实验生文科学实验生文科学生理实验部分生理实验部分朱文博朱文博: zhuwenbomail.sysu.edu: zhuwenbomail.sysu.edu实验安排实验一：熟习运用仪器实验一：熟习运用仪器BL-420BL-420记录系统记录系统 坐骨神经坐骨神经- -腓肠神经标本制腓肠神经标本制备备实验二：神经干动作电位阈强度测定实验二：神经干动作电位阈强度测定 神经干动作电位传导速度测神经干动作电位传导速度测定定实验三：蛙心起博点确实定实验三：蛙心起博点确实定 期前收缩与代偿间歇期前收缩与代偿间歇实验四：兔呼吸运动的调理实验四：兔呼吸运动的调理实验五：兔动脉血压的调理实验五：兔动脉血压的调理实验六：影响尿生成的要素实验六：影响尿生成的要素实验二实验二神经干动作电位阈强度和传导速度的测定神经干动作电位阈强度和传导速度的测定目的目的1.熟习坐骨神经熟习坐骨神经-胫腓神经标本的制胫腓神经标本的制备方法；备方法；2.熟练运用仪器熟练运用仪器BL-420记录系统记录系统 ；3.测定分别的坐骨神经干动作电位测定分别的坐骨神经干动作电位的阈强度和传导速度的阈强度和传导速度静息电位：静息电位：细胞在静息末未受刺激细胞在静息末未受刺激时存在于膜两侧的电时存在于膜两侧的电位差。位差。产活力制：产活力制：K+K+平衡学说平衡学说- K+- K+外流外流K+外流外流动作电位：动作电位：指可兴奋细胞遭到阈上刺激或阈刺激时，其膜电位在指可兴奋细胞遭到阈上刺激或阈刺激时，其膜电位在静息电位的根底上产生一个迅速、可逆的、可传导的静息电位的根底上产生一个迅速、可逆的、可传导的电位变化。电位变化。产活力制：产活力制：Na+平衡学说平衡学说- Na+内流内流根本概念根本概念阈强度：阈强度：引起组织发生兴奋的最小刺激强度。引起组织发生兴奋的最小刺激强度。产活力制：此强度以下的刺激引起的产活力制：此强度以下的刺激引起的Na+Na+内流内流被被K+K+外流抵消，当阈强度的刺激使膜电位到外流抵消，当阈强度的刺激使膜电位到达阈电位时，达阈电位时，Na+Na+通道大量开放引起通道大量开放引起Na+Na+快速快速内流而导致动作电位内流而导致动作电位2. 阈强度的测定阈强度的测定阈强度神经兴奋性的变化期：神经兴奋性的变化期：绝对不应期：又叫有效绝对不应期：又叫有效不应期，不应期， Na Na离子通离子通道全部失活道全部失活相对不应期：相对不应期：NaNa离子通离子通道尚未恢复到备用形道尚未恢复到备用形状状超凡期：膜电位接近阈超凡期：膜电位接近阈电位，低于阈强度的电位，低于阈强度的刺激可引发刺激可引发APAP低常期：膜电位较静息低常期：膜电位较静息电位远离阈电位，需电位远离阈电位，需求高于阈强度的刺激求高于阈强度的刺激才可引发才可引发APAP+-+-测测定原理定原理细细胞外膜胞外膜电电位位测测定定已已兴奋兴奋部位部位带带“负电负电，未，未兴奋兴奋部位部位带带“正正电电，引，引导导出此出此电电位差。位差。复合复合电电位。位。粗端细端+-静息静息形状形状兴奋兴奋形状形状产生双相波形缘由：由于动作电产生双相波形缘由：由于动作电位传导到神经干两记录电极放置位传导到神经干两记录电极放置点的时间先后差别，神经干一端点的时间先后差别，神经干一端遭到刺激时产生正向电流，传至遭到刺激时产生正向电流，传至另一端时前段已部分恢复或完全另一端时前段已部分恢复或完全恢复，从而产生反向电流。恢复，从而产生反向电流。步骤步骤 一、制备坐骨神经一、制备坐骨神经-胫腓神经干标本胫腓神经干标本 二、实验安装衔接二、实验安装衔接 三、实验察看与记录：三、实验察看与记录： 1.动作电位的引导动作电位的引导 2.阈强度的测定阈强度的测定 3.传导速度的测定，传导速度的测定，V=S/t(m/s) S 记录电极之间记录电极之间C1-C3的神经干的神经干长度长度 米为单位；米为单位；t记录通道记录通道1与与2的动作电位起点的的动作电位起点的时间差时间差 秒为单位。秒为单位。 一、制备坐骨神经一、制备坐骨神经- -胫腓神经干标本胫腓神经干标本1 1、分别坐骨神经，到达腓肠肌处、分别坐骨神经，到达腓肠肌处2 2、找到坐骨神经分叉及胫、腓神经、找到坐骨神经分叉及胫、腓神经3 3、顺神经走向，剪开膝关节囊、顺神经走向，剪开膝关节囊4 4、向下分别内侧的胫神经和外侧的腓神经至踝关节、向下分别内侧的胫神经和外侧的腓神经至踝关节5 5、结扎坐骨神经干的脊柱端及腓肠肌的足端、结扎坐骨神经干的脊柱端及腓肠肌的足端6 6、提起结扎线，将神经干标本放入任氏液中备用、提起结扎线，将神经干标本放入任氏液中备用 留意：留意：1 1、保证神经足够长度、保证神经足够长度 2 2、留意不要损伤神经，防止金属器械碰触神经、留意不要损伤神经，防止金属器械碰触神经 3 3、坚持神经潮湿、坚持神经潮湿 4 4、尽量分别干净、尽量分别干净二、实验安装衔接二、实验安装衔接刺激电极刺激电极C1C2+-地地-+-+C3C4神经干粗端神经干细端CH1 CH2计算机计算机网络打印机网络打印机生物信号采集系统生物信号采集系统神经屏蔽盒神经屏蔽盒V=S/t(m/s) S C1-C3的神的神经经干干长长度度 米米 ；tCH1与与2的的动动作作电电位位起点的起点的时间时间差差 秒秒为单为单位位 本卷须知本卷须知1、放置神经干：方向、程度、悬空、放置神经干：方向、程度、悬空2、盖上盖子！坚持潮湿！在神经干上滴上任氏液，、盖上盖子！坚持潮湿！在神经干上滴上任氏液， 坚持槽坚持槽内留有一定量的任氏液内留有一定量的任氏液3、衔接电极本卷须知：、衔接电极本卷须知： 电极插头留意凹槽与插孔的对接，三角形标志对接，直电极插头留意凹槽与插孔的对接，三角形标志对接，直接插入或拔出，切忌旋转插头！接插入或拔出，切忌旋转插头！ 电极插头留意与插孔正确正负极对接，插入后留意悄然电极插头留意与插孔正确正负极对接，插入后留意悄然旋转固定插头！旋转固定插头！留意滤波。留意滤波。 1. 1.动作电位的引导动作电位的引导 2. 2.阈强度的测定阈强度的测定设置：程控方向：增大；增量：设置：程控方向：增大；增量：0.005mV0.005mV；程控：是；程控：是； 3. 3.传导速度的测定，传导速度的测定，V=S/t(m/s)V=S/t(m/s) S S 记录电极之间记录电极之间C1-C3C1-C3的神经干长度米为单的神经干长度米为单位；位；tt记录通道记录通道1 1与与2 2的动作电位起点的时间差秒为的动作电位起点的时间差秒为单位单位数据处置：右击：比较显示；数据处置：区间丈量读数据处置：右击：比较显示；数据处置：区间丈量读右上角的时间间隔右上角的时间间隔 三、神经干动作电位诱导及记录三、神经干动作电位诱导及记录刺激刺激伪迹伪迹刺激伪迹是刺激电流经过神经干分散至两引导电极而构成的电位差信号。1、会随着刺激强度的变化而不断变化2、互换刺激电极的正负极,刺激伪迹图形会颠倒3、处于刺激信号相对应位置4. 在棉线上沾湿任氏液，依然可以出现刺激伪迹。红红线线黑黑线线白白线线红红线线白白线线双相波为什么是不等幅的？双相波为什么是不等幅的？动作电位两相幅度不相等主要缘由：动作电位两相幅度不相等主要缘由：1.1.兴奋传导至细端时粗端尚未完全复极，因此相兴奋传导至细端时粗端尚未完全复极，因此相对电位差较兴奋传至粗端时低；对电位差较兴奋传至粗端时低；2.2.神经纤维数目不等。神经纤维数目不等。Thank you！