血型鉴定和交叉配血中血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理常见问题分析和处理血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 1 1ABOABOABOABO血型正反定不一致的原因分析及处理血型正反定不一致的原因分析及处理血型正反定不一致的原因分析及处理血型正反定不一致的原因分析及处理 2 2交叉配血中常见问题分析及处理交叉配血中常见问题分析及处理交叉配血中常见问题分析及处理交叉配血中常见问题分析及处理 3 3意外抗体筛选的意义和检测方法意外抗体筛选的意义和检测方法意外抗体筛选的意义和检测方法意外抗体筛选的意义和检测方法 Click to add Title4 4弱弱弱弱D D D D检测的意义和检测方法检测的意义和检测方法检测的意义和检测方法检测的意义和检测方法 Click to add Title4 4血型相容性检测血型相容性检测血型相容性检测血型相容性检测 血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 血型相容性检测血型相容性检测受血者和供血者受血者和供血者AB0AB0血型是否相容血型是否相容受血者和供血者受血者和供血者RhDRhD血型是否相容血型是否相容主次侧交叉配血是否相容主次侧交叉配血是否相容受血者血清中是否有临床有意义的意外抗体受血者血清中是否有临床有意义的意外抗体第一部分第一部分血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙ABO正正反反定定型型不不符符的原因分析和处理的原因分析和处理第二部分第二部分血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙原因原因一、实验者操作技术的错误一、实验者操作技术的错误二、红细胞标本问题二、红细胞标本问题三、血清标本的问题三、血清标本的问题血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙原因原因一、实验者操作技术错误一、实验者操作技术错误 未加入抗体或血清未加入抗体或血清未加入抗体或血清未加入抗体或血清 未识别溶血未识别溶血未识别溶血未识别溶血 血清与红细胞比例不当血清与红细胞比例不当血清与红细胞比例不当血清与红细胞比例不当 离心速度、时间不够离心速度、时间不够离心速度、时间不够离心速度、时间不够 使用失效或错误试剂使用失效或错误试剂使用失效或错误试剂使用失效或错误试剂 实验结果记录、解释错误实验结果记录、解释错误实验结果记录、解释错误实验结果记录、解释错误1. 1.假假阴阴性结果性结果血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙原因原因 离心速度过大、时间过长离心速度过大、时间过长离心速度过大、时间过长离心速度过大、时间过长 使用了受到细菌污染的试剂使用了受到细菌污染的试剂使用了受到细菌污染的试剂使用了受到细菌污染的试剂 试验器皿不干净试验器皿不干净试验器皿不干净试验器皿不干净 实验结果记录、解释错误实验结果记录、解释错误实验结果记录、解释错误实验结果记录、解释错误2. 2.假假阳阳性结果性结果血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙二、红细胞标本问题二、红细胞标本问题 患者近期接受了大量患者近期接受了大量ABOABO血型相容但不同型的红细血型相容但不同型的红细胞，如骨髓移植患者，或非胞，如骨髓移植患者，或非O O型人接受型人接受O O型红细胞型红细胞原因原因血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙二、红细胞标本问题二、红细胞标本问题 某些某些ABOABO基因变异的个体或基因变异的个体或ABOABO亚型红细胞，一亚型红细胞，一些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABOABO抗原太抗原太弱，应用抗弱，应用抗A A、抗抗B B试剂未能出现预期的凝集反试剂未能出现预期的凝集反应应原因原因血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙二、红细胞标本问题二、红细胞标本问题 红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性B B抗原红抗原红细胞或细胞或Tn/TTn/T多凝集红细胞，人血清抗多凝集红细胞，人血清抗A A、抗抗B B试试剂可能与这些异常的红细胞反应剂可能与这些异常的红细胞反应原因原因血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙二、红细胞标本问题二、红细胞标本问题 使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的血浆或血使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的血浆或血清中含针对抗清中含针对抗A A、抗抗B B试剂中染色剂或其他成分试剂中染色剂或其他成分的抗体，出现假阳性反应的抗体，出现假阳性反应原因原因血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙二、红细胞标本问题二、红细胞标本问题 患者血清中高活性、高浓度患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体冷自身抗体严重致敏（包严重致敏（包被）自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是抗体被）自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是抗体试剂的特异性免疫反应所致试剂的特异性免疫反应所致红细胞表面包被红细胞表面包被IgGIgG类抗体类抗体原因原因血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙三、血清标本的问题三、血清标本的问题小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集，小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集，如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。原因原因血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙三、血清标本的问题三、血清标本的问题免疫抑制疾病患者血清中免疫抑制疾病患者血清中ABOABO抗体减少或消失。老抗体减少或消失。老年人年人ABOABO抗体减弱抗体减弱4 4-6-6月龄内婴儿血清中月龄内婴儿血清中ABOABO抗体阴性或很弱，一般只抗体阴性或很弱，一般只测正定测正定原因原因血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙三、血清标本的问题三、血清标本的问题血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋白增多可引起非特异凝集，如白增多可引起非特异凝集，如缗钱状红细胞的非特缗钱状红细胞的非特异凝集。异凝集。血清中含抗血清中含抗A A、抗抗B B以外的其他红细胞抗体，如以外的其他红细胞抗体，如抗抗M M、抗抗I I等。等。患者接受了患者接受了ABOABO血型不同的骨髓移植血型不同的骨髓移植原因原因血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙三、血清标本的问题三、血清标本的问题患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体大量大量C 1C 1分子由于异常高效价的补体结合抗体抗分子由于异常高效价的补体结合抗体抗A A、抗抗B B作用，结合到红细胞膜上，遮蔽了作用，结合到红细胞膜上，遮蔽了A A、B B抗原位抗原位点，不发生凝集点，不发生凝集原因原因血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙基本程序基本程序 1.1.重新采集标本，以避免采集、标记、污染等错误重新采集标本，以避免采集、标记、污染等错误2.2.查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史3.3.彻底洗涤标本或试剂红细胞彻底洗涤标本或试剂红细胞4.4.应用抗应用抗ABAB、抗抗A1A1、或抗或抗H H检测红细胞检测红细胞5.5.分析抗筛结果，确定结果是否受同种异型或自身冷抗分析抗筛结果，确定结果是否受同种异型或自身冷抗体干扰体干扰6.6.室温孵育室温孵育3030minmin后，离心观察结果，以检测弱的抗原后，离心观察结果，以检测弱的抗原抗体反应抗体反应7.7. 做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干扰做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干扰分析和处理分析和处理血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙一、一、 抗原表达减弱所致的抗原表达减弱所致的ABOABO正反定不符正反定不符 二、抗二、抗-A-A、抗、抗-B-B血清的意外反血清的意外反应所致的所致的ABOABO正反定不符正反定不符三、三、 意外的血清学反意外的血清学反应所致的所致的ABOABO正反定不符正反定不符分析和处理分析和处理ABOABO正反定不符的分类正反定不符的分类血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙一、抗原表达减弱所致的一、抗原表达减弱所致的ABOABO正反定不符正反定不符 血型抗原表达减弱的常见原因血型抗原表达减弱的常见原因ABO亚型红细胞亚型红细胞白血病或其他恶性疾病患者的红细胞白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原抗原太弱，应用抗太弱，应用抗A、抗抗B试剂未能出现预期试剂未能出现预期的凝集反应的凝集反应新生儿新生儿分析和处理分析和处理血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙抗抗原原表表达达减减弱弱所所致致 A AB BO O 正正反反定定不不符符的的处处理理将将抗抗 A A、抗抗 B B和和抗抗 A A，B B试试剂剂与与洗洗涤涤过过的的红红细细胞胞在在室室温温 或或 4 4孵孵 育育 3 30 0m m i in n，以以 增增 强强 抗抗 原原 、 抗抗 体体 的的 结结 合合用木瓜酶、无花果酶和菠萝蛋白酶处理红细胞，以增用木瓜酶、无花果酶和菠萝蛋白酶处理红细胞，以增强抗原、抗体的结合强抗原、抗体的结合应用抗应用抗ABAB、抗抗A1A1、或抗或抗H H检测红细胞检测红细胞分析和处理分析和处理一、抗原表达减弱所致的一、抗原表达减弱所致的ABOABO正反定不符正反定不符 血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 用人血清抗用人血清抗A A、抗抗B B进行吸收放散行吸收放散试验，检测弱弱A A、B B抗原，但不是所有抗原，但不是所有单克隆抗体克隆抗体试剂都适宜做吸收放都适宜做吸收放散散试验，单克隆抗克隆抗A A、抗抗B B必必须经过系系统验证，且同且同时要做要做O O型血吸收放散型血吸收放散试验作作对照照检测唾液中唾液中A A、B B和和H H血型抗原物血型抗原物质分析和处理分析和处理血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 获得性获得性B B红细胞红细胞 获得性类获得性类A A抗原抗原 混合视野凝集混合视野凝集抗体包被红细胞抗体包被红细胞分析和处理分析和处理二、二、抗抗-A-A、抗、抗-B-B血清的意外反应血清的意外反应所致的所致的ABOABO正反定不符正反定不符 引起抗引起抗-A-A、抗、抗-B-B血清意外反应的因素血清意外反应的因素血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙获得性获得性B B红细胞红细胞( (特征特征) )常出现在有肠道细菌进入血循环的疾病，也可发生常出现在有肠道细菌进入血循环的疾病，也可发生在正常人在正常人通常只有通常只有A A 型人能出现获得性型人能出现获得性B B抗原抗原常伴有常伴有T T和和T nT n多凝集红细胞出现多凝集红细胞出现( (细菌感染时细菌感染时) )自身抗自身抗B B不与自身获得性不与自身获得性B B抗原反应抗原反应( (无自凝现象无自凝现象) )分析和处理分析和处理二、抗二、抗-A-A、抗、抗-B-B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的ABOABO正反定不符正反定不符血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙获得性获得性B B红细胞红细胞( (鉴定鉴定) )调整人血清抗调整人血清抗B B试剂试剂pHpH至至6.06.0时，即不与获得性时，即不与获得性B B细胞反应细胞反应分泌型者唾液中无分泌型者唾液中无B B血型物质血型物质乙酸酐处理能明显减弱其反应，但正常乙酸酐处理能明显减弱其反应，但正常B B细胞不受细胞不受影响影响分析和处理分析和处理二、抗二、抗-A-A、抗、抗-B-B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的ABOABO正反定不符正反定不符血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙二、抗二、抗-A-A、抗、抗-B-B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的ABOABO正反定不符正反定不符获得性类获得性类A A抗原抗原 造血干细胞的体细胞突变可造成部分红细胞持续性造血干细胞的体细胞突变可造成部分红细胞持续性TnTn抗原激活，类同抗原激活，类同A A抗原抗原 TnTn和和T T一样属隐蔽行院抗原一样属隐蔽行院抗原, ,激活暴露后与所有血型的激活暴露后与所有血型的血清和人血清血型抗体出现凝集反应血清和人血清血型抗体出现凝集反应( (全凝后多凝全凝后多凝) )蛋白酶能降解蛋白酶能降解TnTn分子，消除与抗分子，消除与抗A A凝集反应性，而正常凝集反应性，而正常A A抗原不受影响抗原不受影响, ,也可通过也可通过ABAB血清证实血清证实分析和处理分析和处理血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙混合视野凝集混合视野凝集非非O O型人近期输用型人近期输用O O型血型血骨髓移植后骨髓移植后A3A3细胞与抗细胞与抗A A呈典型的混合视野凝集现象呈典型的混合视野凝集现象单合子的镶嵌红细胞后双合子的交移体红细胞单合子的镶嵌红细胞后双合子的交移体红细胞分析和分析和处理理二、抗二、抗-A-A、抗、抗-B-B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的ABOABO正反定不符正反定不符血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙抗体包被红细胞抗体包被红细胞 患患HDNHDN婴儿、存在自身免疫或同种异体免疫的成婴儿、存在自身免疫或同种异体免疫的成人，其红细胞严重包被人，其红细胞严重包被IgGIgG抗体分子抗体分子与含一定蛋白质浓度的试剂（抗与含一定蛋白质浓度的试剂（抗D D、抗抗A A、抗抗B B）产生凝集产生凝集45 45 放散后放散后，抗体解离，即可准确定型，抗体解离，即可准确定型二、抗二、抗-A-A、抗、抗-B-B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的ABOABO正反定不符正反定不符分析和分析和处理理血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙抗体太弱或消失抗体太弱或消失非正常高浓度的抗非正常高浓度的抗A A、抗抗B B可引起前带现象可引起前带现象A2A2、A2BA2B或其他或其他ABOABO亚型人血清中可能有抗亚型人血清中可能有抗A1A1患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物等原因，可发生类似凝集现象，如缗钱状凝集等原因，可发生类似凝集现象，如缗钱状凝集分析和分析和处理理引起意外血清学反应的因素引起意外血清学反应的因素三、意外的血清学反应所致的三、意外的血清学反应所致的ABOABO正正反定不符反定不符血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙冷自身抗体，如抗冷自身抗体，如抗I I、抗抗IHIH、抗抗IAIA等等自身免疫性温型抗体自身免疫性温型抗体同种抗体同种抗体/ /意外抗体意外抗体分析和分析和处理理引起意外血清学反应的因素引起意外血清学反应的因素三、意外的血清学反应所致的三、意外的血清学反应所致的ABOABO正正反定不符反定不符血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 抗体太弱或消失抗体太弱或消失 如新生儿、老年人、免疫抑制患者，如新生儿、老年人、免疫抑制患者，应注意患者的年应注意患者的年龄和诊断龄和诊断非正常高浓度的抗非正常高浓度的抗A A、抗抗B B可引起前带现象，导致假可引起前带现象，导致假阴性阴性, ,将血清稀释或用将血清稀释或用EDTAEDTA（2.52.5）处理可消除处理可消除A2A2、A2BA2B或其他或其他ABOABO亚型人血清中可能有抗亚型人血清中可能有抗A1,A1, 抗抗A1A1只凝集只凝集A1A1型红细胞而不凝集型红细胞而不凝集A2A2、O O型红细胞型红细胞 三、意外的血清学反应所致的三、意外的血清学反应所致的ABOABO正反定不符及其处理正反定不符及其处理血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物等原因，可发生类了大量大分子药物等原因，可发生类似凝集现象，如缗钱状凝集似凝集现象，如缗钱状凝集 将血清用生理盐水稀释将血清用生理盐水稀释3 3倍或用盐倍或用盐水替换技术可消除水替换技术可消除 三、意外的血清学反应所致的三、意外的血清学反应所致的ABOABO正反定不符及其处理正反定不符及其处理血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 冷自身抗体，冷自身抗体，如抗如抗I I、抗抗IHIH、抗抗IAIA等等( (自凝自凝) ) a.a.所有试剂及细胞所有试剂及细胞3737孵育，孵育， 37 37下判读结果下判读结果 b.b.将冷自身抗体吸收将冷自身抗体吸收 c.c.将血清用将血清用0.010.01mol/L DTTmol/L DTT处理和再定型处理和再定型 三、意外的血清学反应所致的三、意外的血清学反应所致的ABOABO正反定不符及其处理正反定不符及其处理血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 自身免疫性温型抗体自身免疫性温型抗体自身免疫性溶血性贫血病人血清中可有温型自身抗体自身免疫性溶血性贫血病人血清中可有温型自身抗体3737反应比室温强反应比室温强血清能凝集自身和其他各型红细胞血清能凝集自身和其他各型红细胞若红细胞上吸附自这种自身抗体，在自身或他人血清中若红细胞上吸附自这种自身抗体，在自身或他人血清中均可出现凝集均可出现凝集三、意外的血清学反应所致的三、意外的血清学反应所致的ABOABO正反定不符及其处理正反定不符及其处理血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 自身免疫性温型抗体自身免疫性温型抗体正定被误认为正定被误认为ABAB型，反定被误认为型，反定被误认为O O型型 用递增温度（用递增温度（2222，3737，4545）洗涤红细胞后）洗涤红细胞后再做血型鉴定再做血型鉴定三、意外的血清学反应所致的三、意外的血清学反应所致的ABOABO正反定不符及其处理正反定不符及其处理血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 同种抗体同种抗体/ /意外抗体意外抗体 室温下抗室温下抗-P、抗、抗-M、抗、抗E等，可能出现意外反应，干等，可能出现意外反应，干扰扰ABO血型鉴定血型鉴定抗体特异性抗体鉴定，选择抗原阴性的红细胞做反定抗体特异性抗体鉴定，选择抗原阴性的红细胞做反定三、意外的血清学反应所致的三、意外的血清学反应所致的ABOABO正反定不符及其处理正反定不符及其处理血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙多发性骨髓瘤致多发性骨髓瘤致ABOABO血型鉴定困难血型鉴定困难1 1例例应用举例应用举例血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙多发性骨髓瘤（多发性骨髓瘤（MM）： 一种恶性浆细胞疾病，大量分泌异常的单克隆一种恶性浆细胞疾病，大量分泌异常的单克隆免疫球蛋白免疫球蛋白(M (M 蛋白蛋白) ,) ,影响红细胞表面负电荷状影响红细胞表面负电荷状态态, ,血清蛋白浓度和比例异常血清蛋白浓度和比例异常,A/G,A/G比例失调比例失调, ,红细红细胞呈缗钱状非特异性聚集胞呈缗钱状非特异性聚集, ,给血型鉴定带来一定的给血型鉴定带来一定的困难。困难。血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙病情简介病情简介 患患者，女，者，女，3838岁，因骨痛、贫血岁，因骨痛、贫血 2 2个月入院；个月入院；Hb 65 g/L ,WBC 6.4 10Hb 65 g/L ,WBC 6.4 109 9 / L,PL T 90 / L,PL T 90 10109 9 / L, / L, 尿本周蛋白阳性尿本周蛋白阳性,BUN,BUN、Cr Cr 均异常；均异常；骨髓象示骨髓象示: :浆细胞浆细胞37% 37% 。诊断：多发性骨髓瘤。有。诊断：多发性骨髓瘤。有既往输血史。既往输血史。血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙血型血清学检查血型血清学检查正定：正定： A型，型，RhD（）（）反定：反定： O型型直抗直抗： （）（）抗筛：抗筛： （）（）血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙处理处理1.吸收试验吸收试验 6 6次洗涤后的患者压积红细胞次洗涤后的患者压积红细胞 等量的抗等量的抗A A、抗、抗B B血清（血清（1:1281:128） 4 1h4 1h离心，取上清，测吸收液的抗离心，取上清，测吸收液的抗A A、抗、抗B B效价效价抗抗A A降低明显，抗降低明显，抗B 1B 1：128128血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 吸收后的患者吸收后的患者RBCRBC用用NSNS洗涤洗涤6 6次等量的次等量的NSNS 56 1056 1015min15min 放散液与放散液与5 5标准标准 A A、B RBCB RBC反应反应 Ac:+ Bc: - Ac:+ Bc: -彻底洗涤吸收放散试验证明：吸收放散试验证明：患者患者RBCRBC上有上有A A抗原，抗原，无无B B抗原抗原, ,为为A A型型2.放散试验放散试验血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙3.将患者血清用将患者血清用O型标准型标准RBC吸收吸收 等份血清等份等份血清等份O O细胞细胞 振荡振荡 室温室温 151530min30min 离心，取上清，转移到另一等份离心，取上清，转移到另一等份O O细胞中细胞中吸收后的血清与标准吸收后的血清与标准A A、B B红细胞反应红细胞反应 Ac: - Bc:+ Ac: - Bc:+患者血清中有患者血清中有抗抗-B-B，无抗，无抗-A-A血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 患者血型最终确定为患者血型最终确定为A A型型 RhDRhD（），输（），输注注2U 2U 经过筛选的经过筛选的A A型悬浮型悬浮RBCRBC后，未见任何后，未见任何不良反应不良反应血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙交叉配血试验中常见问题分析和处理交叉配血试验中常见问题分析和处理第三部分第三部分血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙交叉配血原则交叉配血原则R除非极为紧急情况，输血前患者与献血者必须进除非极为紧急情况，输血前患者与献血者必须进行交叉配血行交叉配血R受血者血清中无即刻或迟发性地凝集和受血者血清中无即刻或迟发性地凝集和( (或或) )溶解溶解所输入的红细胞的抗体所输入的红细胞的抗体R献血者血清中无即刻或迟发性地凝集和献血者血清中无即刻或迟发性地凝集和( (或或) )溶解溶解受血者红细胞的抗体受血者红细胞的抗体血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙方法方法v盐水介质交叉配血盐水介质交叉配血v检测不完全抗体的交叉配血检测不完全抗体的交叉配血血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 盐水介质交叉配血盐水介质交叉配血只能检出只能检出IgMIgM类抗体（主为类抗体（主为ABOABO血型系统抗体），血型系统抗体），无法检无法检出出IgGIgG，具有很大的危险性，只能在受血者血清中不含具有很大的危险性，只能在受血者血清中不含临床有意义抗体的情况下进行。临床有意义抗体的情况下进行。血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 检测不完全抗体的交叉配血检测不完全抗体的交叉配血临床最常见的迟发型输血反应临床最常见的迟发型输血反应ABOABO系统以外的其系统以外的其他血型他血型( (如如RhRh）的的IgGIgG类抗体导致的血型不相容类抗体导致的血型不相容有输血史、妊娠史或血清中有意外抗体的患者必须进有输血史、妊娠史或血清中有意外抗体的患者必须进行不完全抗体的交叉配血试验行不完全抗体的交叉配血试验包括包括抗人球蛋白法、抗人球蛋白法、蛋白酶法、促凝剂法等蛋白酶法、促凝剂法等血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 抗人球蛋白法抗人球蛋白法鉴定不完全抗体最可靠的方法，传统的抗人球法不能成鉴定不完全抗体最可靠的方法，传统的抗人球法不能成为临床输血的常规检验。为临床输血的常规检验。19861986年年, ,LapierreLapierre发明的发明的微柱微柱凝胶抗球蛋白试验凝胶抗球蛋白试验准确、可靠、不需洗涤，可方便的应准确、可靠、不需洗涤，可方便的应用于抗体筛检和交叉配血试验用于抗体筛检和交叉配血试验血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙交叉配血不相容的原因及解决办法交叉配血不相容的原因及解决办法一、一、血型鉴定错误：血型鉴定错误：受血者、献血者红细胞受血者、献血者红细胞ABOABO血型不相血型不相容，出现问题最多的是，其次才是技术错误。容，出现问题最多的是，其次才是技术错误。复查血型复查血型二、二、患者存在冷反应自身抗体：患者存在冷反应自身抗体：采用自身对照和采用自身对照和37 37 水水浴以及递增盐水温度洗涤患者红细胞等方法排除非浴以及递增盐水温度洗涤患者红细胞等方法排除非特异性凝集的干扰特异性凝集的干扰 责任错误责任错误血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙交叉配血不相容的原因及解决办法交叉配血不相容的原因及解决办法三、三、患者存在温反应自身抗体：患者存在温反应自身抗体：采用吸收放散试验后取采用吸收放散试验后取患者的红细胞与血清和同型的洗涤红细胞进行交叉患者的红细胞与血清和同型的洗涤红细胞进行交叉配血。配血。血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙交叉配血不相容的原因及解决办法交叉配血不相容的原因及解决办法四、四、血清蛋白紊乱及白球蛋白比例倒置引起的假凝集：血清蛋白紊乱及白球蛋白比例倒置引起的假凝集：如多发性骨髓瘤、肺癌、肝癌患者等。多表现为主如多发性骨髓瘤、肺癌、肝癌患者等。多表现为主侧凝集侧凝集血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙交叉配血不相容的原因及解决办法交叉配血不相容的原因及解决办法五、五、ABO ABO 以外的其它血型系统引起的交叉配血不合：以外的其它血型系统引起的交叉配血不合：常常发生于有输血史、妊娠史的患者，产生主侧凝集。发生于有输血史、妊娠史的患者，产生主侧凝集。如抗如抗D D、抗抗E E 、抗、抗C C 、抗抗c c、抗抗I I、抗抗e e 和抗和抗FybFyb等等 ，用经筛选的不含相应抗原的血液进用经筛选的不含相应抗原的血液进行交叉配血即可消除。行交叉配血即可消除。血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙交叉配血不相容的原因及解决办法交叉配血不相容的原因及解决办法六、六、献血者红细胞献血者红细胞DATDAT阳性：阳性：大约万分之一健康人包被大约万分之一健康人包被了了IgGIgG或补体的红细胞，或补体的红细胞，不应输用此类细胞。不应输用此类细胞。血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙交叉配血不相容的原因及解决办法交叉配血不相容的原因及解决办法七、七、献血者红细胞是多凝集红细胞：献血者红细胞是多凝集红细胞：正常人血清中可含正常人血清中可含有非红细胞刺激而产生的自然发生的抗体，如抗有非红细胞刺激而产生的自然发生的抗体，如抗T T、抗抗TnTn等。等。应筛选低水平抗应筛选低水平抗T T、抗抗TnTn的血液的血液血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙意外抗体筛选的意义和方法意外抗体筛选的意义和方法第四部分第四部分血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙是指除是指除ABOABO血型系统抗体以外的其他抗体，如抗血型系统抗体以外的其他抗体，如抗D D、抗抗E E等。主要经输血或妊娠等免疫刺激产生，人群检出率等。主要经输血或妊娠等免疫刺激产生，人群检出率为为0.30.32.02.0，是引起迟发性免疫反应的主要原因，是引起迟发性免疫反应的主要原因。意外抗体意外抗体血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙意外抗体意外抗体v临床有意义抗体：引起新生儿溶血病、溶血性输临床有意义抗体：引起新生儿溶血病、溶血性输血反应，或者使输入的红细胞存活期减少的、在血反应，或者使输入的红细胞存活期减少的、在3737反应的同种异型抗体。反应的同种异型抗体。IAT阳性阳性!血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙意外抗体意外抗体v临床无意义抗体临床无意义抗体 室温或低温反应的抗体，但抗室温或低温反应的抗体，但抗- -Vel,Vel,抗抗-P-P等，在体内引起明显的红细胞破坏。等，在体内引起明显的红细胞破坏。血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 筛选方法筛选方法要求要求1.1.选择敏感的技术检测出受血者血清中非常低水平的临选择敏感的技术检测出受血者血清中非常低水平的临床有意义抗体。床有意义抗体。高度注意！高度注意！即使受血者血清中抗体对输入的不相容红细即使受血者血清中抗体对输入的不相容红细胞抗原呈弱反应，但也能够发生快速的强的回忆反应，胞抗原呈弱反应，但也能够发生快速的强的回忆反应，增加抗体产生，破坏红细胞增加抗体产生，破坏红细胞血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 筛选方法筛选方法 要求要求2.2. 每一试剂瓶中只能有一人份的试剂红细胞，不可将每一试剂瓶中只能有一人份的试剂红细胞，不可将多人份红细胞混合，以避免红细胞混合后对弱抗原红多人份红细胞混合，以避免红细胞混合后对弱抗原红细胞的稀释。细胞的稀释。FDAFDA对试剂红细胞抗原表达的要求：对试剂红细胞抗原表达的要求：D,C,E,c,e,M,N,S,s,PI,Le, LeD,C,E,c,e,M,N,S,s,PI,Le, Lea a, Le, Leb b,K,k,Fy,K,k,Fya a, , FyFyb b,Jk,Jka a, Jk, Jkb.b.血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 筛选方法筛选方法实验方法实验方法v盐水直接凝集试验：盐水直接凝集试验： 是最简单的血型血清学方法，是最简单的血型血清学方法，紧急情况下可在室温下立即离心。可检出室温或低于紧急情况下可在室温下立即离心。可检出室温或低于室温反应的临床意义不大的抗体如抗室温反应的临床意义不大的抗体如抗M M、抗抗N N、抗抗P P、抗抗LeLea a等等血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 筛选方法筛选方法实验方法实验方法v抗球蛋白试验：抗球蛋白试验： 可检出绝大部分临床有意义的不完可检出绝大部分临床有意义的不完全抗体，抗球蛋白试剂要有全抗体，抗球蛋白试剂要有多特异性多特异性抗球蛋白抗体，抗球蛋白抗体，其中含有抗其中含有抗IgGIgG和抗和抗C3dC3d。含抗补体的球蛋白也能含抗补体的球蛋白也能够检出结合补体的无临床意义的冷抗体，如抗够检出结合补体的无临床意义的冷抗体，如抗I I、抗抗HIHI等等血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙 筛选方法筛选方法实验方法实验方法v其他试验其他试验: :蛋白酶试验、聚乙二醇试验、蛋白酶试验、聚乙二醇试验、LISSLISS和微柱和微柱凝胶试验等凝胶试验等 各种试验都有其本身的特点，适用不同范围，各种试验都有其本身的特点，适用不同范围，实验室应根据自己的条件，建立实验室常规试验程序实验室应根据自己的条件，建立实验室常规试验程序和规程和规程血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙抗体特异性鉴定抗体特异性鉴定血清标本，血清标本，EDTAEDTA抗凝（避免补体体外致敏红细胞）血抗凝（避免补体体外致敏红细胞）血浆标本浆标本病史：输血、妊娠、用药病史：输血、妊娠、用药试剂：谱细胞、增强介质，抗人球蛋白试剂试剂：谱细胞、增强介质，抗人球蛋白试剂自身对照自身对照血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙抗体特异性鉴定抗体特异性鉴定对谱细胞的要求对谱细胞的要求不少于不少于8 8人份的人份的O O型红细胞型红细胞血型系统包括：血型系统包括： Rh,Kell,Duffy,Kidd,P,Lewis,MNSRh,Kell,Duffy,Kidd,P,Lewis,MNS自身对照的意义自身对照的意义阴性：阴性：血清只与试剂红细胞反应，只有同种抗体存在血清只与试剂红细胞反应，只有同种抗体存在阳性：阳性：有自身抗体存在，或与同种抗体并存有自身抗体存在，或与同种抗体并存 自身吸收后鉴定同种抗体！自身吸收后鉴定同种抗体！血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙抗体筛选的意义抗体筛选的意义发现临床有意义的抗体发现临床有意义的抗体减少溶血性输血反应的发生减少溶血性输血反应的发生有利于免疫溶血性疾病的诊断有利于免疫溶血性疾病的诊断有利于提前选择和准备相合的血液有利于提前选择和准备相合的血液确保临床输血安全、及时、有效确保临床输血安全、及时、有效血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙抗体筛选阴性，盐水介质交叉配血不相容抗体筛选阴性，盐水介质交叉配血不相容供、受血者供、受血者ABOABO血型不相容血型不相容受血者受血者A2A2或或A2BA2B亚型，血清中抗亚型，血清中抗A1A1与供血者与供血者A1A1或或ABAB型型红细胞凝集红细胞凝集存在室温反应的同种抗体，如抗存在室温反应的同种抗体，如抗-M-M等等献血者是多凝红细胞，隐蔽抗原献血者是多凝红细胞，隐蔽抗原T T、TnTn等暴露等暴露抗体筛选的意义抗体筛选的意义血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙献血者献血者是红细胞献血者献血者是红细胞DATDAT阳性阳性 万分之一健康人万分之一健康人红细胞表面包被红细胞表面包被IgGIgG或补体，不应该输此类红细胞或补体，不应该输此类红细胞抗体与低频抗原反应抗体与低频抗原反应 人群人群1%1%血清中含有针对低血清中含有针对低频抗原的抗体频抗原的抗体筛选细胞一般缺少低频抗原筛选细胞一般缺少低频抗原抗体筛选的意义抗体筛选的意义抗体筛选阴性，检测不完全抗抗体筛选阴性，检测不完全抗体的交叉配血不相容体的交叉配血不相容血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙抗体筛选抗体筛选阳阳性，交叉配血性，交叉配血相容相容自身抗自身抗-H-H O O型红细胞含有大量型红细胞含有大量H H抗原，而抗原，而A1A1、A1BA1B含量很含量很低。室温反应，低。室温反应，3737度无反应，无临床意义度无反应，无临床意义献血者红细胞正好不含对应的抗原献血者红细胞正好不含对应的抗原抗抗-Le-Lebhbh 只与只与O O型型Le(a-b+Le(a-b+）反应，不与）反应，不与A1A1、A1B Le(a-A1B Le(a-b+b+）反应，室温反应，）反应，室温反应，3737度无反应，临床意义不大度无反应，临床意义不大抗体筛选的意义抗体筛选的意义血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙抗体筛选抗体筛选阳阳性，交叉配血性，交叉配血不不相容相容同种抗体存在，自身对照阴性同种抗体存在，自身对照阴性 选择对应抗原阴性选择对应抗原阴性的血做交叉。如抗体是抗的血做交叉。如抗体是抗-M-M、抗、抗N N、抗、抗-P1-P1、抗、抗-Le-Lea a等等就无就无须确认对应抗原缺失，但需须确认对应抗原缺失，但需3737度交叉配度交叉配合合抗体筛选的意义抗体筛选的意义血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙抗体筛选抗体筛选阳阳性，交叉配血性，交叉配血不不相容相容同种抗体存在，自身对照阳性同种抗体存在，自身对照阳性 近期（近期（2-32-3月）接受过输血的患者体内的同种抗体可引月）接受过输血的患者体内的同种抗体可引起自身对照阳性起自身对照阳性循环中的自身抗体可引起自身对照阳性循环中的自身抗体可引起自身对照阳性区别两者很重要（很难），因选择红细胞程序不同区别两者很重要（很难），因选择红细胞程序不同可用对应抗原阳性的细胞做吸收放散实验来证实同种抗可用对应抗原阳性的细胞做吸收放散实验来证实同种抗体存在体存在抗体筛选的意义抗体筛选的意义血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙抗体筛选抗体筛选阳阳性，交叉配血性，交叉配血不不相容相容同种抗体存在，自身对照阳性同种抗体存在，自身对照阳性 患者血清中的同种抗体可与输入的红细胞起反应患者血清中的同种抗体可与输入的红细胞起反应如是有意义的抗体，应选择抗原阴性红细胞输血如是有意义的抗体，应选择抗原阴性红细胞输血3737度抗人球交叉配血相合是必须的度抗人球交叉配血相合是必须的抗体筛选的意义抗体筛选的意义血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙抗体筛选抗体筛选阳阳性，交叉配血性，交叉配血不不相容相容冷反应自身抗体冷反应自身抗体 强反应冷抗体（疾病）引起血型鉴定和交叉配血困难，强反应冷抗体（疾病）引起血型鉴定和交叉配血困难，临床意义不大临床意义不大3737度抗人球交叉配血相合是必须的度抗人球交叉配血相合是必须的抗体筛选的意义抗体筛选的意义血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙抗体筛选抗体筛选阳阳性，交叉配血性，交叉配血不不相容相容温反应自身抗体温反应自身抗体 抗体筛选阳性，交叉配血不相容抗体筛选阳性，交叉配血不相容必须分析血清中是否含有有意义的抗体必须分析血清中是否含有有意义的抗体造成输血困难，可经放散后配血造成输血困难，可经放散后配血3737度抗人球交叉配血最低血清学不相容原则度抗人球交叉配血最低血清学不相容原则抗体筛选的意义抗体筛选的意义血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙病例讨论病例讨论病人，女，83岁，因消化道出血住院，有既往输血史（AB），入院后发现有自身溶血，Hb20g/L，DAT，IAT均阳性。血型：见图，有自身凝集。抗体筛选：凝聚胺（-） 卡式法（4+）抗体鉴定： 未完成交叉配血： 10单位 AB，O洗涤红结果： 不相合 血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙弱弱D检测的意义和方法检测的意义和方法第五部分第五部分血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙D D抗原的分抗原的分类(1)(1)D D：正正常常D D抗原抗原(2)(2)弱弱D D：抗原数量减少，表位基本完整抗原数量减少，表位基本完整, ,D D抗原只是量的抗原只是量的减少，无质的改变减少，无质的改变(3)(3)表位不完全型表位不完全型D D（部分部分D D）: :抗原数量正常或增加，缺抗原数量正常或增加，缺失部分表位失部分表位(4)(4)表位不完全型弱表位不完全型弱D D：抗原数目减少，缺失部分表位抗原数目减少，缺失部分表位(5)(5)增强增强D D：D D抗原数量有很大程度的增加抗原数量有很大程度的增加血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙临床床输血中血中检测弱弱D D的意的意义v献血者为弱献血者为弱D的意义：的意义： D抗原表达弱的红细胞可能刺激抗原表达弱的红细胞可能刺激D阴性受血者产阴性受血者产生抗体；受血者血清中已有抗生抗体；受血者血清中已有抗D时，切不可输用弱时，切不可输用弱D型红细胞，因为该受血者血清抗型红细胞，因为该受血者血清抗D会快速破坏输入会快速破坏输入的弱的弱D型红细胞；型红细胞；弱弱D型献血者必须以型献血者必须以D阳性阳性者看待。者看待。 血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙v受血者为弱受血者为弱D的意义：的意义： 如果弱如果弱D D表型是由于该表型是由于该D D抗原缺失抗原缺失1 1至多个至多个D D抗原抗原表位所致，则该弱表位所致，则该弱D D表型受血者可能被输用的表型受血者可能被输用的D D阳性血阳性血所免疫，产生溶血性输血反应；所免疫，产生溶血性输血反应；弱弱D D型受血者应视为型受血者应视为RhRh阴性阴性，以保证临床输血安全。，以保证临床输血安全。 血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙弱弱D D的的检测方法方法 盐水法初筛（）盐水法初筛（）IAT 确认确认弱弱D_ _吸收放散试验吸收放散试验Del型型_ _Rh阴性阴性血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙谢谢 谢谢血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理省医王保龙