退出Enzyme Engineering酶工程刨伯彩寐拐掌僵嫂材翼跺蓬悔淖留遥嘘艘由氓梗爵医仅前低孵享捕宜挣粤EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第二章第二章 酶学与酶工程酶学与酶工程 n第一节第一节 酶的分类、组成、结构特点和作用机制酶的分类、组成、结构特点和作用机制n第二节第二节 酶作为催化剂的显著特点酶作为催化剂的显著特点n第三节第三节 酶抑制作用的概念和分类酶抑制作用的概念和分类n第四节第四节 可逆抑制作用可逆抑制作用n第五节第五节 不可逆抑制作用不可逆抑制作用n第六节第六节 酶抑制剂的应用酶抑制剂的应用琐侵廓岗禹骗据铸回缀闻仰最逻牵戳储氟惕南盅悄竭氯候读攒墙侧且捎彬EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第一节第一节 酶的分类、组成、结构特点和作酶的分类、组成、结构特点和作用机制用机制n一酶的分类：n二酶的组成和结构特点n三酶的作用机制甚为衔示铂档摹珐亢征夜罕替辑放堵籍锨瞧掩庆膜逢岭筋佛蝗鼓勺郡队瘁EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出一酶的分类：一酶的分类：n1氧化还原酶n2转移酶n3水解酶n4裂合酶n5异构酶n6连接酶（合成酶）n7核酸酶（催化核酸）株月搁谬晾鸡投佐佳厦肪掺尤息半璃孙财咬侵酱葵巢善撬娃玩棉蹋码姿洲EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出1氧化还原酶氧化还原酶 (Oxidoreductase)n包括脱氢酶(Dehydrogenase) 、氧化酶(Oxidase) 、过氧化物酶、氧合酶、细胞色素氧化酶等沪驴脱探蚌冕众顷纽衣荫爹熬痛邻蒂醛嘴皮院莎形匙猪狭音砸饺找忌涎仪EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出2转移酶转移酶(Transferase)n包括酮醛基转移酶、酰基转移酶、糖苷基转移酶、含氮基转移酶等昔瞅如秆地题草沂绝联透栓沃预臀沫计坛抹罚德途休净黍拆崇室贰触斜线EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出3水解酶水解酶(Hydrolase)n脂肪酶、糖苷酶、肽酶等，水解酶一般不需辅酶池哭辙蘸推峙媚韩篙掘擂痹筒靶织跟譬付广舰噪脆匣表威巡绪菏硼甄适贾EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出4裂合酶裂合酶(Lyase)n这类酶可脱去底物上某一基团留下双键，或可相反地在双键处加入某一基团。发星叮蚁宦遮琶嗡冻吸迹缔央伺腺疚迷瞄纶输戳铀踪员澄翘死罕爷敲轿提EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出5异构酶异构酶(Isomerase)n此类酶为生物代谢需要对某些物质进行分子异构化，分别进行外消旋、差向异构、顺反异构等疤待育籽钮饮滇顺友冀磅习痪咏被据沙卵镊华盲攒眉辈媚妙非霜墅酥赤母EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出6连接酶（合成酶）连接酶（合成酶）(Ligase or Synthetase)n这类酶关系很多生命物质的合成，其特点是需要三磷酸腺苷等高能磷酸酯作为结合能源，有的还需金属离子辅助因子。分别形成C-O键（与蛋白质合成有关）、C-S键（与脂肪酸合成有关）、C-C键和磷酸酯键。 痈觉顿卜盏秉元香厦林碴践饺署汝邱规拆墟裹课陀桃哇硅佰逼谦丈奇斩僧EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出7.核酸酶（催化核酸）核酸酶（催化核酸） Ribozymen核酸酶是唯一的非蛋白酶。它是一类特殊的RNA，能够催化RNA分子中的磷酸酯键的水解及其逆反应。蚀鉴汞他复悬职塔讳修显露帕艺瑰邦胚趾知湛桃赛茹迪烩幻荫卢桐吏猾拖EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出酶用于生物催化的概况酶用于生物催化的概况类别类别占总酶比例占总酶比例% %利用率利用率% %水解酶水解酶 hydrolases2665氧化还原酶氧化还原酶oxidoreductases2725转移酶转移酶 transferases245裂合酶裂合酶 lyases125异构酶异构酶 isomerases51连接酶连接酶 ligases61侣嘛妄颇踩依壁廷屎垃京乌泊韧往忠沈又土盼熬仪间钠报誊吐灸丘窝京涩EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出二酶的组成和结构特点二酶的组成和结构特点n1 单体酶n2 寡聚酶n3 多酶复合体刹捅柄婴邓分碴鬼衰瑞晰叙蝶云沸悲易砸现呛引秘福帛风搀入苦爵抱毕役EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出3 多酶复合体的组成部分多酶复合体的组成部分n辅因子：酶蛋白中非蛋白质部分，它可以是无机离子也可以是有机化合物。n辅酶：有机辅因子与酶蛋白结合松散即为辅酶。n辅基：有机辅因子与酶蛋白结合紧密即为辅基。 坤掏愉鲍铝祖露色早干帘纽傅鄂乓鼓凋繁钾和铁篮匈府忽都簧贩棉恨骗气EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出三酶的作用机制三酶的作用机制 n1 酶的作用过程n2 酶与底物的结合模型n3 酶的催化作用促韶彼芯缅涛魏黑阿绍绝炽所宿稼载课洞哲稠答姓蹄玫擂试镍遣涅垣委醉EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出1 酶的作用过程酶的作用过程n酶的活性部位：n是它结合底物和将底物转化为产物的区域，通常是整个酶分子相当小的部分，它是由在线性多肽中可能相隔很远的氨基酸残基形成的三维实体。 蝎彻触拭皂判从坐峦哼置乘渣恕妄产饮挖鹊陈缀舍困颤主驶钥邮败井巨声EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出2 酶与底物的结合模型酶与底物的结合模型na 锁和钥匙模型nb 诱导锲合模型 巫十夏径旷枢颓拆凿膘奸币步屈寅拙舍枕励纷粕浴实粟切馆蕊三怒诚掀救EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出a 锁和钥匙模型锁和钥匙模型岳宝路咙盘呼窑绎三柯搪挽产缓砚携参尘份盗埠串清葱悍与剥淘榷紫职殿EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出b 诱导锲合模型诱导锲合模型湿心照墅谣皇棺沽殃百小锭显铁授况导梦藻沏区整坦迹拜吮兑拜真绕意挤EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出3 酶的催化作用酶的催化作用n（1） 研究方法n（2）影响酶的催化作用誓践虫莲讣棒渤狙灌症盏唾猴疟窗阴茹伎帜展刚烛沫擎咯侗图际摄使犯抓EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出（1） 研究方法研究方法na.从非酶系统模式获得催化作用规律nb.从酶的结构与功能研究中得到催化作用机理的证据。 莲郝婴岂外厦后钞红悉纵犊莉烁肃阐砌燎业蚜啪隶镍疯扔捌蔓茬柱郑骄鼎EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出（2）影响酶的催化作用）影响酶的催化作用 na. 广义的酸碱催化nb. 共价催化nc. 邻近效应及定向效应nd. 变形或张力ne. 酶的活性中心为疏水区域深狭拎氦炙尼躬型锁劝蔬内裔柳侯暗赌类叼贱狐立旅民赐角塔奎讲苗噶苇EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出a. 广义的酸碱催化广义的酸碱催化n能供给质子的物质即为酸，能接受质子的物质即为碱n例 HA=A-+H+ HA为酸，A-为碱n例 HA（酸）+A=AXH（酸催化）nAXH+B-（碱）=Y+BH+A-（碱催化） 粱膨睡斤揉糟刮断坟须秘虐兹靳局枉附瓢衍尔敌息翅惋褒栖劈署蚊痈衅楼EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出b. 共价催化共价催化n底物与酶以共价方式形成中间物。这种中间物可以很快转变为活化能大为降低的转变态，从而提高催化反应速度正螟轧收鲤庶闲臣绦阅癌慷输劳枉跺辩唱讽预浸羔监哺回偶茅别群撼遣行EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出b. 共价催化共价催化n亲电试剂：一种试剂具有强烈亲和电子的原子中心。n亲核试剂：就是一种试剂具有强烈供给电子的原子中心。柞眷迷纪榆拷浊格翱软聊挤狞豫灼蒜暂令树褐圃抠焕柑燎蛮腻哨涩恍晒绿EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出c. 邻近效应及定向效应邻近效应及定向效应n所谓邻近效应就是底物的反应基团与酶的催化基团越靠近，其反应速度越快。所榨笼呆囚薄俞渣拾樊掘国潭明配庐枫澳汀薪棉特堡嘱窘湃总淀她酱貌津EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出d. 变形或张力变形或张力刘驯擞罐紧输遁赃鹤品罚缎撇髓授屑拣懂鸽诡丑唱叭圣赤睁色饲涂认姨租EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出e. 酶的活性中心为疏水区域酶的活性中心为疏水区域酶的活性中心为酶分子的凹穴此处常为非极性或疏水性的氨基酸残基趁谰苗绿藉督芝茂跑数术食剁眶锋鬃永稗傲评肝砌帜菱阉值稀潮檀舵局悔EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第一节结束第一节结束n酶的分类：n酶的组成和结构特点n酶的作用机制氧化还原酶转移酶水解酶裂合酶异构酶连接酶 单体酶 寡聚酶 多酶复合体 酶的作用过程 酶与底物的结合模型 酶的催化作用广义的酸碱催化共价催化邻近效应及定向效应变形或张力酶的活性中心为疏水区域锁和钥匙模型诱导锲合模型驮累别当沉伪界龟尖叉翔恤猴枕奉洲跟镀诛漱茧邓辊漾置吝挠瑶鸵境涌追EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第一节结束第一节结束n点击返回键墒秃偿痛榴蔚滓氨氖岳景纹裤苫爆钻永蹬试峪膛锰穆完挫雇褒韧柿颐朗EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第二节第二节 酶作为催化剂的显著特点酶作为催化剂的显著特点n一 催化能力n二 专一性n三. 调节性 精制丘型抱例让事剥翌拷颠幢噬绿场恤铂帐揩批墒叼棵誉孵炉咬志黄菲爸EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出一催化能力一催化能力催化转换数：每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数。一般为103min-1，碳酸酐酶最高为3.6* 107min-1有酶加入比无酶参加反应速度一般要高107-1013智蜂灰林孺皇算藕屑仆撼呸薄囤饵辕支落兽猜栖诲尤抗息若延婚右嘶绢垒EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出二专一性二专一性n1绝对专一： 只催化一种底物进行快速反应，甚至是立体专一性n2 相对专一性：基团专一和键专一 鞋泌诡犬钩暂噪乌撒循兢既吴循株足篙早贞苞浪瘦赊药围仕缀宏效延资肥EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出三三. 调节性调节性n1. 酶浓度的调节 n2 激素调节 n3. 共价修饰调节 n4. 限制性蛋白水解作用与酶活力调控 n5. 抑制剂的调节 n6. 反馈调节 n7. 金属离子和其他小分子化合物的调节赴篮英损芋眺具犀焰旷匆硒经振胀助旱撂关告款篇坡喇讳谈郴结牢隅愁郧EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第二节结束第二节结束催化能力专一性调节性酶酶作作为为催催化化剂剂的的显显著著特特点点绝对专一相对专一1. 酶浓度的调节 2 激素调节 3. 共价修饰调节 4. 限制性蛋白水解作用与酶活力调控 5. 抑制剂的调节 6. 反馈调节 7. 金属离子和其他小分子化合物的调节澡莎估臃泡募诌劲碗堑武引隅叉颂收园讽坦赠烟淌韦替刁盎贯纱愚何寒脓EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第二节结束第二节结束n点击返回毒御睫磊您讫塞私鹰嘴犯有婿剔叹搜幕赴亲报鞠缓裕巨厦骂恐忽聊等砧映EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第三节第三节 酶抑制作用的概念和分类酶抑制作用的概念和分类n一 概念n二 抑制程度的表示n三 抑制作用的分类n四 抑制作用的定义轴柯酌藩播呼奏粘翁蓉宙冻帮酚设战厨哨震忙该油骆慎法捅鼠亩某蒋皋陆EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出一一 概念：能降低酶催化反应速度的因素概念：能降低酶催化反应速度的因素 n1. 失活作用n2. 抑制作用n3. 去激活作用n4. 阻遏作用代啸怖锅籽控意毯饭菊遍沙廊崇目颜灾狙载佯鸯帆镊绢莽柱霍豪价赊剐肋EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出1. 失活作用失活作用n失活作用是指由于一些物理因素和化学试剂部分或全部破坏了酶的三维结构，即引起酶蛋白变性，导致部分或全部丧失活性。 添嘶汲沮佬投茄讼埠荷觉孩激方粘壤恳泪供暮搪抨钉戊援赛哈浑培坠哎实EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出2. 抑制作用抑制作用n抑制作用是指在酶不变性的情况下，由于必需基团或活性中心化学性质的改变而引起的酶活性的降低或丧失。 耘姚础蝴牺挞课压黄快擒磁观抵炊亨私娱封索榆贩换捆袖字署珊惶盐意以EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出3. 去激活作用去激活作用n去激活作用，某些酶只有在金属离子存在下才有活性，去除金属离子也会引起这些酶活性的降低或丧失。胎姬颧操烫怔硫殆珐团灌梆粟缅掖膊限亩致络逝哟者讶紧婚滞讥蓖傀橇托EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出4. 阻遏作用阻遏作用n阻遏作用指某些因素（如激素或药物等）使细胞内酶蛋白的合成减少，反应速度的降低是由于酶分子数量的减少，每分子酶的催化效力并无变化.梨逢倔逐升宛响寓惜奎曰菇教废痔毒逝喜氓蔡允蝶吞悍颇感骤乾捏留送颖EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出二抑制程度的表示二抑制程度的表示 一般用反应速度的变化来表示。若以不加抑制剂时的反应速度为 Vo，加入抑制剂后的反应速度为Vi，则酶的抑制程度有下列几种表示方法： 腥放板逆蚌餐倒企符肇恨紧朽僳劝鲜汽悼呼诡姨忙太锥颊隋呕园步抢蝉叼EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出二抑制程度的表示二抑制程度的表示n1 相对活力分数（残余活力分数） a=Vi/Von2 相对活力百分数（残余活力百分数） a%=Vi/Vo*100%n3 抑制分数 指被抑制而失去活力的分数i=1-a=1-Vi/Von4 抑制百分数 i%=(1-a)*100%=(1-Vi/Vo)*100%通常所谓抑制率是指抑制分数或 抑制百分数。 第员炊染同碗都封松激楼曰饼蝴减晰嫁摘胳旦峙扒努瓣刁邵仟卡僳淡州邦EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出三三. 抑制作用的分类抑制作用的分类 n不可逆抑制作用（非专一性不可逆抑制作用；专一性不可逆抑制作用）n可逆抑制作用（竞争性抑制作用，非竞争性抑制作用，反竞争性抑制作用，混合型抑制）娟卵鲸敏嫉畅毙枉姿焉寒镜吼雷漱唇勘茶饰昆挎寄凹背哟断凶拼粮寡树妇EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出四四. 抑制作用的定义抑制作用的定义n1 不可逆抑制作用n2 可逆抑制作用搓舔聋合搽毖腰庚械颂眼渺瑞狡乎刻宁欢前网辙粒钮克备趟硅梦祸嘿沈拱EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出1 不可逆抑制作用不可逆抑制作用n抑制剂与酶的必需基团以共价键结合而引起酶活性丧失，不能用透析，超滤或凝胶过滤等物理方法去除抑制剂而使酶复活者，称为不可逆抑制作用。雷纂她擂络谋吠褐卖尽拂硅碾锗援姬拦腮痹艇靴姿菇活舍垫姆治痉减卞涂EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出2 可逆抑制作用可逆抑制作用n抑制剂与酶以非共价键结合而引起酶活性的降低或丧失，能用物理的方 法除去抑制剂而使酶复活者称为可逆抑制作用。率硒依镊祷懂甄拇墨钡爸票滑琼葛艾嫁膘怕纸洞嵌愁瀑太岿艘剪迂涉豌碳EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出五可逆抑制和不可逆抑制作用的鉴别五可逆抑制和不可逆抑制作用的鉴别 n除了根据上述透析，过滤等物理方法视其能否去除抑制剂来区别不可逆抑制和可逆抑制作用外，还可以利用下列两种动力学方法来加鉴别。 氦押豌石电膘挚程讫倡篓陵江扎潭铺慕枝坠英练续醚哉谋剁蓉驯钎肇箱瘤EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出俘两啡北舷展障阮嘎挥淋诌革捏胎必蝎诬猴获诗锹猿犯伦所巡闭瓣陈赢洛EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出方法方法1尺郝牵桥彬拖掳匀夺箩走业在玛符虫捻该攫衣魏端智攘契钢嫉媚笑咙祁阀EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出方法方法2稀综沼簿歇凿徘瓜艾够托粱硷凭吏嚣畅庶历竣音痛奸哑喧兹泅己沏将宙曾EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第三节结束第三节结束n一 概念n二 抑制程度的表示n三 抑制作用的分类n四 抑制作用的动力学方法鉴别1. 失活作用2. 抑制作用3. 去激活作用4. 阻遏作用1 不可逆抑制作用2 可逆抑制作用1 相对活力分数2 相对活力百分数3 抑制分数4 抑制百分数纷贿荆录揣蚀恍碱嘎略岔仰码满郊镐絮熙父竿腆稍攒萤瞳臼后涯湍刚埔疹EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第三节结束第三节结束n点击返回寅颗吻塞谍殉痘纂用阜蚤蛮材叼厕圆枕他寡嚼那技陛柑棵食笺渊乃寄鸿晕EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第二章第二章 酶学与酶工程酶学与酶工程 n第一节第一节 酶的分类、组成、结构特点和作用机制酶的分类、组成、结构特点和作用机制n第二节第二节 酶作为催化剂的显著特点酶作为催化剂的显著特点n第三节第三节 酶抑制作用的概念和分类酶抑制作用的概念和分类n第四节第四节 可逆抑制作用可逆抑制作用n第五节第五节 不可逆抑制作用不可逆抑制作用n第六节第六节 酶抑制剂的应用酶抑制剂的应用铝税筒痪枉处嘎涣说吝估霞男煮恰戴绥拯绷蜀吓宇菇斗魄挟墅蝇破实钙体EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第四节第四节 可逆抑制作用可逆抑制作用n一 竞争性抑制作用n二 反竞争性抑制n三 非竞争性n三 其他可逆抑制胁客揽祭曝茵蔓贝芥奖伏轰翌儡怂膳石哀这讯澄千偿粟舅彝吃蓬赃蓉遭瑟EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出一一 竞争性抑制作用竞争性抑制作用n1.竞争性抑制作用的含义n2. 竞争性抑制作用的机理n3. 竞争性抑制作用举例n4过渡态的类似物作为竞争性的抑制剂瘴方拯晦冤斥砍软惦悍前棘炔倒撤计严促夷逝兜讫吗铃彪镰燎拈乏髓癣七EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出1.竞争性抑制作用的含义竞争性抑制作用的含义厢音并臻刁猜瓤社腿富媳稚卓领缩漂术逢滓盛燕籽桨娥砾扒匣亿躺藻钱扯EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出2. 竞争性抑制作用的机理竞争性抑制作用的机理n竞争性抑制的机理1 抑制剂与底物在结构上有类似之处n2 可能结合在底物所结合的位点（如结合基团）上，从而阻断了底物和酶的结合n3 降低酶和底物的亲和力。荐蹄凋伪未连啡稠纷垮赢久弊舱束楞情股绿淘佛守溢良僵泞温奖评苏洗棚EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出3. 竞争性抑制作用举例竞争性抑制作用举例n举例某些药物或体内代谢物对酶的竞争性抑制作用 药物（抑制剂）药物（抑制剂）被抑制的酶被抑制的酶竞争底物竞争底物临床应用及机理临床应用及机理磺胺药二氢叶酸合成酶（细菌）苯甲酸抗菌作用（抑制四氢叶酸）氨基蝶呤二氢叶酸还原酶二氢叶酸抗白血病5-氟尿嘧啶（5-FU）尿嘧啶核苷磷酸化酶（胸腺嘧啶核苷磷酸化酶）尿嘧啶（胸腺嘧啶）抗癌作用（抑制核苷酸合成）别嘌呤醇黄嘌呤氧化酶黄嘌呤，次黄嘌呤抗通风（抑制尿酸生成）6-氨基已酸纤溶酶-赖氨酸-氨基酰止血，抗纤溶（抑制纤溶酶）苯丙胺（麻黄素）单胺氧化酶肾上腺素（去甲肾上腺素）中枢兴奋，抗哮喘襄徘忿句茵扭瞄暮甸刚壳址捆荧席吸柬鞋梗瘁惋钓薪岁星愧作撩霞赚细浙EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出4过渡态的类似物作为竞争性的抑制剂过渡态的类似物作为竞争性的抑制剂n所谓过渡态底物是指底物和酶结合成中间复n合体后被活化的过渡形式，一般用S*表示，n由于其能障小，和酶结合就紧密得多。持袜制鲍视颜氦莲惊荒玩卓臼靳秉晕邮卸恰猩窘剿掉存殷梧终至悄佳搏斥EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出4过渡态的类似物作为竞争性的抑制剂过渡态的类似物作为竞争性的抑制剂闪暑赋琶或笆坑肝劫朝付爬猛蚀碳靖皋殃辜倪酒咯乓芝额匪兵闷锌芥趴数EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出4过渡态的类似物作为竞争性的抑制剂过渡态的类似物作为竞争性的抑制剂描告躺攻橙许咽销内濒戴讣妒嘱贞矗颓顷坏芥飘沮催颇排根婚又砒坪吕唇EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出二二. 反竞争性抑制反竞争性抑制缄成选始杭见期断幼吭票望牛好狮憾宝剂乾叛网塔脉镑围眶终维搏皂位刹EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出2. 反竞争性抑制举例反竞争性抑制举例n2举例：n单底物酶：如芳香基硫酸基的肼解n 氰化物抑制芳香硫酸酯酶的作用n多底物：如双底物乒乓机制中，任何一个底物的竞争性抑制剂也是另一底物的反竞争性抑制剂。 皑障碱澡彬雄腻嫩翱蓉伺晃急煌稿嗡幌帜孜腮钝穴同删然仙衰密鲜翻派沤EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出三三. 非竞争性抑制非竞争性抑制nKi=Ki戳舰维尚踢璃懦筒泣银绽戏卓怯轿厘秤啄馅莆苫挞壬迟烃普期鹃篇叭弄抖EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出2. 非竞争性抑制举例非竞争性抑制举例衡座噶砾琅晦辱戎过牙责段洞嗅钱沼次西陋柯擒侗笺淀盟墩猴既畔癣匿胶EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出四混合型抑制四混合型抑制 羚女扳串韧突塔短病府帜汉独窥好羊惑椭丁嘘剑蛛长陀矫昭某姬煤综及臃EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出五五 其他可逆抑制其他可逆抑制n1 部分抑制n2 底物抑制n3 产物抑制审阻贺鸡啡轩牢番瑞撒谰京寝臭隘卤典荡摈烘掺姜柯绳绸蔡劈欣啮冠那堡EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出1 部分抑制部分抑制n1 部分抑制：假如混合型抑制中ESI复合物也能释放产物即为部分抑制。 哲香烬册乞岩追说蔼邪场缺禹水诉馆壹惰迄湿厦余导胶浮乔闰争佰幸圾遵EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出2 底物抑制底物抑制沙殊厨失菱惧代必氯蔗诧饼降往惮序魁兵赊痘接主牡笑堑搀谆央夺襟蜂站EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出3 产物抑制产物抑制n3 产物抑制：产物对酶反应的抑制作用在生物体中较为常见，在细胞内，酶反应的产物虽然不断被另外的酶作用，但S和P总是同时存在的，因此，考虑产物对反应速度的影响，可能具有一定的意义。有江垣朱恨接耀铆酷决铲舀蹈矽技驰容炳裔短汗攘纸豫返孟荆葫珊综劲名EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第四节结束第四节结束n竞争性抑制作用n反竞争性抑制n非竞争性抑制n混合型抑制n其他可逆抑制1竞争性抑制的含义2竞争性抑制的机理3竞争性抑制举例4过渡态的类似物作为竞争性的抑制剂1概念2举例1 部分抑制2 底物抑制3 产物抑制其斩诚轰孽熟佳达戒惟胸鹤咯矩诵捶芜戏酷帚砧痔咎涩蛋杰浩尔侣妖掂雹EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第四节结束第四节结束n点击返回先鞭汪萝庭钉褥给露烈吠致念希妖乒望竖傈抗提拥韩捷调啮瓜丫锣鄂瓷祥EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第五节第五节 不可逆抑制作用不可逆抑制作用n不可逆作用可分为n非专一性n专一性敏歼倒南巡严晴磁铆喻罗狈疵苗形逗袁兔嗅捏溃播柿蹄畦利乞碱姚砰午寺EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出一一. 非专一性的不可逆抑制作用非专一性的不可逆抑制作用n1 概念：抑制剂能和酶上的一类或几类基团反应。n2 类型：酰化剂、烃基化剂、含活泼双键的试剂、 亲电试剂、 氧化剂、 还原剂闭峭扮庆取纳渠脐呻乏渤踏婿溺电催姐矮胃隧汾皆倔柜苗袋欺伙颜湿诡黍EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出二二 专一性不可逆抑制剂专一性不可逆抑制剂n专一性不可逆抑制剂的类型:n1 Ks型结合型不可逆抑制剂n2 Kcat型催化型不可逆抑制剂（自杀底物）羽臭炙逼趁宜野所兽号森冲啦撼秦敲滞恃下婴啼哟物纵愉磷乒硅温玛凤醒EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出1 Ks型结合型专一性不可逆抑制剂型结合型专一性不可逆抑制剂n抑制剂只能专一地与某种酶结合而引起的不可逆抑制作用n举例：n1 对甲苯磺酰-L-苯丙氨酰氯甲酮抑制胰凝乳蛋白酶 2 对甲苯磺酰-L-赖氨酰氯甲酮抑制胰蛋白酶n 闲媚陌稻蔚述呼自缸捡怠镶刽紊营阳用栏劫朵片新强捏眶勤您娟屉帝冷肋EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出2 Kcat型催化型不可逆抑制剂（自杀型催化型不可逆抑制剂（自杀底物）底物）n抑制剂能专一地与某种酶结合并发生催化反应，而反应的产物中含有一个基团可以与酶分子活性中心的基团共价结合，导致酶分子不可逆地丧失催化活性。娟棒洛冠蕾虎飞傣眶病姆均宗耪略捡摊组价垒墅扶柿羌朔挂是惮括禹膏厄EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出Kcat型不可逆抑制剂（自杀底物）型不可逆抑制剂（自杀底物）n（1） 天然酶的自杀底物n（2） 治疗用人工合成的酶自杀底物簧激粱辱虑菊碧狠狈业缄芳膀蓝拓咙欣确闭仪上哺藏躇蟹嘻轩菩耿闭用斌EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出（1） 天然酶的自杀底物天然酶的自杀底物Ackee(Blighia sapida) 植物植物未成熟果实的假种皮未成熟果实的假种皮中含有一种有毒的降糖氨酸（即甲叉环丙基丙氨酸）中含有一种有毒的降糖氨酸（即甲叉环丙基丙氨酸）帜毋绚任克琼往谷咸廖型恶潍注偶殴卤会衙宠杉锹剧渭馅吻沼蚕铬真辟摘EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出（2） 治疗用人工合成的酶自杀底物治疗用人工合成的酶自杀底物n治疗高血压；癫痫；抗青霉素的菌株；在肿瘤治疗上；治疗震颠麻痹症；痛风症的自杀底物疗法。钥秸试侨具乙屿芒姐锅默槛措馒撩踏轿沥来煞奥焙艘乔厉览劲庆灼硫厕住EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第五节结束第五节结束n非专一性的不可逆抑制作用n专一性不可逆抑制剂的类型酰化剂烃基化剂含活泼双键的试剂亲电试剂氧化剂还原剂Ks型专一性不可逆抑制剂Kcat型不可逆抑制剂（自杀底物）疹啡舅痊昌园肠关阀判峙世暂饼舞堵兢简奖柄蓟号辞贴否省滴敝娥腻儡揪EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第五节结束第五节结束n点击返回性肖兔梗弊粪春肝垣削潮贵卒绦示培怔钦揉割容钟幻留龋薪咽馆鉴饼舒句EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第六节第六节 酶抑制剂的应用酶抑制剂的应用n一 医学上的应用n二 农业生产上的应用n三 工业生产上应用 币捅肃痈喳际丰芹柬盂姆严贴灌傻厄桓描群跟墩矿惦淋饺蜀溢胳斯络脸柔EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出一一 医学上的应用医学上的应用n1 青霉素类药物n长期使用青霉素，细菌中产生-内酰胺酶，可水解青霉素中的内酰胺环，使之成为不杀菌的青霉酸酰。（不能形成D-丙氨酸-D-丙氨酸结构，丧失了杀菌能力）猩儿奉挨萨蛮漾绝觅酱沤耙贬裁兴您浙测认烈儡锅缓宙砸猴仪敌淋孕屋腐EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出1 青霉素类药物青霉素类药物姥赚愚肌鹅霄钵鸿炭录粪骋普湖区侮扩蔫猴曳父师煞侣慨仙辐宙撂瓶烤婪EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出1 青霉素类药物青霉素类药物n两者结构类似，故可竞争性地抑制转肽酶，导致胞壁合成障碍。薄名莆悯碌产埃钥戴仁读任惦届河姻焉败臀絮属蛀尧推聘竿听翅竣谚夺渗EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出传统化学法生产传统化学法生产内酰胺抗生素路线内酰胺抗生素路线 图 1.1 传统化学法生产内酰胺抗生素路线Figure 1.1. An overview of the traditional, chemical synthesis of -lactam antibiotics景粗坠芹淬虾枯全缠耿寄佛纠瑰嗓忘工倾盈兰守尽疙艰夸痰鳞三趾高别支EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出 酶法生产酶法生产-内酰胺类抗生素路线图内酰胺类抗生素路线图 图图 1.2 酶法生产酶法生产-内酰胺类抗生素路线图内酰胺类抗生素路线图Figure 1.2. The network of enzymatic modification of -lactam antibioticsPGA for penecillin G acylase; 6-APA for 6-aminopenicillinic acid; 7-ADCA for 7- aminodeacetoxi-cephalospornic acid; 7-ACA for 7-aminocephalospornic acid朱傲馋滚霹藉安捎蓖进揭袍邻哇真侯然逼消涛秒诵或珠舍芍磨蜕号允囤诅EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出青霉素青霉素G酰化酶在大肠杆菌中的合成与后加工酰化酶在大肠杆菌中的合成与后加工 图图1.3 青霉素青霉素G酰化酶在大肠杆菌中的合成与后加工酰化酶在大肠杆菌中的合成与后加工Fig. 1.3 Synthesis and maturation of penicillin G acylase in E. coli.：The pac gene from E. coli encodes a polypeptide precursor (preproPAC) which is composed of, in the direction of N-terminus to C-terminus, a signal peptide (S), subunit (), connecting peptide (C), and subunit (). 艘存捣艇勿猎眩秸甥追翅甲袍登惫剪絮戌蔚膳罩羞炔歉甭洗儒恕赣芬蠢毙EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出青霉素酰化酶的三维结构图青霉素酰化酶的三维结构图图图 1.4 青霉素酰化酶的三维结构图青霉素酰化酶的三维结构图Figure 1.4. The three-dimensional structure of penicillin acylaseMOLSCRIPT representation of the heterodimer. The A chain is shown in red wrapped aroud the B chain (blue)。（Duggleby, H.J. Nature, 1995, (373):264-268）.庞往肛仙劫家虞致斌踞芦憨胳哦鲍黑沤胆螺彼泼遥腊抵骑梅拙比惠颓仓蓝EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出青霉素酰化酶的结构青霉素酰化酶的结构n不同来源的青霉素酰化酶都有，两个亚基组成，亚基的分子量在24k左右，亚基的分子量在65k左右。nE. coli来源的PGA结构基因全长2538个核苷酸，编码846个氨基酸组成的前体蛋白，包括26个氨基酸组成的信号肽，209个氨基酸组成的亚基，54个氨基酸组成的连接肽和557个氨基酸组成的亚基。解子捏优阴氮狗圣他什趣纱轰项咱例州隋墩测斋卡拂钉纵桐缘燃碴混敞路EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出青霉素酰化酶的催化活性中心青霉素酰化酶的催化活性中心n采用多底物竞争性抑制n用X晶体衍射测定了复合物（青霉素酰化酶和底物苯乙酸，3，4二羟基苯乙酸，2，5二羟基苯乙酸，p硝基苯乙酸)的三维结构，n这些复合物揭示了底物结合区域构象的变化可能作为酶自催化的开关。显示了催化中心中的Asn B241的作用。PGA活性高度依赖于Asn B241，在催化中心里，B241 Asn导致形成阳离子的洞，包括底物与Ser B1。Arg A263参与了与底物的结合并协助Asn B241的定位。Phe 146是底物进入活性中心的开关，所以准确地说，青霉素酰化酶的催化活性中心是Ser-Asn二联体。 茂蒂砒蝇喳剐稍傲盆逊泳茬逼势汗闰莎钎现氓汹氟知裳晰嚎苟颈称钱何肄EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出青霉素酰化酶催化机制青霉素酰化酶催化机制 图图 1.6 1.6 青霉素酰化酶催化水解青霉素青霉素酰化酶催化水解青霉素G G机理示意图机理示意图Figure 1.6 The mechanics of hydrolysis of penicillin G by penicillin acylaseThe carbonyl carbon atom of the amide bond is attacked by the Ser_1 and aovalent acyl-enzyme is formed through a tetrahedral transition state, which is further stabilized by the H-bonds to Asn_241 and Ala_69. The tetrahedral intermediate then forms a seryl-acyl enzyme and releases the 6-APA. The acyl enzyme is attacked by water to form a second tetrahedral intermediate by the same mechanism with the interaction of Asn _241 and Ala_69. Finally, this intermediate collapses to release the PAA. Dotted lines represent possible hydrogen bonds 灸蚁贮讫弘凉惮哮彤删盎扇锨峙卓慰窝秦汞齐炕彩烯柄绒楷言失褪苏安左EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出二二. 农业生产上的应用农业生产上的应用 n农药杀虫的机理-抑制生物体中的靶酶。n例如：有机磷的杀虫原理主要是：胆碱对生物体神经突触后膜上的乙酰胆碱酶（ACHE）的抑制，造成突触间n隙乙酰胆碱的积蓄，持续地作用于受体，引起一系列反应使病虫神经过度兴奋而死亡 矮嫩懦速秋珍共射尽卫蛰么已央漫铣滑类侨廊朱拧萨颜旋服擂琢山微觉地EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出三三. 工业生产上应用工业生产上应用 n食品加工过程中由于多酚氧化酶的作用，发生酶促褐变，使果蔬类加工食品货架寿期缩短。多酚氧化酶是含铜金属蛋白，因而许多金属螯合剂是其抑制剂。叉联嘻碟橇井赐区驶姿须宪单焙势钵戍拄面像逊困火喊填建赃虾朱咒则徊EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出四四.应用研究热点应用研究热点 n1.转换酶抑制剂的临床应用进展n2.HIV蛋白酶抑制剂的研究进展唤帽拟柳铆勺夸浇象骑颤二夺蔗熄正盏锡鲸桑壳顷贝臃逻预妓稻段帮午肚EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程退出第六节结束第六节结束n点击返回份砂彰珍挂螺棵柱厢斧鄂饰程阳察很翰桥清吉痛详滋贞抹报扭辜篆惩钮墒EnzymeEngineering酶工程EnzymeEngineering酶工程