Glucoamylase 1淀粉酶2葡萄糖淀粉酶GA3催化域催化域连接域连接域结合域结合域基本结构三个功能区三个功能区O-Glycosylated Linker4基本结构黑曲霉糖化酶黑曲霉糖化酶GA GA GA GA 催化域CDO-糖基化域淀粉结合域SBD限制性水解不含淀粉结合域SBD，少数甚至不含O-糖基化域5催化域CD结构含13股-螺旋，折叠成桶状（/）6结构，桶的核心为一个口袋状，催化中心位于其中6催化机制酸碱催化7连接域结构起连接CD和SBD的作用，一般被O-糖基化修饰不同真菌来源的糖化酶该区域的氨基酸序列可变性较大在生物活性条件下，甘露糖比半乳糖更容易以O-方式连接到连接域的Ser和Thr残基上8连接域结构与功能的关系GAGpI:GAGpI:增加了一段重复的O-糖基化连接域2 2个重组个重组蛋白酶蛋白酶GA470-493：缺少O-糖基化连接域中Ala470-Thr493氨基酸序列结果：结果：GAGpIGAGpI的热稳定性及的热稳定性及PHPH稳定性都有所提高，这主要是由于它含有稳定性都有所提高，这主要是由于它含有额外的额外的O-O-糖基化连接域，增加了糖基化位点，因此碳水化合物的含量也糖基化连接域，增加了糖基化位点，因此碳水化合物的含量也增加增加9淀粉结合域结构具有八条折叠股，形成两个主要的片层：第一个包括五个反平行的链，第二个包括一个平行和一对反平行的链10淀粉结合域功能使得不溶性底物与溶液中的酶相互作用使底物结合到催化区域的活性位点上破坏淀粉颗粒的表面，提高淀粉水解率11水解过程先为吸附，然后形成一种复合体，破坏维系淀粉分子螺旋结构的氢键，然后不断水解淀粉的糖苷键，水解使得淀粉颗粒的表面形成一系列的空穴，最后达到破坏淀粉结构的效果。12水解速率13实际应用中存在的问题及拟解决途径水解水解-1,6-1,6糖苷键糖苷键的性能差的性能差热稳定性不够热稳定性不够PHPH稳定性低稳定性低1.1.添加普鲁兰添加普鲁兰酶酶2.2.改变改变CDCD中回中回环环3 3和回环和回环5 5结结构构1. .定点突变某定点突变某些氨基酸些氨基酸2.2.选用产糖化选用产糖化酶稳定性高的酶稳定性高的菌株菌株定点突变定点突变1415 刚才的发言，如刚才的发言，如有不当之处请多指有不当之处请多指正。谢谢大家！正。谢谢大家！16