机能实验学基础知识机能实验学基础知识机能实验中心1. 机能实验学概述 机能实验学是融会了生理学、病理生理学和药理学三门学科实验教学的内容和手段的一门新的综合性实验学科，以研究生物体正常机能和代谢、疾病发生发展过程的机能和代谢及其发病机制和药物作用的规律。一、什么是机能实验学？一、什么是机能实验学？二、教学目的二、教学目的 通过该课程的教学，使同学们初步掌握基本操作技能，通过观察实验动物的生理指标、复制某些疾病模型和防治手段的应用等基本方法，巩固生理、病理生理和药理学的基本理论，培养同学们理论联系实际的能力和独立思考，分析问题的能力。三、机能学实验课的要求三、机能学实验课的要求熟悉相关生理学、病理生理学、药理学理论知识。以严谨的科学态度进行实验。实验中严格按操作程序进行。实验小组各成员合理分工并密切合作。仔细、耐心地观察实验过程中出现的现象并做好记录。主动联系理论思考、分析实验结果和各种实验现象。认真整理分析结果，按要求书写实验报告。四、实验室守则四、实验室守则提前10分钟进入实验室，进入实验室必须穿戴工作服。养成良好的学习和工作作风，保持实验室安静。实验中严格按实验步骤和方法进行。实验前认真清点实验器材，并做好借领手续。养成节约的良好习惯，不得随意损坏公共财物。实验完成后，按程序及时关闭计算机。要安排值日小组做好实验室卫生环境。实验报告的一般格式实验报告的一般格式实验名称实验名称实验人员实验人员 日期时间日期时间 指导老师指导老师实验目的：实验目的：实验原理：实验原理：实验器材：实验器材：实验步骤：实验步骤：观察项目：观察项目：实验结果：实验结果：结论讨论：结论讨论：2. 基本操作基本操作基本设备及器械基本设备及器械实验仪器实验仪器动物手术基本过程动物手术基本过程（动物捉拿、固定、麻醉、处死）（动物捉拿、固定、麻醉、处死）三通管正确使用三通管正确使用一、基本设备与器械一、基本设备与器械（一）实验板实验板(台台) - 家兔实验台、蛙板。（二）药药品品与与试试剂剂 - 主要包括麻醉药物、抗凝药、各种平衡盐溶液，及各种实验所需的特殊试剂（三）手手术术器器械械 - 止血钳、组织剪、组织镊、持针器、缝合针、缝线等手术器械眼科剪眼科剪眼科镊眼科镊组织镊组织镊止血钳止血钳组织剪组织剪粗剪刀粗剪刀 1. 组织镊：正正确确使使用用组组织织镊镊的的手手法法是是：以以食食指指、中中指指放放于于器器械械的的外外侧侧缘缘，拇拇指指放放于于内内侧侧缘缘，集集3指指的的力力量量实实施施操操作作动动作作，而且适用于左右手的同时操作。而且适用于左右手的同时操作。 2. 止血钳：主要用于止血和分离组织。主要用于止血和分离组织。基基本本结结构构包包括括止止血血钳钳的的头头部部、关关节节活活动动部部、柄柄部部和和套套扣扣4部部分分。有有大大、中中、小小3种种不不同同规规格格，每每一一规规格格的的止止血血钳钳中中又又分分为为直直、弯弯2种种类类型。型。正正确确的的使使用用方方法法是是：以以拇拇指指、无无名名指指分分别别套套入入止止血血钳钳的的套套扣扣内内，控控制制止止血血钳钳展展开开的的力力度度，以以食食指指放放在在止止血血钳钳的的关关节节部部位位，控控制制止止血血钳钳的的方方向向和和钳钳夹夹组组织织部部位位的的准准确性。确性。切切不不可可以以左左右右手手分分别别抓抓住住止止血血钳钳的的套套扣扣部部位位，用用两两手手的的合合力力进进行行止血或分离组织。止血或分离组织。 3. 组织剪： 4. 探针和玻璃分针金金属属探探针针主主要要用用于于破破坏坏和和捣毁动物的中枢神经捣毁动物的中枢神经玻玻璃璃分分针针主主要要应应用用于于对对精精细细部部位位和和组组织织的的分分离离和和游游离离等等操操作作，如如分分离离血血管管、游游离离神神经经等等均均需需借借助助于于玻玻璃分针的帮助。璃分针的帮助。（四）仪器设备（四）仪器设备 机能学实验中常用的仪器设备包括：机能学实验中常用的仪器设备包括：动物天平动物天平医用计算机医用计算机恒温水浴箱或平滑肌槽恒温水浴箱或平滑肌槽6240生理信号记录系统或生理信号记录系统或BL-420E系统系统动物呼吸机动物呼吸机图像分析系统图像分析系统启动系统传感器与RM6240相连启动计算机“实验”菜单 二、机能学动物手术的基本过程二、机能学动物手术的基本过程1 动物选择与捉拿动物选择与捉拿2 麻醉动物麻醉动物3 固定动物固定动物4.手术区备皮手术区备皮剪毛剪毛5.暴露需要的组织器官进行相应的手术暴露需要的组织器官进行相应的手术6.术后处死动物术后处死动物1动物选择与捉拿常常用用的的实实验验动动物物：犬犬、家家兔兔、猫猫、鸡鸡、大大鼠鼠、豚豚鼠鼠、小鼠小鼠、蛙、蛙、蟾蜍蟾蜍等。等。实验动物的选择实验动物的选择 实实验验动动物物的的选选择择直直接接关关系系到到实实验验的的成成败败和和其其可可行性、科学性等。行性、科学性等。 （1）小鼠）小鼠捉捉拿拿时时先先用用右右手手将将鼠鼠尾尾抓抓住住提提起起，放放在在较较粗粗糙糙的的台台面面或或鼠鼠笼笼上上，在在其其向向前前爬爬行行时时，右右手手向向后后拉拉尾尾，用用左左手手拇拇指指和和食食指指抓抓住住小小鼠鼠的的两两耳耳和和头头颈颈部部皮皮肤肤，将将其其固固定定于于左左手手大大鱼鱼际际处处，用用左左手手无无名名指指和和小小指指压压紧紧鼠鼠尾尾，右手即可作注射或其他实验操作。右手即可作注射或其他实验操作。 （2）蛙和蟾蜍用用左左手手将将动动物物贴贴紧紧在在手手掌掌中中，并并以以左左手手中中指指、无无名名指指夹夹住住前前肢肢、无无名名指指和和小小指指压压住住腹腹部部，拇拇指指压压背背，食食指指压压头头，右右手手进进行行其其他他实实验验操操作作。抓抓取取蟾蟾蜍蜍时时，禁禁忌忌挤挤压压两两侧侧耳耳部部毒毒腺腺，以以免免毒液射入眼中。毒液射入眼中。（3）家兔）家兔一一手手抓抓住住兔兔颈颈部部的的被被毛毛与与皮皮肤肤，另另一一手手托托其其臀臀部部，使使其其躯躯干干的的重重量量大大部部分分集集中中在在手手上，然后称重。上，然后称重。2麻醉动物麻醉动物 针对不同的动物，可以选择不同的麻醉药物、实施针对不同的动物，可以选择不同的麻醉药物、实施不同的麻醉方法。不同的麻醉方法。麻醉药物应用原则麻醉药物应用原则：依据动物体重计算麻醉药物的剂量；依据动物体重计算麻醉药物的剂量；掌握宁少勿多、分阶段给药的方式。掌握宁少勿多、分阶段给药的方式。 （1）麻醉剂乙醚乙醚-是最常用的吸入性麻醉剂是最常用的吸入性麻醉剂 巴比妥类药物、氯胺酮、氨基甲酸乙酯巴比妥类药物、氯胺酮、氨基甲酸乙酯（乌拉坦）、水合氯醛等。（乌拉坦）、水合氯醛等。动物麻醉动物麻醉局部麻醉局部麻醉 1普鲁卡因，颈部普鲁卡因，颈部23ml，股部，股部12ml全身麻醉全身麻醉 1. 吸入麻醉：乙醚吸入麻醉：乙醚 2. 注射麻醉：戊巴比妥钠：注射麻醉：戊巴比妥钠：3，1 ml/kg 乌拉坦：乌拉坦： 25%, 4 ml/kg （2）给药途径）给药途径吸入麻醉吸入麻醉- - 一般适用于实验一般适用于实验动物的全身麻醉。具有麻醉动物的全身麻醉。具有麻醉安全系数较大、麻醉深度易安全系数较大、麻醉深度易于掌握等优点。于掌握等优点。腹腹腔腔注注射射-是是啮啮齿齿类类动动物物常常用用的的给给药药方方法法。注注射射部部位位是是左、右下腹部。左、右下腹部。灌灌胃胃给给药药-是是啮啮齿齿类类动动物物常常用用的的给给药药方方法法。用用灌灌胃胃针针直直接将药物灌入胃中。接将药物灌入胃中。静静脉脉注注射射-应应根根据据动动物物的的种种类类选选择择注注射射部部位位。家家兔兔多多选选用用耳耳缘缘静静脉脉。因因为为静静脉脉注注射射是是通通过过血血管管给给药药，所所以以只只限限于液体药物。于液体药物。 兔耳缘静脉注射：兔耳缘静脉注射：将将动动物物放放入入兔兔盒盒内内，拔拔去去耳耳缘缘部部位位的的被被毛毛，耳耳缘缘静静脉脉即即清清晰晰可可见见。用用左左手手食食指指和和中中指指夹夹住住静静脉脉近近心心端端，拇拇指指和和小小指指夹夹住住耳耳缘缘部部分分，以以左左手手无无名名指指和和小小指指放放在在耳耳下下作作垫垫，待待静静脉脉充充盈盈后后，有有手手持持注注射射器器使使针针头头尽尽量量由由静静脉脉远远心心端端刺刺入入，顺顺血血管管方方向向平平行行、向向心心端端刺刺入入。注注射射完完毕毕抽抽出出针针头头，用用棉棉球球压压迫迫注注射射部部位位数数分钟，以免出血。分钟，以免出血。 （4）动物麻醉技巧与效果的判断）动物麻醉技巧与效果的判断 静脉注射麻醉药物时，开始给药的速度可略为快些，即先静脉注射麻醉药物时，开始给药的速度可略为快些，即先给予总量的给予总量的1 13 3，以求动物能顺利、快速地渡过兴奋期。，以求动物能顺利、快速地渡过兴奋期。给后给后2 23 3剂量的速度宜慢；边注射、边注意观察动物的生剂量的速度宜慢；边注射、边注意观察动物的生命体征变化（心跳、呼吸、肌肉松弛情况等）。当确定已命体征变化（心跳、呼吸、肌肉松弛情况等）。当确定已达到麻醉效果时，即可停止给药，不必急于将剩余的麻醉达到麻醉效果时，即可停止给药，不必急于将剩余的麻醉药物全部推入。药物全部推入。若麻醉剂量已给足，动物仍有挣扎、兴奋等表现时，应观若麻醉剂量已给足，动物仍有挣扎、兴奋等表现时，应观察一段时间，确认动物是否已渡过兴奋期，切不可盲目追察一段时间，确认动物是否已渡过兴奋期，切不可盲目追加麻醉药物。避免因麻醉过深，抑制心跳呼吸中枢而导致加麻醉药物。避免因麻醉过深，抑制心跳呼吸中枢而导致动物死亡。动物死亡。 动物达到麻醉的基本状态是：动物达到麻醉的基本状态是：（1）全身肌肉松弛；）全身肌肉松弛；（2）呼吸平稳；）呼吸平稳；（3）角膜反射迟钝；）角膜反射迟钝； （4）痛觉消失。）痛觉消失。 3固定动物 当当麻麻醉醉效效应应趋趋于于平平稳稳时时，即即可可固固定定动动物物。固固定定动动物物的的体体位位主主要要有有仰仰卧卧位位、俯俯卧卧位位、侧侧卧卧位位等等。也也可可用用特特制制的的盒盒及及相相应应的的工工具具进进行行特特殊殊的的固固定定。但但要要注注意意的的问问题题是是，随随着着麻麻醉醉药药物物的的失失效效，动动物物可可能能因因挣挣扎、躁动等而发生失去控制的情况。扎、躁动等而发生失去控制的情况。4.动物急性处死方法脊椎脱臼法：小鼠脊椎脱臼法：小鼠空气栓塞法空气栓塞法: 兔兔2040 ml急性放血法：兔颈总动脉放血急性放血法：兔颈总动脉放血三通管的正确用法五、机能实验学教学资源网站机能学实验室网站机能实验学精品课程网站= 六、虚拟实验室进入虚拟实验室的方法进入虚拟实验室的方法1、输入网址，进入长沙医学院机能学实验室网站；2、下载机能实验学虚拟软件客户端，安装；3、双击桌面VBL-100虚拟实验室图标，输入手动；4、进入虚拟实验室界面选择相关实验。 每次实验课结束，请班长安排4-6名同学打扫实验室卫生！离开教室时请关好门窗、水电！