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培养基的类型培养基的类型 小组成员:欧阳翼 苗蓬勃 张艳芳谢欢 培养基英文名为Medium,它是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。 (一)按对培养基(一)按对培养基成分成分的了解分类的了解分类 天然培养基(complex medium)是一类利用动、植物或微生物体包括用其提取物制成的培养基,这是一类营养成分既复杂又丰富、难以说出其确切化学组成的培养基。此类培养基比较经济,除实验室经常使用外,更适宜于在生产上用来大规模地培养微生物和生产微生物产品。 常用的天然有机营养物质包括牛肉浸膏、蛋白胨、酵母浸膏、豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、稻草浸汁、羽毛浸汁、胡萝卜汁、椰子汁等,嗜粪微生(coprophilous microorganisms)可以利用粪水作为营养物质。天然培养基成本较低,除在实验室经常使用外,也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。 合成(组合)培养基(synthetic medium)是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。该类培养基的组成成分精确、清楚,重复性强,但微生物生长较慢,且价格昂贵,故一般适于在实验室范围内他有关研生物营养需要、代谢、分类鉴定、生物测定以及菌种选育、遗传分析等方面的研究工作。如高氏培养基、察氏培养基等.半组合培养基(semi-defined medium)指一类主要由化学试剂配制,同时还添加某些天然成分的培养基。以更有效地满足微生物对营养物的需要.如马铃薯蔗糖培养基(二)按培养基(二)按培养基外观的物理状态外观的物理状态来分类来分类 液体培养基(liquid medium)是一类呈液体状态的培养基,在实验室和生产实践中用途广泛,尤其适用于大规模地培养微生物。液体培养基不含任何凝固剂,菌体与培养基充分接触,操作方便。可据培养后的浊度判断微生物的生长程度. 固体培养基(solid medium)天然固体营养基质制成的培养基,或液体培养基中加入一定量凝固剂(琼脂2)而呈固体状态的培养基。为微生物的生长提供营养表面。常用于微生物的分离、纯化、计数等方面的研究。固体培养基根据固态的性质可分为以下四种:a 固化培养基 b 非可逆性固化培养基 c 天然固态培养基 d 滤膜 半固体培养基(semi-solid medium)指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态培养基。例如“稀琼脂”。此类培养基常用来观察细菌运动的特征,以进行菌种鉴定和噬菌体效价滴定等方面的实验工作。 脱水培养基(dehydrated culture media)只含有除水以外的一切成分的培养基,使用时只需要加入少量水分并加以灭菌即可,是一类既有成分精确又有使用方法方便等优点的现代化培养基。 1.不被微生物分解、利用、液化;理想凝固剂应具备 2.不因消毒灭菌而被破坏; 3.在微生物的生长温度内保持固态; 4.凝固点的温度对微生物无害; 5.透明度好,粘着力强(三)按培养基(三)按培养基对微生物的功能对微生物的功能来分类来分类选择性培养基(selective medium)是一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。利用这种培养基可用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来,广泛应用于菌种的筛选等领域。 加富性选择培养基(enriched medium):在普通培养基中加入某些特殊的营养物,如血、血清、动、植物组织液或其他营养物质(或生长因子)的一类营养丰富的培养基。用来培养营养要求苛刻的微生物,或用以富集(数量上占优势)和分离某中微生物. 抑制性选择培养基(inhibited selected media):在筛选的培养基中加入某种制菌物质,经培养后,使原有试样中对此抑制剂表现敏感的优势菌的生长大受抑制,而原先处于劣势的分离对象却趁机大量增殖,最终在数量上占了优势。用作加富的营养物主要是一些特殊的氮源或碳源。鉴别性培养基鉴别性培养基(differential medium)用于鉴别不同类型微生物的培养基,在普通用于鉴别不同类型微生物的培养基,在普通培养基中加入能与某种代谢产物发生反应的指示剂或化学药品,从而产生某种明显的特征培养基中加入能与某种代谢产物发生反应的指示剂或化学药品,从而产生某种明显的特征性变化,以区别不同的微生物。最常见的鉴别性培养基是性变化,以区别不同的微生物。最常见的鉴别性培养基是伊红美蓝乳糖培养基伊红美蓝乳糖培养基即即EMB(Eosin Methylene Blue). G+菌:受抑制菌:受抑制 产酸能力强,菌落在透射光下呈紫色,产酸能力强,菌落在透射光下呈紫色, 反射光下呈绿色金属闪光反射光下呈绿色金属闪光(大肠杆菌)(大肠杆菌)试样试样 能发酵乳糖,产酸能发酵乳糖,产酸 (肠杆菌属)(肠杆菌属) (沙雷氏菌属)(沙雷氏菌属) 产算力弱,菌落棕色产算力弱,菌落棕色 (克雷伯氏属)(克雷伯氏属) (哈夫尼菌属)(哈夫尼菌属) G-菌菌 (变型菌属)(变型菌属) 不发酵乳糖,不产酸,菌落无色透明不发酵乳糖,不产酸,菌落无色透明 (沙门氏菌属)(沙门氏菌属) (志贺氏菌属)(志贺氏菌属) EMB在鉴别各种肠道杆菌中的作用在鉴别各种肠道杆菌中的作用一些鉴别培养基一些鉴别培养基培养基名培养基名称称 加入化学加入化学物质物质 微生物微生物 代代谢产物谢产物 培养基特征培养基特征性变化性变化 主要用途主要用途 酪素培养基明胶培养基油脂培养基淀粉培养基酪素明胶食用油、土温中性红指示剂胞外蛋白酶胞外蛋白酶胞外脂肪酶胞外淀粉酶蛋白水解圈明胶液化由淡红色变成深红色淀粉水解圈鉴别产蛋白酶菌株鉴别产蛋白酶菌株鉴别产脂肪酶菌株鉴别产淀粉酶菌株(四)根据所培养的(四)根据所培养的微生物的类群微生物的类群来分来分 (1)细菌培养基细菌培养基 (2)放线菌培养基放线菌培养基 (3)霉菌培养基霉菌培养基 它能使菌体迅速生长,产生较多优质孢子,且不易引起菌种发生变异。它能使菌体迅速生长,产生较多优质孢子,且不易引起菌种发生变异。1 1)孢子培养基)孢子培养基供菌种繁殖孢子的培养基,常用固体培养基。供菌种繁殖孢子的培养基,常用固体培养基。配制时需注意配制时需注意:A A)营养不要太丰富(特别是有机氮源),否则不易产孢子。)营养不要太丰富(特别是有机氮源),否则不易产孢子。如灰色链霉菌在葡萄糖如灰色链霉菌在葡萄糖-硝酸盐硝酸盐-其他盐的培养基上都能很好地生长和产其他盐的培养基上都能很好地生长和产生孢子,但若加入生孢子,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,就只长菌体而不产孢子酵母膏或酪蛋白后,就只长菌体而不产孢子B B)所用无机盐的浓度要适量,否则会影响孢子量和孢子颜色。)所用无机盐的浓度要适量,否则会影响孢子量和孢子颜色。C C)培养基的)培养基的pHpH要适中,所用原材料的质量要稳定。要适中,所用原材料的质量要稳定。常用孢子培养基:常用孢子培养基: 麸皮培养基麸皮培养基 小米培养基小米培养基 大米培养基大米培养基 玉米碎屑培养基玉米碎屑培养基 用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制的琼脂斜面用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制的琼脂斜面培养基培养基大米和小米常用作霉菌孢子培养基,因为它们含氮量少、大米和小米常用作霉菌孢子培养基,因为它们含氮量少、疏松、表面积大,是良好的孢子培养基。疏松、表面积大,是良好的孢子培养基。 营养要求比较丰富和完全,氮源和维生素的含量也要高营养要求比较丰富和完全,氮源和维生素的含量也要高些,但总浓度以略稀薄为好,这样可达较高的溶解氧,供大些,但总浓度以略稀薄为好,这样可达较高的溶解氧,供大量菌体生长和繁殖。量菌体生长和繁殖。 种子培养基的成分要考虑在代谢过程中能维持稳定的种子培养基的成分要考虑在代谢过程中能维持稳定的pHpH,其成分还要根据不同菌种的主要特征而定。其成分还要根据不同菌种的主要特征而定。 一般种子培养基都用营养丰富而完全的天然有机氮源,因一般种子培养基都用营养丰富而完全的天然有机氮源,因为有些氨基酸能刺激孢子发芽。但无机氮源容易利用,有利菌为有些氨基酸能刺激孢子发芽。但无机氮源容易利用,有利菌体的迅速生长,所以在种子培养基中常包括有机氮源和无机氮体的迅速生长,所以在种子培养基中常包括有机氮源和无机氮源。源。 最后一级的种子培养基的成分最好能较接近于发酵培养基,最后一级的种子培养基的成分最好能较接近于发酵培养基,这样可使种子进入发酵培养基后能迅速适应,快速生长。这样可使种子进入发酵培养基后能迅速适应,快速生长。2 2)种子培养基)种子培养基供孢子发芽、生长和菌体繁殖的培养基。供孢子发芽、生长和菌体繁殖的培养基。3 3)发酵培养基发酵培养基 既要使种子接入后能迅速生长,达到一定的既要使种子接入后能迅速生长,达到一定的菌体浓度,又要使长好的菌体能迅速合成所需产菌体浓度,又要使长好的菌体能迅速合成所需产物。因此,发酵培养基的组成除有菌体生长所必物。因此,发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外,还要有合成产物所需的特需的元素和化合物外,还要有合成产物所需的特定元素、前体和促进剂等。定元素、前体和促进剂等。供菌体生长、繁殖和合成产物用的供菌体生长、繁殖和合成产物用的培养基。培养基。 但若因生长和合成产物所需的总的碳源、氮但若因生长和合成产物所需的总的碳源、氮源和其他营养物质总的浓度太高,或生长和合成源和其他营养物质总的浓度太高,或生长和合成产物两个阶段各需的最佳条件有求不同时,则可产物两个阶段各需的最佳条件有求不同时,则可考虑培养基用分批补料工艺来加以满足。考虑培养基用分批补料工艺来加以满足。THANK YOU FOR YOUR ATTENTION !
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