微生物革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌微生物革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌本章内容本章内容革兰阳性无芽胞杆菌革兰阳性无芽胞杆菌白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌产单核细胞李斯特菌产单核细胞李斯特菌红斑丹毒丝菌红斑丹毒丝菌革兰阳性需氧芽胞杆菌属革兰阳性需氧芽胞杆菌属炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌蜡样芽胞杆菌蜡样芽胞杆菌本章内容革兰阳性无芽胞杆菌教学要求教学要求掌握掌握白喉棒状杆菌、白喉棒状杆菌、炭疽芽孢杆菌生物学性状与炭疽芽孢杆菌生物学性状与微生物学检验。微生物学检验。熟悉产单核细胞李斯特菌的生物学性状与微生物熟悉产单核细胞李斯特菌的生物学性状与微生物学检查法。学检查法。了解红斑丹毒丝菌、蜡样芽胞杆菌的生物学性状了解红斑丹毒丝菌、蜡样芽胞杆菌的生物学性状与微生物学检查与微生物学检查教学要求掌握白喉棒状杆菌、炭疽芽孢杆菌生物学性状与微生物学检第一节第一节 革兰阳性无芽胞杆菌革兰阳性无芽胞杆菌（一（一 ）生物学特性）生物学特性1. 形态结构形态结构：革兰氏染色阳性，菌体细长弯曲，：革兰氏染色阳性，菌体细长弯曲，一端或两端一端或两端膨大呈棒状膨大呈棒状，常排列呈，常排列呈V、L等文字等文字形。无鞭毛、无荚膜、无芽胞。用亚甲蓝或奈形。无鞭毛、无荚膜、无芽胞。用亚甲蓝或奈瑟染色，菌体一端、两端或中央可见明显的浓瑟染色，菌体一端、两端或中央可见明显的浓染颗粒，称为染颗粒，称为异染颗粒异染颗粒，主要成分是核糖核酸，主要成分是核糖核酸和多磷酸盐。和多磷酸盐。一、白喉棒状杆菌一、白喉棒状杆菌第一节革兰阳性无芽胞杆菌（一）生物学特性一、白喉棒状杆菌电镜下的白喉杆菌电镜下的白喉杆菌电镜下的白喉杆菌形态与染色形态与染色形态与染色革兰染色白喉棒状杆菌革兰染色白喉棒状杆菌革兰染色白喉棒状杆菌2. 培养特性：培养特性： 本菌为需氧或兼性厌氧菌。对营养要求较严格，本菌为需氧或兼性厌氧菌。对营养要求较严格，在一般培养基上不生长。在一般培养基上不生长。 在在吕氏血清斜面吕氏血清斜面上生长快，菌落为细小有光泽、上生长快，菌落为细小有光泽、圆形、灰白色、凸起、光滑的菌落；涂片染色菌体圆形、灰白色、凸起、光滑的菌落；涂片染色菌体形态典型、异染颗粒明显形态典型、异染颗粒明显。 在亚碲酸钾血平板上，可形成黑色或灰黑色菌在亚碲酸钾血平板上，可形成黑色或灰黑色菌落。此培养基可作为选择和鉴定之用。落。此培养基可作为选择和鉴定之用。 在麦康凯平板上不生长。在麦康凯平板上不生长。2.培养特性：亚碲酸钾血平板菌落：亚碲酸钾血平板菌落：亚碲酸钾血平板菌落：3. 3. 生化反应生化反应发酵葡萄糖、麦芽糖，产酸不产气。发酵葡萄糖、麦芽糖，产酸不产气。触酶和硝酸盐还原试验阳性，氧化酶阴性。触酶和硝酸盐还原试验阳性，氧化酶阴性。不分解尿素，不产生吲哚。不分解尿素，不产生吲哚。4. 4. 抵抗力抵抗力 对热抵抗力不强，煮沸对热抵抗力不强，煮沸1 1分钟死亡。分钟死亡。对干燥、对干燥、寒冷和日光的抵抗力较其他无芽胞细菌强，对一寒冷和日光的抵抗力较其他无芽胞细菌强，对一般消毒剂敏感。般消毒剂敏感。3.生化反应（二）微生物学检验（二）微生物学检验标本的采集标本的采集鉴定鉴定直接涂片直接涂片分离培养分离培养毒力试验毒力试验（二）微生物学检验标本的采集用无菌长棉拭子从疑为假膜的边缘采取分用无菌长棉拭子从疑为假膜的边缘采取分泌物，也可采取鼻咽部或扁桃腺分泌物。作泌物，也可采取鼻咽部或扁桃腺分泌物。作培养时应在抗生素前采取，如不能立即送检，培养时应在抗生素前采取，如不能立即送检，应将标本浸于无菌生理盐水或应将标本浸于无菌生理盐水或15%甘油中，甘油中，标本应取双份。标本应取双份。1. 标本的采集标本的采集用无菌长棉拭子从疑为假膜的边缘采取分泌物，也可采取鼻咽部或2. 2. 鉴定鉴定直接涂片染色镜检直接涂片染色镜检革兰染色革兰染色：观察形态、染色：观察形态、染色异染颗粒染色异染颗粒染色：观察异染颗粒：观察异染颗粒初步报告初步报告：检出具有异染颗粒的革兰阳性杆菌：检出具有异染颗粒的革兰阳性杆菌分离培养：分离培养：同时接种血平板及吕氏斜面或亚碲酸同时接种血平板及吕氏斜面或亚碲酸钾血平板钾血平板吕氏斜面吕氏斜面：生长迅速，涂片镜检异染颗粒明显：生长迅速，涂片镜检异染颗粒明显亚碲酸钾血平板亚碲酸钾血平板：黑色菌落：黑色菌落2.鉴定直接涂片染色镜检五、开标与评标13.1本合同以人民币支付。2、采购代理机构应当自中标人确定之日起2个工作日内，采购代理机构将向中标人签发中标通知书，并在省级以上人民政府财政部门指定的媒体上同时进行公告。1、坚持中国共产党的领导，坚持四项基本原则，积极参加各种政治理论学习，入党动机端正；贴心服务的质量有明确的衡量标准。服务者的热忱要通过一定的规划，使之能够被客户感受得到。人员、电话和业务服务过程中都存在服务礼仪。一般的礼仪对应要达到礼尚往来、宾至如归这样的质量目标。因5S做得不好而引发的设备故障，在作业现场是举不胜举，如润滑的堵塞、因灰尘导致马达烧坏、光电管脏污产生错误动作。10、确定成交候选人（3）人事部和督察部，要对市场各级人员检查。把思想状况和工作做为考核内容，及时做出处理。b.统计方法用于生产过程控制，可以减少质量波动，防止不合格品的出现，有利于提高产品质量和技术性能；9.4.5供应商在响应文件中提供虚假材料的；a、如有条件，可以开一产品鉴定会，这样可以加速把药品情况向医生做一介绍，使其对我们的企业和产品有个初步印象，为以后工作打下基础。鉴定要点鉴定要点革兰阳性，着色不均匀，菌体细长弯曲，排列不革兰阳性，着色不均匀，菌体细长弯曲，排列不规则，有规则，有X X、V V形态，具有异染颗粒形态，具有异染颗粒触酶阳性，无动力，无芽胞触酶阳性，无动力，无芽胞吕氏血清斜面的菌落：灰白色、隆起、湿润吕氏血清斜面的菌落：灰白色、隆起、湿润亚碲酸钾血平板的菌落：黑色或灰黑色亚碲酸钾血平板的菌落：黑色或灰黑色五、开标与评标鉴定要点革兰阳性，着色不均匀，菌体细长弯曲，排毒力试验毒力试验人类临床标本中检出白喉棒状杆菌，并非人类临床标本中检出白喉棒状杆菌，并非都能产生毒素，产生外毒素的菌株是由于都能产生毒素，产生外毒素的菌株是由于携带携带-棒状杆菌噬菌体棒状杆菌噬菌体。可用。可用 Elek Elek 琼脂脂扩散法体外散法体外试验或用或用动物体内毒力物体内毒力测定。定。毒力试验人类临床标本中检出白喉棒状杆菌，并非都能产生毒素，产(1)(1)琼脂平板毒力试验：琼脂平板毒力试验： 将含有将含有2020牛血清肉汤琼脂注于平皿牛血清肉汤琼脂注于平皿中，将浸有中，将浸有lOOulOOumlml抗毒素血清的滤纸条抗毒素血清的滤纸条沉于琼脂内，在与滤纸条垂直方向将待检沉于琼脂内，在与滤纸条垂直方向将待检菌划线接种，同时接种标准产毒株作为阳菌划线接种，同时接种标准产毒株作为阳性对照。性对照。3737培养培养 2448h 2448h，若菌苔两侧，若菌苔两侧出现斜向外侧延伸的乳白色沉淀线，并与出现斜向外侧延伸的乳白色沉淀线，并与其邻近的标准产毒株的沉淀线相吻合，则其邻近的标准产毒株的沉淀线相吻合，则为产毒株。为产毒株。 (1)琼脂平板毒力试验：ElekElek平板试验结果平板试验结果沉淀线沉淀线(阳性阳性)含白喉抗毒素滤纸片含白喉抗毒素滤纸片白喉杆菌菌苔白喉杆菌菌苔Elek平板试验结果沉淀线(阳性)含白喉抗毒素滤纸片白喉杆菌(2)(2)动物试验动物试验 采用家兔皮内试验法。取待检菌的采用家兔皮内试验法。取待检菌的48h48h肉汤肉汤培养液培养液O O2ml2ml，注射在去毛的一侧体壁皮内，注射在去毛的一侧体壁皮内，5h5h后注射后注射500U500U白喉抗毒素血清，白喉抗毒素血清，30min30min后再次注后再次注射同样的培养液于动物去毛的另一侧体壁皮内作射同样的培养液于动物去毛的另一侧体壁皮内作为对照。经为对照。经2472h2472h后，若注射抗毒素前接种培后，若注射抗毒素前接种培养液的部位发生红肿与坏死，而对照部位不发生养液的部位发生红肿与坏死，而对照部位不发生任何变化，则说明待检菌株具有毒力。任何变化，则说明待检菌株具有毒力。 (2)动物试验采用家兔皮内试验法。取待检菌的48h（三）临床意义（三）临床意义传染源：患者或带菌者传染源：患者或带菌者致病物质：白喉外毒素（由携带致病物质：白喉外毒素（由携带-棒状杆菌噬菌棒状杆菌噬菌体的白喉杆菌产生）体的白喉杆菌产生）经呼吸道飞沫感染，引起白喉。经呼吸道飞沫感染，引起白喉。假膜脱落阻塞呼吸道是白喉早期死亡的主要原因假膜脱落阻塞呼吸道是白喉早期死亡的主要原因中毒性心肌炎是白喉晚期死亡的主要原因中毒性心肌炎是白喉晚期死亡的主要原因抗白喉免疫主要依靠白喉抗毒素的中和作用抗白喉免疫主要依靠白喉抗毒素的中和作用（三）临床意义传染源：患者或带菌者二、产单核细胞李斯特菌二、产单核细胞李斯特菌（一）生物学特性（一）生物学特性（二）微生物检验（二）微生物检验（三）临床意义（三）临床意义二、产单核细胞李斯特菌（一）生物学特性（一）微生物特性（一）微生物特性形态与染色：形态与染色：G G+ +短小杆菌或球杆菌，常成双排列，短小杆菌或球杆菌，常成双排列，无芽胞无芽胞培养特性：培养特性：最适最适30303737， 4 4能生长，在血琼能生长，在血琼脂平板上，形成较小、圆形、光滑而有狭窄脂平板上，形成较小、圆形、光滑而有狭窄-溶溶血血环环的菌落，耐的菌落，耐8.5%NaCl8.5%NaCl，半固体培养中，半固体培养中动动力阳力阳性（性（倒伞形，倒伞形，是本菌特征之一）是本菌特征之一）。生化反生化反应：触酶（触酶（+ +），甲基红（），甲基红（+ +），），VPVP（+ +），）， CAMPCAMP（+ +），发酵葡萄糖、果糖、麦芽糖等，产酸），发酵葡萄糖、果糖、麦芽糖等，产酸不产气不产气 （一）微生物特性形态与染色：G+短小杆菌或球杆菌，常成双排列（二）微生物学检验（二）微生物学检验标本采集：标本采集：血液、脑脊液、分泌物及病变组织等血液、脑脊液、分泌物及病变组织等鉴定：鉴定：直接涂片：直接涂片：脑脊液离心后取沉淀涂片，其它直接涂片脑脊液离心后取沉淀涂片，其它直接涂片分离培养：分离培养：脑脊液：血琼脂平板脑脊液：血琼脂平板血标本：增菌后，再接种血琼脂平板血标本：增菌后，再接种血琼脂平板咽拭子、组织和粪便等：接种于肉汤培养基中，置于咽拭子、组织和粪便等：接种于肉汤培养基中，置于4 4冰箱中冷增菌，然后转种于血琼脂平板冰箱中冷增菌，然后转种于血琼脂平板（二）微生物学检验标本采集：血液、脑脊液、分泌物及病变组织等（二）微生物学检验（二）微生物学检验鉴定特点：鉴定特点：G+G+杆菌，细菌在湿片中呈翻筋斗运杆菌，细菌在湿片中呈翻筋斗运动动倒伞形生长，在血平板上形成狭窄倒伞形生长，在血平板上形成狭窄-溶血溶血环环CAMPCAMP阳性，与金葡协同溶血阳性，木糖、甘露阳性，与金葡协同溶血阳性，木糖、甘露醇、醇、H2SH2S（- -）（二）微生物学检验鉴定特点：G+杆菌，细菌在湿片中呈翻筋斗运（三）临床意义（三）临床意义 李斯特菌属有李斯特菌属有7 7个种，只有该菌对人和动物致病个种，只有该菌对人和动物致病分布广泛，土壤、水、植物、人和动物粪便中均分布广泛，土壤、水、植物、人和动物粪便中均存在，亦可自甲壳动物、蝇、蜱中分离出存在，亦可自甲壳动物、蝇、蜱中分离出能引起多种野生动物和家畜感染（羊、马、狗、能引起多种野生动物和家畜感染（羊、马、狗、猫、鸟、鱼等）猫、鸟、鱼等）正常人粪便带菌率达正常人粪便带菌率达10%10%左右，左右，70%70%的人可短期带的人可短期带菌。新生儿、免疫功能降低者，易受该菌感染菌。新生儿、免疫功能降低者，易受该菌感染（三）临床意义李斯特菌属有7个种，只有该菌对人和动物致病健康带菌者是主要的传染源健康带菌者是主要的传染源 污染食物，粪污染食物，粪- -口途径传播，通过肠道扩散全身口途径传播，通过肠道扩散全身胎盘和产道胎盘和产道感染新生儿（脑炎、脑膜炎、败血症）感染新生儿（脑炎、脑膜炎、败血症）接触病畜及产品接触病畜及产品眼和皮肤的局部感染、脓肿、尿道炎眼和皮肤的局部感染、脓肿、尿道炎氨基糖苷类抗生素可增强青霉素的抗菌活性，但头孢类不氨基糖苷类抗生素可增强青霉素的抗菌活性，但头孢类不能用于此菌的临床治疗能用于此菌的临床治疗（三）临床意义（三）临床意义 （三）临床意义33.2详细评审即按照“第四章评标标准及方法”对所有实质上响应招标文件要求的投标进行评审，以确定中标候选人。4.3本条规定不因本合同的终止和到期而失效。（1）货物主要技术性能的详细描述：包括货物名称、结构、功能、技术性能、特点、供货范围、加工装配检验等工艺手段、验收执行的标准、质量保证措施、采用的新材料、新工艺、新技术等内容。人才培训方法（4）保证交货期的措施（必要时提供生产计划周期表）。（二）、“基础资料”菜单5.2卖方应在合同规定的交货期前五日以传真形式通知买方。10、依据财政部、工业和信息化部政府采购促进中小企业发展暂行办法（财库2011181号）文件规定，中型、小型和微型企业报价的须提供企业所在地的县级以上中小企业主管部门认定书和声明函；（18）投标人最终报价表服务过程中涉及到各个环节、每个细节。即使没有面对面的语言交流，行销人员具备优雅的姿态和绅士淑女的风度，也能够在短时间内给顾客留下深刻而美好的印象。因此，行销人员在工作过程中也需对自身的体态语言加以重视。2.2叙述统计方法：指统计工作的初步阶段。主要运用搜集和显示这两种方法，目的在于描述事物观测结果；三、红斑丹毒丝菌生物学性状微生物学检查临床意义33.2详细评审即按照“第四章评标标准及方法”对所有（一）生物学性状形态与染色：G+短小杆菌培养特性：需氧或兼性厌氧，最适温度3035，pH7.27.4,耐8.5%NaCl，35培养24h形成S和R两种菌落，S型细菌呈杆状或球杆装，R型细菌呈长丝状，明胶穿刺呈“试管刷”样生长。生化反应：触酶、氧化酶（-），乳糖、甲基红、V-P、靛基质、尿酶（-），三糖铁产H2S。（一）生物学性状形态与染色：G+短小杆菌（二）微生物学检查标本：血液、分泌物、渗出液鉴定：（1）直接涂片镜检：G+短小杆菌（2）分离培养：35培养24h形成S和R两种菌落，明胶穿刺接种可见“试管刷”样生长。（3）生化反应：触酶（-），乳糖（+），三糖铁产H2S（二）微生物学检查标本：血液、分泌物、渗出液（三）临床意义红斑丹毒丝菌病病原体鱼类、家畜、家禽、兔类经皮肤感染局部感染多见，很少引起全身感染症状：红肿、疼痛、痒，高热，淋巴管炎，关节炎，败血症、心内膜炎首选青霉素（三）临床意义红斑丹毒丝菌病病原体第二节第二节 革兰阳性需氧芽胞杆菌属革兰阳性需氧芽胞杆菌属炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌蜡样芽胞杆菌蜡样芽胞杆菌第二节革兰阳性需氧芽胞杆菌属炭疽芽胞杆菌炭疽病疫情炭疽病疫情据新华社电据新华社电20112011年年8 8月月1212日，从辽宁省卫日，从辽宁省卫生厅获悉，辽宁鞍山海城市和岫岩县近日生厅获悉，辽宁鞍山海城市和岫岩县近日发生的皮肤炭疽传染病疫情，截至发生的皮肤炭疽传染病疫情，截至1111日日2020时病例报告数已增至时病例报告数已增至3030例，其中临床确诊例，其中临床确诊病例病例3 3例，疑似病例例，疑似病例2727例，无死亡病例。例，无死亡病例。据调查，辽宁这次疫情是由于当地居民私据调查，辽宁这次疫情是由于当地居民私自屠宰或接触病牛而感染发生的自屠宰或接触病牛而感染发生的炭疽病疫情据新华社电2011年8月12日，从辽宁省卫生厅获微生物革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌培训课件皮肤炭疽皮肤炭疽 一、炭疽芽胞杆菌一、炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌是人类历史上最早被发现的炭疽芽胞杆菌是人类历史上最早被发现的病原菌，俗称炭疽杆菌。是一种致病能力病原菌，俗称炭疽杆菌。是一种致病能力最强的革兰阳性大杆菌。最强的革兰阳性大杆菌。芽孢：芽孢：有些细菌有些细菌(多为杆菌多为杆菌)在一定条件下在一定条件下,细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。很强的球形或椭圆形的休眠体。 一、炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌是人类历史上最早被发现的病原菌（一）微生物特性（一）微生物特性形态与染色形态与染色 培养特性培养特性生化反应生化反应抵抗力抵抗力（一）微生物特性形态与染色1 1、形态与染色、形态与染色致病菌中最大的致病菌中最大的G G+ +杆菌杆菌，两端平切、竹节状、，两端平切、竹节状、无无鞭毛，鞭毛，有毒株有明显荚膜，有毒株有明显荚膜，有芽胞有芽胞椭圆形，小于菌体，位于菌体中央椭圆形，小于菌体，位于菌体中央1、形态与染色致病菌中最大的G+杆菌，两端平切、竹节状、无鞭炭疽杆菌荚膜炭疽杆菌荚膜炭疽杆菌荚膜2 2、培养特性、培养特性需氧或兼性厌氧，生长条件不严格；需氧或兼性厌氧，生长条件不严格；普通培养基：扁平、粗糙、不透明、灰白色、无普通培养基：扁平、粗糙、不透明、灰白色、无光泽，边缘不整齐的菌落，低倍镜下菌落边缘呈光泽，边缘不整齐的菌落，低倍镜下菌落边缘呈卷发状卷发状；血平板血平板：121215h15h不溶血，不溶血，181824h24h轻微溶血；轻微溶血；肉汤：絮状沉淀生长肉汤：絮状沉淀生长其他需氧芽胞杆菌大多溶血明显而快速其他需氧芽胞杆菌大多溶血明显而快速2、培养特性需氧或兼性厌氧，生长条件不严格；3.1除本合同另有规定外，业主的权利和义务包括：（5）分项报价表这家医院的每部电梯里都有相应的指示地图，这种服务让病人对医院的满意度大为提高。4.3.3企业概况生产特点，本企业安全生产的一般状况、性质、特点和特殊危险部位的介绍；作业现场经常可看到主管为故障的事后处理而烦恼，实际上这此故障只要通过几分钟的事前预防即可防止，却因作业人员视若无睹而造成大故障，例如：机械的给油量不足、油内混入异物造成管路阻塞、螺丝未能锁紧等等。这些微缺陷之所以造成故障，是因为当时不排除不至于立刻产生异常，因此谁都认为不重要。微缺陷的排除只有彻底活用5S手法才能真正解决问题。1、初步评审，确定入围投标人1.11站内禁止使用手机、照相机、摄像机。（3）如只是合同的一部分被终止，其他部分仍应继续执行。1、招标代理机构对招标文件必要的澄清或修改须在投标文件递交截止时间15日前，以书面形式通知所有购买招标文件的潜在投标人。澄清或修改的内容将构成招标文件的组成部分，对所有投标人具有约束力；炭疽在普通平板的菌落炭疽在普通平板的菌落3.1除本合同另有规定外，业主的权利和义务包括：炭疽在普炭疽在血平板的菌落炭疽在血平板的菌落炭疽在血平板的菌落炭疽杆菌卷发状菌落炭疽杆菌卷发状菌落炭疽杆菌卷发状菌落3 3、生化反应、生化反应发酵葡萄糖、麦芽糖海藻糖等，产酸不产发酵葡萄糖、麦芽糖海藻糖等，产酸不产气气硝酸盐还原试验阳性硝酸盐还原试验阳性不产生吲哚和硫化氢不产生吲哚和硫化氢枸橼酸盐、尿酶阴性枸橼酸盐、尿酶阴性3、生化反应发酵葡萄糖、麦芽糖海藻糖等，产酸不产气4 4、抵抗力、抵抗力抵抗力不强，加热抵抗力不强，加热60 3060 30分钟死亡，易被一般消分钟死亡，易被一般消毒剂杀灭；毒剂杀灭；芽胞抵抗力很强，煮沸芽胞抵抗力很强，煮沸10min10min或干热或干热140 3h140 3h才能才能杀灭；杀灭；芽胞在干燥土壤中或皮毛中常温下存活数十年致芽胞在干燥土壤中或皮毛中常温下存活数十年致病力不减，牧场一旦污染，传染性可持续数十年病力不减，牧场一旦污染，传染性可持续数十年生物武器生物武器4、抵抗力抵抗力不强，加热6030分钟死亡，易被一般消毒 （二）微生物学检验（二）微生物学检验标本采集及处理标本采集及处理鉴定鉴定标本直接检查标本直接检查分离培养分离培养鉴定依据鉴定依据鉴别试验鉴别试验（二）微生物学检验标本采集及处理1 1、标本采集及处理、标本采集及处理皮肤炭疽：皮肤炭疽：病灶深部标本病灶深部标本肺炭疽：肺炭疽：痰和血液痰和血液肠炭疽：肠炭疽：粪、呕吐物粪、呕吐物脑膜炭疽：脑膜炭疽：CSFCSF、血液、血液尽可能在抗生素治疗前采取标本尽可能在抗生素治疗前采取标本严禁用解剖方式获取标本。严禁用解剖方式获取标本。1、标本采集及处理皮肤炭疽：病灶深部标本2 2、 鉴定鉴定G G+ +染色：染色：G G+ +大杆菌、两端平截、竹节状排列。大杆菌、两端平截、竹节状排列。荚膜染色：荚膜染色：有明显荚膜，有时呈有明显荚膜，有时呈S S、T T、O O形排列。形排列。芽胞染色：芽胞染色：芽胞卵圆形，位于菌体中央，菌体不芽胞卵圆形，位于菌体中央，菌体不膨大。膨大。（1 1）直接镜检）直接镜检2、鉴定G+染色：G+大杆菌、两端平截、竹节状排列。（1）（2）分离培养）分离培养血平板上的菌落：较大、灰白色、边缘不整齐和血平板上的菌落：较大、灰白色、边缘不整齐和有轻微溶血。有轻微溶血。普通营养琼脂平板的菌落：灰白色、扁平、干燥、普通营养琼脂平板的菌落：灰白色、扁平、干燥、无光泽。无光泽。浸染严重标本，最好用选择性培养基（喷他脒多浸染严重标本，最好用选择性培养基（喷他脒多粘菌素粘菌素B B培养基）。培养基）。（2）分离培养血平板上的菌落：较大、灰白色、边缘不整齐和有轻（3 3）鉴定依据）鉴定依据涂片染色和菌落特征涂片染色和菌落特征生化试验生化试验青霉素抑菌试验青霉素抑菌试验噬菌体裂解试验噬菌体裂解试验（3）鉴定依据涂片染色和菌落特征 将可疑菌落挑出，划线接种于普通营将可疑菌落挑出，划线接种于普通营养琼脂平板之上，在划线区内分别贴上浸养琼脂平板之上，在划线区内分别贴上浸有诊断用炭疽芽孢杆菌噬菌体和青霉素的有诊断用炭疽芽孢杆菌噬菌体和青霉素的纸片。纸片。3737孵育过夜或孵育过夜或24h24h后，在两种纸片后，在两种纸片的周围均出现明显的抑菌环，便可判定为的周围均出现明显的抑菌环，便可判定为炭疽芽孢杆菌。炭疽芽孢杆菌。将可疑菌落挑出，划线接种于普通营养琼脂平板之上，微生物革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌培训课件噬菌体斑噬菌体斑噬菌体斑（4 4）鉴别试验）鉴别试验串珠试验串珠试验 炭疽芽孢杆菌接种于含有炭疽芽孢杆菌接种于含有0.050.050.5U/ml0.5U/ml青霉素的培养基中，可发生形态变青霉素的培养基中，可发生形态变异，形成大而均匀的圆球状并相连如串球异，形成大而均匀的圆球状并相连如串球状，而类炭疽杆菌无此现象。状，而类炭疽杆菌无此现象。（4）鉴别试验串珠试验串珠试验串珠试验串珠试验（三）临床意义（三）临床意义所致疾病：所致疾病：炭疽病炭疽病炭疽芽胞杆菌主要是牛、羊等食草类动物炭疽病的炭疽芽胞杆菌主要是牛、羊等食草类动物炭疽病的病原体病原体炭疽病是人畜共患的急性传染病炭疽病是人畜共患的急性传染病传染源：患病食草动物及其制品或被污染物传染源：患病食草动物及其制品或被污染物传播途径：接触传播途径：接触皮肤炭疽皮肤炭疽 食用食用肠炭疽肠炭疽 吸入吸入肺炭疽肺炭疽（三）临床意义所致疾病：炭疽病致病物质致病物质荚膜：荚膜：抗吞噬，有利于细菌在组织内繁殖扩散抗吞噬，有利于细菌在组织内繁殖扩散毒素：是致病和死亡的主要原因毒素：是致病和死亡的主要原因对青霉素、红霉素、庆大霉素、氯霉素、链霉素、对青霉素、红霉素、庆大霉素、氯霉素、链霉素、环丙沙星均敏感，但对头孢菌素耐药。环丙沙星均敏感，但对头孢菌素耐药。（三）临床意义（三）临床意义致病物质（三）临床意义二、蜡样芽孢杆菌二、蜡样芽孢杆菌微生物学特性微生物学特性微生物学检验微生物学检验临床意义临床意义二、蜡样芽孢杆菌微生物学特性（一）微生物学特性（一）微生物学特性形态与染色形态与染色培养特性培养特性生化反应生化反应（一）微生物学特性形态与染色1 1、形态与染色、形态与染色G G+ +大杆菌，菌体两端稍钝圆，多数呈链状大杆菌，菌体两端稍钝圆，多数呈链状排列。排列。无荚膜、有鞭毛（炭疽杆菌无鞭毛）无荚膜、有鞭毛（炭疽杆菌无鞭毛）芽胞位于菌体中心或次末端、不突出菌体芽胞位于菌体中心或次末端、不突出菌体1、形态与染色G+大杆菌，菌体两端稍钝圆，多数呈链状排列。蜡样杆菌蜡样杆菌2 2、培养特性、培养特性营养琼脂平板：菌落呈乳白色、不透明、边缘不营养琼脂平板：菌落呈乳白色、不透明、边缘不整齐，菌落常沿划线蔓延扩展成片如同白蜡整齐，菌落常沿划线蔓延扩展成片如同白蜡血平板：菌落呈浅灰色、毛玻璃样，伴草绿色溶血平板：菌落呈浅灰色、毛玻璃样，伴草绿色溶血或透明溶血环血或透明溶血环卵黄培养基：培养卵黄培养基：培养3 3小时能看到白色混浊环，称之小时能看到白色混浊环，称之为为乳光反应乳光反应液体培养基：生长均匀，有菌膜液体培养基：生长均匀，有菌膜2、培养特性营养琼脂平板：菌落呈乳白色、不透明、边缘不整齐，蜡样杆菌在血平板溶血蜡样杆菌在血平板溶血蜡样杆菌普通平板菌落蜡样杆菌普通平板菌落3 3、生化反应、生化反应发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、水杨素等，产发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、水杨素等，产酸不产气酸不产气不产生吲哚和硫化氢不产生吲哚和硫化氢V-PV-P（+ +）3、生化反应发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、水杨素等，产酸不产气（二）微生物学检验（二）微生物学检验标本：标本：患者食物、呕吐物、剩余食物、腹泻粪便患者食物、呕吐物、剩余食物、腹泻粪便鉴定鉴定直接涂片镜检直接涂片镜检分离培养分离培养活菌计数活菌计数 105个个/g 或或 105个个/ml鉴定依据：菌落、形态染色、生化反应等鉴定依据：菌落、形态染色、生化反应等（二）微生物学检验标本：患者食物、呕吐物、剩余食物、腹泻粪便( (三三) )临床意义临床意义食物中毒食物中毒含菌量达含菌量达105/g（ml)以上以上呕吐型呕吐型耐热肠毒素耐热肠毒素腹泻型腹泻型不耐热肠毒素不耐热肠毒素心内膜炎、败血症和脑膜炎心内膜炎、败血症和脑膜炎夏、秋季多见夏、秋季多见(三)临床意义食物中毒练习题1、对炭疽病动物采集标本要特别禁止、对炭疽病动物采集标本要特别禁止( ) A、取舌尖、取舌尖 B、取耳尖、取耳尖 C、局部病灶的病变组织、局部病灶的病变组织 D、宰杀后解剖、宰杀后解剖 2、下列哪种细菌的菌落为卷发状、下列哪种细菌的菌落为卷发状( )A蜡样芽胞杆菌蜡样芽胞杆菌 B炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌 C白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌 D阴道加特纳菌阴道加特纳菌 E产单核李斯特菌产单核李斯特菌练习题1、对炭疽病动物采集标本要特别禁止()3、以下哪个不是炭疽芽胞杆菌的生物学特征、以下哪个不是炭疽芽胞杆菌的生物学特征( ) A、革兰阳性、革兰阳性 B、菌体呈竹节状、菌体呈竹节状 C、专性需氧、专性需氧 D、感染后病死率不高、感染后病死率不高4、既有荚膜又有芽胞的细菌是、既有荚膜又有芽胞的细菌是( ) A、肺炎克雷伯菌、肺炎克雷伯菌 B、炭疽芽胞杆菌、炭疽芽胞杆菌 C、枯草芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌 D、蜡样芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌5、产单核李斯特菌在半固体培养基中培养可出现（、产单核李斯特菌在半固体培养基中培养可出现（ ） A、沉淀生长、沉淀生长 B、浑浊生长、浑浊生长 C、产生色素、产生色素 D、倒伞形生长、倒伞形生长 3、以下哪个不是炭疽芽胞杆菌的生物学特征()A、革兰