实实 验验 四四 一、血沉测定一、血沉测定 二、二、HCT测定及贫血分类测定及贫血分类 三、三、Ret计数计数*四、红细胞平均直径测定四、红细胞平均直径测定一、血沉测定一、血沉测定n概念概念红细胞沉降率简称血沉（红细胞沉降率简称血沉（ESRESR），指在规定的条件下，），指在规定的条件下，离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率。离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率。血沉测定实际上是测量单位时间内红细胞下沉后血浆血沉测定实际上是测量单位时间内红细胞下沉后血浆段的距离。段的距离。临床意义临床意义n血沉测定对临床诊断有一定的参考价值，但并无特异血沉测定对临床诊断有一定的参考价值，但并无特异性。性。1、生理性增快：年龄（新生儿偏低，、生理性增快：年龄（新生儿偏低，50岁以上岁以上FIB ，ESR ）；性别（女大于男）；月经期、妊娠）；性别（女大于男）；月经期、妊娠3个个月以上，月以上， FIB ，ESR 2、病理性增高：、病理性增高：（1）动态观察病情变化（风湿热、结核病活动期）动态观察病情变化（风湿热、结核病活动期或静止期或静止期 ）；）；（2）良性肿瘤与恶心肿瘤鉴别的参考）良性肿瘤与恶心肿瘤鉴别的参考 （良性时多正常，恶性时多增快，晚期或转移明（良性时多正常，恶性时多增快，晚期或转移明显增快）；显增快）；（3）功能性病变与器质性病变的鉴别）功能性病变与器质性病变的鉴别 （心绞痛多正常，心肌梗死时增快（心绞痛多正常，心肌梗死时增快）3、血沉减慢：血沉减慢：真心红细胞增多症、低纤维蛋白原血症、充血性真心红细胞增多症、低纤维蛋白原血症、充血性心力衰竭、红细胞形态异常等。心力衰竭、红细胞形态异常等。影响因素影响因素1、RBC本身的因素（大小、形态、本身的因素（大小、形态、 HB含量含量）:大红细胞、红细胞贫血等2 、血浆因素：、血浆因素：Fbg 、CHOL、TG、r- Globulin、a、- Globulin均均ESR。3、药物、病毒、代谢物等均药物、病毒、代谢物等均ESR4、标本溶血、血沉管倾斜、温度过高标本溶血、血沉管倾斜、温度过高5、Albumin 、卵磷脂均、卵磷脂均ESR。 实验操作过程实验操作过程1、实验器材准备、实验器材准备2、试管中加入、试管中加入106mmol/l枸橼酸钠枸橼酸钠3、静脉抽血加入试管中，轻轻混匀；、静脉抽血加入试管中，轻轻混匀；4、用血沉管吸取抗凝血至、用血沉管吸取抗凝血至“0”刻度，擦去刻度，擦去 管外附着的血液，将血沉管直立于血沉架上；管外附着的血液，将血沉管直立于血沉架上；5、室温静置、室温静置1小时，读取血浆段的高度，小时，读取血浆段的高度，报告方式：报告方式：mm /h参考值参考值男 015 mm / 1h女 020 mm / 1hHCT（红细胞比积）又称红细胞压积（红细胞比积）又称红细胞压积1、方法：温氏法、方法：温氏法二、红细胞压积测定及贫血分类二、红细胞压积测定及贫血分类2、原理：将定量的抗凝血液置于温氏管中，用一、原理：将定量的抗凝血液置于温氏管中，用一定速度和时间离心沉淀，即得红细胞和血浆的比定速度和时间离心沉淀，即得红细胞和血浆的比例，从而得知每升血液中红细胞所占体积的比值例，从而得知每升血液中红细胞所占体积的比值（ 升升/升）。升）。HCT主要与红细胞的数量及大小有关，常用于帮主要与红细胞的数量及大小有关，常用于帮助诊断贫血并判断贫血程度，也用于红细胞各项助诊断贫血并判断贫血程度，也用于红细胞各项平均值的计算。平均值的计算。1 根据MCV、MCH、MCHC对贫血分类类型 MCV(fl) MCH(pg) MCHC (%) 病因 大细胞性贫血 100 34 32-36 巨幼贫等正常细胞性贫血 80-100 27-34 32-36 急性失血等小细胞低色素性 80 26 32 缺铁贫等 贫血单纯小细胞性 80 1000为止）。为止）。Miller窥盘 A31B将将MillerMiller窥盘放在显窥盘放在显微镜目镜中微镜目镜中, ,通过窥盘通过窥盘中大小方格间的中大小方格间的9 9比比1 1比例关系计算比例关系计算RBCRBC数和数和RetRet数。数。四、计算四、计算 1.Miller窥窥盘盘法法：网网织织红红细细胞胞（Ret）百百分分率率(%)= （大大方方格格内内Ret总总数数）/（小小方方格格内内RBC总数总数9）100% 2.直直接接计计数数法法：网网织织红红细细胞胞（Ret）百百分分率率(%)= 多多个个视视野野内内Ret总总数数/多多个个视视野野内内RBC总数总数100%五、注意事项五、注意事项1.用用酒酒精精染染液液时时，应应待待玻玻璃璃片片上上的的酒酒精精挥挥发发干干燥燥后后，才才能能加加血血液液，染染色色时时应应用用推推片片角角不不停停搅搅动动，使使染染料料和和血液混合，防止凝固。血液混合，防止凝固。2.染染色色时时间间一一定定要要充充足足，混混合合后后不不能能立立即即推推片片，室室温温低低时染色时间应适当延长，应覆以另一玻片防止蒸发。时染色时间应适当延长，应覆以另一玻片防止蒸发。3.染液与血液比例以染液与血液比例以1：1为宜，为宜，贫血适当加血量贫血适当加血量。4.涂片厚薄均匀适宜，涂片厚薄均匀适宜，弓形移动弓形移动，多个区域计数，多个区域计数5.试剂应定期重配，以免变质沉淀。试剂应定期重配，以免变质沉淀。六、参考值六、参考值成人：（成人：（0.5%-1.5%）新生儿：（新生儿：（2%-6%）儿童：（儿童：（0.5%-7.5%）成人绝对值成人绝对值（24-84） 109/L 七、临床意义七、临床意义（1）评价骨髓增生能力，判断贫血类型）评价骨髓增生能力，判断贫血类型 再障再障时，明显降低。绝对值低于时，明显降低。绝对值低于5109/L可做为急性再障的可做为急性再障的辅助诊断指标。辅助诊断指标。失血、多数失血、多数溶血性贫血溶血性贫血患者网织红细胞可明显高于正常。患者网织红细胞可明显高于正常。营养不良性贫血营养不良性贫血在治疗前网织红细胞可保持正常、轻度升在治疗前网织红细胞可保持正常、轻度升高或降低。高或降低。（2 2）评价疗效）评价疗效网织红细胞反应：网织红细胞反应：IDA或巨幼细胞贫血分别给予铁剂、维或巨幼细胞贫血分别给予铁剂、维生素生素B12或叶酸治疗或叶酸治疗23d后，网织红细胞计数值开始上升，后，网织红细胞计数值开始上升，710d达到最高达到最高(10%左右左右)；两周以后逐渐降至正常水平，；两周以后逐渐降至正常水平，红细胞、血红蛋白开始升高。红细胞、血红蛋白开始升高。骨髓移植、骨髓移植、EPO治疗后：治疗后：若骨髓开始恢复造血功能，若骨髓开始恢复造血功能，RMI升高，网织红细胞计数值上升。升高，网织红细胞计数值上升。（3 3）放、化疗监测）放、化疗监测 机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制，早机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制，早期期HFR和和MFR降低，然后才检测到网织红细胞的降低，然后才检测到网织红细胞的降低。而停止放、化疗，骨髓功能恢复后，又见降低。而停止放、化疗，骨髓功能恢复后，又见上述指标依次上升。可指导临床医师适时调整治上述指标依次上升。可指导临床医师适时调整治疗方案，避免造成严重的骨髓抑制。疗方案，避免造成严重的骨髓抑制。