新药的新药的非临床非临床安全性评价安全性评价新药的安全性及有效性新药的安全性及有效性v药理学研究药理学研究主要药效学主要药效学一般药理学一般药理学药代动力学药代动力学v毒理学研究毒理学研究9/19/20242毒理学研究毒理学研究急性毒性急性毒性长期毒性长期毒性局部特殊毒性局部特殊毒性免疫毒性免疫毒性遗传毒性遗传毒性生殖毒性生殖毒性致癌性致癌性依赖性依赖性复方制剂复方制剂9/19/20243评价目的评价目的1.1.1.1.确定潜在的毒性靶器官和毒性反应出现的时确定潜在的毒性靶器官和毒性反应出现的时确定潜在的毒性靶器官和毒性反应出现的时确定潜在的毒性靶器官和毒性反应出现的时间、性质、程度及其可逆性间、性质、程度及其可逆性间、性质、程度及其可逆性间、性质、程度及其可逆性2.2.2.2.确定临床监测的安全性参数确定临床监测的安全性参数确定临床监测的安全性参数确定临床监测的安全性参数3.3.3.3.推算人体使用的安全起始剂量以及随后的剂推算人体使用的安全起始剂量以及随后的剂推算人体使用的安全起始剂量以及随后的剂推算人体使用的安全起始剂量以及随后的剂量递增方案量递增方案量递增方案量递增方案9/19/20244具体问题具体分析具体问题具体分析品种特点品种特点最大限度暴露毒性（如果临床上存在某些方面的安全最大限度暴露毒性（如果临床上存在某些方面的安全性担忧时则应进行该方面的非临床安全性研究）性担忧时则应进行该方面的非临床安全性研究）执行执行GLP毒性暴露结果向临床过渡，利弊权衡毒性暴露结果向临床过渡，利弊权衡重在重在“评价评价”药理毒理研究的整体性、综合性、阶段性药理毒理研究的整体性、综合性、阶段性说明书：说明书：“严进严进”、“宽进宽进”一般原则一般原则9/19/20245何谓具体问题具体分析？何谓具体问题具体分析？研究内容（重点）研究内容（重点）研究阶段性研究阶段性试验设计试验设计结果评价结果评价 CASECASE（要素）要素） CASECASE（评价）评价）产品的设计思路产品的设计思路分子结构分子结构作用机制、活性特点作用机制、活性特点安全性担忧安全性担忧相关动物相关动物相关动物相关动物免疫原性免疫原性免疫原性免疫原性临床适应症、用药人群临床适应症、用药人群临床用药周期临床用药周期已有相关安全性信息已有相关安全性信息技术、经济可行性等等技术、经济可行性等等9/19/20246药理学研究药理学研究主要药效学研究主要药效学研究体内和体外两种以上实验方法，其中一种必须体内和体外两种以上实验方法，其中一种必须是整体的正常动物或模型动物是整体的正常动物或模型动物空白对照及已知阳性药物对照空白对照及已知阳性药物对照作用机制作用机制研究研究9/19/20248一般药理学（一般药理学（General Pharmacology）研研究究对主要药效学（对主要药效学（Primary Pharmacodynamic）作用以外的广泛的药理学研究作用以外的广泛的药理学研究次要药效学（次要药效学（Secondary Pharmacodynamic ）安全药理学（安全药理学（Safety Pharmacology ）F中枢神经系统中枢神经系统F心血管系统心血管系统F呼吸系统呼吸系统9/19/20249 追加的追加的 补充的补充的 可免做的可免做的一般药理研究的特殊情况一般药理研究的特殊情况9/19/202410药物在体内的处置，药物在体内的处置，ADME的过程及特点的过程及特点吸收吸收（Absorption）分布分布（Distribution）代谢（代谢（Metabolism）排泄排泄（Excretion） 药代代动力学研究力学研究9/19/202411血药浓度时间曲线血药浓度时间曲线药代动力学参数的估算（见后）药代动力学参数的估算（见后）药物的吸收药物的吸收药物的分布药物的分布药物的排泄药物的排泄尿粪排泄尿粪排泄胆汁排泄胆汁排泄v物料平衡（物料平衡（Mass Balance）药物与血浆蛋白的结合药物与血浆蛋白的结合代谢转化试验代谢转化试验对药物代谢酶活性的影响对药物代谢酶活性的影响具具体体研研究究项项目目9/19/202412血药浓度时间曲线下面积（血药浓度时间曲线下面积（AUC） 半衰期（半衰期（t1/2）吸收速率常数（吸收速率常数（Ka）消除速率常数（消除速率常数（Ke）峰浓度（峰浓度（Cmax）达峰时间（达峰时间（Tmax）表观分布容积（表观分布容积（Vd）清除率（清除率（CL）生物利用度（生物利用度（F）主要药代动力学参数主要药代动力学参数9/19/202413药代动力学研究药代动力学研究动物动物剂量剂量多次给药多次给药药代动力学研究药代动力学研究组织分布研究组织分布研究生物样本的药物测定方法生物样本的药物测定方法色谱法色谱法放射性核素标记法放射性核素标记法免疫学方法免疫学方法微生物学方法微生物学方法9/19/202414药代动力学研究药代动力学研究方法学确证方法学确证选择性选择性灵敏度灵敏度准确度准确度精密度精密度重现性重现性稳定性稳定性标准曲线标准曲线质控样品质控样品9/19/202415毒理学研究毒理学研究一次或一次或24小时内多次给予小时内多次给予动物动物给药途径给药途径阴性对照组阴性对照组判断安全范围判断安全范围急性毒性急性毒性研究研究9/19/202417急性毒性急性毒性研究研究F最大无反应剂量最大无反应剂量F未见反应剂量（未见反应剂量（NOEL） ：No Observed Effect LevelF未见不良反应剂量（未见不良反应剂量（NOAEL）：）： No Observed Adverse Effect LevelF最小毒性反应剂量最小毒性反应剂量F最大耐受量（最大耐受量（MTD）：）：Maximal Tolerance DoseF最小致死剂量（最小致死剂量（MLD）：）：Minimal Lethal DoseF半数致死量（半数致死量（LD50）：）：Median Lethal Dose9/19/202418急性毒性研究试验方法急性毒性研究试验方法最大耐受量最大耐受量法法最大给药量法最大给药量法半数致死量（）半数致死量（）法法固定剂量法固定剂量法上下法（阶梯法，序贯法）上下法（阶梯法，序贯法）近似致死剂量法近似致死剂量法累积剂量设计法（金字塔法）累积剂量设计法（金字塔法）9/19/202419相关动物相关动物给药途径给药途径剂量剂量毒代动力学毒代动力学药代研究在毒理学研究的延伸药代研究在毒理学研究的延伸药代研究在毒理学研究的延伸药代研究在毒理学研究的延伸阶段性阶段性以不同给药期限的长期毒性研究来分以不同给药期限的长期毒性研究来分别支持药物进入别支持药物进入 期、期、期或期或期临床试验（生产）期临床试验（生产） 长期毒性期毒性研究研究9/19/202420支持临床疗程超过支持临床疗程超过2 周的药物周的药物II 期和期和III 期临床试验所需动期临床试验所需动物长期毒性研究的最短给药期限物长期毒性研究的最短给药期限9/19/202421检测指标检测指标 常规指标（一般症状、体重、摄食量）常规指标（一般症状、体重、摄食量）血液学指标血液学指标 ：10项项血液生化学指标血液生化学指标 ：12项（非啮齿类项（非啮齿类16项）项）尿液分析指标：尿液分析指标：9项（非啮齿类）项（非啮齿类）体温、血压、呼吸、心电图及眼科检查（非啮体温、血压、呼吸、心电图及眼科检查（非啮 齿类）齿类）组织病理学检查组织病理学检查脏器系数：脏器系数：12项项组织病理学检查组织病理学检查：30项（非啮齿类项（非啮齿类33项）项）恢复期恢复期9/19/202422局部用药特殊毒性研究局部用药特殊毒性研究刺激性刺激性给药部位的可逆性炎症改变给药部位的可逆性炎症改变过敏性过敏性（变态反应或超敏反应）（变态反应或超敏反应）特异性免疫反应，表现为组织损伤或生理功能紊乱，异常或病理性的特异性免疫反应，表现为组织损伤或生理功能紊乱，异常或病理性的型，快发或速发过敏型，型，快发或速发过敏型，IgE介导介导型，细胞毒型或溶细胞型，型，细胞毒型或溶细胞型，IgG介导介导型，免疫复合物型或血管炎型，免疫复合物型或血管炎型，型，IgG、IgM介导介导型，迟发型或结核菌素型，型，迟发型或结核菌素型，T淋巴细胞介导淋巴细胞介导光敏性光敏性光毒性（光刺激性）光毒性（光刺激性）光过敏性（光变态反应）光过敏性（光变态反应） 型变态反应型变态反应溶血性溶血性溶血及红细胞凝聚溶血及红细胞凝聚免疫性溶血免疫性溶血型和型和 型过敏反应型过敏反应非免疫性溶血非免疫性溶血9/19/202423刺激性刺激性制剂阴性对照皮肤刺激性注射给药部位刺激性眼刺激性其他途径给药部位刺激性9/19/202424过敏性过敏性注射给药注射给药全身主动过敏试验（全身主动过敏试验（ASA）皮肤被动过敏试验（皮肤被动过敏试验（PCA）经皮给药经皮给药豚鼠最大化试验（豚鼠最大化试验（GPMT）Buehler试验（试验（BT）吸入给药吸入给药豚鼠吸入诱导豚鼠吸入诱导刺激试验刺激试验皮肤光毒性试验皮肤光毒性试验皮肤光过敏性试验皮肤光过敏性试验阳性和阴性对照阳性和阴性对照9/19/202425溶血性溶血性体外试管法（肉眼观察）体外试管法（肉眼观察）分光光度法分光光度法阴性对照阴性对照阳性对照（视情况）阳性对照（视情况）9/19/202426免疫毒性研究免疫毒性研究评价潜在的免疫原性评价潜在的免疫原性 检测血清抗体滴度检测血清抗体滴度免疫复合物形成免疫复合物形成间接引起生物活性分子释放间接引起生物活性分子释放 病理毒性（结合在长毒中观察）病理毒性（结合在长毒中观察）淋巴器官称重淋巴器官称重血液学，血细胞分类计数血液学，血细胞分类计数免疫器官免疫器官组织病理学检查组织病理学检查9/19/202427免疫毒性研究免疫毒性研究对免疫功能的影响对免疫功能的影响对脾抗体形成细胞（对脾抗体形成细胞（PFCPFC）的影响（体液免疫功能的影响（体液免疫功能HMIHMI）溶血空斑试验溶血空斑试验 对小鼠迟发性变态反应的影响（对小鼠迟发性变态反应的影响（DTHDTH，细胞免疫功能细胞免疫功能CMICMI）放免放免/DNFB/DNFB二硝基氟苯二硝基氟苯 淋巴细胞增殖试验：有丝分裂原（淋巴细胞增殖试验：有丝分裂原（PHAPHA，ConAConA， LPSLPS，PWMPWM）刺激成淋巴细胞化作用刺激成淋巴细胞化作用 NKNK细胞活性测定：乳酸脱氢酶（细胞活性测定：乳酸脱氢酶（LDHLDH）释放法释放法 过敏反应过敏反应- -人源蛋白豚鼠价值很小，尚无可靠手段人源蛋白豚鼠价值很小，尚无可靠手段9/19/202428v鼠伤寒沙门氏菌营养缺陷型回复突变试验鼠伤寒沙门氏菌营养缺陷型回复突变试验 （Ames试验）试验）阴性及阳性对照阴性及阳性对照S9代谢激活代谢激活 v中国中国仓鼠肺成鼠肺成纤维细胞（胞（CHLCHL）染色体畸染色体畸变试验空白、溶剂、阳性对照空白、溶剂、阳性对照S9代谢激活代谢激活v啮齿动物（小鼠）微核物（小鼠）微核试验阴性及阳性对照阴性及阳性对照遗传毒性（致突变）研究遗传毒性（致突变）研究9/19/202429v段段 一般生殖毒性一般生殖毒性试验试验雌性受孕、分娩、活胎与死胎、外观、骨骼与内脏等雌性受孕、分娩、活胎与死胎、外观、骨骼与内脏等雄性生育能力雄性生育能力v段段 致畸敏感期毒性致畸敏感期毒性试验试验胚胎毒性和潜在的致畸性胚胎毒性和潜在的致畸性v段段 围产期毒性期毒性试验试验子代动物子代动物生殖毒性研究生殖毒性研究9/19/202430致癌性研究致癌性研究 创新药创新药 v 短期致癌试验短期致癌试验哺乳动物培养细胞恶性转化试验哺乳动物培养细胞恶性转化试验小鼠肿瘤诱发试验小鼠肿瘤诱发试验v 长期致癌试验长期致癌试验9/19/202431具有精神神经作用的药物需要提供具有精神神经作用的药物需要提供 身体依赖性试身体依赖性试Q镇痛药、镇静催眠药镇痛药、镇静催眠药 催促试验催促试验 诱导试验诱导试验自然戒断试验或替代试验自然戒断试验或替代试验 精神依赖性试验精神依赖性试验自身给药自身给药药物依赖性研究药物依赖性研究9/19/2024321.1.科学的，科学的，“case-by-casecase-by-case” 的的设计思路设计思路2.2.通过药理作用来选择相关动物通过药理作用来选择相关动物3.3.可采用一种动物可采用一种动物4.4.免疫原性非常重要免疫原性非常重要5.5.遗传毒性通常不要求遗传毒性通常不要求6.6.代谢研究通常不要求代谢研究通常不要求7.7.两年的致癌性试验通常不要求两年的致癌性试验通常不要求8.8.没有仿制品？没有仿制品？1.1.大多数品种的研究内容相似大多数品种的研究内容相似2.2.通过代谢来选择相关动物通过代谢来选择相关动物3.3.要求采用啮齿和非啮齿类动要求采用啮齿和非啮齿类动物进行试验物进行试验 4.4.通常没有免疫原性通常没有免疫原性5.5.要求进行遗传毒性研究要求进行遗传毒性研究 6.6.要求进行代谢研究要求进行代谢研究 7.7.要求进行两年的致癌性试验要求进行两年的致癌性试验8.8.有仿制品有仿制品生物制品生物制品小分子化合物小分子化合物非临床安全性评价的主要不同非临床安全性评价的主要不同9/19/202433 9/19/202434