1 1、研究微生物，利用微生物，需要培、研究微生物，利用微生物，需要培养微生物。我们怎样培养微生物？培养微生物，养微生物。我们怎样培养微生物？培养微生物，需要提供哪些物质？需要提供哪些物质？ 2 2、各种微生物的代谢类型不同，生长、各种微生物的代谢类型不同，生长过程所需要的物质是不同的。怎样根据微生物过程所需要的物质是不同的。怎样根据微生物代谢方式的差异选择培养基中的物质？代谢方式的差异选择培养基中的物质？ 若硝化细菌、圆褐固氮菌、不固氮的蓝藻若硝化细菌、圆褐固氮菌、不固氮的蓝藻混合在一起，我们配置什么样的培养基可混合在一起，我们配置什么样的培养基可以将三种微生物分离？以将三种微生物分离？碳源碳源氮源氮源能源能源硝化细菌硝化细菌COCO2 2氨氨氨氨圆褐固氮菌圆褐固氮菌糖类等含糖类等含碳有机物碳有机物N N2 2有机物有机物不固氮的蓝不固氮的蓝藻藻COCO2 2铵盐、硝酸盐铵盐、硝酸盐光光碳源碳源氮源氮源生长因子生长因子无机盐无机盐水水微生物需要的五大类营养要素物质微生物需要的五大类营养要素物质（一）微生物需要的营养物质及功能（一）微生物需要的营养物质及功能概念概念来源来源作用作用碳源凡是能为微凡是能为微生物提供所生物提供所需碳元素的需碳元素的营养物质营养物质无机碳源无机碳源 COCO2 2 NaHCO NaHCO3 3等等有机碳源有机碳源 糖类糖类 脂肪酸脂肪酸 花生粉花生粉饼饼 石油石油 等等构成细胞构成细胞物质和一些物质和一些代谢产物代谢产物异养微生异养微生物的能源物的能源1、微生物的碳源、微生物的碳源 自养型和异养型微生物分别能自养型和异养型微生物分别能利用哪类碳源物质？利用哪类碳源物质？思考思考营养类型营养类型能源能源氢的供体氢的供体基本碳源基本碳源微生物举例微生物举例光能自养型光能自养型光光无机物无机物二氧化碳二氧化碳蓝藻蓝藻红硫细菌红硫细菌衣藻衣藻光能异养型光能异养型光光有机物有机物二氧化碳二氧化碳及简单有及简单有机物机物红螺菌红螺菌紫色紫色非硫细菌非硫细菌化能自养型化能自养型无机无机物物无机物无机物二氧化碳二氧化碳硝化细菌硝化细菌硫细菌硫细菌铁细菌铁细菌化能异养型化能异养型有机有机物物有机物有机物有机物有机物大多数已知细大多数已知细菌和全部真核菌和全部真核微生物微生物微生物的营养类型微生物的营养类型概念概念来源来源作用作用氮氮源源无机氮源无机氮源 N N2 2、NHNH4 4+ +、 NONO3 3- -、NHNH3 3等等有机氮源有机氮源 尿素、牛肉膏、尿素、牛肉膏、 蛋白胨、氨基蛋白胨、氨基酸酸 等等凡是能够凡是能够为微生物为微生物提供提供N N元元素的营养素的营养物质物质主要用于合成主要用于合成蛋白质、核酸蛋白质、核酸及含及含N N的代谢的代谢产物产物2、微生物的氮源、微生物的氮源 哪些微生物能够利用分子态哪些微生物能够利用分子态氮？氮源能否为微生物提供能量？氮？氮源能否为微生物提供能量？思考思考概念概念成分成分作用作用为什么不可缺少？为什么不可缺少？常见的生长因子常见的生长因子微生物生长不可缺少的微量有机物微生物生长不可缺少的微量有机物有机物有机物酶和核酸的组成成分酶和核酸的组成成分缺乏合成这些物质所需酶或合成能力有限缺乏合成这些物质所需酶或合成能力有限维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等3 3、生长因子、生长因子 设计一个实验证明胱氨酸是肠膜状乳杆菌设计一个实验证明胱氨酸是肠膜状乳杆菌所需的生长因子。所需的生长因子。、目的要明确、目的要明确根据所培养的微生物的种类、培养的目的配制根据所培养的微生物的种类、培养的目的配制、营养要协调、营养要协调注意各种营养物质的浓度和比例注意各种营养物质的浓度和比例, ,最重要为碳源最重要为碳源和氮源的比，如：和氮源的比，如：谷氨酸生产中谷氨酸生产中 C C: :N=4:1N=4:1，菌体数，菌体数谷氨酸谷氨酸。 C:N=3:1C:N=3:1，菌体，菌体数数谷氨酸谷氨酸。、pHpH要适宜要适宜 细菌细菌 pH6.57.5 pH6.57.5 放线菌放线菌 pH7.58.5pH7.58.5 真菌真菌 pH5.06.0pH5.06.0（二）培养基的配制原则（二）培养基的配制原则根据根据物理性质物理性质分分固体培养基固体培养基用于微生物的分离计数用于微生物的分离计数半固体培养基半固体培养基观察微生物的运动观察微生物的运动, ,鉴定菌种鉴定菌种液体培养基液体培养基常用于工业生产常用于工业生产根据根据化学成分化学成分分分合成培养基合成培养基成分明确成分明确, ,常用于分类常用于分类, ,鉴定鉴定天然培养基天然培养基成分不明确成分不明确, ,常用于工业生产常用于工业生产（三）培养基的种类（三）培养基的种类图根据根据用途用途分分选择培养基选择培养基在培养基中加入某种化学物质在培养基中加入某种化学物质, ,以抑制不需要的微生物的生长以抑制不需要的微生物的生长, ,促进所需要的促进所需要的微生物的生长微生物的生长, ,如如加高浓度的食盐加高浓度的食盐, ,抑制多种细菌生长抑制多种细菌生长, ,分离到分离到金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌鉴别培养基鉴别培养基在培养基中加入某种指示剂或在培养基中加入某种指示剂或化学药品化学药品, ,用以鉴别不同种类的微生物用以鉴别不同种类的微生物, ,如如伊红和美蓝伊红和美蓝, ,和大肠杆菌的代谢产物结合和大肠杆菌的代谢产物结合, ,使使菌落呈深紫色菌落呈深紫色, ,并带有金属光泽并带有金属光泽, ,可以用来鉴可以用来鉴别大肠杆菌别大肠杆菌选择培养基选择培养基加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基 分离金黄色葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基不加含碳有机物的无碳培养基 分离自养型微生物分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基加入青霉素等抗生素的培养基 分离导入了目的基因的受体细胞分离导入了目的基因的受体细胞微生物的分离：科赫的稀释微生物的分离：科赫的稀释划线分离培养法划线分离培养法 1919世纪后期，德国细菌学家科赫发明了固体培养基，世纪后期，德国细菌学家科赫发明了固体培养基，将微生物样品稀释后，用针尖沾取少量的稀释菌液在固体将微生物样品稀释后，用针尖沾取少量的稀释菌液在固体培养基上划线，不久培养基的表面就会长出多种菌落。培养基上划线，不久培养基的表面就会长出多种菌落。 科赫推断相同特征的菌落来自同科赫推断相同特征的菌落来自同一个种，于是，就挑选某一种菌落的一个种，于是，就挑选某一种菌落的微生物，经过几次相同的培养过程后，微生物，经过几次相同的培养过程后，就得到了纯种。就得到了纯种。 应用固体培养基，科赫分离出了应用固体培养基，科赫分离出了炭疽芽孢杆菌、霍乱弧菌、结核杆菌炭疽芽孢杆菌、霍乱弧菌、结核杆菌等。等。19051905年，科赫因结核杆菌的研究年，科赫因结核杆菌的研究成果而获诺贝尔生理学及医学奖。成果而获诺贝尔生理学及医学奖。细菌学家科赫细菌学家科赫用稀释划线法获得用稀释划线法获得的不同细菌的菌落的不同细菌的菌落 固体培养基固体培养基半固体培养基半固体培养基液体培养基液体培养基主要用于微生物的主要用于微生物的分离、计数等分离、计数等主要用于观察微生主要用于观察微生物的运动、鉴定菌物的运动、鉴定菌种等种等主要用于工业生产主要用于工业生产需加入凝固需加入凝固剂，如琼脂剂，如琼脂