镜那样由单个透镜组成，而是由两级特定透镜所组成。靠近被观察物体的透镜叫做物镜，而靠近眼睛的透镜叫做目镜。借助靠近被观察物体的透镜叫做物镜，而靠近眼睛的透镜叫做目镜。借助物镜与目镜的两次放大，就能将物体放大到很高的倍数（物镜与目镜的两次放大，就能将物体放大到很高的倍数（20002000倍）。倍）。图图1-21-2所示是在显微镜中得到放大物像的光学原理图。所示是在显微镜中得到放大物像的光学原理图。n被观察的物体被观察的物体AB AB 放在物镜之前放在物镜之前(zhqin)(zhqin)距其焦距略远一些的位置，距其焦距略远一些的位置，由物体反射的光线穿过物镜，经折射后得到一个放大的倒立由物体反射的光线穿过物镜，经折射后得到一个放大的倒立实象，目镜再将实像放大成倒立虚像，这就是我们在显微镜实象，目镜再将实像放大成倒立虚像，这就是我们在显微镜下研究实物时所观察到的经过二次放大后的物像。下研究实物时所观察到的经过二次放大后的物像。n在设计显微镜时，让物镜放大后形成的实像位于目镜的焦距在设计显微镜时，让物镜放大后形成的实像位于目镜的焦距之内，并使最终的倒立虚像在距眼睛之内，并使最终的倒立虚像在距眼睛250mm 250mm 处成像，这时观察处成像，这时观察者看得最清晰。者看得最清晰。第二十一页，共三十九页。21图图1 1- -2 2 显显微微镜镜光光学学( (g gu u n ng gx xu u ) )原原理理图图第二十二页，共三十九页。22显微镜的成像原理显微镜的成像原理(yunl)n透镜成像规律是依据近轴光线得出的结论。近轴光线是指与光轴接近平行（即夹角很小）透镜成像规律是依据近轴光线得出的结论。近轴光线是指与光轴接近平行（即夹角很小）的光线。由于物理条件的限制，实际光学系统的成像与近轴光线成像不同，两者存在偏离，的光线。由于物理条件的限制，实际光学系统的成像与近轴光线成像不同，两者存在偏离，这种相对于近轴成像的偏离就叫做像差。像差的产生降低了光学仪器的精确性。按像差产这种相对于近轴成像的偏离就叫做像差。像差的产生降低了光学仪器的精确性。按像差产生原因可分为两类：一类是单色光成像时的像差，叫做单色像差。如球差、慧差、像散、生原因可分为两类：一类是单色光成像时的像差，叫做单色像差。如球差、慧差、像散、像场弯曲和畸变均属单色像差；另一类是多色光成像时，由于介质折射率随光的波长不同像场弯曲和畸变均属单色像差；另一类是多色光成像时，由于介质折射率随光的波长不同而引起的像差，叫做色差。色差又可分为位置色差和放大率色差。而引起的像差，叫做色差。色差又可分为位置色差和放大率色差。n透镜成像的主要缺陷就是球面差和色差（波长差）。球面差是指由于球面透镜的中心透镜成像的主要缺陷就是球面差和色差（波长差）。球面差是指由于球面透镜的中心部分和边缘部分的厚度不同，造成不同折射现象，致使来自于试样表面同一点上的光部分和边缘部分的厚度不同，造成不同折射现象，致使来自于试样表面同一点上的光线经折射后不能聚集于一点（图线经折射后不能聚集于一点（图1-31-3），因此使映像模糊不清。球面像差的程度与光通过透镜），因此使映像模糊不清。球面像差的程度与光通过透镜的面积有关。光圈放得越大，光线通过透镜的面积越大，球面像差就越严重；反之，缩小光圈，的面积有关。光圈放得越大，光线通过透镜的面积越大，球面像差就越严重；反之，缩小光圈，限制边缘光线射入限制边缘光线射入(sh r)(sh r)，使用通过透镜中心部分的光线，可减小球面像差。但光圈太小，也，使用通过透镜中心部分的光线，可减小球面像差。但光圈太小，也会影响成像的清晰度。色差的产生是由于白光中各种不同波长的光线在穿过透镜时折射率不同，会影响成像的清晰度。色差的产生是由于白光中各种不同波长的光线在穿过透镜时折射率不同，其中紫色光线的波长最短，折射率最大，在距透镜最近处成像；红色光线的波长最长，折射率最其中紫色光线的波长最短，折射率最大，在距透镜最近处成像；红色光线的波长最长，折射率最小，在距透镜最远处成像；其余的黄、绿、蓝等光线则在它们之间成像。这些光线所成的像不能小，在距透镜最远处成像；其余的黄、绿、蓝等光线则在它们之间成像。这些光线所成的像不能集中于一点，而呈现带有彩色边缘的光环。色差的存在也会降低透镜成像的清晰度，也应予以校集中于一点，而呈现带有彩色边缘的光环。色差的存在也会降低透镜成像的清晰度，也应予以校正。通常采用单色光源（或加滤光片），也可使用复合透镜。如图正。通常采用单色光源（或加滤光片），也可使用复合透镜。如图1-31-3所示。所示。第二十三页，共三十九页。23（a a）球面）球面(qimin)(qimin)像差像差 （b b）色差）色差图图1 1- -3 3透透镜镜( (t t u uj j n ng g) )产产生生像像差差的的示示意意图图第二十四页，共三十九页。24低倍镜、高倍低倍镜、高倍(o bi)镜、油镜的镜、油镜的使用使用n见光盘见光盘(un pn)。第二十五页，共三十九页。25光学光学(gungxu)(gungxu)显微镜的使用练显微镜的使用练习习n显微镜的使用主要包括两个显微镜的使用主要包括两个(lin )(lin )方面，光度和焦距的调节。按照下方面，光度和焦距的调节。按照下列步骤进行操作：列步骤进行操作：n检查亮度调节开关检查亮度调节开关 确保其处于最小值。接通电源，打开开关。确保其处于最小值。接通电源，打开开关。n低倍物镜下对光低倍物镜下对光 掌握通过亮度调节开关、聚光镜和虹彩光圈掌握通过亮度调节开关、聚光镜和虹彩光圈来调节视野亮度的方法。将视野调节得明亮而均匀后，转换成来调节视野亮度的方法。将视野调节得明亮而均匀后，转换成高倍物镜，注意观察视野亮度发生了什么变化？应该如何进行高倍物镜，注意观察视野亮度发生了什么变化？应该如何进行调整？调整？n取取“上上”字制片观察字制片观察 在低倍物镜下找到物像并使用聚焦器调在低倍物镜下找到物像并使用聚焦器调节至最清晰程度，观察到的放大节至最清晰程度，观察到的放大“上上”字是正的还是倒的？将字是正的还是倒的？将制片左移或右移，物像移动的方向是否与制片移动方向一致？制片左移或右移，物像移动的方向是否与制片移动方向一致？为什么？转换成高倍镜，为什么？转换成高倍镜，“上上”字的大小、位置和亮度发生了字的大小、位置和亮度发生了什么变化？什么变化？第二十六页，共三十九页。26n观察气泡观察气泡 在载玻片上滴一滴稀胶水，用解剖针搅拌使产生小在载玻片上滴一滴稀胶水，用解剖针搅拌使产生小的气泡，加盖玻片后在显微镜下观察。在显微镜下看到的气泡，的气泡，加盖玻片后在显微镜下观察。在显微镜下看到的气泡，其外围一黑圈，中间明亮。应该记住气泡在显微镜下的形象，其外围一黑圈，中间明亮。应该记住气泡在显微镜下的形象，在以后的实验中，不要把气泡误认为植物组织中的结构在以后的实验中，不要把气泡误认为植物组织中的结构 。 n观察浮游生物观察浮游生物 在载玻片上放一滴含有浮游生物的水，然后轻轻加上在载玻片上放一滴含有浮游生物的水，然后轻轻加上盖玻片。盖玻片一定要擦拭清洁，否则将影响观察。盖玻片。盖玻片一定要擦拭清洁，否则将影响观察。 先在先在10 10 物镜下观察浮游生物的游动情况，并试着移动载玻物镜下观察浮游生物的游动情况，并试着移动载玻片追踪浮游生物。最后在高倍物镜下观察，并改变光圈片追踪浮游生物。最后在高倍物镜下观察，并改变光圈(gungqun)(gungqun)的的大小，了解其对物像的影响。大小，了解其对物像的影响。 光学显微镜的使用光学显微镜的使用(shyng)练习练习第二十七页，共三十九页。27显微镜复原显微镜复原(f yun)n亮度调到最小再关电源亮度调到最小再关电源(dinyun)(dinyun)。n载物台降到最低。载物台降到最低。n低倍镜低倍镜(10(10倍倍) )转到垂直的位置。转到垂直的位置。n盖上显微镜套。盖上显微镜套。n显微镜上的拉杆始终保持拉开状态。显微镜上的拉杆始终保持拉开状态。第二十八页，共三十九页。28临时装片的制作临时装片的制作(zhzu)与观察与观察第二十九页，共三十九页。29制作并观察制作并观察(gunch)(gunch)人口腔上皮细胞临时人口腔上皮细胞临时装片装片n用牙签粗的一端，放在口腔里，轻刮口腔用牙签粗的一端，放在口腔里，轻刮口腔颊颊内几下内几下(注意不要注意不要用力用力(yng l)过猛，以免损伤颊部过猛，以免损伤颊部)。将刮下的白色粘性物。将刮下的白色粘性物薄而均匀薄而均匀地涂在载玻片上。加一滴地涂在载玻片上。加一滴0.9Nacl溶液溶液（不宜过多，恰在盖玻片（不宜过多，恰在盖玻片之下为宜），然后加盖玻片。先在低倍显微镜下观察。口腔上之下为宜），然后加盖玻片。先在低倍显微镜下观察。口腔上皮细胞常数个连在一起。由于口腔上皮细胞薄而透明，因此光皮细胞常数个连在一起。由于口腔上皮细胞薄而透明，因此光线需要线需要暗暗些。找到口腔上皮细胞后，将其放在视野中心，再转高些。找到口腔上皮细胞后，将其放在视野中心，再转高倍镜观察。口腔上皮细胞呈扁平多边形。试辨认细胞核、细胞质、倍镜观察。口腔上皮细胞呈扁平多边形。试辨认细胞核、细胞质、细胞膜。细胞膜。n若观察不清楚时，可在盖片一侧加一滴若观察不清楚时，可在盖片一侧加一滴0.1的亚甲蓝的亚甲蓝，另一侧，另一侧用条形吸水纸吸。如此，可使染液流入盖片下面，将细胞染成用条形吸水纸吸。如此，可使染液流入盖片下面，将细胞染成浅蓝色。核染色较深。浅蓝色。核染色较深。n染液不可加得过多，以免妨碍观察。染液不可加得过多，以免妨碍观察。第三十页，共三十九页。30n 细胞膜细胞膜细胞核细胞核细胞质细胞质人的口腔人的口腔(kuqing)上皮细上皮细胞胞第三十一页，共三十九页。31制作并观察制作并观察(gunch)洋葱细胞临时装洋葱细胞临时装片片 取片取片 n取一片干净的载玻片，用滴管在其中央加一滴蒸馏水。取一片干净的载玻片，用滴管在其中央加一滴蒸馏水。 装片装片 n取洋葱鳞茎，把它切成八瓣，剥下一片新鲜的肉质鳞叶，用刀片在其内表面划一个边取洋葱鳞茎，把它切成八瓣，剥下一片新鲜的肉质鳞叶，用刀片在其内表面划一个边长为长为5mm5mm的正方形，然后用镊子撕下正方形块内表皮，迅速将其置于载玻片上的正方形，然后用镊子撕下正方形块内表皮，迅速将其置于载玻片上的水滴中；如果内表皮发生卷曲，应细心用解剖的水滴中；如果内表皮发生卷曲，应细心用解剖(jipu)(jipu)针将它展平。针将它展平。 盖片盖片 n应该用镊子夹住盖玻片一侧，使盖玻片另一侧边缘与水滴边缘相接触，然后慢慢放下，直应该用镊子夹住盖玻片一侧，使盖玻片另一侧边缘与水滴边缘相接触，然后慢慢放下，直到放平为止，这样可使盖玻片下的空气逐渐被水挤出，以免产生气泡，影响观察效果。到放平为止，这样可使盖玻片下的空气逐渐被水挤出，以免产生气泡，影响观察效果。 观察观察 n将制好的装片放在显微镜载物台上，先用低倍物镜观察，注意视野中能容纳多少个表皮细将制好的装片放在显微镜载物台上，先用低倍物镜观察，注意视野中能容纳多少个表皮细胞以及细胞的大小胞以及细胞的大小? ? 后换高倍物镜，注意此时看到的细胞数目与大小有何变化？和在低倍后换高倍物镜，注意此时看到的细胞数目与大小有何变化？和在低倍镜下观察到的物像有何不同镜下观察到的物像有何不同? ? 为什么为什么? ? 你能识别出洋葱表皮细胞的基本结构吗你能识别出洋葱表皮细胞的基本结构吗? ?第三十二页，共三十九页。321、准备、准备(zhnbi)(1)(1)用洁净的纱布把载盖玻片和用洁净的纱布把载盖玻片和 擦拭擦拭(csh)(csh)干净。干净。(2)(2)把载玻片放在实验室台上把载玻片放在实验室台上, ,用吸管在载玻片的中央用吸管在载玻片的中央(zhngyng)(zhngyng)滴一滴清水滴一滴清水(3)(3)用镊子从洋葱鳞片叶内用镊子从洋葱鳞片叶内侧的表皮上侧的表皮上, ,撕一小块透明撕一小块透明薄膜薄膜.(4)(4)把撕下的薄膜浸入载玻片上的水把撕下的薄膜浸入载玻片上的水滴中滴中, ,用镊子把薄膜展平用镊子把薄膜展平. .(5)5)用镊子夹起盖玻片用镊子夹起盖玻片, ,使它的一边接触载使它的一边接触载玻片上的水滴玻片上的水滴, ,然后轻轻地盖在薄膜上然后轻轻地盖在薄膜上, ,避免盖避免盖玻片玻片 下出现气泡下出现气泡。第三十三页，共三十九页。33第三十四页，共三十九页。34生物生物(shngw)(shngw)绘图绘图的基本要的基本要求求n科学性和准确性。科学性和准确性。 绘生物图不同于一般的美术创作，必须具有高度的科学性和准确性。必须绘生物图不同于一般的美术创作，必须具有高度的科学性和准确性。必须认真观察要画的对象认真观察要画的对象切片或标本等，学习与之有关的文字记载及描述，正确理解了切片或标本等，学习与之有关的文字记载及描述，正确理解了各部分的特征，选出正常的典型材料，才能在绘图时保证形态结构的准确性。各部分的特征，选出正常的典型材料，才能在绘图时保证形态结构的准确性。n点、线要清晰流畅。点、线要清晰流畅。 线条要一笔画出，粗细均匀，光滑清晰，接头处无分叉和重线条痕迹，切忌重复线条要一笔画出，粗细均匀，光滑清晰，接头处无分叉和重线条痕迹，切忌重复描绘。一般用圆点衬阴，表示明暗和颜色的深浅，给予立体感。点要圆而整齐，大小均匀，根据需要灵描绘。一般用圆点衬阴，表示明暗和颜色的深浅，给予立体感。点要圆而整齐，大小均匀，根据需要灵活掌握疏密活掌握疏密(sh m)变化，不能用涂抹阴影的方法代替圆点。变化，不能用涂抹阴影的方法代替圆点。n比例要正确。比例要正确。绘图要按生物各器官、组织以及细胞等各部构造原有比例绘出，绘放大的绘图要按生物各器官、组织以及细胞等各部构造原有比例绘出，绘放大的解剖图或形态图时，最好要注明放大的倍数，也可以用单位短线表示出长度。倍数一解剖图或形态图时，最好要注明放大的倍数，也可以用单位短线表示出长度。倍数一般以长度的比例为准。般以长度的比例为准。n突出主要特征。突出主要特征。生物学绘图中允许重点描绘生物的主要形态特征而其他部分可仅绘出轮廓，以表示其生物学绘图中允许重点描绘生物的主要形态特征而其他部分可仅绘出轮廓，以表示其完整性。完整性。n图纸及版面要保持整洁。图纸及版面要保持整洁。 绘图完成后，图纸及版面要整洁清晰。绘图完成后，图纸及版面要整洁清晰。n准确的标注。准确的标注。 图注一律用正楷书写，要求用水平的直线引出，最好在图的右侧，必须整齐一致。图图注一律用正楷书写，要求用水平的直线引出，最好在图的右侧，必须整齐一致。图及图注一律要求用铅笔，通常用及图注一律要求用铅笔，通常用2H或或3H铅笔，不要用钢笔、有色水笔或圆珠笔。图题写在图的铅笔，不要用钢笔、有色水笔或圆珠笔。图题写在图的下方。下方。第三十五页，共三十九页。35生物绘图生物绘图(hu t)的一般步骤的一般步骤n构图。构图。根据所要表达生物材料的内容要求，设计好所要绘制的各个部分各自所占根据所要表达生物材料的内容要求，设计好所要绘制的各个部分各自所占位置，避免因画面设计不合理造成排列的混乱与失衡，影响绘图的质量。位置，避免因画面设计不合理造成排列的混乱与失衡，影响绘图的质量。n先绘草图再绘成图。先绘草图再绘成图。用尖的软铅笔（用尖的软铅笔（HB）轻轻地在图纸上勾画出图形轮廓的草图，以）轻轻地在图纸上勾画出图形轮廓的草图，以便于修改。勾画时，要注意对照观察所画轮廓大小是否便于修改。勾画时，要注意对照观察所画轮廓大小是否(sh fu)与实物相符合。正式绘制与实物相符合。正式绘制时要用时要用2H或或3H的绘图硬铅笔，按顺手的方向动笔，描出与物体相吻合的线条。线条要均的绘图硬铅笔，按顺手的方向动笔，描出与物体相吻合的线条。线条要均匀，最好一次成图，不绘重线，以免模糊。匀，最好一次成图，不绘重线，以免模糊。n概绘全图、细绘局部。概绘全图、细绘局部。在绘生物的宏观解剖图时要先绘全形图，后绘部分的解剖图。边在绘生物的宏观解剖图时要先绘全形图，后绘部分的解剖图。边解剖观察，边描绘作图，严格地按一定次序解剖绘图。解剖观察，边描绘作图，严格地按一定次序解剖绘图。n绘轮廓时可采用各种辅助方法。绘轮廓时可采用各种辅助方法。 如比例尺、坐标纸及实物测量等。如果绘的图是要如比例尺、坐标纸及实物测量等。如果绘的图是要出版或发表的，则还需要用绘图笔细致地描在硫酸纸上，或直接用电脑绘图。出版或发表的，则还需要用绘图笔细致地描在硫酸纸上，或直接用电脑绘图。第三十六页，共三十九页。36思考题思考题 1、绘图，并标明各部分结构名称及图形名称、绘图，并标明各部分结构名称及图形名称.n人口腔上皮细胞人口腔上皮细胞(绘绘23个细胞，详绘其中个细胞，详绘其中1个个)。n洋葱表皮细胞。洋葱表皮细胞。 (绘绘23个细胞，详绘其一个细胞，详绘其一)。 2、写出正确、写出正确(zhngqu)使用显微镜的步骤。使用显微镜的步骤。 3、 简述生物绘图的方法和要求。简述生物绘图的方法和要求。 4、依据实验情况，讨论并总结：、依据实验情况，讨论并总结：n动、植物细胞的特点。动、植物细胞的特点。n使用显微镜的注意事项。使用显微镜的注意事项。n为什么在显微镜下观察气泡时，会有黑圈出现？为什么在显微镜下观察气泡时，会有黑圈出现？n说明在高倍物镜下观察浮游生物时，改变光圈大小对物像的影响。说明在高倍物镜下观察浮游生物时，改变光圈大小对物像的影响。第三十七页，共三十九页。37第三十八页，共三十九页。38显微镜的使用与细胞观察内容(nirng)总结显微镜的使用与细胞观察。了解双目显微镜的基本构造及其维护，掌握显微镜的使用方法。显微镜的构造可分为保证(bozhng)成象的光学系统和用以安装光学系统的机械部分。物镜的放大倍数越大，它的工作距离越小。调拔操纵杆可以改变光圈的大小，调节光线的强弱。如果相对实物说的话，应该是倒立的放大的虚像。为了得到更高的放大倍数，就要采用显微镜，显微镜可以使放大倍数达到15002000倍。像差的产生降低了光学仪器的精确性第三十九页，共三十九页。显微镜的使用与细胞观察