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背景资料 显微镜的发明和发展显微镜的发明和发展:伽利略自己制造出了望远镜,也着手设计显微镜。并对小动物的感觉器官进行了观察。真正用显微镜发现有机体内部世界的是马尔比基、列文虎克、胡克和斯旺麦丹。1660年,马尔比基用显微镜发现了毛细血管,观察了许多动物呼吸系统,还发展了胚胎学研究。1675年,列文虎克用自制的只有一个透镜的显微镜观察到了原生动物。他还最早发现了红血球的存在。1683年,他还发现了细菌。1665年,物理学家胡克用自己制造了复式的显微镜,观察软木塞薄片,将软木上的那些小孔称为“细胞”。电子显微镜是利用高速运动的电子束代替光波的一种显微镜。大大提高了显微镜的分辨本领,能观察物质极为微细的结构形态。显微镜技术l光学显微镜:-普通光学显微镜:分辨力0.2m,必须染色-相差显微镜:利用细胞内非均一性造成的光相位差,将其转变为亮度差,可观察活细胞结构及其内部运动-荧光显微镜:利用细胞内不同物质对紫外线产生不同颜色荧光的现象,可利用荧光染料-暗视野显微镜:利用侧向斜射光线,使之在物体上散射进入物镜,可提高显微镜的分辨力达到0.20.04 m-偏光显微镜:利用偏振光对一定方向的物体照明,可观察丝状标本的细微结构和鉴别细胞中化学成分显微镜技术(2)l电子显微镜l扫描电子显微镜:电子枪产生的电子在电磁透镜中汇聚成电子束,由扫描线圈控制扫描样品表面,分辨力610nm,立体感强,样品可移动,便于多向观察l透射电子显微镜:分辨力0.20.25nm(见P11图)l超高压电子显微镜:电子束电压500V,穿透力强,分辨力高可观察较厚样品l扫描隧道电子显微镜:利用真空隧道中的量子现象,显示物体表面的原子结构了解显微镜了解显微镜 的基本结构的基本结构1101142376985目镜目镜物镜物镜镜筒镜筒镜臂镜臂镜座镜座载物台载物台压片夹压片夹反光镜反光镜遮光器遮光器粗准焦螺旋粗准焦螺旋细准焦螺旋细准焦螺旋转换器转换器12 安装安装 装配适当的物镜和目镜。装配适当的物镜和目镜。 低倍镜的使用低倍镜的使用 必须先用低倍镜,视野大,容易发现目标和确定观察部位。必须先用低倍镜,视野大,容易发现目标和确定观察部位。 (1)检查检查 有无损坏。有无损坏。 (2)准备准备 前方略偏左侧。将载物台下降。再旋转物镜转换器,将低倍镜对前方略偏左侧。将载物台下降。再旋转物镜转换器,将低倍镜对准载物台中央的通光孔准载物台中央的通光孔(可听到可听到“咔哒咔哒”声声)。 (3)对光对光 打开光圈,上升聚光器;用内置光源时,使用光亮调节器调光。打开光圈,上升聚光器;用内置光源时,使用光亮调节器调光。 (4)放标本片放标本片 标本片的盖片朝上,观察部分对准光孔的正中央。标本片的盖片朝上,观察部分对准光孔的正中央。 (5)调节焦距调节焦距 侧面注视物镜镜头,粗调节钮,镜台上升,低倍镜头与玻片侧面注视物镜镜头,粗调节钮,镜台上升,低倍镜头与玻片间的距离约间的距离约5mm,从目镜里观察视野,左手慢慢转动粗调节钮,镜台缓,从目镜里观察视野,左手慢慢转动粗调节钮,镜台缓缓下降,视野中出现物像。细调节钮至物像清晰。缓下降,视野中出现物像。细调节钮至物像清晰。 (6)计算倍数计算倍数 显微镜的安装和使用显微镜的安装和使用高倍镜的用法 (1)低倍镜找到清晰物像。低倍镜找到清晰物像。 (2)将需要观察的部分移到视野的中央。将需要观察的部分移到视野的中央。 (3)眼睛从侧面注视物镜,用手移动转换器,换高倍镜。眼睛从侧面注视物镜,用手移动转换器,换高倍镜。 (4)眼睛向目镜内观察,同时微微上下转动细调节钮,眼睛向目镜内观察,同时微微上下转动细调节钮,直至视野内看到清晰的物像为止。直至视野内看到清晰的物像为止。油镜的使用方法(1) 先用低倍物镜观察标本的概况。先用低倍物镜观察标本的概况。(2) 更换高倍物镜,视野中央。更换高倍物镜,视野中央。(3) 镜台缓缓下降约镜台缓缓下降约1.5 cm,再把油镜转到工作位置。,再把油镜转到工作位置。(4) 在盖玻片上所要观察的位置滴一小滴香柏油,细心拧动粗调螺旋,使镜台上升。在盖玻片上所要观察的位置滴一小滴香柏油,细心拧动粗调螺旋,使镜台上升。从侧面观察物镜前端与标本的距离,油滴接触,慢慢提升镜台,至物镜前端接近从侧面观察物镜前端与标本的距离,油滴接触,慢慢提升镜台,至物镜前端接近而没有碰到盖玻片为止。这步操作要特别小心,防止油镜压碎标本或损坏油镜而没有碰到盖玻片为止。这步操作要特别小心,防止油镜压碎标本或损坏油镜(油油镜的工作距离约镜的工作距离约0.2 mm)。(5) 眼睛从目镜中观察,拧动细调螺旋,使镜台慢慢下降到能看清标本。这步操作要眼睛从目镜中观察,拧动细调螺旋,使镜台慢慢下降到能看清标本。这步操作要特别注意不要把细调螺旋的方向拧错,以防压碎标本。特别注意不要把细调螺旋的方向拧错,以防压碎标本。(6) 观察完毕后,下降镜台约观察完毕后,下降镜台约1 cm,把油镜转离光轴,及时清洁。擦镜纸擦,把油镜转离光轴,及时清洁。擦镜纸擦12次,次,去油,二甲苯滴湿的擦镜纸擦去油,二甲苯滴湿的擦镜纸擦2次,擦镜纸擦次,擦镜纸擦1次。顺镜头直径方向,不圆周擦。次。顺镜头直径方向,不圆周擦。 (7) 复原复原 聚光器下降约聚光器下降约1 cm 。把物镜转离光轴。下降载物台,载物台上标本移动器。把物镜转离光轴。下降载物台,载物台上标本移动器移到适当位置,关闭内置光源。移到适当位置,关闭内置光源。p是低倍镜还是高倍镜的视野大、视野明亮?为什么? 低倍镜的视野大,通过的光多,教亮,放大的倍数小; 高倍镜的视野小,通过的光少,较暗,放大的倍数大。p为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察? 如果直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此,需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察。p用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺旋行不行? 不行。用高倍镜观察,只需微调即可。转动粗准焦螺旋,容易压坏玻片。p如何判断细胞和气泡? (一一)显微镜的使用显微镜的使用1. 观察前的准备工作 (1)观察者要养成显微镜镜检的工作习惯,观察时要双 眼同时睁开,一边观察一边进行记录或描绘。 (2)观察时所用的材料、药品和各种器具要预先准备好。 (3)显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否完整 和正常,并对载物台、目镜、物镜以及聚光器上端透 镜进行必要的清洁工作。然后进行合轴调节。瞳 距 调 节2. 显微镜的调节屈 光 度 调 节粗 调 松 紧 调 节 旋 钮聚 光 镜 中 心 调 节 光轴中心调节光轴中心调节光轴中心调节光轴中心调节螺钉螺钉螺钉螺钉 视场视场视场视场光栏光栏光栏光栏 孔径孔径孔径孔径光栏光栏光栏光栏10X10X10X10X物物物物镜镜镜镜 标标标标本本本本 聚光镜升降聚光镜升降聚光镜升降聚光镜升降旋钮旋钮旋钮旋钮孔径光栏调节N.A聚= =(0 0.6-06-0.8 8)N.A物操作步骤如下操作步骤如下: : (1 (1)可变光栏的中心对准聚光镜的中心。如果可变光栏的水)可变光栏的中心对准聚光镜的中心。如果可变光栏的水平是固定的,则装配时已保证它与聚光镜合轴,不必调整平是固定的,则装配时已保证它与聚光镜合轴,不必调整; ;如果可如果可变光栏的水平位置可以移动,则应把可变光栏关到最小,使它的变光栏的水平位置可以移动,则应把可变光栏关到最小,使它的中心孔对准聚光镜下方的透镜中心。中心孔对准聚光镜下方的透镜中心。 (2) (2)载物台上放置观察标本,把聚光器上升到它上端透镜平载物台上放置观察标本,把聚光器上升到它上端透镜平面稍低于载物台平面的高度,并将它的可变光栏开到最大,用低面稍低于载物台平面的高度,并将它的可变光栏开到最大,用低倍物镜,进行调焦到能看见标本,可调反射镜使视野得到最亮和倍物镜,进行调焦到能看见标本,可调反射镜使视野得到最亮和最均匀最均匀 的照明,或把光栏关小,最亮的照明区正处在视野的中央。的照明,或把光栏关小,最亮的照明区正处在视野的中央。 (3) (3)转到高倍镜,并调焦到看清标本,然后去掉标本,拔出转到高倍镜,并调焦到看清标本,然后去掉标本,拔出目镜,眼睛直接向镜筒观察,并把可变目镜,眼睛直接向镜筒观察,并把可变 光栏关小,看其亮点是否光栏关小,看其亮点是否在视野中心,如果不是,就要转动聚光器的调节螺旋,把亮点调在视野中心,如果不是,就要转动聚光器的调节螺旋,把亮点调到视野中到视野中 央,再慢慢开启可变光栏,使视野看到光栏边缘和聚光央,再慢慢开启可变光栏,使视野看到光栏边缘和聚光镜的边缘相接为止。镜的边缘相接为止。3. 观察操作:观察操作:(1) (1) 低、高倍镜的使用低、高倍镜的使用: : 先把低倍的物镜用粗调焦螺旋下降至离盖玻片先把低倍的物镜用粗调焦螺旋下降至离盖玻片0.5cm0.5cm处,然后一边观察视野一边上升物镜,直至看到图像,再将标本移处,然后一边观察视野一边上升物镜,直至看到图像,再将标本移到视野中心,用细调焦螺旋把物镜调至最清晰处,若要用高倍镜观察时,到视野中心,用细调焦螺旋把物镜调至最清晰处,若要用高倍镜观察时,把所要进一步放大观察的部位移至视野中央,直接顺时针转换成高倍物镜,把所要进一步放大观察的部位移至视野中央,直接顺时针转换成高倍物镜,然后用细调焦螺旋调焦,至看清物像。然后用细调焦螺旋调焦,至看清物像。 其他常用的探究器具其他常用的探究器具 观察器具观察器具:放大镜等其他常用的探究器具其他常用的探究器具 解剖工具解剖工具: 解剖盘 解剖剪 镊 子 刀 片其他常用的探究器具其他常用的探究器具计量器具计量器具: 量筒 天平其他常用的探究器具其他常用的探究器具加热器具加热器具: 酒精灯 三脚架 石棉网其他常用的探究器具其他常用的探究器具通用器具通用器具: 烧杯 试管 试剂瓶 培养皿 研钵 滴管 药匙使用常用探究器具注意事项使用常用探究器具注意事项1、要注意安全,不要用手触摸刀口,也不要碰到他人;2、不要用手直接接触被称量的物体;3、加热时,不要离开加热装置,加热结束后要及时、正确地切断热源,不要用手直接接触被加热的玻璃器具。;4、实验结束后,要及时作清理工作。临时装片的制作临时装片的制作玻片标本l按保存时间长短按保存时间长短+临时玻片标本临时玻片标本+永久玻片标本永久玻片标本l按取材方式按取材方式+切片切片+涂片涂片+装片装片p制作临时装片时,取了材料再滴清水,还是滴了清水再取材料先滴清水再取材料p在观察前,要先对光,需要转动物镜对准通光孔。用于对光的物镜应该是低倍物镜还是高倍物镜?低倍物镜p对光再放玻片标本,还是放了玻片标本再对光?先对光,再放标本p看到细胞的物象在视野左上角,在转高倍之前,要把这个物象移到视野的中央,该向哪个方向移动?向左上方移动
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