实验十四实验十四离体小肠平滑肌的生理特性离体小肠平滑肌的生理特性 目的目的 通过观察化学物质、温度变化对离体小肠平滑肌收缩的影通过观察化学物质、温度变化对离体小肠平滑肌收缩的影响，使学生掌握离体小肠平滑肌收缩的记录方法，加深对平滑响，使学生掌握离体小肠平滑肌收缩的记录方法，加深对平滑肌某些基本特性的理解。肌某些基本特性的理解。 原理原理 平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外，还具有自动节律性平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外，还具有自动节律性收缩的特性，并且受肠壁内神经丛与外来植物性神经的支配。收缩的特性，并且受肠壁内神经丛与外来植物性神经的支配。离体肠段虽然失去外来神经的支配，但肠壁神经丛仍存在，在离体肠段虽然失去外来神经的支配，但肠壁神经丛仍存在，在适宜的条件下，仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作适宜的条件下，仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。离体小肠实验不仅在理论上可以证明平滑肌的生理特性，用。离体小肠实验不仅在理论上可以证明平滑肌的生理特性，而且还可用来研究各种因素对平滑肌的影响。而且还可用来研究各种因素对平滑肌的影响。 方法与步骤方法与步骤 一、实验准备一、实验准备 1.1.恒温平滑肌浴槽装置恒温平滑肌浴槽装置 向中央标本槽内加向中央标本槽内加入台氏液至浴槽高入台氏液至浴槽高度的度的2/3处。外部容处。外部容器为水浴锅加自来器为水浴锅加自来水。启开电源，恒水。启开电源，恒温工作点定在温工作点定在38。 2.2.标本制备标本制备 向兔耳缘静脉注射空气向兔耳缘静脉注射空气( (或用木棒猛击兔的后脑或用木棒猛击兔的后脑部部) )使其致死，背位固定于手术台上，腹部剪毛后，使其致死，背位固定于手术台上，腹部剪毛后，沿正中线切开皮肤和腹壁，找到胃，以胃幽门与十二沿正中线切开皮肤和腹壁，找到胃，以胃幽门与十二指肠交界处为起点指肠交界处为起点, ,快速沿肠缘剪去肠系膜，然后再快速沿肠缘剪去肠系膜，然后再剪取剪取202030 cm30 cm长的十二指肠，置于长的十二指肠，置于44左右的台氏液左右的台氏液中轻轻漂洗，可用注射器向肠腔内注入台氏液冲洗肠中轻轻漂洗，可用注射器向肠腔内注入台氏液冲洗肠腔内壁，并置于腔内壁，并置于4 466台氏液中备用。台氏液中备用。3.3.仪器连接仪器连接 实验时将肠管剪成实验时将肠管剪成2 23 cm3 cm的肠段，用棉线结扎的肠段，用棉线结扎肠段两端，将一端结扎线连于浴槽内的标本固定钩上，肠段两端，将一端结扎线连于浴槽内的标本固定钩上，另一端连于张力换能器，适当调节换能器的高度，使另一端连于张力换能器，适当调节换能器的高度，使其与标本之间松紧度合适。此相连的线必需垂直，并其与标本之间松紧度合适。此相连的线必需垂直，并且不能与浴槽壁接触，避免摩擦。用塑料管将充满气且不能与浴槽壁接触，避免摩擦。用塑料管将充满气体的球胆或增氧泵与浴槽底部的通气管相连，调节塑体的球胆或增氧泵与浴槽底部的通气管相连，调节塑料管上的螺旋夹，让通气管的气泡一个一个的溢出，料管上的螺旋夹，让通气管的气泡一个一个的溢出，为台氏液供氧。将张力换能器输入端与系统的通道相为台氏液供氧。将张力换能器输入端与系统的通道相连，进入生物机能实验系统，选择对应通道项目为张连，进入生物机能实验系统，选择对应通道项目为张力。力。 二、实验项目二、实验项目 1.观察、记录观察、记录38 台氏液中的肠段节律性收缩曲线。台氏液中的肠段节律性收缩曲线。2.观察、记录观察、记录25台氏液中的肠段节律性收缩曲线。台氏液中的肠段节律性收缩曲线。 3.待中央标本槽内的台氏液的温度稳定在待中央标本槽内的台氏液的温度稳定在38后，加后，加1:10 000肾上腺素肾上腺素12滴于中央标本槽中，观察肠段收缩曲线的滴于中央标本槽中，观察肠段收缩曲线的改变。在观察到明显的作用后，用预先准备好的新鲜改变。在观察到明显的作用后，用预先准备好的新鲜38台台氏液冲洗三次。氏液冲洗三次。4.待肠段活动恢复正常后，再加待肠段活动恢复正常后，再加1:10 000乙酰胆碱乙酰胆碱12滴于中滴于中央标本槽中，观察肠段收缩曲线的改变，作用出现后同上法冲央标本槽中，观察肠段收缩曲线的改变，作用出现后同上法冲洗肠段。洗肠段。 5.向中央标本槽内加入向中央标本槽内加入1 molL-1NaOH溶液溶液12滴，观察肠段滴，观察肠段收缩曲线的改变。作用出现后同上法冲洗肠段。收缩曲线的改变。作用出现后同上法冲洗肠段。 6.向中央标本槽内加入向中央标本槽内加入1 molL-1HCl溶液溶液12滴，观察肠段收滴，观察肠段收缩曲线的改变。待作用出现后同上法冲洗肠段。缩曲线的改变。待作用出现后同上法冲洗肠段。 7.向中央标本槽内加入向中央标本槽内加入1%CaCl2溶液溶液23滴，观察肠段收缩曲滴，观察肠段收缩曲线的改变。线的改变。 注意事项注意事项 1.实验动物先禁食实验动物先禁食24 h，于实验前，于实验前1 h喂食，然后处死喂食，然后处死,取出标取出标本，肠运动效果更好。本，肠运动效果更好。 2.标本安装好后，应在新鲜标本安装好后，应在新鲜38台氏液中稳定台氏液中稳定510min，有收，有收缩活动时即可开始实验。缩活动时即可开始实验。3.注意控制温度。加药前，要先准备好更换用的新鲜注意控制温度。加药前，要先准备好更换用的新鲜38台氏台氏液，每个实验项目结束后，应立即用液，每个实验项目结束后，应立即用38台氏液冲洗，待肠段台氏液冲洗，待肠段活动恢复正常后，再进行下一个实验项目。活动恢复正常后，再进行下一个实验项目。 4.实验项目中所列举的药物剂量为参考剂量，若效果不明显，实验项目中所列举的药物剂量为参考剂量，若效果不明显，可以增补剂量，但要防止一次性加药过量。可以增补剂量，但要防止一次性加药过量。 结果与分析结果与分析一、低温对离体肠肌活动的影响一、低温对离体肠肌活动的影响 离体肠肌收缩减弱。温度降低，肠肌离体肠肌收缩减弱。温度降低，肠肌细胞兴奋型降低，代谢相关酶活性降低，细胞兴奋型降低，代谢相关酶活性降低，肠肌代谢水平降低，肠肌收缩减弱。肠肌代谢水平降低，肠肌收缩减弱。二、滴加肾上腺素二、滴加肾上腺素 离体肠肌收缩减弱。肾上腺素可与肠肌细胞离体肠肌收缩减弱。肾上腺素可与肠肌细胞膜上肾上腺素能受体（膜上肾上腺素能受体（、型）结合，一方面型）结合，一方面可使可使CaCa2+2+、K K+ +外流增加，细胞膜电位发生超极化，外流增加，细胞膜电位发生超极化，兴奋性降低；另一方面可促进肌膜和肌浆网膜上兴奋性降低；另一方面可促进肌膜和肌浆网膜上钙泵活动加强，使肌浆内钙泵活动加强，使肌浆内CaCa2+2+浓度降低，肌张力减浓度降低，肌张力减弱。弱。三、滴加乙酰胆碱三、滴加乙酰胆碱 离体肠肌收缩加强。乙酰胆碱可与肠肌细离体肠肌收缩加强。乙酰胆碱可与肠肌细胞膜上胞膜上M M型受体结合，使肌膜上型受体结合，使肌膜上CaCa2+2+通道开放，通道开放， CaCa2+2+内流，肌浆内内流，肌浆内CaCa2+2+浓度升高，肠肌收缩加强。浓度升高，肠肌收缩加强。四、滴加四、滴加NaOH 离体肠肌收缩加强。离体肠肌收缩加强。H H+ +浓度降低，促进浓度降低，促进CaCa2+2+通道开放，通道开放，CaCa2+2+内流增加；促进肌浆网释内流增加；促进肌浆网释放放CaCa2+2+；促进；促进CaCa2+2+与肌钙蛋白结合，最终导致与肌钙蛋白结合，最终导致肠肌收缩加强。肠肌收缩加强。五、滴加五、滴加HCl 离体肠肌收缩减弱。离体肠肌收缩减弱。H H+ +浓度升高，抑制浓度升高，抑制CaCa2+2+通道开放，通道开放， Ca Ca2+2+内流减少；抑制肌浆网内流减少；抑制肌浆网释放释放CaCa2+2+；抑制；抑制CaCa2+2+与肌钙蛋白结合，最终导与肌钙蛋白结合，最终导致肠肌收缩减弱。致肠肌收缩减弱。六、滴加六、滴加CaCl2 离体肠肌收缩加强。滴加离体肠肌收缩加强。滴加CaClCaCl2 2后，肠后，肠肌细胞膜内外肌细胞膜内外CaCa2+2+浓度差加大，浓度差加大， Ca Ca2+2+顺浓度顺浓度差内流，使肠肌细胞胞浆内差内流，使肠肌细胞胞浆内CaCa2+2+浓度升高，浓度升高，肠肌活动加强。肠肌活动加强。