ABO血型鉴定血型鉴定实验原理实验原理n n人类ABO血型抗原主要有A和B两种，根据红细胞外表这两种抗原的有无可把血型分为四种。据此，将抗A和抗B抗体分别与待测红细胞混合，抗A或和抗B抗体与红细胞外表上的相应抗原结合而引起红细胞凝集，据其凝集情况便可断定出受试者的血型。【实验资实验资料】料】 1 1规规范血清范血清 A A型型规规范血清含抗范血清含抗B B凝集素凝集素使使B B型、型、ABAB型型红细红细胞的凝集原凝集胞的凝集原凝集B B型型规规范血清含抗范血清含抗A A凝集素凝集素使使A A型、型、ABAB型型红细红细胞的凝集原凝集胞的凝集原凝集2 2一次性采血一次性采血针针1 1枚、干枚、干净净玻片玻片1 1块块、长长滴管滴管1 1支、支、7575酒精、酒精、灭灭菌棉菌棉签签。3.用规范的血清鉴定ABO血型时，根据凝集4. 反响的结果可推测血型。“+表示有凝集反响，“表示无凝集反响被测者被测者标准血清标准血清甲甲乙乙丙丙丁丁AA型型+ + BB型型 + + + 推测的血清推测的血清 B型 AB型O型A型二、实验过程1.配制红细胞悬液. 消毒 受检者的指尖. 捏紧指尖，用消毒过的 采血针 迅速 刺破皮肤 . 待血流出后将1滴血，滴入盛有 1毫升浓度为 0.9 的 生理盐水 的 小瓶 中，摇匀，即成为红细胞悬液2.玻片法鉴定血型 取1载玻片 用小滴管吸A型规范血清，滴1滴在 左侧 ，用 另一小滴管吸 B型 规范血清，滴1滴在右侧。 用小滴管取 红细胞悬液 ，各滴1滴在左侧 和右侧的血清上 用一根 消毒牙签的两端 分别用来混合A型和B型规范血清和红细胞悬液 静置数分钟后， 察看凝集景象。3.根据察看到的 凝集 景象推测受检者的血型AB抗A抗B抗抗A A分型分型试剂侧试剂侧抗抗B B分型分型试剂侧试剂侧血型血型+ +A A+ +B B+ + +ABABO O“”表示红细胞凝集，表示红细胞凝集，“”表示红细胞未凝集表示红细胞未凝集【实验结果】记录受检者红细胞凝集情况，根据ABO血型鉴定表(下表)，判别受检者的血型。 ABO血型鉴定表本卷须知本卷须知n n 1红细胞悬液和规范血清均应新颖、合格且无污染，防止出现假凝集景象。n n 2留意能否有溶血，切勿把溶血当作不凝集。n n 3在操作中，应严厉分别各种检测用品，留意汲取规范血清的滴管和搅拌用的竹签等用品绝不能混淆，即防止在进展操作时相互污染。n n 4判别红细胞凝集，要有足够的时间。人的心音听诊 目的要求目的要求n n学习心音听诊的方法，识别第一心音与第二心音。 根本原理根本原理n n心音是由心脏瓣膜封锁和心肌收缩引起的振动所产生的声音。用听诊器在胸壁前听诊，在每一心动周期内可以听到两个心音。 实验器材实验器材n n听诊器听诊器 方法与步骤方法与步骤n n1受受试者安静端坐，胸部裸露。者安静端坐，胸部裸露。n n2检查者者带好听好听诊器，留意听器，留意听诊器的耳具器的耳具应与外耳道开口方向一致向前。以右与外耳道开口方向一致向前。以右手的食指、拇指和中指手的食指、拇指和中指轻持听持听诊器胸端器胸端紧贴于受于受试者胸部皮肤上，依次由左房室瓣者胸部皮肤上，依次由左房室瓣听听诊区区自自动脉瓣听脉瓣听诊区区肺肺动脉瓣听脉瓣听诊区区右房室瓣听右房室瓣听诊区，仔区，仔细听取心音，留听取心音，留意区分两心音。意区分两心音。心心脏瓣膜听瓣膜听诊区区n为心心脏各瓣膜各瓣膜开开闭时产生的生的声音声音n与各瓣膜的解与各瓣膜的解剖位置并不完剖位置并不完全一致全一致Area of auscultation 听听诊内容内容n心率heart raten心律heart rhythmn心音heart sound 本卷须知本卷须知n n1实验室内必需坚持安静，以利听诊。实验室内必需坚持安静，以利听诊。n n2听诊器耳具应与外耳道方向一致。听诊器耳具应与外耳道方向一致。橡皮管不得交叉、扭结，管切勿与它橡皮管不得交叉、扭结，管切勿与它物摩擦，以免发生摩擦音影响听诊。物摩擦，以免发生摩擦音影响听诊。n n3如呼吸音影响听诊，可令受试者暂如呼吸音影响听诊，可令受试者暂停呼吸片刻。停呼吸片刻。人体动脉血压的测定及其影响要素 目的要求目的要求n n1学习并掌握人体间接测压法的原理和方法。n n2察看在正常情况下，某些要素对动脉血压的影响。 根本原理根本原理n n测定人体动脉血压最常用的方法是间接测测定人体动脉血压最常用的方法是间接测压法，是运用血压计在动脉外加压，根据血管压法，是运用血压计在动脉外加压，根据血管音的变化来丈量动脉血压的。音的变化来丈量动脉血压的。实验原理-间接测定法间接的方法：以外加的压强间接反映 在某种情况下：外压分别等于收缩压、舒张压 ？ 何种情况我们必需寻求我们必需寻求建立某种关系建立某种关系实验原理-间接测定法人们发现：在某些情况下会出现“血管音当外压大于收缩压时：血管被压闭，无血流，无血管音当外压大于收缩压时：血管被压闭，无血流，无血管音当外压小于舒张压时：学流通畅，无血管音当外压小于舒张压时：学流通畅，无血管音当外压小于收缩压而大于舒张压时：血管时断时续，出现血管音当外压小于收缩压而大于舒张压时：血管时断时续，出现血管音 实验器材n n血压计、听诊器。 方法与步骤方法与步骤 1受试者脱左臂衣袖，静坐受试者脱左臂衣袖，静坐5min。2松开打气球上的螺丝，将压脉带内的松开打气球上的螺丝，将压脉带内的空气完全放出，再将螺丝扭紧。空气完全放出，再将螺丝扭紧。3将压脉带裹于左上臂，其下缘应在肘将压脉带裹于左上臂，其下缘应在肘关节上约关节上约2cm处，松紧应适宜。受试者手处，松紧应适宜。受试者手掌向上平放于台上，压脉带应与心脏同一掌向上平放于台上，压脉带应与心脏同一程度程度 n n4 4在肘在肘在肘在肘窝窝部找到部找到部找到部找到动动脉搏脉搏脉搏脉搏动处动处，左手持听，左手持听，左手持听，左手持听诊诊器的胸器的胸器的胸器的胸具置于其上。留意：不可用力下具置于其上。留意：不可用力下具置于其上。留意：不可用力下具置于其上。留意：不可用力下压压。n n5 5听取血管音听取血管音听取血管音听取血管音变变化右手持打气球，向化右手持打气球，向化右手持打气球，向化右手持打气球，向压压脉脉脉脉带带打气打气打气打气加加加加压压，此，此，此，此时时留意留意留意留意倾倾听声音听声音听声音听声音变变化，在声音消逝后再化，在声音消逝后再化，在声音消逝后再化，在声音消逝后再加加加加压压20mmHg20mmHg，然后扭开打气球之螺，然后扭开打气球之螺，然后扭开打气球之螺，然后扭开打气球之螺丝丝，缓缓慢放慢放慢放慢放气切勿气切勿气切勿气切勿过过快，此快，此快，此快，此时时可听到血管音的一系列可听到血管音的一系列可听到血管音的一系列可听到血管音的一系列变变化，声音从无到有，由低而高，而后忽然化，声音从无到有，由低而高，而后忽然化，声音从无到有，由低而高，而后忽然化，声音从无到有，由低而高，而后忽然变变低，低，低，低，最后完全消逝。然后扭最后完全消逝。然后扭最后完全消逝。然后扭最后完全消逝。然后扭紧紧打气球螺打气球螺打气球螺打气球螺丝继续丝继续打气加打气加打气加打气加压压，反复听取声音，反复听取声音，反复听取声音，反复听取声音变变化化化化2323次。次。次。次。n n6丈量动脉血压反复上一操作，同时留意检压计之水银柱和声音变化。在徐徐放气减压时，第一次听到血管音的水银柱高度即代表收缩压。在血管音忽然由强变弱时的水银柱高度即代表舒张压，记下测定数值后，将压脉带内的空气放尽，使压力降至零。 本卷须知本卷须知n n1 1测压时室内须坚持安静，以利听诊。测压时室内须坚持安静，以利听诊。n n2 2戴听诊器时，务使耳具的弯曲方向与戴听诊器时，务使耳具的弯曲方向与n n 外耳道一致，即接耳的弯曲端向前外耳道一致，即接耳的弯曲端向前n n3 3压脉带裹绕要松紧适宜，并与心脏同压脉带裹绕要松紧适宜，并与心脏同n n 一程度。一程度。n n4 4反复测压时，须将压脉带内空气放反复测压时，须将压脉带内空气放n n 尽，使压力降至零位，而后再加压丈量。尽，使压力降至零位，而后再加压丈量。n n 5. 5. 切勿将听诊器放入袖带内。切勿将听诊器放入袖带内。n n 6. 6. 测测2323次，以较低的值为准次，以较低的值为准n n 7. 7. 血压计的开关血压计的开关1.学习离体蛙心灌流方法学习离体蛙心灌流方法;2.了解离体器官的研讨方法；了解离体器官的研讨方法；3.察看察看K+、Na+、Ca2+等离子、肾上腺素、等离子、肾上腺素、乙酰胆碱、酸硷度诸要素对心脏活动的影响，乙酰胆碱、酸硷度诸要素对心脏活动的影响，了解心脏正常活动需求一适当的理化环境了解心脏正常活动需求一适当的理化环境;蛙心灌流蛙心灌流【目的】【目的】 心心脏的的正正常常节律律性性活活动必必需需在在适适宜宜的的理理化化环境境里里才才干干维持持，一一旦旦适适宜宜的的理理化化环境境(内内环境境)被被干干扰或或破破坏坏，心心脏活活动就会遭到影响。就会遭到影响。 心心脏受受自自主主性性神神经的的双双重重支支配配，交交感感神神经兴奋时，其其末末梢梢释放放去去甲甲肾上上腺腺素素，作作用用于于心心脏1受受体体使使心心肌肌收收缩力力加加强，传导增增快快，心心率率加加快快；而而迷迷走走神神经兴奋时，其其末末梢梢释放放乙乙酰胆胆碱碱，作作用用于于心心脏M受受体体使使心心肌肌收收缩力减弱，心率减慢。力减弱，心率减慢。 蛙蛙心心离离体体后后，用用理理化化性性质近近似似于于血血浆的的任任氏氏液液灌灌流流，在在一一定定时间内内，可可坚持持节律律性性收收缩和和舒舒张。改改动任任氏氏液液的的组成成成成分分，心心脏跳跳动的的节律律、频率率和和幅幅度度都都可随之可随之发生改生改动。【原理】【原理】 【实验步骤及察看工程】【实验步骤及察看工程】 1离体心脏制备离体心脏制备1 1取取一一青青蛙蛙，破破坏坏脑脑和脊髓，暴露心脏。和脊髓，暴露心脏。2 2用用小小镊镊子子夹夹起起心心包包膜膜，沿沿心心轴轴剪剪开开心心包包膜膜，仔仔细细识识别别心心房房、心心室室、动动脉脉圆圆锥锥、自自动动脉脉、静静脉脉窦窦、前后腔静脉等解剖构造。前后腔静脉等解剖构造。录象象3 3在左自动脉下穿一根线，接近动脉在左自动脉下穿一根线，接近动脉分叉处结扎左自动脉，另一线置自动脉分叉处结扎左自动脉，另一线置自动脉圆锥下备用。提起左自动脉结扎线，用圆锥下备用。提起左自动脉结扎线，用眼科剪在左自动脉接近动脉圆锥处剪一眼科剪在左自动脉接近动脉圆锥处剪一小斜口，将盛有少量任氏液的蛙心插管小斜口，将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入自动脉，插至动脉圆锥时略由此口插入自动脉，插至动脉圆锥时略向后退，在心室收缩时，向心室后壁方向后退，在心室收缩时，向心室后壁方向下插，经自动脉瓣插入心室腔内，一向下插，经自动脉瓣插入心室腔内，一次不成可反复多次稍退后插，但不可过次不成可反复多次稍退后插，但不可过深顶室壁以免堵住管口。插管假设胜利深顶室壁以免堵住管口。插管假设胜利进入心室，管内液面会随着心室跳动而进入心室，管内液面会随着心室跳动而上下挪动或看到血如喷泉涌入插管。用上下挪动或看到血如喷泉涌入插管。用动脉圆锥下的备用线结扎插管，并将结动脉圆锥下的备用线结扎插管，并将结扎线固定于插管侧面的小突起上防止滑扎线固定于插管侧面的小突起上防止滑脱。脱。 4提起插管，在结扎线远端分别剪断左、右自动脉，悄然提起插管，在结扎线远端分别剪断左、右自动脉，悄然提提起起插插管管及及心心脏脏，用用线线将将左左、右右肺肺前前后后腔腔静静脉脉结结扎扎，留留意意：在在结结扎扎前前用用小小弯弯镊镊沿沿静静脉脉窦窦往往下下压压，结结扎扎线线在在镊镊子子下下方方结结扎扎，以以维维护护静静脉脉窦窦防防止止误误扎扎，否否那那么么出出现现窦窦房房阻阻滞滞；最最后后在在结结扎扎线线下下方方剪剪断断上上述述静静脉脉而而将将心心脏脏离离体体。用用滴滴管管吸吸净净插插管管内内血血液液，参参与与新新颖颖任任氏氏液液，反反复复冲冲洗洗数数次次，直直至至液液体体廓廓清清。坚坚持持灌灌流流液液面面高高度恒定度恒定12厘米，即可进展实验。厘米，即可进展实验。5用试管夹将蛙心插管固定于铁支架上，将连于蛙心夹的用试管夹将蛙心插管固定于铁支架上，将连于蛙心夹的线线经经滑滑轮轮转转挂挂于于张张力力换换能能器器，留留意意防防止止液液体体滴滴到到换换能能器器上上漏漏电电锈蚀，适当调整前负荷即可记录。锈蚀，适当调整前负荷即可记录。2仪器器线路路衔接接 将将张力力换能能器器插插头衔接接至至BL系系统第第1通通道道或或MS系系统第第2道的插座道的插座3. 软件操作件操作开机并启开机并启动相关相关实验系系统。1BL系系统“实验工程工程“循循环实验 “蛙心灌流。蛙心灌流。G、T、F可适当可适当调理，理，让波形幅度大小适宜。波形幅度大小适宜。扫描速度可根据波形描速度可根据波形进展展调理，理，让波形分开易波形分开易辩。 4察看工程察看工程1描记正常心跳曲线曲线疏密表示心跳频率；曲线幅度表描记正常心跳曲线曲线疏密表示心跳频率；曲线幅度表示心脏收缩力的强弱；曲线的规律性表示心跳的节律性。示心脏收缩力的强弱；曲线的规律性表示心跳的节律性。2吸出插管内全部灌流液，换入等量的吸出插管内全部灌流液，换入等量的0.65%NaC1，察看心，察看心跳曲线。当效应明显时应及时吸出灌流液，并用新颖任氏液反复跳曲线。当效应明显时应及时吸出灌流液，并用新颖任氏液反复换洗，直至恢复适宜的心跳曲线为止。调理最后一次液面高度同换洗，直至恢复适宜的心跳曲线为止。调理最后一次液面高度同前前12厘米。厘米。3滴入滴入2CaC12 12滴，察看及换液方法同上。滴，察看及换液方法同上。4滴入滴入lKCl 12滴，察看及换液方法同上。滴，察看及换液方法同上。5滴入滴入3乳酸乳酸12滴，效应出现后立刻滴入滴，效应出现后立刻滴入2.5NaHCO3 数滴，效应明显时及时吸出灌流液，换液方法同上。数滴，效应明显时及时吸出灌流液，换液方法同上。 6滴入滴入1 10 000肾上腺素上腺素12滴，察看及滴，察看及换液方法同上。液方法同上。7滴滴入入1 100 000乙乙酰胆胆碱碱滴滴，效效应明明显时应立立刻刻吸吸出出灌灌流液，并用新流液，并用新颖任氏液任氏液换洗，方法同上。洗，方法同上。8滴滴入入0.1%阿阿托托品品1滴滴，效效应出出现后后立立刻刻滴滴入入1 100 000乙乙酰胆胆碱碱1滴滴，察察看看结果果并并与与8比比较，然然后后用用任任氏氏液液换洗洗，方方法同上。法同上。【本卷须知】【本卷须知】1换洗时可暂停记录，且最后一次加液的液面应坚持同一高度换洗时可暂停记录，且最后一次加液的液面应坚持同一高度.2滴入试剂时，先加滴入试剂时，先加12滴，察看效应。如不明显可再补加。滴，察看效应。如不明显可再补加。3每项实验均应有前后对照。每项实验均应有前后对照。4每次加药时，应作标志。每次加药时，应作标志。5随时滴加任氏液于心脏外表使之坚持潮湿。随时滴加任氏液于心脏外表使之坚持潮湿。6吸吸任任氏氏液液的的吸吸管管和和吸吸蛙蛙心心插插管管内内液液的的吸吸管管要要分分开开专专管管公公用用，以免影响实验结果。，以免影响实验结果。 7.有有些些步步骤骤，如如滴滴加加KCl和和Ach时时，在在刚刚出出现现抑抑制制效效应应时时立立刻刻冲冲洗，否那么作用过久抑制过深能够难以抢救。洗，否那么作用过久抑制过深能够难以抢救。