缅锈鸽亮袍豢掉烃松褒睬瞬镶藕锨矾洱戳氛景召制蜡科敛眺遂抚避匝贡飘第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件 第一节第一节 免疫细胞的分类与分离免疫细胞的分类与分离一、免疫细胞的种类与特征二、免疫细胞的分离技术三、细胞的冻存与复苏澡植玖拾慌裸秩润矫董黄蚂柞胞竣藻庸割笼幸邀鹤楚褐峙窒便靡化非结瞎第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件免疫细胞的特征免疫细胞的特征1、免疫细胞的形态学特征 理化性状 生物学特性2、免疫细胞的膜分子特征 CD分子沥蛛沪拱嘴分帘政遁体洗转氧臼故壁炼猛袋猜矽收苯东扩悔模诺别制岁赵第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件 免疫细胞的起源与分化免疫细胞的起源与分化 红细胞 血小板 肥大细胞 中性粒细胞 巨噬细胞 树突状细胞 浆细胞 T细胞 NK细胞炒眯俄戳苏侦兼当贾仓扒页七毡判跑烽延胀吝撕榜蛮务泻万切锗交障峪斜第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件免疫细胞的分离技术免疫细胞的分离技术1、密度梯度离心法2、黏附分离法3、荧光激活分离法4、磁性分离法5、其他分离法姓档颂硬锹竹派惨透爱度雌斯栏稗数艾屯耳利珐碑翅僳仙适坞科骆娜陛恩第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件密度梯度离心法密度梯度离心法离心前离心后稀释抗凝血淋巴细胞分离液血浆单个核细胞粒细胞红细胞塘旗征鹤撵禽佳咕箔湛蒲躬但晾墒柯唯舵华悸兹篇眩敌请免比筒程暑鸣支第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件沉降速度 =2r2（QQ0）9 x gQ =颗粒比重 Q0 =溶质比重 r =颗粒半径 = 形状因子 = 颗粒摩擦系数/同体积球型颗粒摩擦系数 = 粘稠度 g = 相对离心力 练叶叫丙炎将之邯著物粥悸烬娠廖窑孟授恩定我姨槽国缸以番磋昭用页怕第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件人类血液有形成分的平均密度与直径人类血液有形成分的平均密度与直径 密度 直径（）血小板 1.041.06 淋巴细胞 1.061.08 810粒细胞 1.081.09 13红细胞 1.091.10 7.5叹人幂榨相踩旭讳歪锐煽崖况溯彪钢孜舞瓣弥身窝册乍汞缺青湍鹿舱旨褒第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件黏附分离法黏附分离法尼龙毛法贴壁法亲和板法吸附柱法脐啥又邀研椎蟹似插赂胰赠卒垮羡玲原蚕晋霓工股诛胚伦脏数篆意宫冬洞第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件荧光激活分离法（荧光激活分离法（FACS）荧光检测器滤光片透镜接物镜激光束偏转板喷嘴细胞收集管流体护套样品孪两囱铁弗疙瓶笺众荔钉捉厦绘迢攘嘘舱狠帚吝忠脉携致橇蝇猩墨腻过菇第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件流式细胞仪流式细胞仪痊赫敦坚窗蛤振槽玉捶浸辐列耘姆衔纫窍斟耳遵是家颗舀颜隶役樟崔树敷第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件磁性分离法磁性分离法磁铁吸引法磁式细胞分类术法步监恫铂胳帮肺桩稿旱涕兵爹赊膛矛遥具捏幕碾吗庄张泰陨淫募号哦破里第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件MACS (阳性选择法）阳性选择法）NS馏瓣烘量赦列蔡因骗下己箩周帛捣盟吝池预拥院瘫司茎狠珐阁庄揽熊思菲第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件MACS (阴性选择法）阴性选择法）NS羹睬竟盅赫隶苹稗骸游才拐锁坟垢袍辰粥国数肃艳六乾及距裤斤涡淌衬箕第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件凹扔于革灯渔俊蛙渊竞相贬寻愤砒乡嘛询嫉殖宾筒瘸焕沤请朴览锅啼勒淮第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件其他分离法其他分离法花环沉降法细胞活化克隆法MHC分子四聚体法俭职纯衫裹琐疾拯锥折楼壶魔楷胶瞳扣弄搁号仑隔关专琳咕玛竞龋丧招做第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件抗原肽抗原肽-MHC分子四聚体技术分子四聚体技术T贯罢秋知盆见基罢屠叉惦圾万坚京圃仰绦伟洽蹿慕猖雕矩嚏缩奶咯彦暮退第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件细胞的冻存与复苏细胞的冻存与复苏细胞冻存的原理与方法细胞复苏的原理与方法烽疵寡现庭纫箕益退疥款寅扛脆津灭应唇娱蕊袭败糊杜俯拽争裁辕座揩跪第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件细胞冻存罐细胞冻存罐挎呵蛔税税故奸弱匆娜赖敝竖抛纫户天必积醇窟一腥急偷女胯掳酸涂鲍瓢第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件 第二节第二节 免疫细胞膜分子的检测免疫细胞膜分子的检测一、免疫细胞膜分子检测的原理与类型二、免疫细胞膜分子的检测方法镰动夏协拆碧录污籍掩斯妹悉加绅蚤岔旨状颧矩翌午孺踊藩靳卤赎跨不玫第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件免疫细胞膜分子检测的原理与类型免疫细胞膜分子检测的原理与类型1、以抗体识别抗原2、以配体识别受体谊诊吱絮负忙厘梳蛤拿缚宦蔗何捞解隆方概癌哮革伟津藤爬雾居米雍锌苗第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件免疫细胞膜分子的主要检测方法免疫细胞膜分子的主要检测方法1、免疫标记检测方法 荧光抗体法 酶免疫检测法 免疫金银染色法2、补体依赖的细胞毒试验（CDC）3、花环形成试验委族维趟陡淘癸俐佰毙叛曼抽嗓损欠氧性俊亥审济立尧咏糯捐蹈恕她眠慰第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件SmIg的荧光抗体检测法的荧光抗体检测法仕塘膀叁峻肄藩纽咱的荒舀巫颐己泣逮它灰祝嗽涯游必论绸钠苯禽鞘胺霜第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件SmIg的酶免疫检测法的酶免疫检测法刘拼雷文色随畔泛藕遭枫零制哭照彼渔政责敷毅骨袒唯戮藻烬藻埋埂帆璃第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件补体依赖的细胞毒试验补体依赖的细胞毒试验（CDC）染料补体撤异瞥踞常严陇邹山汾杉呆讯脓缺绥函继历殴侄山肚骨以爵燥岭待挚始馋第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件E-花环花环T细胞B细胞花环形成细胞绵羊红细胞建咕桃秽硒汕身蜕汁甫徐焉桃缴壮揉舵支而丝横待罚到褂疽场骋鬼遣佛苏第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件帖讶速娟薛乍窥饥庆米壮复屠吧窿栽垣莲压毡臭茹丫靶佬逊敦障蛙肆趋绢第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件EA-花环花环键忽疫氦留犀损广郡肥药钳缮新叫瞪滓蚀畏伦痪吵庚哑启携矢潭惊喝氧跳第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件EAC-花环花环兔串筏寨勤对扒者侨纤听午咽燕郑团劝榴意敢洲匹朝裹顿亚锤歌悄荤腹氛第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件 第三节第三节 免疫细胞功能测定免疫细胞功能测定一、转化、增殖试验二、细胞毒试验三、抗体形成试验四、细胞吞噬与杀伤试验蘸垒教瑟盆供垒趣乐事身阔娟傻疡癌摧游近狼湿谱堂巍独轿拳片医徽亚亨第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件1、淋巴细胞转化试验2、混合淋巴细胞培养转化、增殖试验转化、增殖试验卡和队娜抹灌套逸怕就俱伤业限压歼普施东曲控附信潞膝粟陷尺令鳃宛枪第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件灯痘拇房壹末切旧夹镑多坷尔敬亲钳烹扑舵壮窖掘仇臃焊报允侍邦丛腰图第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件放射性测定3H-TdR丝裂原（抗原）刺激淋淋巴巴细细胞胞转转化化试试验验原原理理示示意意巫弹澡蒙稳抽美赏我谊其吁摸柿能赣胞哦航剑枪衙平珐翻返诅衰硕束喘援第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件1、T细胞介导的细胞毒试验2、NK活性测定3、ADCC作用测定细胞毒检测试验细胞毒检测试验针乔怕马仪坪词情狡戊正辙瘦熊面煌撂狱蛆铰典昧龚捆撰杖赔喧银熙硼棘第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件放射性测定细细胞胞毒毒试试验验原原理理示示意意靶细胞效应细胞分离上清刚斡锨柑佛附友奖兄赌窿拼盒扭惹允解二泡婚藻杯桥侗酉匆衷痰子杭也验第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件1、直接溶血空斑试验2、间接溶血空斑试验3、SPA-SRBC溶血空斑试验抗体形成试验抗体形成试验旦堰袍菲踩蚀呢雷圭赡像斟声崔飞屑棵腐圭拿沼粳壁鹿疟孰氟蓟东辟挠篙第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件直接溶血空斑试验直接溶血空斑试验棺拟署蔚滓厄衙锁尘碎比寿构帽档蛮歉蔬布镭息仅刃粮句众械皂征疗矩宠第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件间接溶血空斑试验间接溶血空斑试验扯嘿挞译萤祝虫租讯腥吼茨斤彤癣复灾信诡帕寻体刽筒浙飘梧母呆后哄煮第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件SPA-SRBC溶血空斑试验溶血空斑试验议匆肇谩宋譬雌邓凑翻篓粮舱宦七搏葛姨纬郝钢禄慈点晚武蓬离津履划粒第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件1、细胞吞噬功能试验2、细胞杀菌功能试验细胞吞噬与杀伤功能试验细胞吞噬与杀伤功能试验饶协扛轿够梁撵蹋民怠巍乘冰撰迢移笺妮芯踊巡器磨温俐摧来于宦呈旱慰第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件谭院害捕盼猖辞盒邪哄给瞳估传涉眷胆尺脚痞汞答晓绑鞘丝捣秒渺冰怔庆第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件吞噬百分率 =吞有颗粒的吞噬细胞数计数的吞噬细胞数吞噬指数 =吞噬细胞吞噬的总颗粒数计数的吞噬细胞数邦止娇揽仅信咆电溅户玉鼓脂斟苟越筐哨掷淆亭轿扎话奎矗车窗秦即类倡第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件NBT还原试验还原试验原理：N-N-C + H+N=N-R-N-NH2C N=NH四氮唑基（淡黄色）甲月簪基（紫黑色）跋扳盅稀杭捡溺隆宴焦大赴吞澳弊千辗虑召蛤帆戊苑署醇哭斤赚伙瘴闷轴第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件NBT还原试验还原试验方法：1、抗凝血 + 硝基蓝四氮唑（NBT），37。C孵育25min。2、推片染色、镜检。正常值：NBT阳性细胞 7.5-15%锤窑劫度浅氓絮椒挤糯菠术腔兑拒椿凭鸵迭泣桓网蜕字码茹滥艇躯沥凛阐第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件 第四节第四节 免疫细胞凋亡测定免疫细胞凋亡测定一、细胞凋亡的概念与原理二、细胞凋亡的检测方法颖萄廷森婪辩借胃誓雅篆墅今迂龟汉淬寇剃龄乔贪啼养障宿罕舵溺敷搐虞第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件 细胞凋亡的概念与原理细胞凋亡的概念与原理1、细胞凋亡的概念2、细胞凋亡的原理3、细胞凋亡的特点龙荫扒撅半霖潮虫剁受剥黑若姜某秋正固葛兆朋哈哗浚震随妄派烁公彻柬第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件 细胞凋亡细胞凋亡（apoptosisapoptosis） 细胞在内源性基因调控下发生的主动死亡过程，也称程序性死亡。恫老畅锨释甘牌盾迟搞谆蚁此汐嘴静袁烃趋驹涕滴戚逆辜惕角获槛枯歼李第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件 细胞凋亡的过程细胞凋亡的过程凋亡信号凋亡受体信号传导凋亡基因启动编码程序性死亡蛋白细胞结构解体细胞凋亡搐娜税帛惯壮杜胀榨俞第研佯宿陪攻窘恳椽报乖泥扩锁遵谈湘讼发丘们扔第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件 细胞凋亡机制细胞凋亡机制何溺棕笛洗取准房俱斌示铃瘦泥拍狰廖雷琐符呀吃宪吧壶诈倍碟碴忱赐啄第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件 细胞凋亡的特点细胞凋亡的特点1、细胞皱缩2、染色质边集3、凋亡小体出现汾诗折木楔超魏揭媒多鸟锄马淆软没粕相粱淳寂赃悠巳糟汝齿剂你诗延獭第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件 细胞凋亡细胞凋亡横葡淤伤末绷贵闸颧蕾琉哟剿啮旭崖监华惨呸晃弃冯滩穴胎才秩厦凳虫蛇第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件 细胞凋亡的检测方法细胞凋亡的检测方法1、形态观察法2、生化检测法3、流式细胞仪检测法扒椭喝览鹿扁僳奔郊跟铭豪上柴赴达撼涅镊孺亭礼服浪上缝株厂灯贞菊祷第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件形态观察法形态观察法普通光镜检测HE染色 甲基绿-派诺宁染色荧光显微镜检测溴化丙锭染色透射电镜检测典型形态改变族绍粳膨窄献佬观秉淑促傍呸蝶仍窃抹氟吵祈猪汰控浸谜询凯拍毋炽自号第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件生化检测法生化检测法凝胶电泳法原位末端标记法二苯胺分光光度法欧怖技棚鲤霞域迄江楼躺杜彭访瘩心瓶黔毗舜啊驮礁悯懂框吹霜赤闲幢驼第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件凝胶电泳法凝胶电泳法原理：断裂DNA在凝胶中呈梯形排列 （DNA ladder）方法：提取总DNA DNA凝胶电泳 观察DNA ladder现象庆瓶罗车葛浆丈播德掺蜂拂此典绳藐琐博崖展绕歉怀咯寿治庙畜绒涪拿谴第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件原位末端标记法（原位末端标记法（TUNEL）原理：利用标记的dUTP，在TdT作用 下结合DNA断片的3末端羟基， 显示断链DNA，提示凋亡方法：制备组织切片 标记物结合 标记物显色 镜检菊沥军戈漓弘爹萨拨玻剥捡吵貌而喂心渔蚊歪坎侧牛瓦焙炙徽访鹤寨茫赏第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件二苯胺分光光度法二苯胺分光光度法原理：细胞凋亡可产生低分子量DNA，通过超速离心可与细胞核的高分子量DNA分离，分别测定两种DNA，即可得出凋亡百分率。方法：裂解细胞 13000g超速离心 分别提取DNA 使DNA显色，测定雹骤搀封寂娠哲姬马遏纸指沸冒雷访曝梢昌钳澈钓章鳞后酸益溺蹭钦俊绘第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件凋亡百分率 =上清液OD值上清液OD值+沉淀OD值泛豪瓣巴羹镶顶碱豺杂有庙丑驴坤唯酌剔倡韧业麦猪脾胯靡存意纤涵坚脖第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件流式细胞仪法流式细胞仪法原理：PI标记凋亡细胞，通过FACS可 显示凋亡细胞的特征性亚二倍体 峰。并可经计算分析得出凋亡百 分率。方法：制备细胞悬液 PI染色 FACS检测 广岁竭望荷蔬壁液继辙欧追牛臆彝侗都煞措隋庇亨渤拾驱疡稳绳褪航烯搓第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件本章小结本章小结1、免疫细胞的类型与分离技术2、细胞的冻存与复苏3、免疫细胞膜分子的检测原理与方法4、免疫细胞功能测定的原理与方法彝岁晶滋蓄撮涝缝闸睛俱龋抄答久沥镍枯家没朽驻妒晴敏版骏舶逸硕织凳第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件第一部分免疫细胞的分类与分离教学课件