第十四章中药制剂分析第十四章中药制剂分析 第十四章第十四章 内容内容1 1了解中药制剂的分类及中药制了解中药制剂的分类及中药制剂分析的特点剂分析的特点2 2熟习中药制剂分析的普通程序熟习中药制剂分析的普通程序3 3掌握中药制剂常用的定量分析掌握中药制剂常用的定量分析方法方法一、定义一、定义 中药制剂是根据药典、制剂规范和其它规中药制剂是根据药典、制剂规范和其它规定的处方，将中药的原料药物加工制成具有一定的处方，将中药的原料药物加工制成具有一定规格，可以直接用于防病、治病的药品定规格，可以直接用于防病、治病的药品第一节第一节 概述概述留意：中药制剂必需是以中医药根底留意：中药制剂必需是以中医药根底实际和用药原那么为指点制成的一方实际和用药原那么为指点制成的一方或复方制剂。中药的成方制剂又称为或复方制剂。中药的成方制剂又称为中成药中成药同物异名同物异名 同名异物同名异物30多种，鳞毛蕨科、蹄盖蕨科、多种，鳞毛蕨科、蹄盖蕨科、 紫萁科、乌毛蕨科紫萁科、乌毛蕨科贯众贯众二、二、中药制剂分析的特点中药制剂分析的特点 中药市场混乱中药市场混乱1.同物异名景象严重：同物异名景象严重： 重楼为百合科重楼为百合科Paris polyphylla Smith. 的根茎又名七叶一枝花、蚤休、的根茎又名七叶一枝花、蚤休、草河车草河车 拳参为蓼科拳参为蓼科Polygonum bistra L.的根的根茎又名草河车茎又名草河车生长环境、采收季节及部位差别生长环境、采收季节及部位差别麻黄麻黄 东东北北西北西北 - 麻黄碱含量麻黄碱含量 + 麻黄碱含量麻黄碱含量GAP 中药材消费质量管理规范中药材消费质量管理规范中药材质量的不稳定性中药材质量的不稳定性2.益母草益母草 水苏碱水苏碱 营养期含量最高营养期含量最高 益母草碱益母草碱 营养期含量最低营养期含量最低薄荷脑薄荷脑 秋季叶变黄时含量最高秋季叶变黄时含量最高丹参酮丹参酮 11、12月份含量最高月份含量最高不同部位人参皂苷的含量不同部位人参皂苷的含量 分量比分量比(%) 总皂苷含量总皂苷含量(%) 周皮周皮 6.9 2.60韧皮韧皮 46.6 3.04木质部木质部 46.5 0.31五倍子五倍子 鞣质鞣质70%槐米槐米 芦丁芦丁20%长春花长春花 长春新碱百万分之一长春新碱百万分之一美登木美登木 美登木碱千万分之一美登木碱千万分之一各种有效成分含量相差悬殊各种有效成分含量相差悬殊3. 中药药效的发扬是多种成分中药药效的发扬是多种成分协同作用的结果，因此应从整体协同作用的结果，因此应从整体上来控制中药的质量上来控制中药的质量成分复杂且大多数有效成分尚不非常清楚成分复杂且大多数有效成分尚不非常清楚4.鞣质鞣质 地榆止血地榆止血 其他无药效其他无药效有效有效 无效无效同一成分在不同药材中的药理作用不同同一成分在不同药材中的药理作用不同5.例例 三黄泻心汤干浸膏三黄泻心汤干浸膏有效成分与浓缩枯燥方法的关系有效成分与浓缩枯燥方法的关系(%) 常压常压 减压减压 逆浸透逆浸透 成分成分 浓缩浓缩 浓缩浓缩 喷雾喷雾大黄酸葡萄糖苷大黄酸葡萄糖苷 41.1 51.6 96.8小檗碱小檗碱 34.5 37.5 94.5黄连碱黄连碱 6.3 12.0 93.7黄岑苷黄岑苷 77.4 77.6 98.5制剂工艺不同，有效成分的量也不同制剂工艺不同，有效成分的量也不同6.丸、散、片、锭、合、酒、酊、丸、散、片、锭、合、酒、酊、膏、露、茶、栓、颗粒、糖浆等膏、露、茶、栓、颗粒、糖浆等剂型繁多，辅料干扰大剂型繁多，辅料干扰大7. 针对不同的剂型，采用相应的方法进针对不同的剂型，采用相应的方法进展分别纯化后测定展分别纯化后测定蜡丸蜡丸 蜂蜡蜂蜡蜜丸蜜丸 蜂蜜蜂蜜糊剂糊剂 糯米粉、黄米粉糯米粉、黄米粉曲剂曲剂 发酵发酵胶剂胶剂 豆油、黄酒、冰糖豆油、黄酒、冰糖中药制剂的分类中药制剂的分类二、二、中国药典中国药典2000年版一部二十六种年版一部二十六种丸剂丸剂 胶剂胶剂 膏药膏药 颗粒剂颗粒剂 滴眼剂滴眼剂散剂散剂 合剂合剂 露剂露剂 糖浆剂糖浆剂 软膏剂软膏剂片剂片剂 酒剂酒剂 茶剂茶剂 滴丸剂滴丸剂 注射剂注射剂锭剂锭剂 酊剂酊剂 搽剂搽剂 胶囊剂胶囊剂 滴鼻剂滴鼻剂栓剂栓剂 巴布膏剂巴布膏剂 橡胶膏剂橡胶膏剂 气雾剂喷雾剂气雾剂喷雾剂 煎膏剂膏滋煎膏剂膏滋流浸膏剂与浸膏剂流浸膏剂与浸膏剂一一液体制剂液体制剂用药材提取物制备的液体制剂用药材提取物制备的液体制剂合合剂剂、糖、糖浆剂浆剂、酒、酒剂剂、茶、茶剂剂、酊、酊剂剂 滴鼻滴鼻剂剂、滴眼、滴眼剂剂、露、露剂剂、搽、搽剂剂等等无植物组织与细胞，故无显微鉴别无植物组织与细胞，故无显微鉴别1、合剂与口服液合剂与口服液 单剂单剂量合量合剂剂也可称也可称为为“口服液口服液 合剂系指药材用水或其他溶剂，采用适宜方法合剂系指药材用水或其他溶剂，采用适宜方法提取，经浓缩制成的内服液体制剂提取，经浓缩制成的内服液体制剂普通检普通检查工程查工程2、 酒剂与酊剂酒剂与酊剂酒酒剂剂酊酊剂剂药材用蒸馏酒提取制成的廓清液体制剂药材用蒸馏酒提取制成的廓清液体制剂药物用规定浓度的乙醇提取或溶解而制成药物用规定浓度的乙醇提取或溶解而制成的廓清液体制剂的廓清液体制剂普通检查工程普通检查工程二二半固体制剂半固体制剂软膏软膏装量装量微生物限制微生物限制检查工程检查工程常用基常用基质质 油脂性、水溶性油脂性、水溶性 乳乳剂剂型型 乳膏乳膏剂剂 药物、药材细粉、药材提取药物、药材细粉、药材提取物与适量基质混合制成的半物与适量基质混合制成的半固体外用制剂固体外用制剂 药材提取液的浓缩液药材提取液的浓缩液三三半流体制剂半流体制剂煎膏剂煎膏剂(膏滋膏滋)流浸膏剂与浸膏剂半流体或固体流浸膏剂与浸膏剂半流体或固体无植物组织与细胞，无植物组织与细胞，故无显微鉴别故无显微鉴别药材用水煎煮、去渣浓缩后，加炼药材用水煎煮、去渣浓缩后，加炼蜜或糖制成的半流体制剂蜜或糖制成的半流体制剂1、 煎膏剂煎膏剂(膏滋膏滋) 相对密度相对密度不溶物不溶物 装量装量微生物限制微生物限制检查工程检查工程应应无焦臭、异味，无糖无焦臭、异味，无糖结结晶析出晶析出2、流浸膏剂与浸膏剂半流浸膏剂与浸膏剂半/固固药材用适宜的溶剂提取，蒸去部分或全部溶药材用适宜的溶剂提取，蒸去部分或全部溶剂，调整浓度至规定规范而制成的制剂剂，调整浓度至规定规范而制成的制剂装量装量微生物限制微生物限制检查工程检查工程1ml流流 浸膏浸膏 1g 原原药药材材1g 浸膏浸膏 2 5g 原原药药材材消费提取溶剂大多为水或稀醇消费提取溶剂大多为水或稀醇检测时普通需经有机提取后分析检测时普通需经有机提取后分析对于流浸膏，有对于流浸膏，有的测总固体量以的测总固体量以控制其质量控制其质量有效成分不明或无定有效成分不明或无定量方法的，可量方法的，可 测一定测一定溶剂的浸出物含量溶剂的浸出物含量 有效成清楚确且有有效成清楚确且有适当方法适当方法 ，测定有，测定有效成分的含量效成分的含量四四固体制剂固体制剂 药材提取物、药材粉末加赋药材提取物、药材粉末加赋形剂、制备而成形剂、制备而成丸丸剂剂、胶、胶剂剂、颗颗粒粒剂剂、散、散剂剂、片、片剂剂、胶囊胶囊剂剂、锭剂锭剂、胶、胶剂剂、茶、茶剂剂、栓、栓剂剂有植物组织与细胞，可做显微鉴别有植物组织与细胞，可做显微鉴别1、 丸剂丸剂 指药材细粉或药材提取物加适宜的指药材细粉或药材提取物加适宜的黏合剂或其他辅料制成球形或类球形制黏合剂或其他辅料制成球形或类球形制剂，分为蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、剂，分为蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、浓缩丸、蜡丸、微丸等浓缩丸、蜡丸、微丸等检查工程检查工程水分、分量差别水分、分量差别(按丸或分量按丸或分量)装量差别装量差别(按一次剂量分装的按一次剂量分装的)溶散时限、微生物限制溶散时限、微生物限制装量差别装量差别(按一次剂量分装的按一次剂量分装的)水分、分量差别水分、分量差别(按丸或分量按丸或分量)溶散时限溶散时限微生物限制微生物限制检查工程检查工程水分规定水分规定大蜜丸、小蜜丸、大蜜丸、小蜜丸、浓缩浓缩蜜丸蜜丸 15.0%水蜜丸、水蜜丸、浓缩浓缩水蜜丸水蜜丸 12.0%水丸、糊丸、水丸、糊丸、浓缩浓缩水丸水丸 9.0%装量差别装量差别高高低低溶散时限溶散时限6丸，照崩解时限检查法丸，照崩解时限检查法分量差别分量差别第一法按丸服用每次最高丸数或每第一法按丸服用每次最高丸数或每 丸丸1.5g，10份份高高低低高高低低第二法按分量服每份第二法按分量服每份10丸，丸，10份份 高高 低低2、 散剂散剂 一种或多种药材混合制成的粉一种或多种药材混合制成的粉末状制剂，分内服和外用散剂末状制剂，分内服和外用散剂 检查工程检查工程均匀度均匀度水分水分装量差别装量差别微生物限制微生物限制均匀度均匀度取供试品适量置光滑纸上，平铺取供试品适量置光滑纸上，平铺约约5cm2，将其外表压平，在亮处，将其外表压平，在亮处察看，应呈现均匀的色泽，无花察看，应呈现均匀的色泽，无花纹、色斑纹、色斑水分水分9.0%3、颗粒剂颗粒剂 药材提取物与适宜辅料或药材细药材提取物与适宜辅料或药材细粉制成的颗粒状制剂，分为可溶性颗粉制成的颗粒状制剂，分为可溶性颗粒剂、混悬性颗粒剂、泡腾性颗粒剂粒剂、混悬性颗粒剂、泡腾性颗粒剂 检查工程检查工程粒度粒度 水分水分 溶化性溶化性装量差别装量差别 微生物限制微生物限制粒度粒度 1号筛号筛4号筛号筛8%(左右悄然往返3分钟)溶化性溶化性装量差别装量差别单剂单剂量包装量包装 同丸同丸剂剂多多剂剂量包装量包装 最低装量最低装量检查检查法法(附附录录 C) 平均装量平均装量标标示装量示装量 每个装量每个装量限量限量% 4、 片剂片剂 药材提取物加药材细粉或药材细药材提取物加药材细粉或药材细粉与适宜辅料混匀压制而成的园片状粉与适宜辅料混匀压制而成的园片状或异形片状的制剂，分为浸膏片、半或异形片状的制剂，分为浸膏片、半浸膏片和全粉片浸膏片和全粉片检查工程检查工程分量差别分量差别崩解时限崩解时限微生物限制微生物限制原粉片原粉片30浸膏片浸膏片1h薄膜衣片薄膜衣片1h5、胶囊剂胶囊剂硬胶囊剂硬胶囊剂软胶囊剂软胶囊剂肠溶胶囊剂肠溶胶囊剂 检查工程检查工程水分水分装量差别装量差别崩解时限崩解时限微生物限制微生物限制第二节第二节 中药制剂分析的普通程序中药制剂分析的普通程序 含量测定含量测定检查检查鉴别鉴别取样取样提取提取纯化纯化供试品溶液的制备供试品溶液的制备一、一、一一提取方法提取方法1、萃取法萃取法 利用溶质在两种互不相溶的溶利用溶质在两种互不相溶的溶剂中溶解度的不同，使物质从一种剂中溶解度的不同，使物质从一种溶剂转移到另一种溶剂中，将测定溶剂转移到另一种溶剂中，将测定组分提取出来的方法组分提取出来的方法用于皂苷类用于皂苷类正丁醇正丁醇氯仿氯仿乙醚、石油醚乙醚、石油醚醋酸乙酯醋酸乙酯1萃取溶剂的选择萃取溶剂的选择.用于生物碱类用于生物碱类用于黄酮类用于黄酮类用于挥发油用于挥发油2水相水相pH的选择的选择酸性成分酸性成分 比其比其pKa低低12个个pH单位单位 比其比其pKa高高12个个pH单位单位 碱性成分碱性成分3仪器和提取次数仪器和提取次数 4 酒酒剂剂和酊和酊剂剂先先挥挥去乙醇去乙醇5防止和消除乳化防止和消除乳化分液漏斗分液漏斗鉴别鉴别1次次含量测定含量测定 3 4次次2、冷浸法冷浸法 样品置溶剂里，室温下浸泡一样品置溶剂里，室温下浸泡一段时间的提取方法段时间的提取方法适宜易溶出的组分适宜易溶出的组分适宜遇热不稳定的药物适宜遇热不稳定的药物 费时费时8 24小时小时特点特点适用范围适用范围适宜植物性粉末适宜植物性粉末不宜动物性粉末不宜动物性粉末亲亲脂性脂性 亲亲水性水性石油醚石油醚 苯苯 氯仿氯仿 乙醚乙醚 乙酸乙酯乙酸乙酯 丙酮丙酮 乙醇乙醇 甲醇甲醇 水水3、回流提取法回流提取法 样品置有机溶剂中加热回流的样品置有机溶剂中加热回流的提取方法提取方法加快溶出速度，省时加快溶出速度，省时适宜受热稳定的药物适宜受热稳定的药物适宜较难溶出的组分适宜较难溶出的组分特点特点仪器仪器普通回流安装普通回流安装经过改换溶剂，使提取更完全经过改换溶剂，使提取更完全4、延续回流提取法延续回流提取法 样品置有机溶剂中加热，蒸发样品置有机溶剂中加热，蒸发的溶剂经冷凝流回样品管的提取方的溶剂经冷凝流回样品管的提取方法法节省溶剂，提高提取效率节省溶剂，提高提取效率适宜受热稳定的药物适宜受热稳定的药物费时费时特点特点仪器仪器索氏提取器索氏提取器5、水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法 适用于具挥发性的可随水蒸气适用于具挥发性的可随水蒸气蒸出的组分的测定蒸出的组分的测定麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油6、超声提取法超声提取法 超声波振荡器超声波清洗器超声波振荡器超声波清洗器 简便简便 省时省时 提取率高提取率高 利用超声波的助溶作用进展提取利用超声波的助溶作用进展提取原理原理 超声波在液体中以疏密相超声波在液体中以疏密相间间的方式向物体的方式向物体辐辐射，出射，出现现“空化空化景象景象 气泡的构成、气泡的构成、产产生及破生及破裂景象裂景象 ，构成超越，构成超越1000个大气个大气压压的冲的冲击击力力7、超临界流体萃取超临界流体萃取SFE法法当压力和温度超越气体的临当压力和温度超越气体的临界点时所构成的单一相态界点时所构成的单一相态超临界流体超临界流体 是一种处于超临界点之上的流体，是一种处于超临界点之上的流体，是介于气体与液体之间的一种物相，兼是介于气体与液体之间的一种物相，兼有气体与液体的一些特性有气体与液体的一些特性气体气体超临界流体超临界流体气体气体T 压压力力T 压压力力SFE 工艺流程工艺流程 超临界流体萃取与化学法萃取相比有超临界流体萃取与化学法萃取相比有以下突出的优点：以下突出的优点： 1 它具有它具有与液体类似的与液体类似的密度，因此具密度，因此具有与液体类似有与液体类似的较强的溶解的较强的溶解才干；才干；2溶质在溶质在流体中的分散流体中的分散系数与气体类系数与气体类似，具有传质似，具有传质快，提取时间快，提取时间短的优点；短的优点； 3超临界超临界流体的外表流体的外表张力为零，张力为零，易浸透到样易浸透到样品中，带走品中，带走测定组分；测定组分；4超临界超临界流体在通常形流体在通常形状下为气体，状下为气体，萃取后溶剂可萃取后溶剂可立刻变成气体立刻变成气体而逸出，易到而逸出，易到达浓集的目的；达浓集的目的；6 CO2价钱廉价，价钱廉价，纯度高，容纯度高，容易获得，且易获得，且在消费过程在消费过程中循环运用，中循环运用，从而降低本从而降低本钱；钱；5 CO2是是一种不活泼的一种不活泼的气体气体, 萃取过程萃取过程不发生化学反不发生化学反响响,且属于不燃且属于不燃性气体性气体,无味、无味、无臭、无毒，无臭、无毒，故平安性好；故平安性好；7 该技该技术易与其他仪术易与其他仪器联用实现自器联用实现自动化动化二二纯化方法纯化方法1、萃取法萃取法 利用药物与杂质溶解性能利用药物与杂质溶解性能的不同进展分别的不同进展分别例例生物碱盐生物碱盐氨水氨水H2O2、柱色谱法柱色谱法1保管测定组分在柱上，洗去杂保管测定组分在柱上，洗去杂 质，再用适当溶剂洗下组分质，再用适当溶剂洗下组分2保管杂质于柱上保管杂质于柱上常用固定相常用固定相硅胶硅胶氧化铝氧化铝大孔吸附树脂大孔吸附树脂鉴别实验鉴别实验二、二、鉴定有临床疗效的知成分鉴定有临床疗效的知成分黄连黄连 小檗碱抗菌消炎小檗碱抗菌消炎 麻黄麻黄 麻黄碱支气管哮喘麻黄碱支气管哮喘乌头乌头 乌头碱毒性乌头碱毒性洋地黄洋地黄 强心苷强心强心苷强心延胡索延胡索 延胡索乙素镇痛延胡索乙素镇痛一一显微鉴别显微鉴别含生药粉制剂含生药粉制剂丸剂、片剂、胶囊剂、散剂丸剂、片剂、胶囊剂、散剂快速，简便，覆盖面大快速，简便，覆盖面大 选择原那么选择原那么1、应选有专属性的特征进展鉴别、应选有专属性的特征进展鉴别2、多来源的药材应选择共有的特征进展、多来源的药材应选择共有的特征进展 鉴别鉴别1、水牛角浓缩粉、水牛角浓缩粉2、麝香、麝香3、珍珠、珍珠4、朱砂、朱砂5、雄黄、雄黄6、黄连、黄连7、栀子、栀子8、郁金、郁金9、黄芩、黄芩安宫牛黄丸安宫牛黄丸二二化学鉴别化学鉴别 抗干扰才干差抗干扰才干差显显色、色、荧荧光光例例 二妙丸中苍术的鉴别二妙丸中苍术的鉴别苍术酮苍术酮苍术炔苍术炔三三色谱鉴别色谱鉴别TLC法法运用最多运用最多 Rf、颜颜色、色、荧荧光光 GC法法 适用于含适用于含挥发挥发性成分性成分 的的药药物物 HPLC法法常与含量常与含量测测定同定同时进时进 行行阴、阳对照法阴、阳对照法阳性对照阳性对照 将要鉴别的药材按制剂将要鉴别的药材按制剂 工艺处置，再按鉴别方工艺处置，再按鉴别方 法提取的溶液法提取的溶液阴性对照阴性对照 把制剂中要鉴别的药材把制剂中要鉴别的药材 除去，用剩下的各味药除去，用剩下的各味药 按制剂工艺处置，再按按制剂工艺处置，再按 鉴别方法提取的溶液鉴别方法提取的溶液 O O O O O O O O O O 例例阳阳性性对对照照阴阴性性对对照照样样品品大大大大补补补补阴丸阴丸阴丸阴丸 黄柏的黄柏的黄柏的黄柏的TLCTLC法法法法鉴别鉴别鉴别鉴别 样样品品对照对照药材药材小小檗檗碱碱O O OO O 例例薄薄薄薄层层层层板的板的板的板的选择选择选择选择 硅胶硅胶硅胶硅胶GG板板板板 可加可加可加可加0.3% 0.5% CMC-Na0.3% 0.5% CMC-Na 多用多用多用多用 氧化氧化氧化氧化铝铝铝铝板板板板 常用于生物碱常用于生物碱常用于生物碱常用于生物碱类药类药类药类药物物物物 聚聚聚聚酰酰酰酰胺板胺板胺板胺板 常用于黄常用于黄常用于黄常用于黄酮类酮类酮类酮类及酚及酚及酚及酚类类类类 药药药药物物物物 纤维纤维纤维纤维素板素板素板素板 常用于氨基酸常用于氨基酸常用于氨基酸常用于氨基酸类药类药类药类药物物物物 1.定义：定义：2. 中药材或中药制剂经适当处中药材或中药制剂经适当处置后，采用一定的分析手段，得到置后，采用一定的分析手段，得到的可以标定该中药材或中药制剂特的可以标定该中药材或中药制剂特性的共有峰的图谱性的共有峰的图谱四中药鉴别新技术中药指四中药鉴别新技术中药指 纹图谱纹图谱2. 色谱指纹图谱的根本属性色谱指纹图谱的根本属性模糊性模糊性 强强调调分析、比分析、比较较指指纹图谱纹图谱的的类类似性，而似性，而不是完全一不是完全一样样。是一种是一种综综合的、量化的色合的、量化的色谱鉴别谱鉴别手段。手段。整体性整体性 将指将指纹图谱纹图谱作作为为一个整体来分析和比一个整体来分析和比较较它的它的综综合特征以到达合特征以到达鉴别鉴别的目的。的目的。色色谱谱指指纹图谱纹图谱在中在中药质药质量量评评价中可以尽能价中可以尽能够够多地反响中多地反响中药药的全貌。的全貌。不需求清楚每一个不需求清楚每一个组组分的化学构造；不需分的化学构造；不需求求对对每一个每一个组组分都分都进进展定量；只需求不同展定量；只需求不同批号的同一种批号的同一种药药品的指品的指纹图谱坚纹图谱坚持一致。持一致。3. 指纹图谱的运用指纹图谱的运用雅莲云莲味莲味莲雅莲雅莲云莲云莲IIIIII诃诃 子子小诃子小诃子大诃子大诃子绒毛诃子绒毛诃子人参须根人参须根人参主根人参主根不不同同产产地地高高良良姜姜的的气气相相指指纹纹图图谱谱指纹图谱研讨过程中的本卷须知：指纹图谱研讨过程中的本卷须知：1、在药效学指点下进展研讨，保证指纹、在药效学指点下进展研讨，保证指纹图谱反映的化学成分包括中药材中有图谱反映的化学成分包括中药材中有效部位所含的绝大部分成分或有效成效部位所含的绝大部分成分或有效成分的全部。分的全部。2、样品的预处置过程及测定方法应简便、样品的预处置过程及测定方法应简便、经济、易行，且专属性、准确度与重经济、易行，且专属性、准确度与重现性好。现性好。杂质检查杂质检查三、三、水分水分水分水分总总总总灰分和酸不溶性灰分灰分和酸不溶性灰分灰分和酸不溶性灰分灰分和酸不溶性灰分重金属重金属重金属重金属砷砷砷砷盐盐盐盐残留残留残留残留农药农药农药农药 主要工程主要工程杂质来源及检查意义杂质来源及检查意义水分水分 结块结块、霉、霉变变或有效成分水解或有效成分水解灰分灰分 控制控制药药物本身及泥土、沙石物本身及泥土、沙石 等无机等无机杂质杂质砷砷盐盐 剧剧毒，常由除草毒，常由除草剂剂、杀杀虫虫剂剂 或化肥引入或化肥引入重金属重金属 环环境境污污染和运用染和运用农药农药引入引入 残留残留农药农药 有毒有毒烘干法不含或少含挥发性成分烘干法不含或少含挥发性成分甲苯法甲苯法 含挥发性成分含挥发性成分减压枯燥法含挥发性成分贵重药减压枯燥法含挥发性成分贵重药 GC法法一一水分测定法水分测定法酸不溶性灰分的测定酸不溶性灰分的测定总灰分的测定总灰分的测定二二总灰分和酸不溶性灰分的测定总灰分和酸不溶性灰分的测定WHO规定植物药规定植物药铅铅10ppm镉镉0.3ppm干法破坏干法破坏湿法破坏湿法破坏硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法三三重金属的测定重金属的测定干法破坏干法破坏ChP湿法破坏湿法破坏USP(调到中性调到中性)碱融法破坏碱融法破坏湿法破坏湿法破坏碱融法碱融法H+四四砷盐的测定砷盐的测定五五残留农药的测定残留农药的测定1、总氯量的测定总氯量的测定2、总磷量的测定总磷量的测定3、GC法法 中国药典中药制剂含量测定所占比例中国药典中药制剂含量测定所占比例 版本版本 % 1977 1.48 1985 5.31 1990 8.73 2019 12.81 2000 62.09 HPLC 36% TLCS 24% GC 3%)含量测定工程的选定含量测定工程的选定四、四、测定工程的选定原那么测定工程的选定原那么1 首选君药及贵重药、剧毒药建立首选君药及贵重药、剧毒药建立 含量测定方法含量测定方法2 其次思索臣药及其他味药其次思索臣药及其他味药3 有效成清楚确的，可选有效成分有效成清楚确的，可选有效成分4 成分类别清楚的，可测某一类总成分类别清楚的，可测某一类总 成分的含量成分的含量5 检测成分应归属某单一药味检测成分应归属某单一药味6 检测成分应与中医用药的功能主检测成分应与中医用药的功能主 治相近治相近7 确无法含量测定的，可测定浸出确无法含量测定的，可测定浸出 物含量物含量化学分析法化学分析法色谱法色谱法常用定量方法常用定量方法 分光光度法分光光度法一一化学分析法化学分析法分量分析法分量分析法 容量分析法容量分析法特点特点 A、准确度、精细度高、准确度、精细度高 B、抗干扰才干差、抗干扰才干差例例二二分光光度法分光光度法UV法法 比色法比色法特点特点 A、灵敏度高、灵敏度高 B、简便、快速、简便、快速 C、精细度稍低、精细度稍低 D、干扰多、干扰多 芦丁芦丁黄芩苷黄芩苷小檗碱小檗碱 丹皮酚丹皮酚三三TLCS法法 测定薄层板上斑点对单色光的吸测定薄层板上斑点对单色光的吸收或反射的强度而进展定量的方法收或反射的强度而进展定量的方法特点特点 A、分、分别别效果好效果好 B、适用于无法用、适用于无法用UV、HPLC 法法测测定的定的组组分分 C、准确度、精、准确度、精细细度低于度低于HPLC2000年版中国药典年版中国药典2000年版年版薄层扫描法种类薄层扫描法种类 种种类类数量数量 TLCS数量数量 占占总总数数%534 药药材材 20 3.74458 成成药药 32 6.99978 总总数数 52 10.731、 选择测定条件选择测定条件1薄层色谱条件薄层色谱条件 分别好分别好 不拖尾不拖尾2检测方法检测方法吸收测定法吸收测定法荧光测定法荧光测定法反射法反射法透射法透射法3扫描方式扫描方式 单波长单波长双波长双波长线性扫描法线性扫描法锯齿扫描法锯齿扫描法外标法外标法内标法内标法4散射参数散射参数SX薄层板的散射使薄层板的散射使Kubelka-Munk方程方程1薄层板薄层板 均匀、平整均匀、平整2、 本卷须知本卷须知2点样量点样量 准确准确4显色剂显色剂 均匀、适当均匀、适当 5 维护维护斑点斑点 用一用一样样大小干大小干净净玻璃盖住薄玻璃盖住薄层层板，板，并用透明胶并用透明胶纸纸封住封住边缘边缘，以起固定和隔，以起固定和隔绝绝空气作空气作用用3斑点斑点 应完全分别，不拖尾应完全分别，不拖尾 样样 样样 对对 对对 样样 样样 对对 对对 样样 样样 对对 对对 低低 高高 低低 高高 低低 高高 外标法两点校正法外标法两点校正法四四HPLC法法RP - HPLC色谱柱色谱柱 ODS流动相流动相 甲醇甲醇 - 水水PIC 反离子反离子 氢氧化四丁基铵氢氧化四丁基铵色谱柱色谱柱 ODSRP - PIC 反离子反离子 烷基磺酸盐烷基磺酸盐 无机阴离子无机阴离子外标法和内标法外标法和内标法离子对色谱法离子对色谱法PIC 极性流动相中参与离子对试剂，极性流动相中参与离子对试剂，与被分析离子生成中性离子对，从而与被分析离子生成中性离子对，从而添加在非极性固定相中的溶解度，使添加在非极性固定相中的溶解度，使分配系数增大分配系数增大2000年版中国药典年版中国药典2000年版年版HPLC法种类法种类 种类数量种类数量 HPLC数量数量 占总数占总数%534药材药材 54 10.11458成药成药 48 10.48978总数总数 102 20.59运用实例运用实例- -小青龙合剂小青龙合剂 处处方方 麻黄麻黄125g 125g 桂枝桂枝125g 125g 白芍白芍125g 125g 干姜干姜125 125 五味子五味子125g125g 细细辛辛62g 62g 甘草甘草( (蜜炙蜜炙) ) 法半夏法半夏188g188gNOTESNOTES：合：合剂剂是在是在传统汤剂传统汤剂根底上改良后根底上改良后的一种新的一种新剂剂型型生物碱生物碱桂皮醛桂皮醛芍药甙芍药甙挥发油挥发油三萜皂甙三萜皂甙运用实例运用实例- -小青龙合剂小青龙合剂 制法制法 以上八味，以上八味，细细辛、桂枝提取辛、桂枝提取挥发挥发油，油，蒸蒸馏馏后的水溶液另器搜集，后的水溶液另器搜集，药药渣与白芍、麻黄、渣与白芍、麻黄、五味子、甘草加水煎煮至味尽，合并煎液，五味子、甘草加水煎煮至味尽，合并煎液，滤过滤过，滤滤液和蒸液和蒸馏馏后的水溶液合并，后的水溶液合并，浓缩浓缩至至约约1000ml1000ml。法半夏、甘姜照流浸膏法半夏、甘姜照流浸膏剂项剂项下渗漉法，用下渗漉法，用70%70%乙乙醇作溶醇作溶剂剂，浸，浸渍渍2424小小时时后后进进展渗漉，漉液展渗漉，漉液浓缩浓缩，与上述与上述药药液合并，静置，液合并，静置，滤过滤过，滤滤液液浓缩浓缩至至1000ml1000ml，参与苯甲酸，参与苯甲酸钠钠3g3g与与细细辛、桂枝辛、桂枝挥发挥发油，油，搅搅匀，即得。匀，即得。 性状性状 本品为棕黑色的液体；气微香，味本品为棕黑色的液体；气微香，味甜、微辛。甜、微辛。 功能与主治功能与主治 解表化饮，止咳平喘。用于解表化饮，止咳平喘。用于风寒水饮，恶寒发热，无汗，喘咳痰稀。风寒水饮，恶寒发热，无汗，喘咳痰稀。 用法与用量用法与用量 口服，一次口服，一次10-20ml10-20ml，一日，一日3 3次，用时摇匀。次，用时摇匀。方方药药分析：分析：君君 麻黄麻黄发发汗汗为为君君臣臣 桂枝桂枝解表解表为为臣臣佐佐 甘草甘草恐恐发发汗太汗太过过, , 佐以甘草佐以甘草缓缓 之之使使 白芍、干姜、白芍、干姜、细细辛、法半夏、五辛、法半夏、五 味子味子几几药药合力共合力共为为使。使。可外可外发发汗，内行水，散表里之邪。汗，内行水，散表里之邪。汉汉代代张张仲景仲景 小青小青龙汤龙汤近代由重近代由重庆庆桐君桐君阁阁中中药药厂厂该汤剂为该汤剂为合合剂剂本方治本方治疗伤疗伤寒表不解，心下有水气，干呕，寒表不解，心下有水气，干呕，发热发热而咳。近代也用于慢性支气管炎，而咳。近代也用于慢性支气管炎，支气管哮喘、肺气支气管哮喘、肺气肿肿，均，均见见咳、喘、痰咳、喘、痰白清稀者。白清稀者。供供试试品溶液与阴性品溶液与阴性对对照液的制照液的制备备： 取合取合剂剂10 ml10 ml，石油，石油醚醚分分3 3次萃取，合并次萃取，合并石油石油醚醚萃取液萃取液 油油层层 ，浓缩浓缩至至1ml1ml，为为供供试试品品溶液溶液A A； 水水层层 用用Na2CO3Na2CO3调调PH11-12PH11-12，用，用氯氯仿萃取，合仿萃取，合并并氯氯仿萃取液，回收仿萃取液，回收氯氯仿至干，残渣用仿至干，残渣用1ml1ml甲甲醇溶解，醇溶解，为为供供试试品溶液品溶液B B；NOTESNOTES：阴性：阴性对对照液如上法同步照液如上法同步进进展。展。1. 1. 桂皮桂皮醛醛的的鉴别鉴别 取供取供试试品液品液A A、阴性、阴性对对照液、桂皮照液、桂皮醛对醛对照液照液 1ug/ml1ug/ml 15ul15ul，点于同一硅胶，点于同一硅胶G G板上，板上，环环己己烷烷- -乙酸乙乙酸乙酯酯 1717：3 3 展开，晾干，展开，晾干，喷喷2 2，44二硝基苯二硝基苯肼肼乙醇乙醇T.ST.S，供，供试试品品A A与与对对照照品在相品在相应应位置上位置上显显一一样样的橙色斑点，而阴的橙色斑点，而阴性性对对照液无此斑点。照液无此斑点。2. 2. 细辛挥发油的鉴别细辛挥发油的鉴别 取供试品液取供试品液A A、阴性对照液、细辛挥发、阴性对照液、细辛挥发油对照液油对照液1 1：1010乙醚液乙醚液5ul5ul，点于同一，点于同一硅胶硅胶G G板上，环己烷展开，晾干，喷板上，环己烷展开，晾干，喷10%10%香香草醛浓硫酸草醛浓硫酸T.ST.S，加热至显色，供试品，加热至显色，供试品A A与与对照品在相应位置上显一样的粉红色斑点，对照品在相应位置上显一样的粉红色斑点，而阴性对照液无此斑点。而阴性对照液无此斑点。3. 麻黄碱的鉴别麻黄碱的鉴别 取供试品液取供试品液B，阴性对照液，麻黄碱对照品，阴性对照液，麻黄碱对照品液液1mg/ml各各5ul，点于同一硅胶，点于同一硅胶G，氯仿，氯仿-甲醇甲醇-浓氨水浓氨水20：5：0.5展开，晾干，喷茚三酮展开，晾干，喷茚三酮T.S，加，加热至斑点显色，供试品热至斑点显色，供试品B与对照品在相应位与对照品在相应位置上显一样的蓝紫色斑点，而阴性对照液无置上显一样的蓝紫色斑点，而阴性对照液无此斑点。此斑点。 取合剂取合剂5ml，上聚酰胺柱，上聚酰胺柱，DW洗脱，洗洗脱，洗脱液水浴浓缩至干，用脱液水浴浓缩至干，用1ml甲醇溶解，为供甲醇溶解，为供试品溶液试品溶液C； 聚酰胺柱再用聚酰胺柱再用95%乙醇洗脱，弃取洗脱乙醇洗脱，弃取洗脱液，用液，用3M氨乙醇液洗脱，搜集洗脱液水浴蒸氨乙醇液洗脱，搜集洗脱液水浴蒸干，干， 1ml甲醇溶解，为供试品溶液甲醇溶解，为供试品溶液D。4. 芍药甙的鉴别芍药甙的鉴别 取供试品液取供试品液C、阴性对照液、芍药甙对照、阴性对照液、芍药甙对照液液1mg/ml10ul，点于同一硅胶，点于同一硅胶G板上，氯板上，氯仿仿-乙酸乙酯乙酸乙酯-甲醇甲醇-冰醋酸冰醋酸-甲酸甲酸8：1：2：0.04展开，晾干，喷展开，晾干，喷10%硫酸乙醇液，加热硫酸乙醇液，加热至显色，供试品至显色，供试品C与对照品在相应位置上显一与对照品在相应位置上显一样的紫色斑点，而阴性对照液无此斑点。样的紫色斑点，而阴性对照液无此斑点。 5. 甘草酸的鉴别甘草酸的鉴别 取供试品液取供试品液D、阴性对照液、甘草酸铵对、阴性对照液、甘草酸铵对照液照液2mg/ml2ul，点于同一硅胶，点于同一硅胶G板上，板上，乙酸乙酯乙酸乙酯-甲酸甲酸-冰醋酸冰醋酸-蒸馏水蒸馏水30：2：2：4展开，晾干，喷展开，晾干，喷10%硫酸乙醇液，加热至硫酸乙醇液，加热至显色，显色，UV灯灯365nm察看，供试品察看，供试品D与对照品与对照品在相应位置上显一样的紫色斑点，而阴性对在相应位置上显一样的紫色斑点，而阴性对照液无此斑点。照液无此斑点。含量测定含量测定HPLC法测定芍药甙的含量法测定芍药甙的含量仪器与色谱条件仪器与色谱条件 BECKMAN 332型高效液相色谱仪型高效液相色谱仪163型可变波长紫外检测仪，型可变波长紫外检测仪，220nm427型记录及数据处置仪型记录及数据处置仪色谱柱为色谱柱为YWGC18流动相乙腈流动相乙腈-水水15：85规范曲线制备规范曲线制备 精细称取芍药甙精细称取芍药甙5.08mg，溶于水，溶于水至至50ml量瓶中，定容，分别汲取量瓶中，定容，分别汲取0.50、1.00、1.50、2.00ml于于10ml量瓶中定容。量瓶中定容。回收率测定回收率测定 精细汲取除去白芍制成的合剂即精细汲取除去白芍制成的合剂即阴性对照液阴性对照液0.3ml与适量芍药甙对照品液，经与适量芍药甙对照品液，经过过0.5g聚酰胺柱，用水洗脱至聚酰胺柱，用水洗脱至50ml量瓶中至刻度，量瓶中至刻度，依前述条件测定，平均回收率为依前述条件测定，平均回收率为99.42%，RSD为为0.23%n=3。样品测定样品测定 取自制小青龙合剂摇匀，用滤纸过滤，取自制小青龙合剂摇匀，用滤纸过滤，精细汲取精细汲取0.3ml0.3ml滤液经过聚酰胺柱，以不同滤液经过聚酰胺柱，以不同回收率测定条件进展测定。回收率测定条件进展测定。 分析分析实实例例万氏牛黄清心丸万氏牛黄清心丸 处方处方 牛黄牛黄10g 10g 朱砂朱砂60g 60g 黄连黄连200g 200g 黄芩黄芩120g 120g 栀子栀子120g 120g 郁金郁金80g80g分析分析实实例例万氏牛黄清心丸万氏牛黄清心丸 制法制法 以上六味，除牛黄外，朱砂水飞或粉碎以上六味，除牛黄外，朱砂水飞或粉碎成极细粉；其他黄连等四味粉碎成细粉；将成极细粉；其他黄连等四味粉碎成细粉；将牛黄研细，与上述粉末配研，过筛，混匀。牛黄研细，与上述粉末配研，过筛，混匀。每每100g100g粉末加炼蜜粉末加炼蜜100-200g100-200g制成大蜜丸，即制成大蜜丸，即得。得。古方为糊丸，亦有水丸古方为糊丸，亦有水丸 性状性状 本品为红棕色至棕褐色的大蜜丸；气本品为红棕色至棕褐色的大蜜丸；气特异，味甜、微涩、苦。特异，味甜、微涩、苦。 功能主治功能主治 清热解毒，镇惊安神。用于热邪清热解毒，镇惊安神。用于热邪内闭，焦躁不安，神昏谵语，小儿高热惊厥。内闭，焦躁不安，神昏谵语，小儿高热惊厥。 方方药药分析分析 本方来源于明本方来源于明.痘疹世医痘疹世医 心法心法 ，本方，本方为为清心开清心开窍剂窍剂，主治，主治热热邪内陷心包所邪内陷心包所致致窍闭窍闭神昏症。神昏症。 方中牛黄，清心解毒，豁痰开方中牛黄，清心解毒，豁痰开窍为窍为君君药药；黄黄连连、黄芩、黄芩、栀栀子清子清热热泻火，泻火，为为臣臣药药；朱砂；朱砂清心，重清心，重镇镇安神，郁金行气开安神，郁金行气开窍窍共共为为佐使佐使药药，合用以奏透邪泻合用以奏透邪泻热热，开，开窍窍安神之效。安神之效。 方方药药分析分析 牛黄牛黄清清热热解毒解毒药药，主含胆酸，主含胆酸类类成分。成分。黄黄连连清清热热燥湿燥湿药药，主要，主要为为小檗碱。小檗碱。黄芩黄芩清清热热燥湿燥湿药药，主要，主要为为黄黄酮类酮类。栀栀子子清清热热泻火泻火药药，主含，主含栀栀子子甙甙。朱砂朱砂安神安神药药，主含硫化汞，主含硫化汞 HgSHgS 。郁金郁金活血去瘀活血去瘀药药，主含，主含挥发挥发油。油。 鉴别鉴别q 显显微微鉴别鉴别q郁金郁金糊化淀粉糊化淀粉团块团块几乎无色。几乎无色。q栀栀子子种皮石种皮石细细胞。胞。q黄芩黄芩纤维纤维淡黄色，梭形，厚壁，孔沟淡黄色，梭形，厚壁，孔沟细细。q黄黄连连纤维鲜纤维鲜黄色，壁稍厚，黄色，壁稍厚，纹纹孔明孔明显显。q朱砂朱砂不不规规那么那么块块状物或状物或颗颗粒状物，暗粒状物，暗红红棕色、棕色、鲜红鲜红色或棕黄色。色或棕黄色。郁金郁金糊化淀粉糊化淀粉团块团块栀栀子子种皮石种皮石细细胞胞黄芩黄芩纤维纤维黄黄连连纤维纤维朱砂朱砂不不规规那么那么块块状状物或物或颗颗粒状物，暗粒状物，暗红红棕色、棕色、鲜红鲜红色或棕黄色或棕黄色色q 化学鉴别化学鉴别1. 1. 朱砂的鉴别朱砂的鉴别 取本品取本品3g3g，加水适量，研匀，反复洗去悬，加水适量，研匀，反复洗去悬浮物，可得少量朱红色沉淀，取出，参与盐酸浮物，可得少量朱红色沉淀，取出，参与盐酸1ml1ml及铜片少量，加热煮沸，铜片由黄色变为及铜片少量，加热煮沸，铜片由黄色变为雪白色。雪白色。 HgS+2HCl+Cu HgS+2HCl+CuCuCl2+Hg+H2SCuCl2+Hg+H2S NOTES NOTES：在酸性条件下，朱砂与铜片发生：在酸性条件下，朱砂与铜片发生置换反响析出金属汞，在铜片外表构成雪白色置换反响析出金属汞，在铜片外表构成雪白色汞齐。汞齐。2. 2. 人工牛黄的鉴别人工牛黄的鉴别 取本品，剪碎，加硅藻土取本品，剪碎，加硅藻土0.6g0.6g，研匀，加，研匀，加氯仿氯仿10ml10ml、冰醋酸、冰醋酸0.5ml0.5ml，加热回流，加热回流30min,30min,放放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml2ml使溶解，使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。滤过，滤液作为供试品溶液。 胆酸和猪去氧胆酸加乙醇制成胆酸和猪去氧胆酸加乙醇制成1ml1ml含含1mg1mg的的混合溶液，作为对照品溶液。混合溶液，作为对照品溶液。TLCTLC法法 CMC-Na CMC-Na，硅胶，硅胶G G展开剂展开剂 醋酸乙酯醋酸乙酯- -正己烷正己烷- -醋酸醋酸- -甲醇甲醇 32:6:1:132:6:1:1显色剂显色剂 10% 10%磷钼酸乙醇液，磷钼酸乙醇液， 1100C,10min 1100C,10min人人工工牛牛黄黄供供试试品品牛牛黄黄空空白白猪去氧胆酸猪去氧胆酸胆胆酸酸3. 3. 黄芩的鉴别黄芩的鉴别 供试品溶液的制备：取本品供试品溶液的制备：取本品3g3g，剪碎，剪碎，加硅藻土加硅藻土0.5g0.5g，研匀，加甲醇，研匀，加甲醇20ml20ml，加热回，加热回流流1hr,1hr,放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。 对照品溶液的制备：黄芩甙对照品加甲对照品溶液的制备：黄芩甙对照品加甲醇制成每醇制成每1ml1ml含含1mg1mg的溶液，作为对照品溶液。的溶液，作为对照品溶液。TLCTLC法法 CMC-Na CMC-Na，硅胶，硅胶G G 4%4%醋酸钠醋酸钠展开剂展开剂 醋酸乙酯醋酸乙酯- -丁酮丁酮- -甲酸甲酸- -水水 5:3:1:15:3:1:1显色剂显色剂 2% 2%三氯化铁乙醇液三氯化铁乙醇液使斑点更为集中使斑点更为集中-OH与与Fe+3络合络合黄芩甙供试品黄芩空白4. 4. 栀子的鉴别栀子的鉴别 供试品溶液的制备：取本品供试品溶液的制备：取本品3g3g，加乙醚，加乙醚15ml15ml，研磨，弃去乙醚。残渣挥干乙醚，加醋酸乙酯，研磨，弃去乙醚。残渣挥干乙醚，加醋酸乙酯30ml30ml，加热回流，加热回流1hr,1hr,放冷，滤过，滤液蒸干，残放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇渣加甲醇3ml3ml溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。 对照品溶液的制备：栀子甙对照品加甲醇制对照品溶液的制备：栀子甙对照品加甲醇制成每成每1ml1ml含含1mg1mg的溶液，作为对照品溶液。的溶液，作为对照品溶液。TLCTLC法法 CMC-Na CMC-Na，硅胶，硅胶G G展开剂展开剂 醋酸乙酯醋酸乙酯- -丙酮丙酮- -甲酸甲酸- -水水 10 : 7 : 2 : 0.510 : 7 : 2 : 0.5显色剂显色剂 10% 10%硫酸乙醇硫酸乙醇 1050C, 10min 1050C, 10min栀子甙供试品栀子空白5. 5. 黄连的鉴别黄连的鉴别 供试品溶液的制备：取含量测定供试品溶液的制备：取含量测定项下剩余的盐酸项下剩余的盐酸- -甲醇提取液甲醇提取液4ml4ml，水浴蒸，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解，使成干，残渣加甲醇溶解，使成1ml1ml作为供试品作为供试品溶液。溶液。 对照药材溶液的制备：黄连对对照药材溶液的制备：黄连对照药材照药材50mg，加甲醇，加甲醇10ml，回流加，回流加热热15min ,滤过，滤液蒸干，残渣加滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。使溶解，作为对照药材溶液。 对照品溶液的制备：再取盐酸对照品溶液的制备：再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含含 0.5mg的溶液，作为对照品溶液。的溶液，作为对照品溶液。TLCTLC法法 硅胶硅胶G CMC-NaG CMC-Na展开剂展开剂 苯苯- -醋酸乙酯醋酸乙酯- -甲醇甲醇- -异丙醇异丙醇- -浓氨试液浓氨试液12:6:3:3:112:6:3:3:1显色剂显色剂 UV UV365nm365nm盐酸小檗碱黄连黄连公式品供试品供试品黄连空白黄连空白含量测定含量测定 1. 1. 朱砂朱砂 取本品约取本品约5g5g，剪碎，精细称定，置，剪碎，精细称定，置250ml250ml凯氏烧瓶中，加硫酸凯氏烧瓶中，加硫酸30ml30ml与硝酸钾与硝酸钾8g8g，加，加热俟溶液至近无色，放冷，转入热俟溶液至近无色，放冷，转入250ml250ml锥形瓶中，锥形瓶中，用水用水50ml50ml分次洗涤烧瓶，洗液并人溶液中，滴加分次洗涤烧瓶，洗液并人溶液中，滴加1%1%高锰酸钾溶液至显粉红色，两分钟内不消逝，高锰酸钾溶液至显粉红色，两分钟内不消逝，再滴加再滴加2%2%硫酸亚铁溶液至红色消逝后，加硫酸铁硫酸亚铁溶液至红色消逝后，加硫酸铁铵指示液铵指示液2ml2ml，用硫氰酸铵滴定液滴定，即得。，用硫氰酸铵滴定液滴定，即得。每每1ml1ml的硫氰酸铵滴定液相当于的硫氰酸铵滴定液相当于11.63mg11.63mg的硫化汞。的硫化汞。 硫酸与硝酸硫酸与硝酸钾钾分解分解试样试样及有机破坏及有机破坏高高锰锰酸酸钾钾溶液溶液除去除去试样试样分解分解时产时产生的生的亚亚硫酸硫酸粉粉红红色两分色两分钟钟内不消逝内不消逝亚亚硫酸可将硫酸可将Hg2+ Hg2+ 复原复原Hg+Hg+使含量使含量变变低，察看两分低，察看两分钟钟完全除去完全除去亚亚硫酸硫酸硫酸硫酸亚铁亚铁溶液溶液除去除去过过量的高量的高锰锰酸酸钾钾滴定反响滴定反响 Hg2+ +2CNS- Hg(CNS)2 Hg2+ +2CNS- Hg(CNS)2显显色反响色反响 CNS-( CNS-(过过量量)+Fe3+ Fe(CNS)2+()+Fe3+ Fe(CNS)2+(红红色色) )2.2.黄黄连连 取本品取本品约约4g4g，剪碎，精，剪碎，精细细称定，置称定，置索氏提取器，索氏提取器，盐盐酸酸- -甲醇甲醇 1:1001:100 适量，加适量，加热热回流提取至提取液无色，提取液移至回流提取至提取液无色，提取液移至50ml50ml量量瓶中，用瓶中，用盐盐酸酸- -甲醇适量稀甲醇适量稀释释至刻度，至刻度，摇摇匀，匀，照柱色照柱色谱谱法，精法，精细细量取量取5ml5ml，上，上AL2O3AL2O3柱柱,25ml,25ml洗脱，搜集洗液置洗脱，搜集洗液置50ml50ml量瓶中，乙醇量瓶中，乙醇稀稀释释至刻度，精至刻度，精细细汲取汲取2ml2ml置置50ml50ml量瓶中，量瓶中，加加0.05mol/L0.05mol/L硫酸溶液稀硫酸溶液稀释释至刻度，至刻度，摇摇匀。匀。UV345nmUV345nm测测定定A A。 为为728,728,本品含本品含总总生生物碱按物碱按盐盐酸小檗碱酸小檗碱计计不得少于不得少于1.7%1.7%。黄连黄连 方中臣药之首方中臣药之首 用量最大用量最大有效成分清楚有效成分清楚 黄连有效成分为小檗碱，尚含其它少量黄连有效成分为小檗碱，尚含其它少量生物碱，如黄连碱、甲基黄连碱、药根碱、生物碱，如黄连碱、甲基黄连碱、药根碱、巴马亭等，均为原小檗碱型生物碱。巴马亭等，均为原小檗碱型生物碱。 硫酸溶液硫酸溶液 在酸性条件下，在酸性条件下，N原子呈共原子呈共轭轭体系的季体系的季铵铵形状，在形状，在345nm处处有最大吸收。其它五味有最大吸收。其它五味药药的空白提取液在的空白提取液在该该波波优优点略有吸收，点略有吸收，约约相当于相当于0.3%小檗碱，因此小檗碱，因此测测定定结结果偏高。果偏高。 本品本品为为蜜丸制蜜丸制剂剂，其黄，其黄连连生物碱溶生物碱溶出速率出速率较药较药材相材相对缓对缓慢，回流至提慢，回流至提取液无色后取液无色后应应放置一段放置一段时间时间。