影响血型鉴定常见的问题及处理影响血型鉴定常见的问题及处理方法方法2012.8.311学习交流PPT准确的血型鉴定是临床安全有效输血的重要保证，使输血的成分能在受着体内有效存活，无不良反应，即输入的红细胞在受着体内必须不凝集不溶血，输入的血浆成分不导致受者自身红细胞显著破坏，才能使受者获得恢复健康所需的血液。2学习交流PPTABO定型试验中常见的问题：一、标本问题二、试剂问题三、实验者操作技术的错误四、红细胞标本问题五、血清标本的问题3学习交流PPT一、标本问题一、标本问题 血型鉴定血液标本的严格要求是安全输血的关键性措施之一，首先对标本进行科学管理，确保标本一一对应防止“张冠李戴”。1.所用标本要能够恰当反映受血者目前的免疫学状态。2.受血者配血试验的血标本必须是输血前3天内采集的。3.如果受血者需要再次输注红细胞，尤其是受血者最后一次输注红细胞间隔了24小时，应重新采集一份血样进行交叉配血试验，防止新的不规则抗体产生。4学习交流PPT二、试剂问题二、试剂问题 血型定型试剂是做好定型的基础。现在单克隆试剂是通过杂交瘤技术生产的，其效价、特异性、亲和力都较人血清有很大进步，但试剂的运输、贮存等条件不适可导致试剂变质失效，造成鉴定错误。在实验前进行试剂外观、效价等项目质量控制。不同抗凝剂的血液制备的标准红细胞质量也不同，各实验室依据要求正确配制红细胞浓度。5学习交流PPT三、实验者操作技术错误三、实验者操作技术错误1.1.造成假阴性结果原因：造成假阴性结果原因：(1)(1)未加入抗体或血清未加入抗体或血清(2)(2)未识别溶血未识别溶血(3)(3)血清与红细胞比例不当血清与红细胞比例不当(4)(4)离心速度、时间不够离心速度、时间不够(5)(5)使用失效或错误试剂使用失效或错误试剂(6)(6)实验结果记录、解释错误实验结果记录、解释错误6学习交流PPT2. 造成假阳性结果原因： (1)(1)离心速度过大、时间过长离心速度过大、时间过长(2)(2)使用了受到细菌污染的试剂使用了受到细菌污染的试剂(3)(3)试验器皿不干净试验器皿不干净(4)(4)实验结果记录、解释错误实验结果记录、解释错误7学习交流PPT四、红细胞标本问题四、红细胞标本问题1.患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的红细胞，如骨髓移植患者，或非O型人接受O型红细胞。2. 某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细胞，一些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱，应用抗A、抗B试剂未能出现预期的凝集反应。8学习交流PPT3.红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性B抗原红细胞或Tn/T多凝集红细胞，人血清抗A、抗B试剂可能与这些异常的红细胞反应。4.使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的血浆或血清中含针对抗A、抗B试剂中染色剂或其他成分的抗体，出现假阳性反应。9学习交流PPT5.患者血清中有高活性、高浓度冷自身抗体严重致敏自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是抗体试剂的特异性免疫反应所致。6.红细胞表面包被IgG类抗体7.静脉输入高分子药物如甘露醇、右旋糖酐等，可导致红细胞成緍钱状。10学习交流PPT五、血清标本的问题1.纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集，如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时出现假阳性。2.免疫抑制疾病患者血清中ABO抗体减少或消失。老年人ABO抗体减弱。3.新生儿6个月内婴儿血清中ABO抗体阴性或很弱，一般只测正定不测反定。11学习交流PPT4.血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋白增多可引起非特异凝集，如缗钱状红细胞的非特异凝集。5.血清中含抗A、抗B以外的其他红细胞抗体，如抗M、抗I等。6.患者接受了ABO血型不同的骨髓移植。12学习交流PPT7.患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体。8.ABO抗体被输入的液体稀释。13学习交流PPT结果分析和处理的基本步骤1.重新采集标本，以避免采集、标记、污染等错误。2.查询患者临床诊断、既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史。3.彻底洗涤标本或试剂红细胞。4.应用抗AB、抗A1、或抗H检测红细胞。14学习交流PPT5.分析抗筛结果，确定结果是否受同种异型或自身冷抗体干扰。6.室温孵育30min后，离心观察结果，以检测弱的抗原抗体反应。7. 做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干扰。15学习交流PPTABO正反定不符的分类一、抗原表达减弱或丢失所致的ABO正反定不符二、红细胞额外反应所致的ABO正反定不符三、意外的血清学反应所致的ABO正反定不符16学习交流PPT一、抗原表达减弱或丢失所致的ABO正反定不符常见的原因：1.ABO亚型红细胞2.白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱，应用抗A、抗B试剂未能出现预期的凝集反应3.急性大出血17学习交流PPT处理的方法：1.将抗A、抗B和抗A，B试剂与洗涤过的红细胞在室温或4 孵育30min，以增强抗原、抗体的结合。2.用木瓜酶、菠萝蛋白酶处理红细胞，以增强抗原、抗体的结合。3.应用抗AB、抗A1、或抗H检测红细胞。18学习交流PPT4.用人血清抗A、抗B进行吸收放散试验，检测弱A、B抗原，且同时要做O型血吸收放散试验作对照。19学习交流PPT二、红细胞额外反应所致的ABO正反定不符常见的原因1.获得性B红细胞（类B）2.混合视野凝集(mf)3.红细胞被致敏20学习交流PPT获得性B红细胞的特征1.常出现在有肠道细菌进入血循环的疾病，也可发生在正常人；3.常伴有T和Tn多凝集红细胞出现(细菌感染时)；4.自身抗-B不与自身获得性B抗原反应(无自凝现象)21学习交流PPT获得性B红细胞的鉴定1.酸化血清抗-B试剂pH至6.0时，检测无凝集，即不与获得性B细胞反应2.乙酸酐处理能明显减弱其反应，但正常B细胞不受影响3.临床追踪，感染控制后“类B”现象消失22学习交流PPT混合视野凝集1.非O型人近期输用O型血；2.骨髓移植后做血型；3A3(B3)细胞与抗A(抗-B)呈典型的混合视野凝集现象；4.双精子受精（嵌合体）23学习交流PPT红细胞被致敏1.患HDN婴儿、存在自身免疫或同种异体免疫的成人，其红细胞严重包被IgG抗体分子；2.与含一定蛋白质浓度的试剂（抗D、抗A、抗B）产生凝集；3.处理方法：45放散后，抗体解离，即可准确定型；24学习交流PPT三、意外的血清学反应所致的ABO正反定不符常见的原因及处理方法：1.抗体太弱或消失如4-6个月幼儿，老年人、免疫抑制患者，应注意患者的年龄和临床诊断2.非正常高浓度的抗A、抗B可引起前带现象，导致假阴性，将血清稀释或用EDTA（2.5）处理可消除；25学习交流PPT3.A2、A2B或其他ABO亚型，人血清中可能有抗A1，抗A1只凝集A1型红细胞而不凝集A2、O型红细胞；4.患者静脉输用了大量大分子药物等原因，可发生类似凝集现象，如缗钱状凝集，将血清用生理盐水稀释3倍或用盐水替换技术可消除；26学习交流PPT5.冷自身抗体所有试剂及细胞37孵育,37下判读结果; 将冷自身抗体在4吸收在做血型,将血清用0.01mol/L二硫苏糖醇(DTT)处理完再定型；27学习交流PPT6.自身免疫性温型抗体正定被易被误认为AB型，反定易被误认为O型，用递增温度(22，37，45)洗涤红细胞后再做血型鉴定7.血清蛋白过高试剂红细胞多呈假凝集，如肝脏疾病、MM等，加盐水稀释后凝集散开28学习交流PPTRh血型1.导致Rh血型鉴定可能出现假阳性的原因(1)直抗(DAT)阳性；(2)标本抗凝不当，受检过程中出现凝血或出现纤维蛋白凝块，误判为阳性；(3)受检细胞与抗血清孵育的时间过长；(4)定型血清中含有事先未被检测的其他特异性抗体，造成假阳性定型结果；29学习交流PPT(5)多凝集细胞，造成定型的假阳性，如MM。(6)检定用器材或抗体被污染，造成假阳性。2.导致Rh血型鉴定可能出现假阴性的原因(1)DAT强阳性。(2)红细胞与血清比例失调。(3)定型试剂漏加、错加、失效。(4)观察不仔细(5)弱D抗原30学习交流PPT(1)D：正常D抗原(2)弱D：抗原数量减少，表位基本完整,D抗原只是量的减少，无质的改变31学习交流PPT32学习交流PPT