一、检测项目一、检测项目二、仪器检测原理二、仪器检测原理 三、测试项目原理三、测试项目原理 四、质量控制四、质量控制? 尿液干化学分析 ? 尿液沉渣检验 ? 自动化、智能化检测 尿液检验的内容不断增多、检测速度更快，临尿液检验的内容不断增多、检测速度更快，临床实用信息越来越多床实用信息越来越多 一、检测项目一、检测项目 （一）用于初诊患者和健康体检用的（一）用于初诊患者和健康体检用的 811 联组合试带。联组合试带。 （二）用于已确诊疾病的疗效观察的（二）用于已确诊疾病的疗效观察的 组合型试带。组合型试带。 （一）用于初诊患者和健康体检用的（一）用于初诊患者和健康体检用的 811联组合试带。联组合试带。 pH 酸碱反应酸碱反应 Pro 蛋白质蛋白质 Glu 葡萄糖葡萄糖 Ket Nit 亚硝酸盐亚硝酸盐 Uro Bld或或OB 红细胞红细胞 Bil Leu或或WBC 白细胞（白细胞（9项）项） SG 比重比重 （10项）项） VitC或或ASG 维生素维生素C（11项）项） 酮体酮体 尿胆原尿胆原 胆红素（胆红素（8项）项） （二）用于已确诊疾病的疗效观察的（二）用于已确诊疾病的疗效观察的 组合型试带。组合型试带。 肾病型肾病型4联试带：联试带： PH 糖尿病型糖尿病型5联试带：联试带： 肝脏病型肝脏病型2联试带：胆红素、尿胆原。联试带：胆红素、尿胆原。、蛋白、隐血、比密；、蛋白、隐血、比密； PH、蛋白、葡萄糖、酮体、比密；、蛋白、葡萄糖、酮体、比密； 二、尿液分析仪仪器检测原理二、尿液分析仪仪器检测原理 此类仪器一般用微电脑了控制，采用球面积分仪接受双波长此类仪器一般用微电脑了控制，采用球面积分仪接受双波长 反射光的方式测定试带上的颜色变化进行半定量测定。试剂带反射光的方式测定试带上的颜色变化进行半定量测定。试剂带 上有数个含各种试剂的试剂垫，各自与尿中相应成分进行独立上有数个含各种试剂的试剂垫，各自与尿中相应成分进行独立 反应，而显示不同颜色，颜色的深浅与尿液中某种成分的含量反应，而显示不同颜色，颜色的深浅与尿液中某种成分的含量 成比例关系，试剂带中还有另一个成比例关系，试剂带中还有另一个“补偿垫补偿垫”，作为尿液本底，作为尿液本底颜颜 色，了对有色尿及仪器变化待所主生的误差进行补偿。色，了对有色尿及仪器变化待所主生的误差进行补偿。 将吸附有尿液的试剂带放在仪器比色槽内，试剂带将吸附有尿液的试剂带放在仪器比色槽内，试剂带 上已产生化学反应的各种试剂垫被光源照射，其反射光上已产生化学反应的各种试剂垫被光源照射，其反射光 被球面积分仪接收，球面积分仪的光电管被反射的双波被球面积分仪接收，球面积分仪的光电管被反射的双波 长光（通过滤片的测定光和一束参考光）照射，各波长长光（通过滤片的测定光和一束参考光）照射，各波长 的选择由检测项目决定。的选择由检测项目决定。 其中亚硝酸盐、酮体、胆红素、尿胆原的测定波长其中亚硝酸盐、酮体、胆红素、尿胆原的测定波长 为为550nm550nm；PHPH、葡萄糖、蛋白质、维生素、葡萄糖、蛋白质、维生素C C、潜血的测定、潜血的测定 波长为波长为620nm620nm。各试剂块所选用的参考波长为。各试剂块所选用的参考波长为720nm720nm。 其结构示意图见图其结构示意图见图8-1 8-1 尿液自动生化分析仪结构示意图尿液自动生化分析仪结构示意图 仪器按下列公式自动计算出反射率，然后与标准曲线比较，仪器按下列公式自动计算出反射率，然后与标准曲线比较，自动打印出各种成分的相应结果，尿液中某种成分含量高，自动打印出各种成分的相应结果，尿液中某种成分含量高，其相应试剂垫的反射光较暗，否则较强。其相应试剂垫的反射光较暗，否则较强。 反射率分式：反射率分式：R R（% %）=Tm.Cs/TsCm=Tm.Cs/TsCm100% 100% R R（% %）为反射率；）为反射率； Tm Tm为试剂垫对测定波长的反射强度；为试剂垫对测定波长的反射强度； Ts Ts为试剂垫对参考波长的反射强度；为试剂垫对参考波长的反射强度； Cm Cm为校准垫对测定波长的反射强度；为校准垫对测定波长的反射强度； Cs Cs为校准对参考波长的反射强度。为校准对参考波长的反射强度。 测定波长：是被测试剂块的敏感特征波长；测定波长：是被测试剂块的敏感特征波长； 参考波长：是被测试剂块的不敏感的波长，用以消除背景光参考波长：是被测试剂块的不敏感的波长，用以消除背景光 和其它杂散光的影响。和其它杂散光的影响。 三、测试项目原理三、测试项目原理 项目 英文缩写 反应原理 1、PH PH指示剂 2、比重 d （SG） 多聚电解质离子解离法 3、蛋白质 PRO PH指示剂的蛋白质误差法 4、葡萄糖 GLU 葡萄糖氧化酶法 5、胆红素 BIL 偶氮反应法 6、尿胆原 URO 醛反应、重氮反应法 7、酮体 KET 亚硝基铁氢化钠法 8、亚硝酸盐 NIT 亚硝酸盐还原法 9、隐血或红细胞 BLD 血红蛋白类过氧化酶法 10、白细胞 LEU或WBC 酯酶法 11、VitC ASG 吲哚酚法 试剂带的反应原理试剂带的反应原理 pH测定：采用测定：采用pH指示剂原理，常用甲基红和溴麝香草指示剂原理，常用甲基红和溴麝香草 酚蓝组成的复合型指示剂，呈色范围从酚蓝组成的复合型指示剂，呈色范围从pH 59颜色从由橘黄色，绿色变为蓝色，由颜色从由橘黄色，绿色变为蓝色，由 此反映尿液此反映尿液Ph。 尿蛋白质测定：尿蛋白质测定： 利用利用pH指示剂都具有一定的指示剂都具有一定的pH变色范围，当溶液中存在变色范围，当溶液中存在 蛋白质时，蛋白质离子可与带电相反电荷的指示剂离子结蛋白质时，蛋白质离子可与带电相反电荷的指示剂离子结 合，引起指示剂的进一步电离，从而产生颜色的变化，其合，引起指示剂的进一步电离，从而产生颜色的变化，其 颜色的深浅与蛋白质含量有关。颜色的深浅与蛋白质含量有关。 尿葡萄糖的测定：尿葡萄糖的测定： 是基于葡萄糖氧化酶法原理，能特异地检出尿中的是基于葡萄糖氧化酶法原理，能特异地检出尿中的 葡萄糖；葡萄糖； 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧作用，生成葡萄糖酸内葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧作用，生成葡萄糖酸内 酯及过氧化氢（酯及过氧化氢（H2O2），后者与色素酶在过氧化氢酶），后者与色素酶在过氧化氢酶 的作用下，使色素原呈现由蓝色经绿色至棕色的色泽的作用下，使色素原呈现由蓝色经绿色至棕色的色泽 变化，呈色的深浅与葡萄糖含量成正比。变化，呈色的深浅与葡萄糖含量成正比。 常见的色素原有邻联甲苯胺、碘化钾。常见的色素原有邻联甲苯胺、碘化钾。 尿酮体测定：尿酮体测定： 即亚硝基铁氰化钠反应测量酮体。即亚硝基铁氰化钠反应测量酮体。 在碱性条件下，尿中酮体和亚硝基铁氰化钠反应而显紫红在碱性条件下，尿中酮体和亚硝基铁氰化钠反应而显紫红 色，其颜色深浅和与酮体含量有关。色，其颜色深浅和与酮体含量有关。 尿隐血测定：尿隐血测定： 利用游离血红蛋白、溶解的红细胞，或肌红蛋白中的血红素利用游离血红蛋白、溶解的红细胞，或肌红蛋白中的血红素 具有类过氧化物酶的作用，能催化过氧化氢释放新生态氧，具有类过氧化物酶的作用，能催化过氧化氢释放新生态氧， 使色原氧化而显色，其颜色深浅有血红素含量有关。使色原氧化而显色，其颜色深浅有血红素含量有关。 尿胆红素测定：尿胆红素测定： 采用重氮反应法原理。在强酸性条件下，尿中结合胆红素能与采用重氮反应法原理。在强酸性条件下，尿中结合胆红素能与 2，4二氯苯氨重氮盐起偶联反应形成紫红色，颜色深浅与尿二氯苯氨重氮盐起偶联反应形成紫红色，颜色深浅与尿 中胆红素含量有关。中胆红素含量有关。 尿胆原测定：采用尿胆原测定：采用Ehrlich醛反应原理或重氮反应原理。醛反应原理或重氮反应原理。 Ehrlich 醛法试带利用尿胆原在酸性条件下与对二甲氨基苯醛法试带利用尿胆原在酸性条件下与对二甲氨基苯 甲醛反应生成樱红色的复合物，颜色深浅与尿胆原含量有关。甲醛反应生成樱红色的复合物，颜色深浅与尿胆原含量有关。 重氮试带法是利用尿胆原在强酸性的条件下与重氮试带法是利用尿胆原在强酸性的条件下与4-甲氧基苯甲氧基苯 重氮盐四氟化硼酸盐反应生成重氮色素，颜色深浅与尿胆原含重氮盐四氟化硼酸盐反应生成重氮色素，颜色深浅与尿胆原含 量有关量有关 尿亚硝酸盐测定：亚硝酸盐还原法。尿亚硝酸盐测定：亚硝酸盐还原法。 在酸性条件下，亚硝酸盐与芳香胺结合形成重氮化合物，再在酸性条件下，亚硝酸盐与芳香胺结合形成重氮化合物，再 与苯喹啉结合产生重氮色素；颜色变化与细菌数量不成比例，与苯喹啉结合产生重氮色素；颜色变化与细菌数量不成比例， 但阳性结果表明尿中细菌数量在但阳性结果表明尿中细菌数量在105/ml以上。以上。 尿白细胞测定：白细胞酯酶法。尿白细胞测定：白细胞酯酶法。 利用中性粒细胞的酯酶能水解吲哚酚酯生成吲哚酚和有机酸，利用中性粒细胞的酯酶能水解吲哚酚酯生成吲哚酚和有机酸， 吲哚酚可引进一步氧化成靛蓝；或吲哚酚和重氮盐反应生成吲哚酚可引进一步氧化成靛蓝；或吲哚酚和重氮盐反应生成 紫色物质，颜色深浅与粒细胞量的多少有关。紫色物质，颜色深浅与粒细胞量的多少有关。 尿比密测定：多聚电解质离子解离法。尿比密测定：多聚电解质离子解离法。 基于某种预处理的多聚电解质在一定离子浓度中基于某种预处理的多聚电解质在一定离子浓度中pKa的变化的变化 来测量比密。尿液中电解质离子可和聚甲氧乙烯顺丁烯二来测量比密。尿液中电解质离子可和聚甲氧乙烯顺丁烯二 酸共聚体中的氢离子发生置换，换出的氢离子使溴麝香草酸共聚体中的氢离子发生置换，换出的氢离子使溴麝香草 酚蓝指示剂的颜色发生变化，颜色由蓝绿色，绿色变成黄酚蓝指示剂的颜色发生变化，颜色由蓝绿色，绿色变成黄 绿色。绿色。 尿维生素尿维生素C测定：还原法测定：还原法 采用磷钼酸缓冲液或甲基绿与尿中维采用磷钼酸缓冲液或甲基绿与尿中维C进行反应，形成钼蓝，进行反应，形成钼蓝， 颜色由蓝色变成紫色，颜色深浅与尿中维生素颜色由蓝色变成紫色，颜色深浅与尿中维生素C含量有关。含量有关。 四、质量控制四、质量控制 （一）、尿液干化学分析干扰因素及排除方法（一）、尿液干化学分析干扰因素及排除方法（二）、（二）、 尿液干化学分析仪质量控制尿液干化学分析仪质量控制 （三）、分析后质量控制（三）、分析后质量控制 （一）、（一）、 尿液干化学分析干扰因素尿液干化学分析干扰因素 1.2 尿液分析中存在的干扰因素尿液分析中存在的干扰因素 1.2.1 酸碱度的干扰酸碱度的干扰 PH、尿蛋白、尿比重、尿蛋白、尿比重当尿液当尿液PH9.0时，蛋白质出现假阴性或假阳性结果；时，蛋白质出现假阴性或假阳性结果；尿比重测定，碱性尿可使其结果偏低，强酸性尿可使其结果尿比重测定，碱性尿可使其结果偏低，强酸性尿可使其结果偏高，实验证明对于碱性尿，实测结果应在原测定结果基础偏高，实验证明对于碱性尿，实测结果应在原测定结果基础上增加上增加0.005 作为补偿；作为补偿； 1.2.2 菌尿的干扰菌尿的干扰 原因原因1、改变、改变PH值值2、产生或释放一些酶类及其它代谢产物，、产生或释放一些酶类及其它代谢产物，如过氧化物酶。如过氧化物酶。菌尿的干扰的项目菌尿的干扰的项目红细胞、尿糖红细胞、尿糖排除干扰的方法：排除干扰的方法：所以在实验过程中发现菌尿时，最好使用显微镜检查法或者其所以在实验过程中发现菌尿时，最好使用显微镜检查法或者其他方法来加以鉴别。他方法来加以鉴别。 1.2.3 药物的干扰药物的干扰 维生素维生素C； 青霉素对青霉素对尿蛋白尿蛋白定性实验有干扰；定性实验有干扰；庆大霉素或霉素庆大霉素或霉素可造成可造成白细胞白细胞测定假阴性；测定假阴性；磺胺药对磺胺药对尿胆原尿胆原测定有干扰；测定有干扰；氯丙嗪，酚噻嗪等药物可使氯丙嗪，酚噻嗪等药物可使尿胆原和胆红素尿胆原和胆红素等呈等呈假阳性反应等。假阳性反应等。 1.2.4 患者自身因素：患者自身因素： 如疾病类型、饮食、个人习惯等。如疾病类型、饮食、个人习惯等。肾移植、肾炎、肾病综合症、系统性红斑狼疮等肾移植、肾炎、肾病综合症、系统性红斑狼疮等尿白细胞测定假阴性；尿白细胞测定假阴性；对以淋巴细胞为主的患者，会产生假阴性。对以淋巴细胞为主的患者，会产生假阴性。因此对因此对肾病患者或泌尿系统疾病患者肾病患者或泌尿系统疾病患者一律需要一律需要做尿镜检分析，从而减少漏诊或误诊；做尿镜检分析，从而减少漏诊或误诊； 饮食（对饮食（对NIT的影响）的影响）当患者饮食中缺乏蔬菜或水果类食物时，即使有细菌感当患者饮食中缺乏蔬菜或水果类食物时，即使有细菌感染，也无硝酸盐还原，而使亚硝酸盐染，也无硝酸盐还原，而使亚硝酸盐假阴性假阴性。送检标本时间过长或进食含亚硝酸盐丰富送检标本时间过长或进食含亚硝酸盐丰富的食物可使亚硝酸盐出现的食物可使亚硝酸盐出现假阳性假阳性。 1.2.5 其它因素其它因素 尿液干化学分析仪本身的因素尿液干化学分析仪本身的因素试纸条方面试纸条方面 尿液干化学分析项目尿液干化学分析项目 如尿蛋白质、白细胞在一定程度上可干扰比重测定；如尿蛋白质、白细胞在一定程度上可干扰比重测定； 温度与酸碱度干扰酶的活性，从而对尿糖测定产生干扰。温度与酸碱度干扰酶的活性，从而对尿糖测定产生干扰。 温度对尿比重的测定；温度对尿比重的测定； 因此检验时应加以注意。因此检验时应加以注意。 尿液干化学分析干扰因素排除方法尿液干化学分析干扰因素排除方法 应着手分析检验的过程，它可能出现在检验的应着手分析检验的过程，它可能出现在检验的前、中、后期前、中、后期。1、尿液分析仪是否正常运转、尿液分析仪是否正常运转试纸质量是否合格；试纸质量是否合格；2、尿液标本容器首先是否干燥、清洁；、尿液标本容器首先是否干燥、清洁；3、留取标本的时间是否合适；、留取标本的时间是否合适；4、尿送检是否及时；、尿送检是否及时； 5、注意观察尿量及颜色、混浊度等情况；、注意观察尿量及颜色、混浊度等情况； 6、女性应避免月经及阴道分泌物的污染；、女性应避免月经及阴道分泌物的污染； 7、留尿前还应嘱咐病人不要过量饮水、喝浓茶或进药等；、留尿前还应嘱咐病人不要过量饮水、喝浓茶或进药等；8、检验人员应本着认真负责的态度，不要弄错标本或有传、检验人员应本着认真负责的态度，不要弄错标本或有传输结果错误等；输结果错误等；9、对于结果有怀疑的病例，应结合临床综合分析，甚至进、对于结果有怀疑的病例，应结合临床综合分析，甚至进行动态观察。行动态观察。总之为确保检测结果的准确，要尽可能地排除一切可能存在总之为确保检测结果的准确，要尽可能地排除一切可能存在的干扰因素，从而减少不必要的漏诊和误诊。的干扰因素，从而减少不必要的漏诊和误诊。 （二）、（二）、 尿液干化学分析仪质量控制尿液干化学分析仪质量控制 3.1 校正校正 可用质控物对试纸的质量进行监控。可用质控物对试纸的质量进行监控。 3.2 贮存温度贮存温度 3.3 使用寿命使用寿命 3.4室温和湿度室温和湿度 3.5 仪器、试纸监测仪器、试纸监测 尿液分析仪及干化学试纸带一定要符合要求；尿液分析仪及干化学试纸带一定要符合要求；仪器的正常运转和试剂带质量合格是实验结果的基本保证，仪器的正常运转和试剂带质量合格是实验结果的基本保证，所以分析仪与试纸在质量、稳定性等方面要严格把关。所以分析仪与试纸在质量、稳定性等方面要严格把关。 3.6 质控物质控物 建议使用尿液分析仪各生产厂家提供的质控试纸条进行室建议使用尿液分析仪各生产厂家提供的质控试纸条进行室内质控。内质控。 尿液干化学分析干扰因素众多，且不可避免地有一定的假尿液干化学分析干扰因素众多，且不可避免地有一定的假阴性率或假阳性率，因此要结合临床表现判断结果，决不阴性率或假阳性率，因此要结合临床表现判断结果，决不可只看干化学分析，忽视镜检。可只看干化学分析，忽视镜检。（三）、分析后质量控制（三）、分析后质量控制 1 注意试带的专一性与传统检测的不同之处注意试带的专一性与传统检测的不同之处 蛋白模块。蛋白模块。 葡萄糖模块。葡萄糖模块。 酮体模块酮体模块 隐血模块隐血模块 白细胞模块白细胞模块 胆红素及尿胆原模块胆红素及尿胆原模块 比重模块比重模块 2、 尿试带的确证试验尿试带的确证试验 干化学法属于过筛试验。干化学法属于过筛试验。 原则上对怀疑结果应进行确证试验复核，这是质量保证重原则上对怀疑结果应进行确证试验复核，这是质量保证重 要环节。按要环节。按CCCLS文件规定，文件规定， 尿蛋白的确证试验为磺基水杨酸法；尿蛋白的确证试验为磺基水杨酸法； 尿葡萄糖的确证试验为葡萄糖氧化酶定量法；尿葡萄糖的确证试验为葡萄糖氧化酶定量法； 尿胆红素的确证试验为尿胆红素的确证试验为Harrison 法；法； 尿白细胞、红细胞的确证试验为尿沉渣显微镜检查。尿白细胞、红细胞的确证试验为尿沉渣显微镜检查。 3、 仪器检测结果与尿沉渣显微镜检查不符时的分析仪器检测结果与尿沉渣显微镜检查不符时的分析 仪器法检测白细胞、红细胞的结果出现阴性时，仪器法检测白细胞、红细胞的结果出现阴性时， 应以镜检为准；应以镜检为准； 当仪器分析（），而镜检（）的结果分析当仪器分析（），而镜检（）的结果分析 白细胞可能破坏；白细胞可能破坏； 红细胞常破坏，或尿中含触酶时；红细胞常破坏，或尿中含触酶时； 总之，干化学尿分析仪不能取代显微镜检查。总之，干化学尿分析仪不能取代显微镜检查。 尿沉渣显微镜检查的指征尿沉渣显微镜检查的指征 1、美国临床检验标准委员会（、美国临床检验标准委员会（NCCLS）规定凡有下述情况）规定凡有下述情况的应进行显微镜检查：的应进行显微镜检查： （1）医生提出镜检要求的，）医生提出镜检要求的， （2）检验科规定的患者（如泌尿科，肾病科，糖尿病，）检验科规定的患者（如泌尿科，肾病科，糖尿病，应用免疫抑制剂及妊娠妇女），应用免疫抑制剂及妊娠妇女）， （3）任何一项利理学，化学检验结果异常的。）任何一项利理学，化学检验结果异常的。 2、我国检验学会规定凡、我国检验学会规定凡红细胞，白细胞，蛋白和亚红细胞，白细胞，蛋白和亚硝酸盐硝酸盐四项干化学检查中有其中任何一项不正常者都应进四项干化学检查中有其中任何一项不正常者都应进行显微镜检查，并以显微镜检查报告为准。行显微镜检查，并以显微镜检查报告为准。 注意注意事项事项 血尿同时混有白细胞，应区别是血尿或是血血尿同时混有白细胞，应区别是血尿或是血-脓尿：检查红脓尿：检查红-白细胞比例白细胞比例 R:W500：1表明血尿是因出血而来 R:W200：1则表明出血同时合并炎症 隐血实验和镜检隐血实验和镜检RBC结果不相符结果不相符 隐血阳性而镜检RBC阴性的原因 A. 尿液陈旧 B. 碱性尿或低渗尿 C. 血红蛋白或肌红蛋白尿 隐血阴性而镜检RBC阳性的原因 A. 服用维C B. RBC 判断有误 尿常规尿常规(urine routine ；Urine Rt) 尿液外观尿液外观 显微镜检查显微镜检查 干化学分析的结果干化学分析的结果 如正常的尿常规结果：如正常的尿常规结果： 淡黄色，透明淡黄色，透明 RBC 01/HP WBC 02/HP 结晶未见或少量结晶未见或少量 pH 6.0 Pro （）（） Glu （）（） Nit （）（） Uro （）或（）或（） Bld Bil （）（） Leu （）（） SG （）（） （）（）（）（） （）（） Ket ASG