第九章第九章高效毛高效毛细管管电泳泳分析法分析法一、离子分析一、离子分析analysis of ionanalysis of ion二、二、药物分析物分析analysis of analysis of pharmaceuticspharmaceutics三、手性化合物分析三、手性化合物分析analysis of chiral analysis of chiral compoundscompounds四、氨基酸分析四、氨基酸分析analysis of amino acidsanalysis of amino acids五、核酸分析及五、核酸分析及DNADNA测序序analysis of nucleic analysis of nucleic acids and sequence of acids and sequence of DNADNA六、新六、新进展及展及热点点问题advances and special advances and special topicstopics第五第五第五第五节节高效毛高效毛高效毛高效毛细细管管管管电电泳泳泳泳运用与运用与运用与运用与进进展展展展high performance capillary high performance capillary electrophoresis,HPCEelectrophoresis,HPCEapplication and advances application and advances of HPCEof HPCE一、离子分析一、离子分析 analysis of ion analysis of ion阳离子分析阳离子分析 迁移方向和迁移方向和电渗流方向一致；渗流方向一致； 4.5min 4.5min内分内分别了了2424种金属离子；种金属离子； 阳极阳极进样，阴，阴极极检测； 具有很高的灵具有很高的灵敏度；敏度；阴离子分析阴离子分析 阴离子阴离子电电泳方向和泳方向和电电渗流方向相反、速度接近，分渗流方向相反、速度接近，分析析时间长时间长、效率低；、效率低； 质质量小、量小、电电荷密度大的离子如：荷密度大的离子如：SO4-2SO4-2、Cl-Cl-、F-F-等，等，电电泳速率大于泳速率大于电电渗流，阳极端流出，在阴极端无法渗流，阳极端流出，在阴极端无法检检测测； 参与参与电电渗流改性渗流改性剂剂，十六，十六烷烷基三甲基溴化胺等，使基三甲基溴化胺等，使电电泳方向和泳方向和电电渗流方向一致，可在渗流方向一致，可在3.1min3.1min内分内分别别3636种种阴离子；阴极阴离子；阴极进样进样，阳极，阳极检测检测；离子价离子价态态及存在形状分析；及存在形状分析；二、二、药物分析物分析 analysis of pharmaceutics analysis of pharmaceutics 检测检测体液或体液或体液或体液或细细胞中胞中胞中胞中某些代某些代某些代某些代谢产谢产物的分析；物的分析；物的分析；物的分析； 尿液中的氨基酸含尿液中的氨基酸含尿液中的氨基酸含尿液中的氨基酸含量作量作量作量作为临为临床床床床诊诊断糖尿病断糖尿病断糖尿病断糖尿病的的的的辅辅助手段；助手段；助手段；助手段； 采用毛采用毛采用毛采用毛细细管区管区管区管区带电带电泳方式，在泳方式，在泳方式，在泳方式，在11min11min11min11min内分内分内分内分别别17171717种种种种药药物；物；物；物； 采用采用采用采用MEKCMEKCMEKCMEKC方式，方式，方式，方式，鉴鉴定定定定违违禁禁禁禁药药物；效果物；效果物；效果物；效果优优于于于于HPLCHPLCHPLCHPLC法法法法三、手性化合物分析三、手性化合物分析 analysis of chiral compounds analysis of chiral compounds 合成合成合成合成获获得得得得单单一手性化合物相当困一手性化合物相当困一手性化合物相当困一手性化合物相当困难难；528528528528种手性合成种手性合成种手性合成种手性合成药药物，物，物，物，61616161中以中以中以中以单单一一一一对对映体方式映体方式映体方式映体方式销销售，其他售，其他售，其他售，其他为为外消旋体；外消旋体；外消旋体；外消旋体；检测检测分析也分析也分析也分析也相当困相当困相当困相当困难难；研；研；研；研讨热讨热点；点；点；点；R-R-R-R-反响停是安息反响停是安息反响停是安息反响停是安息药药，S-S-S-S-式致胎儿畸形；式致胎儿畸形；式致胎儿畸形；式致胎儿畸形； HPCE HPCE HPCE HPCE分分分分别别分析手性化合物的方法：参与手性分析手性化合物的方法：参与手性分析手性化合物的方法：参与手性分析手性化合物的方法：参与手性选择剂选择剂；构成配合物的构成配合物的构成配合物的构成配合物的稳稳定常数有差定常数有差定常数有差定常数有差别别，结结合合合合HPCEHPCEHPCEHPCE的高效率；的高效率；的高效率；的高效率； 常用手性常用手性常用手性常用手性选择剂选择剂：环环糊精及其衍生物；手性冠糊精及其衍生物；手性冠糊精及其衍生物；手性冠糊精及其衍生物；手性冠醚醚；手性；手性；手性；手性外表活性外表活性外表活性外表活性剂剂氨基酸衍生物、胆酸氨基酸衍生物、胆酸氨基酸衍生物、胆酸氨基酸衍生物、胆酸钠钠、牛磺脱氧胆酸及其、牛磺脱氧胆酸及其、牛磺脱氧胆酸及其、牛磺脱氧胆酸及其钠钠盐盐、低聚糖等天然手性外表活性、低聚糖等天然手性外表活性、低聚糖等天然手性外表活性、低聚糖等天然手性外表活性剂剂四、氨基酸与蛋白四、氨基酸与蛋白质分析分析 analysis of amino acids analysis of amino acids采用采用采用采用MEKCMEKCMEKCMEKC方式，在方式，在方式，在方式，在25252525分分分分钟钟内分内分内分内分别别了了了了23232323种丹种丹种丹种丹酰酰化氨基酸；化氨基酸；化氨基酸；化氨基酸；HPCEHPCEHPCEHPCE可取代可取代可取代可取代传统传统的氨基酸分析的氨基酸分析的氨基酸分析的氨基酸分析仪仪；问题问题：吸附和：吸附和：吸附和：吸附和检测检测；蛋白蛋白质分析分析五、核酸分析及五、核酸分析及DNADNA排序排序 analysis of nucleic acids and sequence analysis of nucleic acids and sequence of DNAof DNA重要分析重要分析重要分析重要分析手段；手段；手段；手段；图图，酶酶解解解解的双螺旋的双螺旋的双螺旋的双螺旋DNADNADNADNA限制限制限制限制性片段的性片段的性片段的性片段的分分分分别别；六、新六、新进展展advances and special topicsadvances and special topics1.1.1.1.微型化微型化微型化微型化 整体化学分析系整体化学分析系整体化学分析系整体化学分析系统统TASTASTASTAS及及及及TASTASTASTAS微型化微型化微型化微型化 在硅片上光刻出矩形槽作在硅片上光刻出矩形槽作在硅片上光刻出矩形槽作在硅片上光刻出矩形槽作为为毛毛毛毛细细管，管，管，管，实际实际塔板塔板塔板塔板数数数数105/m105/m105/m105/m；2.2.2.2.联联用用用用仪仪器器器器 CE-MS CE-MS CE-MS CE-MS；3.3.3.3.阵阵列毛列毛列毛列毛细细管凝胶管凝胶管凝胶管凝胶电电泳泳泳泳 运用于人运用于人运用于人运用于人类类基因基因基因基因DNADNADNADNA测测序；序；序；序； 5 5 5 510101010万个基因，万个基因，万个基因，万个基因，30303030亿亿个碱基个碱基个碱基个碱基对对，目前最有效的，目前最有效的，目前最有效的，目前最有效的DNADNADNADNA序列分析序列分析序列分析序列分析仪仪，10101010小小小小时时/ / / /次；可同次；可同次；可同次；可同时电时电泳泳泳泳24242424个个个个样样品；品；品；品；速度速度速度速度1200120012001200碱基碱基碱基碱基对对/ / / /小小小小时时，提高速度！，提高速度！，提高速度！，提高速度！100100100100支毛支毛支毛支毛细细管管管管阵阵列列列列电电泳；速度泳；速度泳；速度泳；速度280280280280碱基碱基碱基碱基对对/ / / /小小小小时时/ / / /支支支支