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(三)灭菌法的几个重要参数指标(三)灭菌法的几个重要参数指标1.D值值耐热参数耐热参数2.Z值值灭菌温度系数灭菌温度系数3.FT值值T温度下的灭菌时间温度下的灭菌时间4.F0值值标准灭菌时间标准灭菌时间5.5.灭菌灭菌率率L(Lethalrate)()(致死致死率)率)11.D值值耐热参数耐热参数1)定定义义:将将一一含含微微生生物物的的样样品品在在一一定定的的温温度度下下杀杀菌菌,当当样样品品中中的的微微生生物物消消灭灭90%时时,所所需需的的时时间间,又又称称九九成成杀杀灭灭时时间间。(Decimalreductiontime)即即细细菌菌数数减减少少一一个个对对数数单单位位所所需需的的时时间。间。描述微生物对热的耐受性。描述微生物对热的耐受性。2D值定义图值定义图:据据D值定义,若值定义,若lgN1- lgN2=1则则D=t2-t1= =-即即D为该直线斜率的负倒数。为该直线斜率的负倒数。32)测定)测定D值值用用已已知知微微生生物物数数的的悬悬浮浮液液接接种种至至样样品品溶溶液。液。取取若若干干个个样样品品,至至少少用用三三种种不不同同的的时时间间曝热(在一定的温度下)。曝热(在一定的温度下)。以以微微生生物物存存活活数数的的对对数数值值为为纵纵坐坐标标,以以曝曝热热时时间间为为横横坐坐标标作作图图,得得一一直直线线,D值值即为该直线的斜率负倒数。即为该直线的斜率负倒数。43)影响因素)影响因素不不同同微微生生物物具具有有不不同同D值值。D值值越越小小,证证明明微微生生物物抗抗热性越弱。曝热时间较短即可杀灭九成。热性越弱。曝热时间较短即可杀灭九成。同一微生物,曝热温度同一微生物,曝热温度T越高,越高,D值越低(图值越低(图3)T,lgN下降得快,下降得快,D小小;T,lgN下降得慢,下降得慢,D大大D1D3D2121lgN125115Ot15环境条件(介质)(表环境条件(介质)(表1)表表1介质对介质对D值的影响值的影响例例:某某样样品品在在121下下曝曝热热3分分钟钟,微微生生物物数由数由2105降低至降低至8103个。求个。求D值。值。解解D=2.146min62.Z值值灭菌温度系数灭菌温度系数 1)定义:)定义: 使使D值值减减少少90%所所需需增增高高的的温温度度。(即即D下降一个下降一个lg) 描述微生物对温度变化的敏感性。描述微生物对温度变化的敏感性。2)测定)测定Z值值至至少少用用3个个不不同同温温度度,分分别别测测出出某某一一个个微微生物在此三个温度下的生物在此三个温度下的D值。值。以以lgD为为纵纵坐坐标标,温温度度T为为横横坐坐标标,画画出出一直线。一直线。Z值即为此直线斜率负倒数。值即为此直线斜率负倒数。73)定义图(图)定义图(图4)Z=- =(若若lgD=lgD1-lgD2=1,则则Z=T2-T1)lgD2-lgD1=D2/D1=10(T2-T1)/Z84)影响因素)影响因素 不同微生物,有不同不同微生物,有不同Z值。值。 同一微生物在不同溶液中,同一微生物在不同溶液中,Z值不同(表值不同(表2)Z值越小,斜率越大,值越小,斜率越大,TD值变化大值变化大Z值越大,斜率越小,值越大,斜率越小,TD值变化小值变化小 即即Z值越大,此微生物对温度变化的敏感性越值越大,此微生物对温度变化的敏感性越弱,企图通过升高温度来加速杀灭微生物的效弱,企图通过升高温度来加速杀灭微生物的效果就不明显。果就不明显。 表表2 2 嗜热脂肪杆菌在不同溶液中的嗜热脂肪杆菌在不同溶液中的Z Z值值 9 例:设例:设Z=10,T1=110,T2=121。 试分析试分析T1、T2下的灭菌效果。下的灭菌效果。(10-1.1=0.079)10例:设例:设Z=10,T1=110,T2=121。试分析。试分析T1、T2下的灭菌效果。(下的灭菌效果。(10-1.1=0.079) 解解:由由Z=,可得可得:10=-1.1=0.079T1=110下下,灭菌灭菌1min与与T2=121下下,灭菌灭菌0.079min等效,等效,或或 =12.6=12.6T T2 2=121=121下下, , 灭灭菌菌1min1min与与T T1 1=110=110下下, ,灭灭菌菌12.6min12.6min等效等效113.FT值值T温度下的灭菌时间温度下的灭菌时间 1)定义:在一定的灭菌温度与已知)定义:在一定的灭菌温度与已知Z值条值条 件下的等效灭菌时间。件下的等效灭菌时间。FT=DTlgNDT:T温度时的温度时的D值。值。 lgN:T温度下灭菌程序使微生物下降温度下灭菌程序使微生物下降 的对数单位。(图的对数单位。(图5)12若若灭灭菌菌前前微微生生物物总总数数N0,则则在在T温温度度下下杀杀灭至灭至100所需时间为:所需时间为:FT=DTlgN0FT可理解为:灭菌程序赋予被灭菌品在可理解为:灭菌程序赋予被灭菌品在T温温度下的灭菌时间。度下的灭菌时间。134.F0值值标准灭菌时间标准灭菌时间在在121及及Z=10条条件件下下的的等等效效灭灭菌菌时时间:间:F0=D121lgN145灭菌率灭菌率L(Lethalrate)(致死率)(致死率)1)定定义义:指指在在温温度度T下下,灭灭菌菌1min所所获获得得的标准(的标准(T=121)灭菌时间)灭菌时间L=D121/DT2)物理意义)物理意义 温温 度度 为为 121时时 杀杀 灭灭 90%微微 生生 物物 需需D121=A min,温温度度T时时,杀杀灭灭90%的的微微生生物物需需DT=B min。即即121曝曝热热A min与与T曝热曝热B min的灭菌效力相当。的灭菌效力相当。 故故L=D121/DT表表示示T下下曝曝热热1min相相当当于于在在121 下曝热下曝热A/B min。 15Z=,D2/D1=10(T1-T2)/Z令令T2=121,T1=T,则则L=D121/DT=10T-121/ZFT=DTlgN,F0=D121lgNL=D121/DT=F0/FTFT=F0/L(表(表3)由由式式L=10T-121/Z,可可知知当当Z一一定定时时,TL,当,当T100时,时,L0即即当温度低于当温度低于100时,时,L可忽略不计。可忽略不计。16表表3Z=10时,不同温度下的灭菌率时,不同温度下的灭菌率和和T灭菌时间灭菌时间17例:例:T=120时,时,Z=L=0.794186F0的计算的计算 1)理理想想状状态态,灭灭菌菌过过程程中中升升温温、降降温温瞬瞬间间完完成成,灭菌温度恒定不变。灭菌温度恒定不变。则可用公式计算:则可用公式计算: FT=DTlgN0, F0=D121lgN0N0:灭菌前微生物数。:灭菌前微生物数。2)实实际际上上,一一个个产产品品灭灭菌菌过过程程总总有有三三个个阶阶段段:升升温温、保保温温、冷冷却却。即即灭灭菌菌过过程程不不是是始始终终在在恒恒定温度下进行。(下图)定温度下进行。(下图)19F0=即即把把每每一一时时间间点点的的灭灭菌菌率率L叠叠加加得得到到F0值,值,或或F0=t:测定的间隔时间通常取:测定的间隔时间通常取1min。t1:升温达到:升温达到100的时间点。的时间点。t2:冷却达到:冷却达到100100的时间点。的时间点。20
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