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南华大学南华大学 University of South China 第二节第二节 尿液化学检查尿液化学检查(2)(2)授课教师授课教师: :任林任林医学检验教研室医学检验教研室南华大学南华大学 University of South China 四、酮体检查四、酮体检查南华大学南华大学 University of South China 酮体是机体脂肪氧化代谢产生的中间产酮体是机体脂肪氧化代谢产生的中间产物,当糖代谢发生障碍、脂肪分解增多、酮物,当糖代谢发生障碍、脂肪分解增多、酮体产生速度超过机体组织利用速度时,可出体产生速度超过机体组织利用速度时,可出现酮血症,酮体血浓度一旦超过肾阈值,可现酮血症,酮体血浓度一旦超过肾阈值,可产生酮尿。产生酮尿。南华大学南华大学 University of South China 丙酮(丙酮(CH3COCH3)乙酰乙酸(乙酰乙酸(CH3COCH2COOH) -羟丁酸(羟丁酸(CH3CH(OH)CH2COOH)南华大学南华大学 University of South China 【酮体检测酮体检测】原理:原理:膜块中主要含有亚硝基铁氰化钠,膜块中主要含有亚硝基铁氰化钠, 可与尿液中的乙酰可与尿液中的乙酰乙酸、丙酮产生紫色反应。乙酸、丙酮产生紫色反应。方法类别:试带法、方法类别:试带法、Lange法、法、Rothera法、法、 改良改良Rothera法法、片剂法。片剂法。1.亚硝基铁氰化钠法亚硝基铁氰化钠法南华大学南华大学 University of South China 南华大学南华大学 University of South China 2.Gerhardt法:法:原理:高铁离子与乙酰乙酸的烯醇式基团发生原理:高铁离子与乙酰乙酸的烯醇式基团发生螯合,形成酒红色的乙酰乙酸铁复合物。螯合,形成酒红色的乙酰乙酸铁复合物。评价:本法只测定乙酰乙酸,与评价:本法只测定乙酰乙酸,与-羟丁酸、羟丁酸、丙酮不起反应。丙酮不起反应。南华大学南华大学 University of South China 南华大学南华大学 University of South China 检测前检测前: : 丙酮具有挥发性,乙酰乙酸在菌尿中会被细菌丙酮具有挥发性,乙酰乙酸在菌尿中会被细菌降解,因此应使用新鲜尿液标本并尽快检测。降解,因此应使用新鲜尿液标本并尽快检测。检测中:试带应放在阴凉、干燥处,注意使用效期,并检测中:试带应放在阴凉、干燥处,注意使用效期,并坚持室内质控。坚持室内质控。检测后:审核报告。检测后:审核报告。【质量保证质量保证】 南华大学南华大学 University of South China 【参考值参考值】 定性:阴性定性:阴性 定量:健康人尿中酮体含量甚微,酮体定量:健康人尿中酮体含量甚微,酮体(以丙酮计)(以丙酮计)170420mg/L;乙酰乙酸;乙酰乙酸20mg/L。南华大学南华大学 University of South China l糖尿病酮症酸中毒:早期诊断与鉴别诊断。糖尿病酮症酸中毒:早期诊断与鉴别诊断。l非糖尿病性酮症者:如应激状态、剧烈运动、非糖尿病性酮症者:如应激状态、剧烈运动、饥饿、呕吐、严重腹泻等。饥饿、呕吐、严重腹泻等。【临床意义临床意义】南华大学南华大学 University of South China l治疗监测:糖尿病酮症酸中毒早期的主要酮体治疗监测:糖尿病酮症酸中毒早期的主要酮体成分是成分是-羟丁酸,很少或缺乏乙酰乙酸,此时测羟丁酸,很少或缺乏乙酰乙酸,此时测得结果可导致对总酮体量估计不足。在糖尿病酮得结果可导致对总酮体量估计不足。在糖尿病酮症酸中毒症状缓解之后,症酸中毒症状缓解之后,-羟丁酸转变为乙酰乙羟丁酸转变为乙酰乙酸,反而使乙酰乙酸含量比初始急性期增高,易酸,反而使乙酰乙酸含量比初始急性期增高,易对病情估计过重。对病情估计过重。南华大学南华大学 University of South China l其他其他氯仿、磷等中毒或全身麻醉后:尿酮体可阳性。氯仿、磷等中毒或全身麻醉后:尿酮体可阳性。服用双胍类降糖药:如降糖灵等,可出现尿酮服用双胍类降糖药:如降糖灵等,可出现尿酮体阳性。体阳性。新生儿出现尿酮体强阳性,应怀疑为遗传性疾新生儿出现尿酮体强阳性,应怀疑为遗传性疾病。病。南华大学南华大学 University of South China 五、胆红素、尿胆五、胆红素、尿胆原和尿胆素检查原和尿胆素检查南华大学南华大学 University of South China 尿中胆色素包括胆红素(尿中胆色素包括胆红素(bilirubin)、尿)、尿胆原胆原(urobilinogen)及尿胆素及尿胆素(urobilin),俗,俗称尿三胆。由于送检的多为新鲜尿,尿胆原尚称尿三胆。由于送检的多为新鲜尿,尿胆原尚未氧化成尿胆素,故多查前两者,俗称尿二胆。未氧化成尿胆素,故多查前两者,俗称尿二胆。南华大学南华大学 University of South China 胆红素胆红素未结合胆红素(未结合胆红素(UCB)结合胆红素结合胆红素(CB):与葡萄糖醛酸结合:与葡萄糖醛酸结合胆红素胆红素尿胆原(尿胆原(UBG)排入肠腔排入肠腔无色无色UBG 黄色的尿胆素黄色的尿胆素空气氧化空气氧化光线照射光线照射从粪便排出从粪便排出粪胆原粪胆原结合胆红素结合胆红素南华大学南华大学 University of South China 胆红素胆红素【检测方法检测方法】重氮法:试带法多采用此原理。重氮法:试带法多采用此原理。氧化法氧化法尿胆原检测:尿胆原检测:Ehrilich醛反应醛反应尿胆素测定:尿胆素测定:Schleisinger法法南华大学南华大学 University of South China 【质量保证质量保证】检测前:标本必须新鲜,以免胆红素在阳光照射检测前:标本必须新鲜,以免胆红素在阳光照射下成为胆绿素。为提高尿胆原阳性检出率,可于下成为胆绿素。为提高尿胆原阳性检出率,可于检测前嘱患者口服少量碳酸氢钠,以碱化尿液收检测前嘱患者口服少量碳酸氢钠,以碱化尿液收集午后集午后2-4h尿标本尿标本(正常人尿胆原排出量每天波动很(正常人尿胆原排出量每天波动很大,夜间和上午量少,午后迅速增加,在午后大,夜间和上午量少,午后迅速增加,在午后2-4时达最时达最高峰;同时尿胆原的消除率与尿高峰;同时尿胆原的消除率与尿pH相关)相关)。南华大学南华大学 University of South China 检测中:应规范化操作,作好检测中:应规范化操作,作好2种水平室内质控,种水平室内质控,试带应放阴凉干燥处,密封避光保存,注意使用试带应放阴凉干燥处,密封避光保存,注意使用效期。效期。检测后:结合临床,审核报告。检测后:结合临床,审核报告。南华大学南华大学 University of South China l尿液中含高浓度维生素尿液中含高浓度维生素C C和亚硝酸盐时,抑制重氮反应和亚硝酸盐时,抑制重氮反应使尿胆红素呈假阴性。当患者接受大剂量氯丙嗪治疗使尿胆红素呈假阴性。当患者接受大剂量氯丙嗪治疗或尿中含有盐酸苯偶氮吡啶的代谢产物时,尿胆红素或尿中含有盐酸苯偶氮吡啶的代谢产物时,尿胆红素可呈假阳性。可呈假阳性。【干扰因素干扰因素】l尿液中一些内源物质如卟胆原、吲哚等可使尿胆原检尿液中一些内源物质如卟胆原、吲哚等可使尿胆原检查结果出现假阳性,一些药物(如吩噻嗪等)也可使查结果出现假阳性,一些药物(如吩噻嗪等)也可使尿胆原出现假阳性。假阴性与尿中存在大量维生素尿胆原出现假阳性。假阴性与尿中存在大量维生素C C或或长期服用广谱抗生素抑制肠道菌群等有关。长期服用广谱抗生素抑制肠道菌群等有关。南华大学南华大学 University of South China 【参考值参考值】胆红素定性:阴性胆红素定性:阴性尿胆原定性:阴性或弱阳性(尿胆原定性:阴性或弱阳性(1:20稀释后阴性)稀释后阴性)尿胆素定性:阴性尿胆素定性:阴性南华大学南华大学 University of South China 【临床意义临床意义 主要用于黄疸的诊断和鉴别诊断主要用于黄疸的诊断和鉴别诊断南华大学南华大学 University of South China 黄疸黄疸类型类型血清胆红素血清胆红素(mol/L)尿尿粪便粪便总胆总胆红素红素未结未结合胆合胆红素红素结合结合胆红胆红素素颜色颜色尿胆尿胆原原尿胆尿胆素素尿胆尿胆红素红素颜色颜色粪胆粪胆素素正常正常人人正常正常正常正常正常正常浅黄浅黄1:20阴性阴性阴性阴性阴性阴性黄褐黄褐正常正常溶血溶血性黄性黄疸疸轻度轻度加深加深强阳强阳性性阳性阳性阴性阴性加深加深增多增多肝细肝细胞性胞性黄疸黄疸加深加深阳性阳性阳性阳性阳性阳性正常正常或变或变浅浅下降下降或正或正常常阻塞阻塞性黄性黄疸疸正常正常或轻或轻度度加深加深阴性阴性阴性阴性阳性阳性变浅变浅或白或白陶土陶土样样减少减少或消或消失失表表1 正常人及不同类型黄疸实验室鉴别正常人及不同类型黄疸实验室鉴别 南华大学南华大学 University of South China 六、血红蛋白检查六、血红蛋白检查南华大学南华大学 University of South China 正常人血浆中游离血红蛋白与珠蛋白结合,不能从正常人血浆中游离血红蛋白与珠蛋白结合,不能从尿液中排出。尿液中排出。当血管内溶血,当血管内溶血,RBC破坏,破坏,HB释放入血,超过珠释放入血,超过珠蛋白的结合能力,游离血红蛋白从尿液中排出。蛋白的结合能力,游离血红蛋白从尿液中排出。特点:外观呈浓茶色、红葡萄酒色或酱油色,隐血特点:外观呈浓茶色、红葡萄酒色或酱油色,隐血试验阳性。试验阳性。南华大学南华大学 University of South China 【检测方法检测方法】:1.试带法:试带法:l原理:血红蛋白分子中含有血红素基团,具有过氧化原理:血红蛋白分子中含有血红素基团,具有过氧化物酶样活性,能催化过氧化氢作为电子受体使色原氧物酶样活性,能催化过氧化氢作为电子受体使色原氧化呈色,借以识别微量血红蛋白的存在,其呈色深浅化呈色,借以识别微量血红蛋白的存在,其呈色深浅与血红蛋白含量成正比。与血红蛋白含量成正比。南华大学南华大学 University of South China l评价:操作简便、快速,可作为尿评价:操作简便、快速,可作为尿Hb的筛检试验。的筛检试验。l假阳性:尿中含对热不稳定酶、尿液被假阳性:尿中含对热不稳定酶、尿液被氧化剂污染或尿路感染时某些细菌产生氧化剂污染或尿路感染时某些细菌产生过氧化物酶。过氧化物酶。l假阴性:尿中含大剂量维生素假阴性:尿中含大剂量维生素C或其他或其他还原物质、甲醛过量、大量亚硝酸盐。还原物质、甲醛过量、大量亚硝酸盐。南华大学南华大学 University of South China l原理:与试带法反应原理一致。原理:与试带法反应原理一致。l常用方法:邻甲苯胺法、匹拉米洞法等。常用方法:邻甲苯胺法、匹拉米洞法等。l评价:操作简单、但试剂稳定性差,特异性低。评价:操作简单、但试剂稳定性差,特异性低。l假阳性:尿中有铁盐、硝酸、铜、锌、碘化物假阳性:尿中有铁盐、硝酸、铜、锌、碘化物等或有过氧化物酶或其他对热不稳定酶。等或有过氧化物酶或其他对热不稳定酶。2.化学法:化学法:南华大学南华大学 University of South China 3.免疫法:免疫法:原理:采用免疫胶体金法测定原理。原理:采用免疫胶体金法测定原理。评价:操作简便、灵敏度高、特异性强、评价:操作简便、灵敏度高、特异性强、克服以上两法缺点,可为确证试验。克服以上两法缺点,可为确证试验。南华大学南华大学 University of South China 南华大学南华大学 University of South China 【质量保证质量保证】:l检测前:尿标本应新鲜。检测前:尿标本应新鲜。l检测中:做好检测中:做好2种水平的室内质控。种水平的室内质控。l检测后:审核报告。检测后:审核报告。南华大学南华大学 University of South China 【参考值参考值】 阴性阴性南华大学南华大学 University of South China lRBC破坏:破坏:l生物因素:生物因素:l动植物所致溶血:动植物所致溶血:l微血管性溶血性贫血:微血管性溶血性贫血:l服氧化剂药物:服氧化剂药物:l免疫因素:免疫因素:【临床意义临床意义】:有助于血管内溶血疾病的诊断。:有助于血管内溶血疾病的诊断。南华大学南华大学 University of South China 七七. .亚硝酸盐检测亚硝酸盐检测 南华大学南华大学 University of South China 当当当当尿尿尿尿路路路路受受受受大大大大肠肠肠肠埃埃埃埃希希希希氏氏氏氏菌菌菌菌感感感感染染染染时时时时,可可可可将将将将硝硝硝硝酸酸酸酸盐盐盐盐还还还还原原原原成成成成亚亚亚亚硝硝硝硝酸酸酸酸盐盐盐盐,并并并并将将将将膜膜膜膜块块块块中中中中的的的的对对对对氨氨氨氨基基基基苯苯苯苯砷砷砷砷酸酸酸酸重重重重氮氮氮氮化化化化而而而而成成成成重重重重氮氮氮氮盐盐盐盐,后后后后者者者者再再再再与与与与N-N-N-N-萘萘萘萘基基基基乙乙乙乙二二二二胺胺胺胺偶联,使膜块呈现黄至红色的变化。偶联,使膜块呈现黄至红色的变化。偶联,使膜块呈现黄至红色的变化。偶联,使膜块呈现黄至红色的变化。【检测原理检测原理】:南华大学南华大学 University of South China 1.1.1.1.尿亚硝酸盐阳性检出率取决于三个条件:尿亚硝酸盐阳性检出率取决于三个条件:尿亚硝酸盐阳性检出率取决于三个条件:尿亚硝酸盐阳性检出率取决于三个条件: 1)1)1)1)感染细菌是否含有硝酸盐还原酶感染细菌是否含有硝酸盐还原酶 2)2)2)2)尿液中含适量硝酸盐尿液中含适量硝酸盐尿液中含适量硝酸盐尿液中含适量硝酸盐 3)3)3)3)尿液在膀胱中停留时间尿液在膀胱中停留时间尿液在膀胱中停留时间尿液在膀胱中停留时间4h4h4h4h 【方法学评价方法学评价】 2.2.灵敏度:灵敏度:0.3-0.6mg/L0.3-0.6mg/L南华大学南华大学 University of South China 3.3.3.3.假假假假阴阴阴阴性性性性:含含含含大大大大量量量量维维维维生生生生素素素素C C C C、使使使使用用用用利利利利尿尿尿尿剂剂剂剂、不不不不能能能能正正正正常常常常饮饮饮饮食食食食的的的的患患患患者者者者,体体体体内内内内缺缺缺缺乏乏乏乏硝硝硝硝酸酸酸酸盐盐盐盐,即即即即使使使使有有有有细细细细菌感染,也可出现阴性。菌感染,也可出现阴性。菌感染,也可出现阴性。菌感染,也可出现阴性。4.4.4.4.假阳性:陈旧尿、尿含非那吡啶。假阳性:陈旧尿、尿含非那吡啶。假阳性:陈旧尿、尿含非那吡啶。假阳性:陈旧尿、尿含非那吡啶。南华大学南华大学 University of South China l检测前:宜使用晨尿标本,及时送检,尽检测前:宜使用晨尿标本,及时送检,尽快测定。快测定。l检测中:做好检测中:做好2种水平室内质控,试带贮存种水平室内质控,试带贮存应干燥、避光、注意有效期。应干燥、避光、注意有效期。l检测后:审核报告,综合分析。检测后:审核报告,综合分析。【质量保证质量保证】:南华大学南华大学 University of South China 【参考值参考值】:阴性。:阴性。 南华大学南华大学 University of South China 【 临床意义临床意义 】 主要用于尿路感染的快速筛检。泌尿主要用于尿路感染的快速筛检。泌尿主要用于尿路感染的快速筛检。泌尿主要用于尿路感染的快速筛检。泌尿道感染常为阳性。结合显微镜检查和细菌道感染常为阳性。结合显微镜检查和细菌道感染常为阳性。结合显微镜检查和细菌道感染常为阳性。结合显微镜检查和细菌培养可提高对泌尿道感染的确诊率。培养可提高对泌尿道感染的确诊率。培养可提高对泌尿道感染的确诊率。培养可提高对泌尿道感染的确诊率。 南华大学南华大学 University of South China 八八. .白细胞酯酶白细胞酯酶南华大学南华大学 University of South China 粒粒粒粒细细细细胞胞胞胞胞胞胞胞含含含含有有有有酯酯酯酯酶酶酶酶,先先先先与与与与试试试试纸纸纸纸带带带带吲吲吲吲哚哚哚哚酚酚酚酚酯酯酯酯反反反反应应应应生生生生成成成成吲吲吲吲哚哚哚哚酚酚酚酚,后后后后者者者者与与与与重重重重氮氮氮氮盐盐盐盐形形形形成成成成紫紫紫紫红红红红色色色色缩缩缩缩合合合合物物物物。其其其其颜颜颜颜色深浅与细胞多少呈比例关系。色深浅与细胞多少呈比例关系。色深浅与细胞多少呈比例关系。色深浅与细胞多少呈比例关系。吲哚酯酚吲哚酯酚吲哚酯酚吲哚酯酚 酯酶酯酶酯酶酯酶 吲哚酚吲哚酚吲哚酚吲哚酚+ + + +重氮盐重氮盐重氮盐重氮盐氧化缩合氧化缩合氧化缩合氧化缩合 紫色化合物紫色化合物紫色化合物紫色化合物 【原理原理原理原理】:白细胞酯酶法:白细胞酯酶法:白细胞酯酶法:白细胞酯酶法南华大学南华大学 University of South China 1.1.1.1.灵灵灵灵敏敏敏敏度度度度与与与与特特特特异异异异性性性性:灵灵灵灵敏敏敏敏度度度度5-15/l5-15/l;特特特特异异异异性性性性较较较较强强强强。本本本本法法法法主主主主要要要要检检检检测测测测粒粒粒粒细细细细胞胞胞胞酯酯酯酯酶酶酶酶,不不不不与与与与淋淋淋淋巴巴巴巴细细细细胞反应。胞反应。胞反应。胞反应。 2.2.2.2.假假假假阳阳阳阳性性性性:发发发发生生生生率率率率较较较较高高高高,主主主主要要要要见见见见于于于于尿尿尿尿标标标标本本本本被被被被阴阴阴阴道道道道分分分分泌泌泌泌物物物物污污污污染染染染,也也也也可可可可见见见见尿尿尿尿中中中中含含含含甲甲甲甲醛醛醛醛、大大大大量量量量胆胆胆胆红红红红素、素、素、素、非那吡啶等。非那吡啶等。非那吡啶等。非那吡啶等。 3.3.3.3.假阴性:高比重尿,尿中含头孢菌素、假阴性:高比重尿,尿中含头孢菌素、假阴性:高比重尿,尿中含头孢菌素、假阴性:高比重尿,尿中含头孢菌素、 庆庆庆庆大霉素、维生素大霉素、维生素大霉素、维生素大霉素、维生素C C C C等。等。等。等。 【方法学评价方法学评价】南华大学南华大学 University of South China 【质量控制质量控制】检测前:检测前:尿液标本必须新鲜,留尿后应立即测定,以尿液标本必须新鲜,留尿后应立即测定,以免白细胞破坏,导致干化学法与镜检结果差异过大;免白细胞破坏,导致干化学法与镜检结果差异过大;检测中:规范操作和质控;检测中:规范操作和质控;检测后:结合临床,综合分析酯酶、亚硝酸盐结果,检测后:结合临床,综合分析酯酶、亚硝酸盐结果,必要时进行显微镜镜检,以提高尿路感染诊断的可靠必要时进行显微镜镜检,以提高尿路感染诊断的可靠性。性。南华大学南华大学 University of South China 【参考值参考值参考值参考值】:阴性:阴性:阴性:阴性南华大学南华大学 University of South China 【 临床意义临床意义 】 用于诊断泌尿道感染。肾移植后发生排用于诊断泌尿道感染。肾移植后发生排用于诊断泌尿道感染。肾移植后发生排用于诊断泌尿道感染。肾移植后发生排斥反应时,尿中以淋巴细胞为主,因此白细斥反应时,尿中以淋巴细胞为主,因此白细斥反应时,尿中以淋巴细胞为主,因此白细斥反应时,尿中以淋巴细胞为主,因此白细胞酯酶检测呈阴性。此时,因以镜检白细胞胞酯酶检测呈阴性。此时,因以镜检白细胞胞酯酶检测呈阴性。此时,因以镜检白细胞胞酯酶检测呈阴性。此时,因以镜检白细胞结果为准。结果为准。结果为准。结果为准。南华大学南华大学 University of South China 九、维生素九、维生素C C检查检查南华大学南华大学 University of South China 【原理原理】:采用还原法:采用还原法 VitC具有具有1,2-烯二醇还原性基团,在酸性条件下,能将烯二醇还原性基团,在酸性条件下,能将氧化态粉红色的氧化态粉红色的2,6-二氯酚靛酚染料还原为无色的二氯酚靛酚染料还原为无色的2,6-二氯二氯二对酚胺。发生由二对酚胺。发生由绿绿或或深蓝深蓝至至粉红粉红的变化,呈色深浅与维的变化,呈色深浅与维生素生素C含量成正比。含量成正比。南华大学南华大学 University of South China 【方法学评价方法学评价】1.1.灵敏度和特异性:试带法只能检测还原型抗灵敏度和特异性:试带法只能检测还原型抗坏血酸,灵敏度一般为坏血酸,灵敏度一般为50-100mg/L50-100mg/L。2.2.假阳性:见于龙胆酸、假阳性:见于龙胆酸、L-L-多巴或尿多巴或尿pHpH大于大于4.04.0时的内源性酚及巯基化合物、半胱氨酸和时的内源性酚及巯基化合物、半胱氨酸和硫代硫酸钠等。硫代硫酸钠等。3.3.假阴性:碱性尿液(因维生素假阴性:碱性尿液(因维生素C C易分解)。易分解)。南华大学南华大学 University of South China 【质量保证质量保证】l检测前:无需特殊处理。检测前:无需特殊处理。l检测中:作好质控。检测中:作好质控。l检测后:仔细审核、综合分析维生素检测后:仔细审核、综合分析维生素C是否对是否对隐血隐血/血红蛋白、葡萄糖、亚硝酸盐等结果产生血红蛋白、葡萄糖、亚硝酸盐等结果产生影响。影响。南华大学南华大学 University of South China 【参考值参考值】:阴性:阴性南华大学南华大学 University of South China ( 干化学法检测干化学法检测Vit C采用还原法,尿液中采用还原法,尿液中Vit C的含的含量的高低对隐血量的高低对隐血/血红蛋白、胆红素、葡萄糖、亚硝酸血红蛋白、胆红素、葡萄糖、亚硝酸盐等可产生负干扰,检测盐等可产生负干扰,检测Vit C在于提示其他检测项目在于提示其他检测项目的准确性,防止假阴性出现。的准确性,防止假阴性出现。【临床意义临床意义】南华大学南华大学 University of South China 尿液化学检查教学视频尿液化学检查教学视频南华大学南华大学 University of South China 尿尿试试带带化化学学检检查查内内容容南华大学南华大学 University of South China 人绒毛膜促性腺激素检查人绒毛膜促性腺激素检查 十一、其他化学成分检查十一、其他化学成分检查南华大学南华大学 University of South China 人绒毛膜促性腺激素人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG):是由胎盘合体滋养层细是由胎盘合体滋养层细胞分泌的一种具有促进性腺发育的糖蛋白激胞分泌的一种具有促进性腺发育的糖蛋白激素,其对促性腺激素受体具有高度的亲和性。素,其对促性腺激素受体具有高度的亲和性。 南华大学南华大学 University of South China 妊娠妊娠1周周时,时,HCG即可迅速升高;即可迅速升高; 受孕受孕7天天后,可用后,可用ELISA法检出尿液中的法检出尿液中的HCG; 第第8-10孕周孕周达到高峰;达到高峰; 至孕期第至孕期第4个月个月始降至中等水平,并一直始降至中等水平,并一直维持到妊娠末期。(图维持到妊娠末期。(图1)正常孕妇正常孕妇HCG的变化:的变化:南华大学南华大学 University of South China 图图1 正常妊娠妇女血清中正常妊娠妇女血清中HCG平均值平均值南华大学南华大学 University of South China HCG结构:结构:由由亚基和亚基和亚基组成的糖蛋白激素;亚基组成的糖蛋白激素;单个亚基不具有生物活性,当连接成完整化单个亚基不具有生物活性,当连接成完整化合物时始具活性,分子量约为合物时始具活性,分子量约为4.7万;万;亚基不具特异性,亚基不具特异性, 其氨基酸数量及其排列顺其氨基酸数量及其排列顺序与序与FSH、LH、TSH的亚基几乎相同。的亚基几乎相同。亚基具有特异性。亚基具有特异性。南华大学南华大学 University of South China 其主要功能就是刺激黄体,有利于雌其主要功能就是刺激黄体,有利于雌激素和黄体酮持续分泌,以促进子宫蜕膜激素和黄体酮持续分泌,以促进子宫蜕膜的形成,使胎盘生长成熟。的形成,使胎盘生长成熟。HCG功能:功能:南华大学南华大学 University of South China 1. 酶联免疫吸附试验(酶联免疫吸附试验(ELISA)原理:双抗体夹心法。原理:双抗体夹心法。评价:操作简便,灵敏度高,可半定量,特评价:操作简便,灵敏度高,可半定量,特异性高,为异性高,为HCG检查的筛检试验。检查的筛检试验。【检测方法检测方法】南华大学南华大学 University of South China 2. 单克隆抗体胶体金试验单克隆抗体胶体金试验原理:原理:南华大学南华大学 University of South China 胶体金标记鼠抗胶体金标记鼠抗人人-hCG单抗单抗羊抗人羊抗人hCG抗抗体体羊抗鼠羊抗鼠IgG抗体抗体免疫胶体金法免疫胶体金法阴性阴性对照阳性阳性南华大学南华大学 University of South China 判读结果:判读结果:阳性:试带可显示上、下两阳性:试带可显示上、下两条紫红色线条;阴性:标本只显出上边条紫红色线条;阴性:标本只显出上边一条紫红色线。一条紫红色线。评价:评价:操作简便快速、结果可靠、特异操作简便快速、结果可靠、特异性强、灵敏度高、是当前公认性强、灵敏度高、是当前公认最理想的最理想的早早孕诊断法早早孕诊断法。南华大学南华大学 University of South China 3.胶乳凝集抑制试验胶乳凝集抑制试验原理原理:(略略)评价:操作简便,灵敏度低,适合大批标本检查,评价:操作简便,灵敏度低,适合大批标本检查,但因特异性差,不能定量,目前已少用。但因特异性差,不能定量,目前已少用。南华大学南华大学 University of South China 4.检孕卡法:检孕卡法:原理:同胶乳凝集抑制试验原理:同胶乳凝集抑制试验评价:一般早孕诊断,灵敏度低。评价:一般早孕诊断,灵敏度低。南华大学南华大学 University of South China 5.放射免疫试验(放射免疫试验(RIA)原理:竞争抑制。原理:竞争抑制。评价:灵敏度高、可半定量,检测血清评价:灵敏度高、可半定量,检测血清hCG准确稳定,但操作繁琐,且存在放射准确稳定,但操作繁琐,且存在放射性污染,不适用于临床常规检查。性污染,不适用于临床常规检查。南华大学南华大学 University of South China 6.电化学发光免疫法:(电化学发光免疫法:(ECLIA)原理原理:(略略)评价:评价:操作简便、快速、灵敏度高,可操作简便、快速、灵敏度高,可定量检测。定量检测。南华大学南华大学 University of South China 南华大学南华大学 University of South China 【质量保证质量保证】:l检测前:宜采集首次晨尿检测,否则尿液稀释检测前:宜采集首次晨尿检测,否则尿液稀释可呈假阴性;严重血尿、菌尿标本不宜测定可呈假阴性;严重血尿、菌尿标本不宜测定hCG;育龄期妇女应避开排卵期;育龄期妇女应避开排卵期LH增高引起的增高引起的干扰。干扰。l检测中:每次测定应设置阴、阳性对照。检测中:每次测定应设置阴、阳性对照。l检测后:认真审核报告。检测后:认真审核报告。南华大学南华大学 University of South China 【参考值参考值】:非孕妇健康人:阴性。非孕妇健康人:阴性。半定量:半定量:2ng/L。正常妊娠妇女:阳性正常妊娠妇女:阳性南华大学南华大学 University of South China 【临床意义临床意义】 诊断早期妊娠诊断早期妊娠 流产诊断和监测流产诊断和监测 先兆流产 不全流产异位妊娠的诊断异位妊娠的诊断滋养细胞肿瘤诊断与治疗监测滋养细胞肿瘤诊断与治疗监测肿瘤标志物肿瘤标志物
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