医院感染微生物学医院感染微生物学检测前言前言随着现代化医学科学的开展，诊断和治疗手法不断提高，新技术、新疗法不断推陈出新，导管、插管、内镜等侵袭性操作不断添加和抗生素的广泛运用等，使医院感染在当前世界各国的医院中均有不同程度的发生，并呈日益增多的趋势。前言前言医院感染的预防与控制是当今医疗机构面临的艰苦挑战，关系到医疗质量和病人的平安，已成为全球关注的突出的公共卫生课题。医院感染管理是医院管理的重要组成部分，表达医疗机构的管理程度，遭到国内外医院管理者和宽广医务人员的高度注重和关注。 医院感染的定义医院感染的定义是指住院病人在医院内获得的感染，包是指住院病人在医院内获得的感染，包括在住院期间发生的感染和在医院内获括在住院期间发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染，但不包括入院前得出院后发生的感染，但不包括入院前已开场或者入院时已处于埋伏期的感染。已开场或者入院时已处于埋伏期的感染。医院任务人员在医院内获得的感染也属医院任务人员在医院内获得的感染也属医院感染。医院感染。医院感染的分类医院感染的分类1 1、内源性感染本身感染：指免疫机能低下病人由本身、内源性感染本身感染：指免疫机能低下病人由本身正常菌群引起的感染。即病人在发生医院感染之前已是病原正常菌群引起的感染。即病人在发生医院感染之前已是病原携带者，当机体抵抗力降低时引起本身感染。携带者，当机体抵抗力降低时引起本身感染。2 2、外源性感染：指由环境或他人处病人、带菌者、任务、外源性感染：指由环境或他人处病人、带菌者、任务人员、探视者、陪护者获得而引起的直接感染。环境感染人员、探视者、陪护者获得而引起的直接感染。环境感染由污染的环境空气、水、医疗器具及其他物品呵斥的感染。由污染的环境空气、水、医疗器具及其他物品呵斥的感染。如手术室空气污染呵斥病人术后切口感染，注射器灭菌不严如手术室空气污染呵斥病人术后切口感染，注射器灭菌不严厉引起的乙型肝炎流行等。厉引起的乙型肝炎流行等。 医院感染医院感染监测监测内容内容 医院空气微生物学医院空气微生物学医院空气微生物学医院空气微生物学监测监测监测监测 物体外表微生物学物体外表微生物学物体外表微生物学物体外表微生物学监测监测监测监测 消毒消毒消毒消毒剂剂剂剂微生物学微生物学微生物学微生物学监测监测监测监测 医医医医务务务务人人人人员员员员手微生物学手微生物学手微生物学手微生物学监测监测监测监测 灭灭灭灭菌效果生物菌效果生物菌效果生物菌效果生物监测监测监测监测 医医医医疗疗疗疗器械消毒效果器械消毒效果器械消毒效果器械消毒效果监测监测监测监测 医医医医疗疗疗疗用水的微生物学用水的微生物学用水的微生物学用水的微生物学检测检测检测检测 空气微生物医院学空气微生物医院学监测监测 采采样时间样时间消毒后 操作前1、采用干净技术净化空气的房间 干净系统自净后 、操作前2、未采用干净技术净化空气的房间、 消毒、通风换气后 、操作前3、疑心空气与医院感染迸发有关时监测方法方法沉降法沉降法 重力沉降平板沉降法重力沉降平板沉降法 浮游菌浮游菌测测定法定法 撞撞击击式空气微生物采式空气微生物采样样法法 离心式空气微生物采离心式空气微生物采样样法法 洗刷式空气微生物采洗刷式空气微生物采样样法法 过滤过滤空气微生物采空气微生物采样样法法 温差空气微生物采温差空气微生物采样样法法 静静电电或冲或冲击击空气微生物采空气微生物采样样法法未用干未用干净技技术净化空气的房化空气的房间： 平板暴露法采平板暴露法采室内面室内面积 30m2 设内、外、中内、外、中对角角线3点点 内、外点内、外点间隔隔墙壁壁1m处室内面室内面积30m2 设四角及中央共四角及中央共5点点 四角四角间隔隔墙壁壁1m处室内面室内面积 30m2室内面室内面积30m2采用干采用干净技技术净化空气的房化空气的房间 1、平板暴露法 2、空气采样器法参照GB50333-2019医院干净手术部建筑技术规范手手术区：手区：手术台及其周台及其周围的区域的区域 级级手手术术室室 ( (手手术术区百区百级级，周，周围围千千级级 ：手：手术术台两台两侧边侧边至少各至少各外推外推0.9m0.9m，两端至少各外推，两端至少各外推0.4m0.4m后后 包括手包括手术术台台 的区域的区域 级级手手术术室室 ( (手手术术区千区千级级，周，周围围万万级级 ： 手手术术台两台两侧边侧边至少各至少各外推外推0.6m0.6m，两端至少各外推，两端至少各外推0.4m0.4m后后 包括手包括手术术台台 的区域的区域 级级手手术术室室 手手术术区万区万级级，周，周围围十万十万级级 ：手：手术术台四台四边边至少各外至少各外推推0.4m0.4m后后 包括手包括手术术台台 的区域的区域 级级手手术术室室 三十万三十万级级 ：不分手：不分手术术区和周区和周边边区区干干净手手术区平板暴露法布点表示区平板暴露法布点表示图部分百部分百部分百部分百级级周周周周围围千千千千级设级设置置置置13131313点点点点部分千部分千部分千部分千级级周周周周围围万万万万级设级设置置置置9 9 9 9点点点点部分万部分万部分万部分万级级周周周周围围十万十万十万十万级设级设置置置置7 7 7 7点点点点部分十万部分十万部分十万部分十万级级周周周周围围三十万三十万三十万三十万级设级设置置置置5 5 5 5点点点点操作方法操作方法将平皿直径9cm放置在采样点处采样高度间隔地面80-150cm采样时将平皿盖翻开、扣放于平板旁正确操作错误操作放置时间未采用干净技术净化空气的房间类环境暴露15min 类环境暴露5min采用干净技术净化空气的房间暴露30min采样后盖好平皿盖子 记录科室、房间、采样人、采样时间将平皿倒置放于托盘内附化验单采样平皿尽快送至实验室培育 假设疑心与医院感染有关时 进展目的微生物检测正确放置方法错误放置方法平板暴露法采平板暴露法采样本卷本卷须知知 采采样样前封前封锁门锁门窗窗 无人走无人走动动的情况下的情况下 静止静止1010分分钟钟后采后采样样 布点布点应应尽量避开高效送尽量避开高效送风风口正下方口正下方 放置培育皿放置培育皿时时 应应从最里面的房从最里面的房间间或房或房间间的最里面开的最里面开场场布点依次向外、最后人布点依次向外、最后人员员撤出撤出 搜集培育皿搜集培育皿时时 从最外面的房从最外面的房间间或房或房间间的最外面开的最外面开场场、最先布的点最后收最先布的点最后收 对对采采样样人人员员的要求的要求着无菌的任务服、戴口罩、帽子操作前洗手或手卫生所带物品清洁后方可带入手臂及头部不可越过翻开的培育皿上方行动及放置动作要轻尽量减少对空气流动形状的影响每次采样人员不得超越2人 医院物体外表医院物体外表 消毒效果的消毒效果的监测监测采采样时间 消毒后消毒后1、消毒、消毒处处置后置后2、疑心与医院感染迸、疑心与医院感染迸发发有关有关时时 采采样样方法方法 5cm 5cm5cm 5cm灭灭菌菌规规格板格板 放在被放在被检检物体外表物体外表 用蘸有用蘸有0.03mol/L0.03mol/L磷酸磷酸盐缓盐缓冲液冲液 PBSPBS 或生理或生理盐盐水的棉拭子水的棉拭子1 1支支 在在规规格板内横格板内横竖竖往返各涂擦往返各涂擦5 5次次 并随之并随之转动转动棉拭子，延棉拭子，延续续采采样样4 4个个规规格板格板 面面积积，被采外表，被采外表100cm2100cm2，取全部面，取全部面积积 被采被采样样外表外表100cm2100cm2，取，取100cm2100cm2 剪去手接触部分将棉拭子投入装有剪去手接触部分将棉拭子投入装有10ml10ml 无菌无菌检测检测用洗脱液的用洗脱液的试试管中送管中送检检 门门把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体外表采把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体外表采样样 采采样样物体外表有消毒物体外表有消毒剂剂残留残留时时 采采样样液液应应含有相含有相应应中和中和剂剂 记录(检验恳求单科室 房间 、何种物体外表、何种消毒剂采样人采样时间采样终了后送至实验室合格合格规范范 、类类区域：区域： 细细菌菌落菌菌落总总数数5cfu/cm25cfu/cm2 类类区域：区域： 细细菌菌落菌菌落总总数数10cfu/cm210cfu/cm2 不得不得检检出致病微生物出致病微生物疑心与医院感染迸疑心与医院感染迸发发有关有关时时， 进进展目的微生物的展目的微生物的检测检测 消毒液染菌量消毒液染菌量监测监测采采样方法方法用无菌注射器汲取消毒液用无菌注射器汲取消毒液1ml1ml参与参与9ml9ml相相应应中和中和剂剂中中充分振充分振荡荡混匀混匀注明科室、何种消毒注明科室、何种消毒剂剂、开启日期、批号、采、开启日期、批号、采样样人以及采人以及采样样日期日期采采样终样终了后送至了后送至实验实验室室中和剂中和剂醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和。含氯、碘和过氧化物消毒剂用0.1%硫代硫酸钠中和剂。洗必泰、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温80和0.3%卵磷脂中和剂。醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸中和剂。含有外表活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中参与吐温80至3%。合格规范灭菌剂染菌量 0cfu/ml皮肤黏膜消毒剂染菌 10cfu/ml消毒剂染菌量 100cfu/ml疑心与医院感染迸发相关时进展目的微生物检测医务人员手卫生 效果的监测遵照WS/T 313中华人民共和国卫生部行业规范 采采样时间样时间手卫生后接触病人或诊疗操作之前采样方法 棉拭子法棉拭子法 被被检检人人员员五指并五指并拢拢 用蘸有含相用蘸有含相应应中和中和剂剂的棉拭子的棉拭子 在双手手指屈面从指根到指尖往返涂擦在双手手指屈面从指根到指尖往返涂擦2 2次次 一只手的涂擦面一只手的涂擦面积约积约30cm230cm2 并随之并随之转动转动采采样样棉拭子棉拭子 剪去操作者手接触的部分剪去操作者手接触的部分 将棉拭子投入将棉拭子投入10ml10ml含相含相应应中和液的中和液的试试管中管中 化化验单书验单书写：将科室、采写：将科室、采样样地点、被采人、采地点、被采人、采样样人以及采人以及采样时间样时间填写清楚，送至填写清楚，送至细细菌室即可菌室即可采样步骤用棉拭子蘸取相应中和剂双手的屈指面，从指跟到指端；往返涂擦2次，同时转动棉签.将手接触的部分折断，投入10ml含相应中和剂的试管中合格规范 卫卫生手消毒：生手消毒： 细细菌菌落菌菌落总总数数10cfu/cm210cfu/cm2 外科手消毒：外科手消毒： 细细菌菌落菌菌落总总数数5cfu/cm25cfu/cm2 不得不得检检出致病微生物出致病微生物压力蒸汽灭菌效果的生物监测监测时间：每周一次指示菌株：嗜热脂肪芽胞杆菌 ATCC7953或SSIK31株培育基： 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培育基假设指示菌片中的细菌未被杀灭可分解培育基中的葡萄糖产酸使指示剂溴甲酚紫，由原来的紫色变成黄色，对看管为黄色灭菌合格仍为淡蓝色灭菌不合格为黄色结果判果判别灭菌合格：菌合格：检测管培育阴性管培育阴性阳性阳性对看管培育阳性看管培育阳性阴性阴性对看管培育阴性看管培育阴性灭菌不合格：菌不合格：检测管培育阳管培育阳性性阳性阳性对看管培育阳性看管培育阳性阴性阴性对看管培育阴性看管培育阴性将常将常规生物生物监测包放在包放在灭菌器最菌器最难灭菌的部位菌的部位同同时设阴、阳性阴、阳性对照照灭菌周期完成后菌周期完成后立刻将生物指示立刻将生物指示剂取出取出将将灭菌方法、菌方法、锅次、次、灭菌菌员、器械的去向、器械的去向以及以及灭菌菌时间填写清楚送填写清楚送细菌室菌室医 疗 器 械 消 毒 效 果 监 测 高度危高度危险险性医性医疗疗器械：器械： 进进入正常无菌入正常无菌组织组织、脉管系、脉管系统统或有无菌体液或有无菌体液如血液流如血液流过过，假，假设设被微生物被微生物污污染将染将导导致极高致极高感染危感染危险险的器材的器材 如手如手术术器械；穿刺器械；穿刺针针；腹腔；腹腔镜镜；活；活检钳检钳；牙；牙科手机及其配套器械；心科手机及其配套器械；心导导管；植入物等管；植入物等 消毒程度：到达消毒程度：到达灭灭菌菌 消毒效果：消毒效果：应应无菌生无菌生长长中度危中度危险险性医性医疗疗器械：器械： 直接、直接、间间接接触粘膜的器材接接触粘膜的器材 如胃如胃肠肠道内道内镜镜；气管；气管镜镜；喉；喉镜镜；体温表口；体温表口腔腔测测温表，肛温表，肛门测门测温表；呼吸机管道；麻醉温表；呼吸机管道；麻醉剂剂管道；管道；压压舌板；肛舌板；肛门门直直肠压肠压力丈量力丈量导导管等管等消毒程度：高程度消毒或中程度消毒消毒程度：高程度消毒或中程度消毒消毒效果：菌落数消毒效果：菌落数应应20cfu/20cfu/件、件、g g或或100cm2100cm2氧气湿化瓶、吸引器、氧气湿化瓶、吸引器、婴婴儿暖箱、加温加湿罐等儿暖箱、加温加湿罐等宜采用高程度消毒宜采用高程度消毒低度危低度危险险性医性医疗疗器械：器械： 仅仅与完好皮肤接触而不与粘膜接触的器材与完好皮肤接触而不与粘膜接触的器材 如听如听诊诊器；血器；血压计压计袖袖带带；病床；病床围栏围栏、床面以、床面以及床及床头头柜、被褥；柜、被褥；墙墙面；痰盂、尿面；痰盂、尿壶壶、便器等、便器等消毒程度：中程度消毒或低程度消毒或消毒程度：中程度消毒或低程度消毒或坚坚持日常持日常清清洁洁消毒效果：菌落数消毒效果：菌落数应应200cfu/200cfu/件、件、g g或或100cm2100cm2采样时间在消毒或灭菌处置后存放有效期内采样 内窥镜消毒灭菌效果的 生物监测采样时间消毒灭菌后运用前采样方法监测监测部位部位为为内内镜镜的内腔面的内腔面用无菌注射器抽取用无菌注射器抽取10ml10ml含有相含有相应应中和中和剂剂的洗脱的洗脱液液从待从待检检内内镜镜的活的活检检口注入内口注入内镜镜运用蠕运用蠕动泵动泵用无菌用无菌试试管从活管从活检检出口搜集注入的液体出口搜集注入的液体2h2h内送内送检检合格规范消毒内镜 细菌总数 20 cfu/件灭菌内镜 无任何细菌检出呼吸机麻醉机等螺纹管消毒效果生物监测采样时间消毒后运用前采样方法用蘸有相应中和剂的长柄棉签,在被检螺纹管内面反复涂擦并同时转动棉签,剪去手接触的部位,将棉签投入10ml含相应中和剂的 无菌生理盐水试管,立刻送检医疗用水的 细菌学检测 血液透析相关治疗用水的 细菌学监测根据YY 0572进展检测监测时间：初次运用监测应每周监测1次延续2次监测结果符合要求后改为每月1次采样点透析液进入血液透析器衔接处或尽能够接近此处采样方法用75%酒精擦拭采样口酒精自然风干后翻开采样口在透析液延续流动1min后用无菌试管接取样本3-4ml合格规范YY 0572进展检测。透析用水细菌总数 100 cfu/ml谢谢！