现代生物科技专题现代生物科技专题现代生物科技专题现代生物科技专题1.2基因工程的基本操操 作作 程程 序序1v目的基因的获取v基因表达载体的构建v将目的基因导入受体细胞v目的基因的表达和检测基因工程的基本操作程序41）反转录法：）反转录法：蛋白质蛋白质的氨基的氨基酸序列酸序列mRNAmRNA的核苷的核苷酸序列酸序列结构基因结构基因的核苷酸的核苷酸序列序列目的目的基因基因推测推测推测推测化学化学合成合成2）根据已知的氨基酸序列合成）根据已知的氨基酸序列合成DNA法法 ：人人工工合合成成目目的的基基因因v目的基因的获取cDNA102 2 2 2、从、从、从、从基因文库基因文库基因文库基因文库中获取中获取中获取中获取( ( ( (基因序列基因序列基因序列基因序列未未未未知知知知) ) ) )基因文库基因文库基因组文库基因组文库部分基因文库如：部分基因文库如：cDNAcDNA文库文库文库文库v目的基因的获取115 5/ /3 3/ /G GG GT TC C3 3/ /5 5/ /G GA AC CC C聚焦二：目的基因的获取方法聚焦二：目的基因的获取方法 5 5/ /3 3/ /5 5/ /3 3/ /165 5/ /3 3/ /G GG GT TC C3 3/ /5 5/ /G GA AC CC C5 5/ /3 3/ /引物引物G GG G高温高温变性变性低温低温复性复性中温中温延伸延伸5 5/ /3 3/ /A AG G引物引物聚焦二：目的基因的获取方法聚焦二：目的基因的获取方法 5 5/ /3 3/ /5 5/ /3 3/ /90-9555-6570-75173 3 3 3、利用、利用、利用、利用PCRPCRPCRPCR技术技术技术技术扩增扩增扩增扩增目的基因目的基因目的基因目的基因聚合酶链式反应聚合酶链式反应v目的基因的获取18过程：过程：a a、DNADNA变性变性（90-9590-95）：双链）：双链DNADNA模板模板 在热作用下，在热作用下，_断裂，形成断裂，形成_b b、复性、复性（55-6555-65）：系统温度降低，引）：系统温度降低，引 物物与与DNADNA模板结合，形成局部模板结合，形成局部_。 c c、延伸、延伸（70-7570-75）：在）：在TaqTaq酶的作用下，酶的作用下，合成与模板互补的合成与模板互补的_。 氢键氢键单链单链DNADNA双链双链DNADNA链链PCR扩增仪扩增仪19 概念：概念：PCRPCR全称为全称为_，是一项，是一项 在生物在生物_复制复制_的核酸合成技术的核酸合成技术 条件：条件：_、 _、_ _ 、 _._.等等原理：原理：_方式：以方式：以_方式扩增，即方式扩增，即_（n n为扩增循为扩增循 环的次数）环的次数）结果：结果：聚合酶链式反应聚合酶链式反应体外体外特定特定DNADNA片段片段DNADNA复制复制四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸一对引物一对引物DNADNA聚合酶聚合酶指数指数2 2n n使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增要有一段已知目的基因的核苷酸序列（前提条件）要有一段已知目的基因的核苷酸序列（前提条件）P PC CR R技技术术201 1、PCRPCR是一种体外迅速扩增是一种体外迅速扩增DNADNA片段的技术。片段的技术。PCRPCR过程一般过程一般经历下述三十多次循环：经历下述三十多次循环：9595下使模板下使模板DNADNA变性、解链变性、解链5555下复性（引物与下复性（引物与DNADNA模板链结合）模板链结合）7272下引物链下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCRPCR过程的叙过程的叙述中述中不正确不正确的是的是A A变性过程中破坏的是变性过程中破坏的是DNADNA分子内碱基对之间的氢键，也分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现可利用解旋酶实现B B复性过程中引物与复性过程中引物与DNADNA模板链的结合是依靠碱基互补配模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成对原则完成C C延伸过程中需要延伸过程中需要DNADNA聚合酶、聚合酶、ATPATP、四种核糖核苷酸、四种核糖核苷酸D DPCRPCR与细胞内与细胞内DNADNA复制相比所需要酶的最适温度较高复制相比所需要酶的最适温度较高C212、在基因工程中，把选出的目的基因（共、在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460 个），个），放入放入DNA扩增仪中扩增扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是A540 个个 B7560个个 C8100 个个 D17280 个个C22获取目的基因的常用方法有哪些获取目的基因的常用方法有哪些? ?（2 2）从基因文库中获取）从基因文库中获取目的基因序列目的基因序列未未知知（3 3）利用）利用PCRPCR技术扩增技术扩增目的基因序列目的基因序列已已知知（1 1）人工合成）人工合成-目的基因不是很大且目的基因不是很大且已知已知序列序列v目的基因的获取233 3、下列属于获取目的基因的方法的是、下列属于获取目的基因的方法的是( )( )利用利用mRNAmRNA反转录形成反转录形成从基因组文库中提取从基因组文库中提取从受体细胞中提取从受体细胞中提取 利用利用PCRPCR技术技术 利用利用DNADNA转录转录 人工化学合成人工化学合成A. B. C. D.A. B. C. D.4 4、在基因工程技术中，下列方法与目的基因获得、在基因工程技术中，下列方法与目的基因获得无关的是无关的是A.A.辐射诱变法辐射诱变法 B.B.从基因文库中获取从基因文库中获取 C.C.反转录法反转录法 D.D.人工合成法人工合成法24 科学家在培育抗虫棉时，经历了多次失败，才科学家在培育抗虫棉时，经历了多次失败，才获得成功。获得成功。 起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花体内没有表达。棉花体内没有表达。 然后在插入抗虫基因的质粒中插入然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子启动子( (抗抗虫基因首端虫基因首端) )，导入棉花受精卵，长成的棉花植株，导入棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入因的质粒中插入终止子终止子( (抗虫基因末端抗虫基因末端) )，导入棉花，导入棉花受精卵，结果成长的植株，有了抗虫能力。受精卵，结果成长的植株，有了抗虫能力。 资资 料料:聚焦三：基因表达载体的构建聚焦三：基因表达载体的构建作为基因表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？作为基因表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？为什么？ 25v基因表达载体基因表达载体的构建 基因表达基因表达载体的构建是基因工程的核载体的构建是基因工程的核心，其目的是心，其目的是使使目的基因目的基因在受体细胞中在受体细胞中稳定存在稳定存在，并且，并且可以遗传可以遗传给下一代，同给下一代，同时使目的基因能够时使目的基因能够表达和发挥作用表达和发挥作用。27v基因表达载体基因表达载体的构建基因表达载体基因表达载体的模式图的模式图的模式图的模式图抗生素抗生素抗生素抗生素抗性抗性抗性抗性基因基因基因基因uu基因表达除含有基因表达除含有基因表达除含有基因表达除含有目的基因目的基因目的基因目的基因外，还需外，还需外，还需外，还需要哪些元件？要哪些元件？要哪些元件？要哪些元件？启动子启动子启动子启动子终止子终止子终止子终止子标记基因标记基因标记基因标记基因28一一 原核细胞的基因结构原核细胞的基因结构编码区编码区编码区编码区非编码区非编码区非编码区非编码区非编码区非编码区非编码区非编码区编码区上游编码区上游编码区上游编码区上游编码区下游编码区下游编码区下游编码区下游调控遗传信息的表达调控遗传信息的表达(调控序列调控序列)编码蛋白质编码蛋白质(编码序列编码序列)29一一 原核细胞的基因结构原核细胞的基因结构编码区编码区编码区编码区非编码区非编码区非编码区非编码区非编码区非编码区非编码区非编码区与与RNA聚合酶聚合酶结合位点结合位点RNA聚合酶是一种聚合酶是一种蛋白蛋白质质，能，能识别并与调控序识别并与调控序列列中的中的结合位点结合结合位点结合，能能催化催化DNA转录为转录为RNA启动子终止子启动子：启动子：位于基因的首端的一段特殊的位于基因的首端的一段特殊的DNADNA片断，它是片断，它是RNARNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNAmRNA，最终获得蛋白质，最终获得蛋白质终止子：终止子：位于基因的尾端的一段特殊的位于基因的尾端的一段特殊的DNADNA片断，能终止片断，能终止mRNAmRNA的转录的转录30一一 原核细胞的基因结构原核细胞的基因结构与与RNA聚合酶聚合酶结合位点结合位点RNARNA聚合酶聚合酶聚合酶聚合酶A G G T C A C G T C GA G G T C A C G T C GT C C A G T G C A G CT C C A G T G C A G CA G G U C A C G U C GA G G U C A C G U C GRNARNA聚合酶聚合酶聚合酶聚合酶启动子终止子31二二 真核细胞的基因结构真核细胞的基因结构编码区编码区编码区编码区非编码区非编码区非编码区非编码区非编码区非编码区非编码区非编码区调控遗传信息的表达调控遗传信息的表达调控遗传信息的表达调控遗传信息的表达( (调控序列调控序列调控序列调控序列) )外显子外显子外显子外显子( (能编码蛋白质能编码蛋白质能编码蛋白质能编码蛋白质) )内含子内含子内含子内含子( (不能编码蛋白质不能编码蛋白质不能编码蛋白质不能编码蛋白质) )启动子终止子32原核细胞原核细胞真核细胞真核细胞不同点不同点编码区是编码区是_的的编码区是间隔的、编码区是间隔的、_的的相同点相同点都由能够编码蛋白质的都由能够编码蛋白质的_ _ 和具和具有调控作用的有调控作用的_ _ 区组成的区组成的 原核细胞与真核细胞的基因结构比较原核细胞与真核细胞的基因结构比较连续连续不连续不连续编码区编码区非编码非编码33原核细胞不具有剪切、拼接原核细胞不具有剪切、拼接原核细胞不具有剪切、拼接原核细胞不具有剪切、拼接mRNAmRNA的能力，所以真核细胞的能力，所以真核细胞的能力，所以真核细胞的能力，所以真核细胞的基因不能在原核细胞的受体细胞中正确表达的基因不能在原核细胞的受体细胞中正确表达的基因不能在原核细胞的受体细胞中正确表达的基因不能在原核细胞的受体细胞中正确表达34成熟成熟mRNA反转录反转录反转录法合成目的基因反转录法合成目的基因cDNAcDNAcDNA不含非编码区的启动子、终止子不含非编码区的启动子、终止子 不含编码区的内含子不含编码区的内含子35基因表达载体的组成：基因表达载体的组成：目的：使目的基因在受体细胞中稳定存目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。的基因能够表达和发挥作用。聚焦三：基因表达载体的构建聚焦三：基因表达载体的构建a a、目的基因、目的基因b b、启动子、启动子c c、终止子、终止子d d、标记基因、标记基因e、复制原点复制原点基因的运载体、目的基因、启动子、终止子和基因的运载体、目的基因、启动子、终止子和标记基因标记基因 等都是等都是DNA片断，如何将它们连接起来？片断，如何将它们连接起来？37质粒质粒目的基因目的基因限制酶限制酶DNA连接酶连接酶重组重组DNA38质粒质粒DNADNA分子分子一个一个切口切口两个两个黏性末端黏性末端两个两个切口切口获得目的基因获得目的基因DNA DNA 连接酶连接酶重组重组DNADNA分子（重组质粒）分子（重组质粒）同一种同一种 限制酶限制酶 目的基因与运载体的结合过程，实际目的基因与运载体的结合过程，实际上是不同来源的基因重组的过程。上是不同来源的基因重组的过程。聚焦三：基因表达载体的构建聚焦三：基因表达载体的构建质粒中插入启动子、终止子和标记基因质粒中插入启动子、终止子和标记基因 等等 DNA片断，也是同样的重组方法片断，也是同样的重组方法412、科学家已经能够通过基因工程的方法，能使番、科学家已经能够通过基因工程的方法，能使番茄果肉细胞中含有人奶蛋白。以下有关该基因工程茄果肉细胞中含有人奶蛋白。以下有关该基因工程的叙述错误的是（的叙述错误的是（ ） A采用反转录的方法得到的目的基因有启动子、采用反转录的方法得到的目的基因有启动子、终止子终止子 B用同种限制酶处理质粒和含目的基因的用同种限制酶处理质粒和含目的基因的DNA，可产生相同的黏性末端而形成重组可产生相同的黏性末端而形成重组DNA分子分子 C番茄的叶肉细胞可作为受体细胞番茄的叶肉细胞可作为受体细胞 D启动子对于目的基因在番茄的叶肉细胞中的表启动子对于目的基因在番茄的叶肉细胞中的表达是不可缺少的达是不可缺少的1、哪项不是基因表达载体的组成部分、哪项不是基因表达载体的组成部分( ) A.启动子 B.终止密码 C.标记基因 D.目的基因43v将目的基因导入受体细胞 转化 目的基因进入目的基因进入受体细胞受体细胞内，并且在内，并且在 受体细胞内维持受体细胞内维持稳定稳定和和表达表达的过程的过程。阅读阅读P12-13，思考：，思考： 将目的基因导入植物细胞、动物细胞、将目的基因导入植物细胞、动物细胞、微生物细胞的方法分别有哪些？微生物细胞的方法分别有哪些？44v将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法农杆菌转化法基因枪法基因枪法花粉管通道法花粉管通道法显微注射技术显微注射技术感受态法感受态法受体受体细胞细胞植物植物植物植物细胞细胞细胞细胞动物动物动物动物细胞细胞细胞细胞原核原核原核原核细胞细胞细胞细胞45农杆菌转化法适用于适用于适用于适用于双子叶植物双子叶植物双子叶植物双子叶植物裸子植物裸子植物裸子植物裸子植物47适用于适用于适用于适用于单子叶植物单子叶植物单子叶植物单子叶植物基因枪法基因枪法48胚珠花药花丝柱头花柱子房壁子房雄蕊雌蕊49花粉管通道法花粉管通道法适用于适用于适用于适用于被子植物被子植物被子植物被子植物50 将目的基因导入将目的基因导入动物细胞动物细胞方法：显微注射法方法：显微注射法程序：程序： 目的基因表达载体提纯目的基因表达载体提纯 取卵（受精）取卵（受精） 显微注射显微注射 受精卵受精卵 新性状动物新性状动物51 将目的基因导入将目的基因导入微生物细胞微生物细胞原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少方法：方法： 用用Ca2+处理细胞处理细胞 感受态细胞感受态细胞 表表达载体与感受态细胞混合达载体与感受态细胞混合 感受态感受态细胞吸收细胞吸收DNA分子分子52 1、基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等、基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是微生物作为受体细胞，原因是( )A结构简单，操作方便结构简单，操作方便B繁殖速度快繁殖速度快C遗传物质含量少、简单遗传物质含量少、简单D性状稳定性状稳定,变异少变异少B53阅读阅读p13-15，思考：，思考： 1、受体细胞摄入、受体细胞摄入DNA分子后就说明目的基分子后就说明目的基因完成了表达吗？因完成了表达吗？ 2、目的基因是否稳定的存在于转基因生物、目的基因是否稳定的存在于转基因生物并按人们的预期进行表达，需要在那些水平上并按人们的预期进行表达，需要在那些水平上进行检测？进行检测？v目的基因的表达和检测54v目的基因的表达和检测接种实验接种实验接种实验接种实验抗原抗体杂交法抗原抗体杂交法抗原抗体杂交法抗原抗体杂交法DNA-RNADNA-RNA分子杂交法分子杂交法分子杂交法分子杂交法DNADNA分子杂交法分子杂交法分子杂交法分子杂交法受体是否具有受体是否具有受体是否具有受体是否具有转基因特征转基因特征转基因特征转基因特征个体个体个体个体水平水平水平水平目的基因是否翻译目的基因是否翻译目的基因是否翻译目的基因是否翻译目的基因是否转录目的基因是否转录目的基因是否转录目的基因是否转录目的基因是否导入目的基因是否导入目的基因是否导入目的基因是否导入分子分子分子分子水平水平水平水平方法方法方法方法检测对象检测对象检测对象检测对象55DNA分子杂交分子杂交 采用一定的技术手段，将两种生物的采用一定的技术手段，将两种生物的DNADNA分分子的单链放在一起，如果这两个单链具有互补子的单链放在一起，如果这两个单链具有互补的碱基序列，那么，互补的碱基序列就会结合的碱基序列，那么，互补的碱基序列就会结合在一起，形成杂合双链区；在没有互补碱基序在一起，形成杂合双链区；在没有互补碱基序列的部位，仍然是两条游离的单链。列的部位，仍然是两条游离的单链。 56A-A-3232P PT-T-C-G-T-G3232P P-T-T-A-A-C-AX1C-C-A-G-T-T-A-X2-G-G-T-C-A-A-TY1A-A-T-T-C-G-T-Y1-T-T-A-A-G-C-A探针探针探针探针 待测待测待测待测DNAXDNAX 待测待测待测待测DNAYDNAY待测待测DNAY与探针与探针DNA相同相同检测目的基因是否导入受体细胞检测目的基因是否导入受体细胞目的目的目的目的DNADNA片段片段片段片段检测目的基因是否转录出了检测目的基因是否转录出了mRNAmRNA 用上述用上述探针探针和转基因生物的和转基因生物的mRNAmRNA杂交杂交, ,若出现若出现杂交带杂交带, ,表明目的基因转录出了表明目的基因转录出了mRNAmRNA57目的基因蛋白质小鼠体内抗体目的基因受体细胞蛋白质抗原抗原杂交分子检测目的基因是否检测目的基因是否翻译成蛋白质翻译成蛋白质-抗原抗体杂交抗原抗体杂交58个体个体生物学水平生物学水平抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等60 1、目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和、目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是于目的基因检测和鉴定的是检测受体细胞是否有目的基因检测受体细胞是否有目的基因 检测受体细胞是否有检测受体细胞是否有致病基因致病基因 检测目的基因是否转录信使检测目的基因是否转录信使RNA 检测目的检测目的基因是否翻译蛋白质基因是否翻译蛋白质 A. B. C. D.C61归纳: 基因工程的基本操作程序1.1.获取目的基因获取目的基因u从基因文库从基因文库u利用利用PCRPCRu化学方法人工合成化学方法人工合成2.2.构建基因表达载体构建基因表达载体u目的基因、启动子、终止子、标记基因目的基因、启动子、终止子、标记基因3.3.将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞u农杆菌转化法、显微注农杆菌转化法、显微注射法、射法、感受态法感受态法感受态法感受态法4.4.目目的基因的检测与鉴定的基因的检测与鉴定u检测：是否插入、转录、翻译检测：是否插入、转录、翻译u鉴定：鉴定：62 3、利用基因工程生产蛋白质药物的方法之一、利用基因工程生产蛋白质药物的方法之一是将人的基因转入动物体内，再饲养这些转基因动是将人的基因转入动物体内，再饲养这些转基因动物，从动物乳汁或尿液中提取药物。这一过程不涉物，从动物乳汁或尿液中提取药物。这一过程不涉及及 ADNA按照碱基互补配对原则自我复制按照碱基互补配对原则自我复制 BDNA以其一条链为模板合成以其一条链为模板合成RNACRNA以自身为模板自我复制以自身为模板自我复制 D按照按照RNA密码子的排列顺序合成蛋白质密码子的排列顺序合成蛋白质C632）基基因因工工程程是是在在DNA分分子子水水平平上上进进行行设设计计施施工工的的。在在基基因因操操作作的的基基本本步步骤骤中中，不不进进行行碱碱基基互互补补配配对对的的步步骤骤是是 （ ） A、人工合成目的基因、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达、目的基因的检测和表达C C练习练习64练习练习1：(2008理综山东卷理综山东卷)为扩大可耕地面积，为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。了耐盐水稻新品系。（1）获得耐盐基因后，构建重组）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所分子所用的限制性内切酶作用于图中的用的限制性内切酶作用于图中的 处，处，DNA连接酶作用于连接酶作用于 处。（填处。（填“a”或或“b”）aa65练习练习1：(2008理综山东卷理综山东卷)为扩大可耕地面积，增为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。新品系。（2）将重组）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和法有农杆菌转化法和 法。法。（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用利用 技术，该技术的核心是技术，该技术的核心是 和和 。（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的要用放射性同位素标记的 作探针进行分作探针进行分子杂交检测，又要用子杂交检测，又要用 方法从个体水平方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。鉴定水稻植株的耐盐性。基因枪法（花粉管通道法）基因枪法（花粉管通道法）植物组织培养植物组织培养脱分化脱分化再分化再分化耐盐基因耐盐基因移栽到盐碱地等移栽到盐碱地等66 4、酵母菌的维生素、蛋白质含量高，可作食用、酵母菌的维生素、蛋白质含量高，可作食用、药用等，是提取核苷酸、三磷酸腺苷等多种生化产药用等，是提取核苷酸、三磷酸腺苷等多种生化产品的原料，还可用于生产维生素、氨基酸等。科学品的原料，还可用于生产维生素、氨基酸等。科学家将使啤酒产生丰富泡沫的家将使啤酒产生丰富泡沫的LTPl基因植入啤酒酵基因植入啤酒酵母菌中，使其产生母菌中，使其产生LTPl蛋白，酿出泡沫丰富的啤蛋白，酿出泡沫丰富的啤酒，具体的操作过程如下：请据图回答问题：酒，具体的操作过程如下：请据图回答问题： （1）图中）图中LTPl基因与基因与B结合产生的结合产生的C是是_，通常在体外完成，此过程必需，通常在体外完成，此过程必需有有_和和_酶。酶。DNA连接连接 基因表达载体基因表达载体DNA限制性内切酶限制性内切酶67 4、 酵母菌的维生素、蛋白质含量高，可作食酵母菌的维生素、蛋白质含量高，可作食用、药用等，是提取核苷酸、三磷酸腺苷等多种生用、药用等，是提取核苷酸、三磷酸腺苷等多种生化产品的原料，还可用于生产维生素、氨基酸等。化产品的原料，还可用于生产维生素、氨基酸等。科学家将使啤酒产生丰富泡沫的科学家将使啤酒产生丰富泡沫的LTPl基因植入啤基因植入啤酒酵母菌中，使其产生酒酵母菌中，使其产生LTPl蛋白，酿出泡沫丰富蛋白，酿出泡沫丰富的啤酒，具体的操作过程如下：的啤酒，具体的操作过程如下：（2）标记基因的作用是）标记基因的作用是 。筛选转化成功的受体细胞筛选转化成功的受体细胞68 4、 酵母菌的维生素、蛋白质含量高，可作食酵母菌的维生素、蛋白质含量高，可作食用、药用等，是提取核苷酸、三磷酸腺苷等多种生用、药用等，是提取核苷酸、三磷酸腺苷等多种生化产品的原料，还可用于生产维生素、氨基酸等。化产品的原料，还可用于生产维生素、氨基酸等。科学家将使啤酒产生丰富泡沫的科学家将使啤酒产生丰富泡沫的LTPl基因植入啤基因植入啤酒酵母菌中，使其产生酒酵母菌中，使其产生LTPl蛋白，酿出泡沫丰富蛋白，酿出泡沫丰富的啤酒，具体的操作过程如下：的啤酒，具体的操作过程如下：（3）检测）检测LTPl基因在啤酒酵母菌中是否表达可以基因在啤酒酵母菌中是否表达可以通通_。抗元抗体杂交法检测是否产生抗元抗体杂交法检测是否产生LTPl蛋白蛋白69答案：（答案：（1）a a （2）基因枪）基因枪法（花粉管通道法）法（花粉管通道法）（3）植物组织培养（）植物组织培养（1分）分） 脱分化脱分化（去分化）（去分化） 再分化再分化（4）耐盐基因（目的基因）耐盐基因（目的基因） 一定一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中） 70