免免 疫疫 细细 胞胞 Immune cell学习指导1 1、掌握、掌握T T细胞、细胞、B B细胞的重要表面分子细胞的重要表面分子2 2、掌握、掌握T T细胞、细胞、B B细胞、细胞、NKNK细胞的功能细胞的功能3 3、熟悉、熟悉免疫细胞的起源与分化免疫细胞的起源与分化4 4、了解、了解T T细胞、细胞、B B细胞的分化发育细胞的分化发育免疫细胞的基本概念免疫细胞的基本概念 免疫细胞免疫细胞: :是参与免疫应答或与免疫应答有关的是参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞细胞, ,包括包括T T细胞细胞,B,B细胞细胞,NK,NK细胞细胞, ,单核吞噬细胞单核吞噬细胞,DC,DC细细胞等。胞等。 其中其中T,BT,B细胞又称免疫活性细胞细胞又称免疫活性细胞, ,介导细胞免疫介导细胞免疫和体液免疫。和体液免疫。免疫细胞的组成免疫细胞的组成免疫活性细胞免疫活性细胞免疫活性细胞免疫活性细胞TT、B B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞其他免疫细胞其他免疫细胞其他免疫细胞其他免疫细胞NKNK细胞细胞细胞细胞 单核单核单核单核- -巨噬细胞巨噬细胞巨噬细胞巨噬细胞 树突状细胞树突状细胞树突状细胞树突状细胞 粒细胞（嗜中性、嗜酸性、嗜碱性）粒细胞（嗜中性、嗜酸性、嗜碱性）粒细胞（嗜中性、嗜酸性、嗜碱性）粒细胞（嗜中性、嗜酸性、嗜碱性） 肥大细胞肥大细胞肥大细胞肥大细胞 造血干细胞造血干细胞造血干细胞造血干细胞 红细胞？血小板？血管内皮细胞？红细胞？血小板？血管内皮细胞？红细胞？血小板？血管内皮细胞？红细胞？血小板？血管内皮细胞？ 淋巴样干细胞髓样干细胞造血干细胞（HSC）巨/红祖细胞巨核细胞粒/巨祖细胞免疫细胞的起源与分化免疫细胞的起源与分化淋巴细胞系（淋巴细胞系（I I） T T淋巴细胞淋巴细胞一、一、T T细胞的分化成熟及胸腺选择细胞的分化成熟及胸腺选择二、二、T T细胞的表面分子（膜分子）细胞的表面分子（膜分子）三、三、T T细胞亚群及功能细胞亚群及功能 T淋巴细胞（T lymphocyte）简称T细胞，来源于骨髓的淋巴样干细胞，是由一群功能不同的异质性淋巴细胞组成。由于它在胸腺（thymus）内分化成熟故称为T细胞。成熟T细胞由胸腺迁出，移居于周围淋巴组织中淋巴结的副皮质区(T区、胸腺依赖区)和脾白髓小动脉周围，并可经血液组织淋巴血液再循环周游全身以发挥免疫调节和细胞免疫功能。一、一、T T细胞的分化成熟及胸腺选细胞的分化成熟及胸腺选择择早期祖T细胞祖T细胞前T细胞不成熟T细胞成熟T细胞外周T细胞CD2+ CD3+TCR基因重排,表达在胸腺中分化过程：在胸腺中分化过程：祖祖T T细胞细胞前前T T细胞细胞不成熟不成熟T T细胞细胞成熟成熟T T细胞细胞T T细胞的分化发育细胞的分化发育三个重要事件三个重要事件三个重要结果三个重要结果三三 个个 阶阶 段段CD4-CD8-(DN)CD4+CD8+(DP)CD4+/CD8+(SP)TCR重排重排阳性选择阳性选择阴性选择阴性选择获得功能性获得功能性TCR获得获得MHC限制性限制性获得自身耐受获得自身耐受二、二、T T细胞的表面分子及作用细胞的表面分子及作用1 1、TCR-CD3TCR-CD3复合物复合物2 2、辅助受体辅助受体（CD4/CD8CD4/CD8分子）分子）3 3、协同刺激分子、协同刺激分子4 4、丝裂原结合分子、丝裂原结合分子 刀豆素刀豆素A A （Con ACon A）、植物血凝素（）、植物血凝素（PHAPHA）等）等5 5、其他表面分子、其他表面分子 CKRCKRCKRCKR、白介素受体、白介素受体、白介素受体、白介素受体 TCR(TCR(T T c cell ell r receptor): Teceptor): T细胞抗原受体细胞抗原受体TCR TCR 、 链链 、 链链主要的主要的T T细胞细胞（90%90%外周血外周血T T）1 1、TCR-CD3TCR-CD3复合物复合物VV、VV决定决定TCRTCR特异性特异性胞内段短（胞内段短（1-61-6个个aaaa）不能传导信号不能传导信号识别抗原肽识别抗原肽-MHC-MHC分子分子复合物复合物 TCR-CD3 TCR-CD3复合物复合物 （识别（识别 + + 转导信号）转导信号）CD3CD3分子结构分子结构 （捷塔捷塔） 或或 （依塔）依塔）胞内段长（胞内段长（50-15550-155个氨基酸个氨基酸残基）具有残基）具有ITAMITAM基序，基序，介导介导介导介导TCRTCRTCRTCR与抗原接触后产生的与抗原接触后产生的与抗原接触后产生的与抗原接触后产生的活活活活化信号的传递化信号的传递化信号的传递化信号的传递。成熟成熟成熟成熟T T T T细胞表面的特征性表面标志细胞表面的特征性表面标志细胞表面的特征性表面标志细胞表面的特征性表面标志2 2、辅助受体（共受体）、辅助受体（共受体）-辅助第辅助第1 1信号传递信号传递CD4CD4和和CD8CD8分子分子CD4CD4与与MHC II MHC II 类分子类分子CD8CD8与与MHC I MHC I 类分子类分子辅助辅助TCRTCR（与（与MHC/MHC/抗原肽结合，抗原刺激信号转导）抗原肽结合，抗原刺激信号转导）MHCMHC限制性限制性T T细胞亚群细胞亚群的标志的标志信号转导信号转导CD8+T细胞细胞CD4+T细胞细胞A. CD28: (1) T细胞活化的最重要协同刺激受体分子CD28 B7 (2) CTLA-4 B7结合，给予活化的T细胞抑制信号B. CD40L:表达于活化的T细胞，与B细胞表面的CD40结合，参与B细胞的应答C. CD11，又称LFA-1:配体是ICAM-1,2,3，功能为促进T细胞与靶细胞的相互作用，增强细胞免疫效应D. CD2，又称LFA-2 :配体：LFA-3（CD58）、CD59、CD48 （1）表达于成熟T细胞, 胸腺细胞, NK细胞 （2）T细胞活化的旁路途径 （3）细胞间粘附分子: E花环实验，计数、鉴定和分离T细胞 正常人外周血T细胞结花率60703 3、协同刺激分子、协同刺激分子-协同刺激信号（第协同刺激信号（第2 2信号）信号）T T细胞的活化需要细胞的活化需要2 2个刺激信号个刺激信号TCR-CD3 识别识别 MHC/抗原肽抗原肽第第1信号信号CD28等粘附分子等粘附分子 结合结合 相应配体相应配体第第2信号信号协同刺激信号协同刺激信号CD28CD28分子：分子：T T细胞活化最重细胞活化最重要的协同刺激分子要的协同刺激分子 配体：配体：B7(B7-1B7(B7-1、B7-2B7-2） 静止和活化的静止和活化的T T细胞上均细胞上均 表达表达 提供提供T T细胞活化的协同刺细胞活化的协同刺激信号激信号CTLA-4:CTLA-4:抑制抑制T T细胞活化细胞活化配体：配体：B7(B7-1B7(B7-1、B7-2B7-2） 但与但与B7B7亲和力高于亲和力高于CD28CD28 只表达于活化只表达于活化T T细胞表面细胞表面 通过通过ITIMITIM结构传递抑制信号结构传递抑制信号, , 起负调节作用起负调节作用4 4、丝裂原结合分子、丝裂原结合分子5 5、其他表面分子、其他表面分子细胞因子受体（CKR）:参与T细胞活化、增殖和分化白介素受体白介素受体：促进或诱导T细胞活化、增殖、分化和成熟与丝裂原结合促使T细胞活化和诱导细胞分裂植物血凝素(PHA),刀豆素A(Con A)是常用的T细胞丝裂原转化实验用于T细胞功能检测，正常人T细胞转化率6070三、三、T T淋巴细胞亚群及功能淋巴细胞亚群及功能从不同角度分类：从不同角度分类：初始初始T T细胞、效应细胞、效应T T细胞和记忆性细胞和记忆性T T细胞细胞TCRTCRT T细胞和细胞和TCRTCRT T细胞细胞CD4+TCD4+T细胞和细胞和CD8+TCD8+T细胞细胞ThTh、TcTc（CTLCTL）和）和TrTr细胞细胞1 1、初始、初始T T、效应、效应T T、记忆、记忆T T细胞细胞初始初始T效应效应T记忆记忆T未接触过未接触过AgAPCCD45RA、CD62LCD45RO、CD44高亲和力高亲和力IL-2RCD45RO、CD44再次应答再次应答2 2、TCRTCRT T细胞和细胞和TCRTCRT T细胞细胞3. 3. 按表面标志不同分为按表面标志不同分为CD4+CD4+和和CD8+TCD8+T细胞细胞CD4+TCD8+TCD3+CD4+CD8-CD3+CD4-CD8+识别识别MHC II/MHC II/外源性抗原肽外源性抗原肽主要为主要为ThTh（help T lymphocytehelp T lymphocyte） 辅助性辅助性T T细胞细胞识别识别MHC I/MHC I/内源性抗原肽内源性抗原肽主要为主要为TcTc（cytotoxic T cytotoxic T lymphocytelymphocyte ，CTLCTL） 细胞毒性细胞毒性T T细胞细胞4. CD44. CD4+ +ThTh细胞，根据所分泌细胞因子和细胞，根据所分泌细胞因子和功能的不同，可分为：功能的不同，可分为：Th1Th1Th2Th2主要分泌主要分泌IL-2IL-2、IFN-IFN- 、LTLT 主要分泌主要分泌IL-4IL-4、IL-5IL-5、IL-6IL-6、IL10IL10介导细胞免疫介导细胞免疫（参与迟发性超敏反应，促进（参与迟发性超敏反应，促进TcTc活化增殖，促活化增殖，促进进M M 功能功能）介导体液免疫介导体液免疫（促进（促进B B增殖、分化、成熟）增殖、分化、成熟）Th3 Th3 分泌分泌TGF-TGF- ，发挥发挥免疫负调节免疫负调节（TDTH）CD4+CD4+CDCD8 8+CDCD4-4-CDCD8-8-ThThTrTrTcTcTCRTCR TCRTCRTh1Th1Th2Th2Th3Th3Tr1Tr1小小 结结一、一、B B细胞的分化成熟细胞的分化成熟二、二、B B细胞的表面分子（膜分子）细胞的表面分子（膜分子）三、三、B B细胞亚群及功能细胞亚群及功能淋巴细胞系（淋巴细胞系（IIII） B B 淋巴细胞淋巴细胞 来源于骨髓前B细胞，人及哺乳动物的B细胞在骨髓内分化成熟，故称骨髓依赖性淋巴细胞 (bone marrow dependent lymphocyte) , 简称“ B ”细胞。 较少参与再循环，成熟B细胞经血循环主要定居于淋巴结皮质浅层和脾脏红髓与白髓的淋巴小结；外周血中, 占淋巴细胞总数的 10%-20%。分两个阶段分两个阶段: :v 抗原非依赖期抗原非依赖期 ( (中枢免疫器官中枢免疫器官) ) Pro-B Pre-B Pro-B Pre-B 不成熟不成熟B B 成熟成熟B Bv 抗原依赖期抗原依赖期 ( (外周免疫器官外周免疫器官) ) 抗原抗原 成熟成熟B B 浆细胞浆细胞 一、一、B B细胞的分化成熟细胞的分化成熟B细胞的分化发育细胞的分化发育二个重要结果二个重要结果获得功能性获得功能性BCR获得自身耐受获得自身耐受二、二、B B细胞的表面分子细胞的表面分子1 1、BCRBCR复合体复合体2 2、BCRBCR辅助受体辅助受体3 3、协同刺激分子、协同刺激分子4 4、丝裂原受体、丝裂原受体5 5、其他表面分子、其他表面分子1 1、BCRBCR复合体：由复合体：由B B细胞细胞mIgmIg和和Ig/IgIg/Ig构成构成(1)(1)BCR (B cell antigen receptor) :BCR (B cell antigen receptor) : BCR BCR 是是B B细胞特征性受细胞特征性受体，由膜免疫球蛋白分子体，由膜免疫球蛋白分子(mIg)(mIg)构成；多数成熟构成；多数成熟B B细胞表达细胞表达mIgMmIgM和和mIgDmIgD，记忆，记忆B B 细胞无细胞无mIgDmIgD。 BCRBCR功能功能 : : 特异性识别抗原分子特异性识别抗原分子的的B B细胞表位细胞表位 异源二聚体，与异源二聚体，与mIgmIg相连组成相连组成BCR-Ig/IgBCR-Ig/Ig复合体复合体。 功能功能:转导转导BCRBCR与抗原结合产生的信号。与抗原结合产生的信号。 参与参与IgIg从胞内向胞膜的转运。从胞内向胞膜的转运。（2 2）Ig/Ig(CD79a/CD79b): Ig/Ig(CD79a/CD79b): BCR TCR组成组成 BCR- Ig /Ig TCR-CD3结合的抗原结合的抗原 游离抗原游离抗原 不能识别游离抗原不能识别游离抗原 可与任何蛋白抗原结合可与任何蛋白抗原结合 只与抗原肽只与抗原肽-MHC复合物结合复合物结合抗原长度、表位抗原长度、表位 15aa、线性或构象表位、线性或构象表位 8-12aa、线性表位、线性表位BCRBCR与与TCRTCR的区别的区别2 2、BCRBCR辅助受体辅助受体(1) CD19(1) CD19与与CD21CD21、CD81(TAPA-1)CD81(TAPA-1)及及CD225(Ieu-13):CD225(Ieu-13):一般认为，在炎症和补体激活下，补体成分一般认为，在炎症和补体激活下，补体成分C3dC3d把把CDl9/CD21/CD8l CDl9/CD21/CD8l /CD225/CD225复合物与复合物与BCRBCR复合物桥联在复合物桥联在起，把起，把CDl9 CDl9 “拉近拉近” BCRBCR，加强由，加强由BCRBCR复合物传导的信号，增强复合物传导的信号，增强B B细胞对抗原刺激的敏感性。细胞对抗原刺激的敏感性。( 补体补体C3d受体受体 )(1) CD40(1) CD40：表达于成熟的表达于成熟的B B细胞，与细胞，与ThTh细胞表面细胞表面CD40LCD40L结合后结合后产生产生B B细胞活化的细胞活化的第二信号第二信号。(2) CD80(2) CD80和和CD86CD86（和）（和）: : 是激活是激活T T细胞所必须的重要协同刺细胞所必须的重要协同刺激分子受体，在静止的激分子受体，在静止的B B细胞不表达或低表达，活化的细胞不表达或低表达，活化的B B细胞表达增加；细胞表达增加； 与静息与静息T T表面表面CD28CD28相互作用，能增强相互作用，能增强T T细胞的激活；细胞的激活； 与活化与活化T T细胞表面细胞表面CTLA-4CTLA-4相互作用产生抑制信号。相互作用产生抑制信号。 3 3、协同刺激分子、协同刺激分子( 补体补体C3d受体受体 )4 4、丝裂原受体、丝裂原受体 作用于人和小鼠作用于人和小鼠T、B细胞的有丝分裂原细胞的有丝分裂原 人人 小鼠小鼠 T细胞细胞 B细胞细胞 T细胞细胞 B细胞细胞ConA（刀豆蛋白（刀豆蛋白A） + - + -PHA（植物凝集素）（植物凝集素） + - + -PWM（美洲商陆）（美洲商陆） + + + -LPS（脂多糖）（脂多糖） - - - +SPA（葡萄球菌蛋白（葡萄球菌蛋白A） - + - - 可直接诱导静息可直接诱导静息B B细胞的活化、增殖和分化。细胞的活化、增殖和分化。 检测检测B B细胞功能，细胞功能， PWMPWM对对T T细胞和细胞和B B细胞均有致分裂细胞均有致分裂作用；作用； LPSLPS常用于实验室小鼠常用于实验室小鼠B B细胞功能检测。细胞功能检测。细胞因子受体：细胞因子受体：B B细胞表面具有多种细胞因子的受体细胞表面具有多种细胞因子的受体, , 与与 相应的细胞因子结合可调节相应的细胞因子结合可调节B B细胞活化和产生抗体。例如细胞活化和产生抗体。例如 IL-1R/IL-2R/IL-4R/IL-5R/IL-6R/IL-7R/IFN-R IL-1R/IL-2R/IL-4R/IL-5R/IL-6R/IL-7R/IFN-R 等。等。CD20CD20：表达于除浆细胞外发育分化各阶段的表达于除浆细胞外发育分化各阶段的B B细胞。可能细胞。可能通过调节跨膜钙离子流动直接调节通过调节跨膜钙离子流动直接调节B B细胞的增殖和分化。细胞的增殖和分化。CD22CD22：特异表达于特异表达于B B细胞。细胞。B B细胞活化过程中，细胞活化过程中，CD22CD22分子表分子表达增加，但浆细胞不表达。达增加，但浆细胞不表达。CD22CD22与唾液酸聚糖分子（如与唾液酸聚糖分子（如CD45ROCD45RO、CD75CD75）结合，介导）结合，介导B B细胞细胞单核细胞、单核细胞、B BT T细胞细胞以及以及B BB B细胞之间的作用。细胞之间的作用。 CD32CD32（FcR II-bFcR II-b）：）：IgG FcIgG Fc受体受体II-bII-b，B B细胞表面抑制细胞表面抑制性受体。性受体。5 5、其他表面分子、其他表面分子1. B-1 细胞胞：CD5+，由于发育在先（胎儿期），称为，由于发育在先（胎儿期），称为B-1细胞。细胞。 主要存在于腹膜腔、胸膜腔和肠道固有层，参与固有免疫。主要存在于腹膜腔、胸膜腔和肠道固有层，参与固有免疫。 其其BCR与抗体可以较低的亲和力与多种抗原结合与抗体可以较低的亲和力与多种抗原结合, 称为多反应性。称为多反应性。 可对碳水化合物抗原刺激产生较强的应答，产生低亲和力可对碳水化合物抗原刺激产生较强的应答，产生低亲和力IgM。 对自身抗原刺激也能产生对自身抗原刺激也能产生IgM类自身抗体，类自身抗体，与自身免疫病有关与自身免疫病有关。 无无Th 细胞胞辅助。助。2. B-2细胞：细胞：CD5-，发育较晚（出生后），为通常所指的，发育较晚（出生后），为通常所指的B细胞。细胞。1.主要存在于外周淋巴器官主要存在于外周淋巴器官, 少量在外周血少量在外周血, 参与适应性免疫。参与适应性免疫。2.脾脏中的脾脏中的B-2细胞又分为边缘区（细胞又分为边缘区（MZ）B细胞和滤泡（细胞和滤泡（FO）B细胞。细胞。3.MZ B细胞与边缘窦的巨噬细胞并存，为抗血源性颗粒抗原的第一道细胞与边缘窦的巨噬细胞并存，为抗血源性颗粒抗原的第一道防线，对其快速应答。防线，对其快速应答。4.FO B细胞参与较晚的依赖细胞参与较晚的依赖T细胞抗体应答。细胞抗体应答。根据是否表达根据是否表达CD5CD5抗原将抗原将B B细胞分为细胞分为: : 三、三、B B淋巴细胞亚群及功能淋巴细胞亚群及功能 B 分泌分泌IgM固定补体固定补体 B 分泌分泌IgG各种反各种反应应根据产生抗体的类别根据产生抗体的类别 B 分泌分泌IgA粘膜免粘膜免疫疫 B 分泌分泌IgD B 分泌分泌IgE变态反应变态反应B B 淋巴细胞功能淋巴细胞功能1 1、产生抗体、产生抗体介导特异性体液免疫应答介导特异性体液免疫应答B B淋巴细胞的抗原提呈功能主要与其表达的膜免疫球蛋白淋巴细胞的抗原提呈功能主要与其表达的膜免疫球蛋白有关，它能浓集抗原并使之内化。有关，它能浓集抗原并使之内化。2 2、抗原提呈、抗原提呈B B淋巴细胞的提呈功能对于辅助性淋巴细胞的提呈功能对于辅助性T T细胞的活化，及细胞的活化，及B B细胞细胞对对TDTD抗原应答产生抗体，具有极为重要的作用。抗原应答产生抗体，具有极为重要的作用。 通过与其它细胞的接触及产生通过与其它细胞的接触及产生细胞因子细胞因子参与免疫调节、参与免疫调节、炎症反应及造血过程。炎症反应及造血过程。细胞因子细胞因子作用于自身作用于自身B B细胞或其他细胞或其他B B细胞，可刺激或抑制细胞，可刺激或抑制B B细细胞增殖和（或）分化，调节胞增殖和（或）分化，调节B B细胞凋亡，促进或抑制细胞凋亡，促进或抑制B B细胞细胞的趋化运动。的趋化运动。细胞因子细胞因子作用于它种细胞，可激活或抑制巨噬细胞和（或）作用于它种细胞，可激活或抑制巨噬细胞和（或）滤泡树突状细胞；可激活或抑制自然杀伤细胞；可诱导炎滤泡树突状细胞；可激活或抑制自然杀伤细胞；可诱导炎症细胞籍趋化作用而更新；可协同刺激症细胞籍趋化作用而更新；可协同刺激T T细胞增殖。细胞增殖。3 3、免疫调节、免疫调节: :淋巴细胞系（III）NK细胞 NK细胞来源于骨髓，主要存在于血液和淋巴样组织，特别是存在于脾中，由于其胞浆中含有大颗粒故亦称为大颗粒淋巴细胞（large granular lymphocyte，LGL）。从系统发生看，NK细胞被认为是原始杀伤T细胞，但它没有抗原识别受体，能杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞，所以是非特异杀伤作用，但无MHC分子的限制性，故名自然杀伤细胞。约占外周血中淋巴细胞总数的约占外周血中淋巴细胞总数的5 51010 分布：脾中占分布：脾中占1 12 2；淋巴结和骨髓中也有；淋巴结和骨髓中也有NKNK细胞存在。细胞存在。uNKNK细胞具有自然杀伤功能，对肿瘤细胞和细胞具有自然杀伤功能，对肿瘤细胞和病毒感染细胞有强杀伤作用。病毒感染细胞有强杀伤作用。u其杀伤方式为直接杀伤和其杀伤方式为直接杀伤和ADCCADCC效应。效应。作业1 1、T T细胞、细胞、B B细胞的重要表面分子细胞的重要表面分子2 2、T T细胞、细胞、B B细胞、细胞、NKNK细胞的功能细胞的功能