优秀精品课件文档资料;酶联免疫吸附实验ELISA; 目的和要求目的和要求v掌握ELISA的原理、操作过程及本卷须知v了解ELISA实验结果的读取和分析;实验原理实验原理v借助酶标志抗体或抗原在体外与抗原或抗体结合，经过相应底物被酶解后呈现显色反响。反响颜色深浅与抗原或抗体量的多少有关。v特点：灵敏、特异v类型：v 双抗体夹心法、竞争法、间接法等; 双抗夹心法双抗夹心法ELISAELISA; 竞争法竞争法 ELISA ELISA;实验资料实验资料vBSA包被的测定板v酶标抗鼠IgG抗体v待检血清，阳性血清，阴性血清v洗涤液： PBS吐温-20v底物液：邻苯二胺OPDv终止液：10% H2S04;实验步骤实验步骤参与稀参与稀释好的待好的待测血清每孔血清每孔100ul100ul， 3737孵育孵育40min40min参与参与100ul100ul酶标抗体抗体, 37, 37孵育孵育30min30min洗板洗板3 3次次, ,每次每次1min1min洗板洗板3 3次次, ,每次每次1min1min;实验步骤实验步骤参与参与100ulTMB100ulTMB底物液避光室底物液避光室温孵育温孵育15min15min终止反响终止反响: :每孔加每孔加1 1滴滴1010硫酸硫酸结果察看结果察看;本卷须知本卷须知u加样：应将所加物加在加样：应将所加物加在ELISAELISA板孔的底部，并板孔的底部，并留意不可溅出，不可产生气泡。留意不可溅出，不可产生气泡。u洗板：每次洗液参与后，应静置洗板：每次洗液参与后，应静置1 1分钟使清洗分钟使清洗更加彻底。末次洗板尽量将水甩干。更加彻底。末次洗板尽量将水甩干。u液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行悄液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行悄然晃动然晃动3030秒，混匀液体。秒，混匀液体。u底物有毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，尽量防底物有毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，尽量防止接触。止接触。;