实验九实验九 抗抗 酸酸 染染 色色一、实验目的：一、实验目的：1.掌握抗酸染色的原理和方法掌握抗酸染色的原理和方法2. 掌握结核分枝杆菌痰涂片的结果报告掌握结核分枝杆菌痰涂片的结果报告分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，包围在肽聚糖的外面，一般水溶性染料不易进入，所以分枝杆菌一般不易着色且一旦染色后不易脱色，所以要经过加热和延长染色时间来促使其着色。因分枝菌酸与染料结合后，很难被酸性脱色剂脱色，故分枝杆菌又称抗酸杆菌。二、实验原理：二、实验原理：三、实验材料：三、实验材料：细菌：结核杆菌细菌：结核杆菌染液：石炭酸复红液、染液：石炭酸复红液、3%盐酸酒精、碱性美盐酸酒精、碱性美兰溶液兰溶液其它：接种环、酒精灯、载玻片等其它：接种环、酒精灯、载玻片等四、实验方法四、实验方法1、细菌涂片的制备、细菌涂片的制备 1）涂片：）涂片：20mm*15mm厚涂片，竹签挑取，涂厚涂片，竹签挑取，涂2-3遍遍 2）干燥：）干燥：自然干燥，或火焰自然干燥，或火焰 3）固定：）固定：火焰固定，必须火焰固定，必须2、染色1）初染：滴加石炭酸复红适量，在火焰高处徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽暂时离开火焰；若染液蒸发减少，应再加染液，以免干涸，加热5min（可延长），待标本冷却后用水冲洗。2）脱色：3%盐酸酒精脱色30sec1min至无红色液体流下，再用水冲洗。3）复染：用碱性美兰溶液复染1min，用水冲洗后用吸水纸吸干。3、油镜观察五、实验结果：五、实验结果：1.结核杆菌呈红色，常堆积成团，排列无序，偶结核杆菌呈红色，常堆积成团，排列无序，偶呈分枝状生长。呈分枝状生长。2.背景及非抗酸性细菌呈兰色。背景及非抗酸性细菌呈兰色。六、注意事项：六、注意事项：1、涂片要充分研磨，防止细菌成团、涂片要充分研磨，防止细菌成团2、涂片大小、厚度要适中、涂片大小、厚度要适中3、固定温度合适、固定温度合适4、初染加热的温度，勿沸腾、初染加热的温度，勿沸腾5、染色时间、染色时间6、冲洗、冲洗此课件下载可自行编辑修改，供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！