1HCY之检测与发病机理之检测与发病机理2024/9/252前前 言言同型半胱氨酸同型半胱氨酸（homocysteine, Hcyhomocysteine, Hcy）是一）是一种人体内的含硫氨基酸，为蛋氨酸和半胱氨种人体内的含硫氨基酸，为蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的重要中间产物。酸代谢过程中的重要中间产物。新热点新热点: :许多学者认为血液许多学者认为血液HcyHcy升高已成为升高已成为动动脉粥样硬化脉粥样硬化发生的一个独立危险因子，也成发生的一个独立危险因子，也成为基础医学和临床医学研究的新热点。为基础医学和临床医学研究的新热点。新理念新理念: :伴有血浆伴有血浆HcyHcy升高升高( ( 10umol/L)10umol/L)的原的原发性高血压定义为发性高血压定义为H H型高血压型高血压。22024/9/253 同型半胱氨酸（同型半胱氨酸（HcyHcy）能够让）能够让四分之三的高血压患者脑卒中四分之三的高血压患者脑卒中死亡风险增加死亡风险增加1212倍。倍。32024/9/254一、一、HcyHcy的的存在形式存在形式有研究发现在正常人和高有研究发现在正常人和高HcyHcy血症患者血浆中，血症患者血浆中，HcyHcy大部分（大部分（7070）是与蛋白质结合，血浆）是与蛋白质结合，血浆中与中与HcyHcy结合的是白蛋白。结合的是白蛋白。HcyHcy在血液中的存在方式在血液中的存在方式: : 部分以同型半胱氨部分以同型半胱氨酸酸- -半胱氨酸二硫化物存在，微量以还原型半胱氨酸二硫化物存在，微量以还原型同型半胱氨酸存在，大部分通过二硫键与白同型半胱氨酸存在，大部分通过二硫键与白蛋白结合而存在。蛋白结合而存在。42024/9/255二、影响血液二、影响血液HcyHcy水平的因素水平的因素1、遗传因素：、遗传因素：C667T点突变可引起点突变可引起Hcy升高。升高。CBS基因多态性。基因多态性。蛋氨酸合成酶基因多态性。蛋氨酸合成酶基因多态性。52024/9/2562、性别与年龄：、性别与年龄：国内外不少研究发现，国内外不少研究发现，Hcy随年龄增长而随年龄增长而升高，而且男性升高，而且男性女性。女性在绝经前的水女性。女性在绝经前的水平较低，绝经后显著升高，认为其机制可平较低，绝经后显著升高，认为其机制可能与雌激素水平的变化有关。能与雌激素水平的变化有关。6二、影响血液二、影响血液Hcy水平的因素水平的因素2024/9/2573、营养因素：、营养因素：VitB6、VitB12、叶酸是、叶酸是Hcy代谢辅酶，它们的代谢辅酶，它们的水平与水平与Hcy水平呈负相关，摄入不足时，上述三个水平呈负相关，摄入不足时，上述三个酶活性下降，则酶活性下降，则Hcy升高。升高。饮酒：长期饮酒可引起肝细胞蛋氨酸合成酶活性饮酒：长期饮酒可引起肝细胞蛋氨酸合成酶活性下降，从而造成下降，从而造成Hcy血症。血症。饮食中蛋氨酸含量过高：有报道认为高动物蛋白、饮食中蛋氨酸含量过高：有报道认为高动物蛋白、低植物蛋白饮食可能是低植物蛋白饮食可能是Hcy血症的危险因素之一。血症的危险因素之一。7二、影响血液二、影响血液Hcy水平的因素水平的因素2024/9/258三、同型半胱氨酸致病机理三、同型半胱氨酸致病机理1 1、内皮毒性作用：、内皮毒性作用： HcyHcy可引起内皮细胞损伤，尤其合并高血压时更可引起内皮细胞损伤，尤其合并高血压时更易受损，并且破坏血管壁弹力层和胶原纤维。易受损，并且破坏血管壁弹力层和胶原纤维。2 2、刺激血管平滑肌细胞增生：、刺激血管平滑肌细胞增生： HcyHcy可直接诱导血管平滑肌细胞增殖。可直接诱导血管平滑肌细胞增殖。82024/9/2593 3、致血栓作用：、致血栓作用： HcyHcy可促进血栓调节因子的表达，激活蛋可促进血栓调节因子的表达，激活蛋白白C C和凝血因子和凝血因子、，血小板内前列腺，血小板内前列腺素合成增加，从而促进血小板粘附和聚素合成增加，从而促进血小板粘附和聚集。集。9三、同型半胱氨酸致病机理三、同型半胱氨酸致病机理2024/9/2510 HcyHcy通过多种途径损伤血管，它损伤血管内皮细胞同时刺通过多种途径损伤血管，它损伤血管内皮细胞同时刺激血管平滑肌细胞生长，二者导致的损伤阻塞血流通路；激血管平滑肌细胞生长，二者导致的损伤阻塞血流通路；HcyHcy还破坏正常凝血机制；增加血栓形成引起心脏病发作及中风还破坏正常凝血机制；增加血栓形成引起心脏病发作及中风 。10三、同型半胱氨酸致病机理三、同型半胱氨酸致病机理2024/9/25114 4、脂肪、糖、蛋白代谢紊乱：、脂肪、糖、蛋白代谢紊乱： HcyHcy可促进脂质沉积于动脉壁，泡沫细胞增可促进脂质沉积于动脉壁，泡沫细胞增加，还可改变动脉壁糖蛋白分子纤维化结加，还可改变动脉壁糖蛋白分子纤维化结构，促进斑块钙化。构，促进斑块钙化。11三、同型半胱氨酸致病机理三、同型半胱氨酸致病机理2024/9/25125 5、干扰谷胱甘肽的合成、干扰谷胱甘肽的合成 ： 谷胱甘肽是一种重要的高氧化剂，它能防谷胱甘肽是一种重要的高氧化剂，它能防止很多细胞成分的氧化互相作用，对血管止很多细胞成分的氧化互相作用，对血管产生保护作用。产生保护作用。HcyHcy干扰谷胱甘肽的合成，干扰谷胱甘肽的合成，从而对机体造成危害从而对机体造成危害 。12三、同型半胱氨酸致病机理三、同型半胱氨酸致病机理2024/9/25136 6、影响体内的转甲基化反应、影响体内的转甲基化反应 ： HcyHcy浓度的升高会影响体内许多物质的甲浓度的升高会影响体内许多物质的甲基化过程，如核酸（基化过程，如核酸（DNADNA和和RNARNA）、蛋白质、）、蛋白质、髓磷脂、多糖、胆碱和儿茶酚胺类的甲基髓磷脂、多糖、胆碱和儿茶酚胺类的甲基化；甲基化能力的降低影响细胞的发育及化；甲基化能力的降低影响细胞的发育及分化，这可能是分化，这可能是HcyHcy致病的关键因素。致病的关键因素。 13三、同型半胱氨酸致病机理三、同型半胱氨酸致病机理2024/9/2514四、四、HcyHcy的测定方法的测定方法 同位素法：同位素法：该方法灵敏度高，特异性强，该方法灵敏度高，特异性强，但操作繁琐且有放射污染，未能推广使用。但操作繁琐且有放射污染，未能推广使用。色谱法：色谱法：灵敏度、特异性好，但仪器价格灵敏度、特异性好，但仪器价格昂贵而不能推广。昂贵而不能推广。 荧光偏振免疫测定：荧光偏振免疫测定：此法需要专门的荧光此法需要专门的荧光偏光免疫检测仪。偏光免疫检测仪。 142024/9/2515ELISAELISA：对仪器要求不高，易普及，但结果对仪器要求不高，易普及，但结果准确性相对较差。准确性相对较差。放射免疫法：放射免疫法：结果准确，但有放射性污染，结果准确，但有放射性污染，很少使用。很少使用。循环酶法：循环酶法：快速、简便、灵敏度高。可上快速、简便、灵敏度高。可上全自动生化分析仪，适用大批标本，临床全自动生化分析仪，适用大批标本，临床应用广泛。应用广泛。15四、四、Hcy的测定方法的测定方法 2024/9/2516HcyHcy循环酶法实验参数的设计循环酶法实验参数的设计 实验参数根据分析仪的不同有所差异，可要实验参数根据分析仪的不同有所差异，可要求试剂供应商提供相应的实验参数。求试剂供应商提供相应的实验参数。下面列举下面列举OLYMPUSOLYMPUS系列系列的实验参数：的实验参数： Sample VolumeSample Volume（样品体积）：（样品体积）： 9ul9ul R1 Volume R1 Volume （试剂（试剂1 1体积）：体积）：167ul167ul R2 Volume R2 Volume （试剂（试剂2 2体积）：体积）： 45ul45ul Measure Wave1 Measure Wave1（主波长）（主波长） ：340nm340nm Measure Wave2 Measure Wave2（副波长）（副波长） ：700nm700nm162024/9/2517METHOD METHOD （反应类型）（反应类型） ： END END Method PointMethod Point（反应点）：（反应点）： 20272027Reagent OD LimitReagent OD Limit（吸光度范围）：（吸光度范围）：Dynamic Range (Dynamic Range (反应范围反应范围) )： 350350Calibration Type Calibration Type （定标数）：（定标数）： 1 1点点Unit Unit （单位）：（单位）： umol/Lumol/L17Hcy循环酶法实验参数的设计循环酶法实验参数的设计2024/9/2518五、同型半胱氨酸的临床应用五、同型半胱氨酸的临床应用182024/9/25191 1、心血管病防治、心血管病防治（1）HCY升高与动脉粥样硬化升高与动脉粥样硬化(AS)的关系：的关系： 1969年就曾有人从尸检中发现年就曾有人从尸检中发现2例血浆例血浆Hcy浓度超过正常人几十倍的病儿存在广泛浓度超过正常人几十倍的病儿存在广泛的动脉粥样硬化和动脉血栓。临床上发现高的动脉粥样硬化和动脉血栓。临床上发现高胱氨酸尿症病人早年多因全身动脉粥样硬化胱氨酸尿症病人早年多因全身动脉粥样硬化和血栓形成死于脑梗塞和心肌梗塞，这与血和血栓形成死于脑梗塞和心肌梗塞，这与血中中Hcy升高有关。升高有关。192024/9/2520 有学者在动物实验中观察到注射有学者在动物实验中观察到注射HcyHcy后引起高后引起高HcyHcy血症，血症，2323个月后发生动脉粥样硬化个月后发生动脉粥样硬化 。认为高认为高HcyHcy血症是发生动脉粥样硬化的独立危血症是发生动脉粥样硬化的独立危险因素。险因素。20（1）HCY升高与动脉粥样硬化升高与动脉粥样硬化(AS)的关系的关系：2024/9/2521（2 2）HcyHcy水平与心血管疾病的危险性水平与心血管疾病的危险性通过血管内超声观察通过血管内超声观察AS斑块情况斑块情况，观察到，观察到血浆血浆HCY浓度浓度8umol/L时，斑块明显增大（，）时，斑块明显增大（，）,表明与冠状动脉病变程度呈表明与冠状动脉病变程度呈正相关正相关。*Mayer E L, Robinson K, Jacobsen D W. et al .Low plasm homocyseine levels predic reduced atheroma burden in patient undergoing coronary intervention:Evideence from intravascular ultrsund.J Am Coll Cardiol,1995,25(special issum):81 A.242024/9/2522冠动脉病变与血浆冠动脉病变与血浆HCYHCY浓度的关系浓度的关系冠动脉造影冠动脉造影例数例数年龄年龄血浆血浆HcyHcyP P值值正常正常202050.150.12.610.60.450.02单支病变单支病变3045.11.615.51.830.16双支病变双支病变3555.71.617.82.0515umolHcy15umolL L为高为高HcyHcy血症，普通血症，普通人群血浆人群血浆HeyHey水平升高者只有不到水平升高者只有不到5 5 ，而，而在脑卒中患者中可达在脑卒中患者中可达30403040 。282024/9/2526 美国研究表明：美国研究表明： HcyHcy的升高是与中风有重要关联的危险因子。的升高是与中风有重要关联的危险因子。美国最新的数据显示中年后期男性中风发美国最新的数据显示中年后期男性中风发病率，处于病率，处于55-6455-64这个年龄段的男性这个年龄段的男性相对于相对于45-5445-54年龄段的男性而言，前者患中风的几年龄段的男性而言，前者患中风的几率是后者的三倍。率是后者的三倍。中风和脑血管疾病杂志2008；17；165-168“美国中年后期的男性发生中风的相关因子急剧增加”292024/9/2527脑中风与血浆脑中风与血浆HcyHcy浓度的关系浓度的关系例例 数数血浆血浆HcyHcy P P值值 危危 险险 对对 照照1832183212.812.8/ / /中中 风风1823182314.714.70.001 7676岁）追岁）追踪调查踪调查8 8年年HcyHcy值值，结果：，结果：HcyHcy超出超出14mol/L14mol/L，患老年性痴呆的危险性增加倍，患多异古，患老年性痴呆的危险性增加倍，患多异古怪痴呆发生率增加倍。怪痴呆发生率增加倍。英国英国OPTIMAOPTIMA项目研究发现：项目研究发现： HcyHcy水平大于的水平大于的病人，三年后随访，发现他们大脑颞叶（包病人，三年后随访，发现他们大脑颞叶（包括海马）快速萎缩。括海马）快速萎缩。312024/9/25293 3、糖尿病及并发症防治、糖尿病及并发症防治国内外大量研究结果显示，血浆国内外大量研究结果显示，血浆HcyHcy水平可水平可作为作为2-2-型糖尿病患者患大血管疾病的独立型糖尿病患者患大血管疾病的独立危险因素。危险因素。监测糖尿病患者监测糖尿病患者HcyHcy水平有利于对其预后的水平有利于对其预后的评估。评估。HcyHcy升高在糖尿病伴肾脏、视网膜及升高在糖尿病伴肾脏、视网膜及血管并发症的患者更为严重血管并发症的患者更为严重高高HcyHcy血症也能促进糖尿病微血管并发症的血症也能促进糖尿病微血管并发症的发生与发展。发生与发展。322024/9/25304 4、CRFCRF并发症防治并发症防治慢性肾功能衰竭（慢性肾功能衰竭（CRFCRF）患者普遍有高）患者普遍有高HcyHcy血症，其发生率是正常人血症，其发生率是正常人3333倍。倍。尿毒症时一方面肝脏尿毒症时一方面肝脏蛋氨酸腺苷转移酶活蛋氨酸腺苷转移酶活性性升高，导致升高，导致S-S-腺苷蛋氨酸水平升高；另腺苷蛋氨酸水平升高；另一方面肾功能下降使一方面肾功能下降使HcyHcy代谢的必需产物代谢的必需产物丝氨酸合成减少，导致丝氨酸合成减少，导致HcyHcy代谢受抑制代谢受抑制引引起起HcyHcy的堆积。的堆积。332024/9/25315 5、肺血栓栓塞症防治、肺血栓栓塞症防治研究表明，高研究表明，高HcyHcy血症（血症（20mol/L20mol/L）使得）使得深静脉血栓的危险性明显增大，高深静脉血栓的危险性明显增大，高HcyHcy血症血症可使深静脉血栓发生率增加可使深静脉血栓发生率增加4 4倍。倍。高高HcyHcy是我国汉族人群肺血栓栓塞症是我国汉族人群肺血栓栓塞症（PTEPTE）发病的一个独立的危险因子，降低）发病的一个独立的危险因子，降低HcyHcy可降低国人静脉血栓栓塞症（可降低国人静脉血栓栓塞症（VTEVTE）的）的危险。危险。342024/9/25326 6、预测骨折风险、预测骨折风险美国和荷兰的流行病学研究结果显示：高美国和荷兰的流行病学研究结果显示：高HcyHcy的人容易骨折，高的人容易骨折，高HcyHcy组与低组与低HcyHcy组相比，男组相比，男性的骨折风险为后者的性的骨折风险为后者的4 4倍，女性为倍，女性为倍。倍。研究还显示：老年人骨折中研究还显示：老年人骨折中19%19%是由高是由高HcyHcy引引起的。起的。HcyHcy阻碍骨胶原纤维状蛋白质形成网状结构的阻碍骨胶原纤维状蛋白质形成网状结构的作用可能就是高作用可能就是高HcyHcy者容易骨折的原因。者容易骨折的原因。352024/9/25337 7、诊断与监测肝损伤、诊断与监测肝损伤研究结果显示：血浆研究结果显示：血浆HcyHcy浓度在急性肝病和浓度在急性肝病和慢性肝病患者间差异有显著性；慢性肝病患者间差异有显著性；血浆血浆HcyHcy浓度对于慢性肝损伤的敏感性为浓度对于慢性肝损伤的敏感性为91%91%，特异性为，特异性为89%89%。以病理组织切片对照。以病理组织切片对照敏感性为敏感性为94%94%，特异性为，特异性为89%89%。血浆血浆HcyHcy浓度检测还可应用于对普通人群慢浓度检测还可应用于对普通人群慢性肝病的筛选。性肝病的筛选。362024/9/25348 8、优生优育与母婴健康、优生优育与母婴健康流行病流行病学学研究研究报导：报导：血中血中HcyHcy值高的值高的妇妇女容女容易易产产生妊娠生妊娠并发并发症症 (32%)(32%)；早早产产 (38%)(38%)；新生新生儿体儿体重重减减低低 ( 99%)( 99%)。孕妇检测孕妇检测HcyHcy对对防防治治妊娠妊娠并发并发症症与优生优育与优生优育（预防（预防早早产、流产、产、流产、新生新生儿体儿体重重减减低低、胎胎儿儿神神经经管畸型管畸型等）具有重要意义。等）具有重要意义。372024/9/25359 9、肿瘤防治、肿瘤防治有研究发现：未服抗叶酸药物的乳腺癌、有研究发现：未服抗叶酸药物的乳腺癌、卵巢癌和胰腺癌中有许多患者的血清卵巢癌和胰腺癌中有许多患者的血清HcyHcy升升高。高。UelandUeland和和RefsumRefsum在白血病患者的研究认为在白血病患者的研究认为HcyHcy升高是因肿瘤细胞的快速增殖所致。升高是因肿瘤细胞的快速增殖所致。许多恶性肿瘤细胞有对蛋氨酸的依赖性，许多恶性肿瘤细胞有对蛋氨酸的依赖性，蛋氨酸的依赖或高蛋氨酸的依赖或高HcyHcy血症可能是恶性肿瘤血症可能是恶性肿瘤一种表型的表达。一种表型的表达。382024/9/2536Lily LLily L等在一组未用药的肿瘤患者中将等在一组未用药的肿瘤患者中将HcyHcy浓度与主要的肿瘤标志物进行了比较，发浓度与主要的肿瘤标志物进行了比较，发现现HcyHcy血清浓度的变化与血清肿瘤标志物血清浓度的变化与血清肿瘤标志物CA125CA125、CA15-3CA15-3、CA19-9CA19-9及及CEACEA的变化是平的变化是平行的。这提示血清行的。这提示血清HcyHcy与肿瘤标记物一样反与肿瘤标记物一样反应肿瘤细胞的活性或肿瘤细胞的快速增生应肿瘤细胞的活性或肿瘤细胞的快速增生状况。状况。392024/9/2537什么样的人需要做什么样的人需要做HCYHCY检查？检查？已有已有CHDCHD、脑血管病或周围、脑血管病或周围ASAS病者；病者；有高血压、糖尿病、肥胖、吸烟者；有高血压、糖尿病、肥胖、吸烟者；有有CHDCHD或或ASAS家族史者，尤其是直系亲属中有家族史者，尤其是直系亲属中有早发病或早病死者；早发病或早病死者；有黄瘤或黄疣者；有黄瘤或黄疣者； 有家族性高脂血症者；有家族性高脂血症者；4040岁以上男性及绝经期后女性。岁以上男性及绝经期后女性。402024/9/2538六、血标本采六、血标本采集注意事集注意事项项样品为血清或血浆，样品为血清或血浆，空腹空腹 8h8h以上以上，采采血血后后1h1h之內之內离离心分心分离离, , 置置干净试干净试管中保存管中保存。样本稳定性：样本稳定性： 室室温温 ：2-72-7天天；2-8 2-8 ：1414天天； -20 -20 ：几：几年年。样品不宜反复冻融。样品不宜反复冻融 。血血红红蛋白蛋白, ,胆红胆红素素, ,甘油三脂甘油三脂等对等对 Hcy Hcy 结结果果干扰小。干扰小。412024/9/2539七、七、HcyHcy参考值参考值空腹血浆总空腹血浆总HcyHcy水平正常值为水平正常值为515umol/L515umol/L理想值理想值10umol/L 10umol/L 高于高于15umol/L15umol/L被认为是高被认为是高HcyHcy血症血症 将高将高HcyHcy分为轻、中、重度，其空腹血浆浓分为轻、中、重度，其空腹血浆浓度分别为度分别为15301530、3110031100及大于及大于100umol/L 100umol/L 422024/9/2540八、高八、高HcyHcy血症的预防及治疗血症的预防及治疗 可预防及治疗高可预防及治疗高HcyHcy血症的药物：血症的药物：v叶酸叶酸v维生素维生素B B6 6v维生素维生素B B1212v甜菜碱甜菜碱v依那普利叶酸片（依叶片）依那普利叶酸片（依叶片）依那普利叶酸片依那普利叶酸片是治疗是治疗H H型高血压和我国预防脑卒中型高血压和我国预防脑卒中的新思路。的新思路。432024/9/2541结结语语HcyHcy作为独立的心血管风险指标已被广泛接受，作为独立的心血管风险指标已被广泛接受，中国高血压人群中国高血压人群75%75%为为H H型高血压。型高血压。高高HcyHcy是脑卒中的独立危险因素。是脑卒中的独立危险因素。许多有关高许多有关高HcyHcy血症的生化基础有待明确。血症的生化基础有待明确。HcyHcy与各种疾病的关系及防治仍需继续探讨。与各种疾病的关系及防治仍需继续探讨。442024/9/2542谢谢！谢谢！