国产奶牛：年均产奶量3000公斤左右国际良种奶牛：年均产奶量10000公斤左右我国蒙古黄牛：均重300Kg海福特肉用牛：2岁体重可达800Kg存在的问题：1.引进一头良种成年奶牛需要引进一头良种成年奶牛需要35万元万元2.牛的生育率低，一头牛一胎只一个，一生只能生育四五次牛的生育率低，一头牛一胎只一个，一生只能生育四五次怎样解决？（体细胞核移植）19821982年世界首例试管牛犊问世年世界首例试管牛犊问世 实现良种牛快速大量繁殖可以通过实现良种牛快速大量繁殖可以通过 和和 的培养。的培养。体外受精体外受精早期胚胎早期胚胎试管动物技术：试管动物技术：1、概念：经过、概念：经过 使卵子和精子在使卵子和精子在_下成熟和受精，并通过培养发育下成熟和受精，并通过培养发育成成_后，再经移植产生后代的技术。后，再经移植产生后代的技术。体外条件体外条件人工操作人工操作早期胚胎早期胚胎2、使用的技术：、使用的技术：体外受精体外受精胚胎的早期培养胚胎的早期培养胚胎移植胚胎移植3 3、意义：实现优良种畜的快速大量繁殖。、意义：实现优良种畜的快速大量繁殖。有性生殖有性生殖无性生殖无性生殖核移植技术、核移植技术、胚胎移植胚胎移植体外受精、体外受精、胚胎移植胚胎移植遵照遵照不遵循不遵循概念：采取雌性动物的概念：采取雌性动物的 和雄性动物的和雄性动物的 ，使其在，使其在 中受精。中受精。一、体外受精一、体外受精卵母细胞卵母细胞精子精子试管试管1.1.卵母细胞的采集和培养卵母细胞的采集和培养2.2.精子的采集和获能精子的采集和获能3.3.受精受精过程：注：个体发育的主要场所是母体）注：个体发育的主要场所是母体）1.1.卵母细胞的采集和培养卵母细胞的采集和培养 不同动物不同动物, ,采集卵母细胞的方法不同采集卵母细胞的方法不同大型动物：如牛大型动物：如牛供体注射供体注射 ，卵巢，卵巢 ，从，从 中冲取卵子。中冲取卵子。超数排卵超数排卵促性腺激素促性腺激素输卵管输卵管a.a.从从 母畜的母畜的 中采集卵母细胞；中采集卵母细胞；b.b.直接从直接从 动物的动物的 中吸取卵母细胞。中吸取卵母细胞。卵巢卵巢屠宰的屠宰的活体活体卵巢卵巢自学P69-70 （可直接与获能的精子在体外受精）（可直接与获能的精子在体外受精）（在体外进行人工培养，使其成熟后才能受精（在体外进行人工培养，使其成熟后才能受精) )一、体外受精一、体外受精实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等B B超活采仪超活采仪B B B B超引导法：超引导法：超引导法：超引导法： 借助超声波探头和借助超声波探头和借助超声波探头和借助超声波探头和屏幕的引导，从活母畜屏幕的引导，从活母畜屏幕的引导，从活母畜屏幕的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。操卵巢采集卵母细胞。操卵巢采集卵母细胞。操卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探作员先将带有超声波探作员先将带有超声波探作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通头和采卵针的采卵器通头和采卵针的采卵器通头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫，同时过阴道插入子宫，同时过阴道插入子宫，同时过阴道插入子宫，同时通过将卵巢贴在探头上。通过将卵巢贴在探头上。通过将卵巢贴在探头上。通过将卵巢贴在探头上。根据根据根据根据B B B B超屏幕所显示的卵超屏幕所显示的卵超屏幕所显示的卵超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿泡位置，利用采卵针穿泡位置，利用采卵针穿泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母刺卵泡并同时抽吸卵母刺卵泡并同时抽吸卵母刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。细胞。细胞。细胞。卵母细胞的成熟培养：卵母细胞的成熟培养：CO2培养箱培养箱2.2.精子的采集和获能精子的采集和获能 收集精子的方法有：收集精子的方法有：假阴道法假阴道法手握法手握法电刺激法电刺激法自学P70-71适用于 动物适用于 动物适用于 动物大型小型、易控制野生或者经济 精子获能的方法有：精子获能的方法有： 法：在法：在 中获能。对于中获能。对于 、 和和 。 法：在一定浓度的法：在一定浓度的 中，用化学药物诱导获中，用化学药物诱导获能。对于能。对于 、 等家畜等家畜啮齿动物啮齿动物家兔家兔猪猪牛牛羊羊获能液获能液肝素或钙离子载体肝素或钙离子载体A23187溶液溶液培育培育化学诱导化学诱导3.3.受精受精 获能的精子和培养获能的精子和培养成熟的卵子，一般情成熟的卵子，一般情况下在况下在 或或中完成受精过程。中完成受精过程。获能溶液获能溶液专用受精溶液专用受精溶液一、体外受精一、体外受精二、胚胎的早期培养二、胚胎的早期培养1.培养液成分：无机盐、有机盐两盐）、培养液成分：无机盐、有机盐两盐）、 维生素、激素两素）、维生素、激素两素）、 氨基酸、核苷酸两酸）、氨基酸、核苷酸两酸）、 血清、水、等血清、水、等 受精卵受精卵早期胚胎发育培养液不同动物胚胎移植时间不同：不同动物胚胎移植时间不同：牛、羊：桑椹胚或囊胚阶段牛、羊：桑椹胚或囊胚阶段小鼠、家兔：卵裂期或囊胚阶段小鼠、家兔：卵裂期或囊胚阶段人：人：8 81616个细胞阶段个细胞阶段 胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。向受体移植或冷冻保存。二、胚胎的早期培养二、胚胎的早期培养2.2.培养时间培养时间二、胚胎的早期培养二、胚胎的早期培养3.3.牛体外受精胚胎的工厂化生产牛体外受精胚胎的工厂化生产采集良种母牛卵母细胞采集良种公牛精子卵母细胞的体外培养精子体外获能体外受精良种牛体外受精胚胎受体牛良种犊牛成熟期牛屠宰加工厂采集卵巢中卵母细胞市场胚胎移植3.23.2体外受精和早期胚胎培养体外受精和早期胚胎培养一、教学目标：一、教学目标：1.简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。2.简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。3.认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。二、教学重点：二、教学重点：1.体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。2.哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。三、教学难点：三、教学难点：1.卵母细胞的采集和培养。卵母细胞的采集和培养。 2.精子的采集和获能。精子的采集和获能。19781978年年7 7月月2525日世界首例试管婴儿日世界首例试管婴儿19881988年年3 3月月1010日我国首例试管婴儿日我国首例试管婴儿19921992年我国首例三胞胎试管婴儿年我国首例三胞胎试管婴儿根据资料回答下列问题：根据资料回答下列问题：1.1.资料上用到了什么生物技术？资料上用到了什么生物技术？ 试管婴儿技术包括体外受精、胚胎体外试管婴儿技术包括体外受精、胚胎体外培养和胚胎移植技术。培养和胚胎移植技术。2.2.试管婴儿和母亲正常怀孕，生产的过程有何试管婴儿和母亲正常怀孕，生产的过程有何异同？异同？相同之处：都通过有性生殖产生，在母体子宫相同之处：都通过有性生殖产生，在母体子宫内发育形成胎儿。内发育形成胎儿。不同之处：受精作用在体外，并在体外发育成不同之处：受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。早期胚胎进行胚胎移植。B B B B超引导法：超引导法：超引导法：超引导法： 借助超声波探头借助超声波探头借助超声波探头借助超声波探头和屏幕的引导，从活和屏幕的引导，从活和屏幕的引导，从活和屏幕的引导，从活母畜卵巢采集卵母细母畜卵巢采集卵母细母畜卵巢采集卵母细母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有胞。操作员先将带有胞。操作员先将带有胞。操作员先将带有超声波探头和采卵针超声波探头和采卵针超声波探头和采卵针超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插的采卵器通过阴道插的采卵器通过阴道插的采卵器通过阴道插入子宫，同时通过将入子宫，同时通过将入子宫，同时通过将入子宫，同时通过将卵巢贴在探头上。根卵巢贴在探头上。根卵巢贴在探头上。根卵巢贴在探头上。根据据据据B B B B超屏幕所显示的卵超屏幕所显示的卵超屏幕所显示的卵超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针泡位置，利用采卵针泡位置，利用采卵针泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸穿刺卵泡并同时抽吸穿刺卵泡并同时抽吸穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。卵母细胞。卵母细胞。卵母细胞。活活体体采采集集的的牛牛卵卵母母细细胞胞