急性呼吸窘迫综合征急性呼吸窘迫综合征 （Acute respiratory distress syndrome，ARDS）急性呼吸窘迫综合征0【理论复习理论复习】 ARDS的定的定义 ARDS的病因的病因急性呼吸窘迫综合征0【定定 义义】多种原多种原发病病过程中，因程中，因急性肺急性肺损伤引起的急性呼引起的急性呼吸衰竭，以吸衰竭，以进行性呼吸困行性呼吸困难和和顽固性低氧血症固性低氧血症为特征特征急性呼吸窘迫综合征0【病因病因】直接肺直接肺损伤因素：因素：严重肺部感染、肺挫重肺部感染、肺挫伤、吸入、吸入有毒气体等有毒气体等间接肺接肺损伤因素：因素：肺外肺外严重感染及重感染及脓毒症、毒症、严重重胸外胸外创伤、急重症胰腺炎等、急重症胰腺炎等急性呼吸窘迫综合征0【实验目的实验目的】 v复制急性呼吸窘迫复制急性呼吸窘迫综合征的合征的实验动物模型物模型 v观察急性呼吸窘迫察急性呼吸窘迫综合征家兔的表合征家兔的表现，并，并探探讨其其发生机制生机制 急性呼吸窘迫综合征0【实验动物实验动物】 家兔家兔 (性性别、体重、体重) 急性呼吸窘迫综合征0【实验分组实验分组】v生理生理盐水水组：0.2ml/kg生理生理盐水（水（NS） 经家兔耳家兔耳缘静脉注入静脉注入v油酸油酸组：0.2ml/kg油酸（油酸（OA）经家兔耳家兔耳 缘静脉注入静脉注入急性呼吸窘迫综合征01.称重称重2.固定固定：背部交叉仰卧位固定：背部交叉仰卧位固定3.记录呼吸曲呼吸曲线：张力力换能器能器BL-410系系统【实验步骤实验步骤】 急性呼吸窘迫综合征04.给药：耳：耳缘静脉注入，油酸静脉注入，油酸组（0.2ml/kg油酸、油酸、缓慢慢、2分分钟注射完），生理注射完），生理盐水水组（0.2ml/kg生理生理盐水）水）5.给药后后记录家兔呼吸情况，家兔呼吸情况，1小小时后后处死家兔死家兔6.在甲状在甲状软骨下骨下缘2-3cm 行行颈部正中切口，分离气管后部正中切口，分离气管后夹闭并游离气管和食道，开胸，小心取出心并游离气管和食道，开胸，小心取出心脏和肺，和肺，细心剪心剪去食管、心去食管、心脏及肺及肺门周周围组织，观察肺外察肺外观，并称重，并称重计算算肺系数肺系数肺系数肺系数 = 肺重（肺重（g）/ 体重（体重（kg） 急性呼吸窘迫综合征07.肺泡灌洗肺泡灌洗（bronchoalvage lavage，BAL） 方法：方法：将橡皮管插入气管后用将橡皮管插入气管后用线固定，然后用注射固定，然后用注射器将器将10ml生理生理盐水正水正压缓慢慢注入肺内，反复抽吸三注入肺内，反复抽吸三次，回收灌洗液，灌洗液于次，回收灌洗液，灌洗液于3000rpm/min，离心，离心15min，细胞沉淀用胞沉淀用1ml生理生理盐水重水重悬8.取取10ul重重悬液抹片，染色，液抹片，染色，显微微镜下下观察察细胞胞细胞种胞种类急性呼吸窘迫综合征0【注意事项注意事项】油酸注射油酸注射应平平稳在在2分分钟注完，并保注完，并保证全部注入全部注入静脉内，溢出或注入皮下静脉内，溢出或注入皮下组织均可造成模型复制均可造成模型复制失失败切断气管前注意先切断气管前注意先夹闭，避免血液、，避免血液、组织液等液等进入影响入影响实验结果果分离肺分离肺脏时勿勿损伤肺表面，以免肺内水肺表面，以免肺内水肿液外流，液外流，影响肺系数的准确性和肺泡灌洗液的收集影响肺系数的准确性和肺泡灌洗液的收集急性呼吸窘迫综合征0【实验结果实验结果】 生生理理盐水水组油油酸酸组呼吸幅度与频率 肺大体观颜色质量支气管肺泡灌洗液细胞数目与分类指指标分分组发绀0 15 30 60给药前 给药后肺系数IIIIII急性呼吸窘迫综合征0推片推片染色染色显微微镜下下观察并描述涂片察并描述涂片低倍低倍镜计数数高倍高倍镜分分类【细胞涂片的制作与白细胞染色分类细胞涂片的制作与白细胞染色分类】急性呼吸窘迫综合征0推片：取一滴重悬细胞液置于载玻片的一端,左手持载玻片，右手以边缘平滑的推片的一端从悬液前方后移接触悬液，悬液即沿推片散开。然后按推片与载片夹角保持30-45度平稳地向前移动，载片上保留下一层薄膜，涂片制成后可手持玻片在空气中挥动，使细胞膜迅速干燥，以免细胞皱缩急性呼吸窘迫综合征0染色：染色：取几滴瑞士染色液加在涂片上，取几滴瑞士染色液加在涂片上，2分分钟后，后，用自来水洗用自来水洗净，将玻片，将玻片风干干涂片涂片观察：察：显微微镜下下观察涂片，察涂片，对比描述比描述细胞数目胞数目和和细胞种胞种类急性呼吸窘迫综合征0正常大鼠的肺切片正常大鼠的肺切片HE染色染色油酸油酸诱导的大鼠肺切片的大鼠肺切片HE染色染色急性呼吸窘迫综合征0【讨论讨论】本次本次试验制制备的家兔急性呼吸窘迫的家兔急性呼吸窘迫综合征的合征的实验动物模型是否成功物模型是否成功？静脉注射油酸静脉注射油酸为什么会引起急性呼吸窘迫什么会引起急性呼吸窘迫综合征合征？急性呼吸窘迫急性呼吸窘迫综合征的治合征的治疗措施有哪些？措施有哪些？急性呼吸窘迫综合征01. 实验名称、名称、实验时间、实验人人员2. 实验目的目的3. 实验动物物4. 实验步步骤5. 实验结果（列表）果（列表）6. 实验讨论7. 实验结论【实验报告实验报告】急性呼吸窘迫综合征0